專題2-課題2-土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)

1、+學(xué)習(xí)目標(biāo)分解1.知道篩選目的菌株的思路和計(jì)數(shù)的方法，原理2.掌握從土壤中分離分解尿素的微生物及進(jìn)行平板計(jì)數(shù)的方法.提出的問題提出的問題 如何尋找如何尋找耐高溫耐高溫的酶？的酶？解決問題的思路解決問題的思路尋找尋找耐高溫耐高溫環(huán)境環(huán)境原理原理高溫淘汰其他菌種，選出耐高溫淘汰其他菌種，選出耐高溫菌種，高溫菌種，耐高溫菌種提取耐高溫耐高溫菌種提取耐高溫酶酶。閱讀閱讀P21-23P21-23，思考：，思考：1 1、說出實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選原理、說出實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選原理2 2、根據(jù)、根據(jù) 此配方能否篩選出產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌？為什么？此配方能否篩選出產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌？為什么？3 3、總結(jié)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目常用的

2、方法，并據(jù)此分析、總結(jié)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目常用的方法，并據(jù)此分析P22 P22 （二）中兩位同學(xué)的結(jié)果是否合理。（二）中兩位同學(xué)的結(jié)果是否合理。4 4、分析、分析P22P22（三）中（三）中A A同學(xué)的實(shí)驗(yàn)，想想如何對其同學(xué)的實(shí)驗(yàn)，想想如何對其 結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證要分離一種微生物，必須根據(jù)該微生物的特點(diǎn)，包要分離一種微生物，必須根據(jù)該微生物的特點(diǎn)，包括營養(yǎng)、生理、生長條件等，配置合適的培養(yǎng)基。括營養(yǎng)、生理、生長條件等，配置合適的培養(yǎng)基。方法：方法：抑制大多數(shù)微生物生長抑制大多數(shù)微生物生長造成有利于該菌生長的環(huán)境造成有利于該菌生長的環(huán)境結(jié)果：結(jié)果：培養(yǎng)一定時(shí)間后，該菌數(shù)量上升，再通過稀培養(yǎng)一定時(shí)間

3、后，該菌數(shù)量上升，再通過稀釋涂布平板法等方法對它進(jìn)行純化培養(yǎng)分離。釋涂布平板法等方法對它進(jìn)行純化培養(yǎng)分離。此培養(yǎng)基能否篩選出產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌？為什么？此培養(yǎng)基能否篩選出產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌？為什么？能。該能。該只有產(chǎn)生只有產(chǎn)生脲酶脲酶的細(xì)菌才能利用尿素作為氮源而生存。的細(xì)菌才能利用尿素作為氮源而生存。實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)組對照組對照組培養(yǎng)基培養(yǎng)基類型類型是否是否接種接種 目的目的 結(jié)果結(jié)果以尿素為以尿素為唯一氮源唯一氮源的培養(yǎng)基的培養(yǎng)基牛肉膏牛肉膏蛋白胨蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)基 是是是是分離分分離分解尿素解尿素的細(xì)菌的細(xì)菌判斷該判斷該培養(yǎng)基培養(yǎng)基有無選有無選擇性擇性只生長分只生長分解尿素的解尿素的細(xì)菌細(xì)菌生長多生長多

4、種微生種微生物物 當(dāng)樣品的當(dāng)樣品的稀釋度足夠高稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表時(shí)，培養(yǎng)基表 面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋 液中的液中的一個(gè)活菌一個(gè)活菌，通過統(tǒng)計(jì)平板上的，通過統(tǒng)計(jì)平板上的 菌落數(shù)，就能推測出樣品中菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約大約含有含有 多少活菌。多少活菌。 例：兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同例：兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同 一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)。從對應(yīng)稀釋倍數(shù)為一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)。從對應(yīng)稀釋倍數(shù)為10106 6的培養(yǎng)基中，得到以下兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果。的培養(yǎng)基中，得到以下兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果。 1 1、甲同學(xué)在該濃度下涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的、甲同學(xué)在該濃度下涂

5、布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為菌落數(shù)為230230。 2 2、乙同學(xué)在該濃度下涂布了、乙同學(xué)在該濃度下涂布了A A、B B、C C三個(gè)平板，三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別為統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別為2121、212212、256256，該同學(xué)以這三，該同學(xué)以這三個(gè)平板上菌落數(shù)的平均值個(gè)平板上菌落數(shù)的平均值163163作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果。作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果。 你認(rèn)為這兩位同學(xué)的做法正確嗎？如果有問題，你認(rèn)為這兩位同學(xué)的做法正確嗎？如果有問題，錯(cuò)在哪？錯(cuò)在哪？甲：沒有重復(fù)實(shí)驗(yàn)甲：沒有重復(fù)實(shí)驗(yàn)（至少涂布（至少涂布3 3個(gè)平板）個(gè)平板）乙：乙：A A組結(jié)果誤差過大，不應(yīng)用于計(jì)算平均值組結(jié)果誤差過大，不應(yīng)用于計(jì)算平均值注：誤差太

6、大，須重做或再多設(shè)幾組注：誤差太大，須重做或再多設(shè)幾組 利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行尿素分解菌的分離利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行尿素分解菌的分離過程中，從對應(yīng)稀釋倍數(shù)為過程中，從對應(yīng)稀釋倍數(shù)為10106 6的培養(yǎng)基中，的培養(yǎng)基中，A A、B B兩同學(xué)分別得到以下兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果。兩同學(xué)分別得到以下兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果。 1 1、A A同學(xué)篩選出同學(xué)篩選出150150個(gè)菌落。個(gè)菌落。 2 2、B B同學(xué)篩選出同學(xué)篩選出5050個(gè)菌落。個(gè)菌落。 B B認(rèn)為認(rèn)為A A的培養(yǎng)基被雜菌污染了，或培養(yǎng)基的培養(yǎng)基被雜菌污染了，或培養(yǎng)基中混入了其他含氮物質(zhì)，因而導(dǎo)致不能分解尿中混入了其他含氮物質(zhì)，因而導(dǎo)致不能分解尿素的細(xì)菌也能在該培養(yǎng)基中生

7、長。素的細(xì)菌也能在該培養(yǎng)基中生長。A A確認(rèn)自己確認(rèn)自己的操作無誤，但也拿不出能令人信服的證據(jù)。的操作無誤，但也拿不出能令人信服的證據(jù)。 控制變量控制變量設(shè)置對照的方法：設(shè)置對照的方法：空白對照：不給對照組任何處理因素。空白對照：不給對照組任何處理因素。條件對照：給對照組施以部分實(shí)驗(yàn)因素，但不是條件對照：給對照組施以部分實(shí)驗(yàn)因素，但不是所要研究的處理因素。所要研究的處理因素。自身對照：對照組和實(shí)驗(yàn)組都在同一研究對象上進(jìn)行。自身對照：對照組和實(shí)驗(yàn)組都在同一研究對象上進(jìn)行。相互對照：不單設(shè)對照組，而是幾個(gè)實(shí)驗(yàn)組相互對照。相互對照：不單設(shè)對照組，而是幾個(gè)實(shí)驗(yàn)組相互對照。練習(xí)：練習(xí)：判斷正誤：判斷正誤

8、：1、根據(jù)培養(yǎng)皿中菌落數(shù)可以準(zhǔn)確計(jì)算樣品中含有、根據(jù)培養(yǎng)皿中菌落數(shù)可以準(zhǔn)確計(jì)算樣品中含有的活菌實(shí)際數(shù)目（的活菌實(shí)際數(shù)目（ ）2、只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素（、只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素（ ）3、篩選分解尿素的細(xì)菌應(yīng)以尿素作為培養(yǎng)基中的、篩選分解尿素的細(xì)菌應(yīng)以尿素作為培養(yǎng)基中的唯一氮源（唯一氮源（ ）4、統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌一般用平板劃線法（、統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌一般用平板劃線法（ ）【鞏固【鞏固1 1】 分分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，對培養(yǎng)離土壤中分解尿素的細(xì)菌，對培養(yǎng)基的要求是基的要求是( () )。加尿素不加尿素加瓊脂不加瓊脂加尿素不加尿素加瓊脂不加瓊脂加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸鹽不加

9、葡萄糖不加葡萄糖加硝酸鹽不加硝酸鹽加硝酸鹽A A B B C C D D 【鞏固【鞏固2 2】用用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，需要設(shè)置的對照是需要設(shè)置的對照是( () )。A A. .未接種的選擇培養(yǎng)基未接種的選擇培養(yǎng)基B B. .未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C C. .接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基D.D.接種了的選擇培養(yǎng)基接種了的選擇培養(yǎng)基 CC閱讀閱讀P23-26P23-26，思考：，思考：1 1、說出土壤取樣的原因和操作方法、說出土壤取樣的原因和操作方法2 2、說出樣品稀釋的目的，熟記細(xì)菌、放線菌

10、、真菌、說出樣品稀釋的目的，熟記細(xì)菌、放線菌、真菌 的稀釋倍數(shù)的稀釋倍數(shù)3 3、熟記細(xì)菌、放線菌、霉菌的培養(yǎng)溫度和時(shí)間、熟記細(xì)菌、放線菌、霉菌的培養(yǎng)溫度和時(shí)間4 4、說明鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素的方法、說明鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素的方法 同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大，同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大，種類最多。種類最多。取樣要求：取樣要求：先鏟去表層土先鏟去表層土3cm3cm左右左右，再取樣，再取樣取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的的信封在使用取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的的信封在使用前都要前都要滅菌滅菌。 P25P25制備以尿素為唯一氮源的制備以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)

11、基。應(yīng)在應(yīng)在火焰旁火焰旁稱取土壤稱取土壤10g10g。將稱好的土。將稱好的土樣倒入盛有樣倒入盛有90mL90mL無菌水的錐形瓶中，塞好無菌水的錐形瓶中，塞好棉塞。棉塞。 P25P25 在稀釋土壤溶液的過程中，在稀釋土壤溶液的過程中，每一步都要每一步都要在火焰旁進(jìn)行。在火焰旁進(jìn)行。在實(shí)際操作中，通常選用一定稀釋范在實(shí)際操作中，通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)。以保證獲得圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)。以保證獲得菌落菌落數(shù)在數(shù)在3030300300之間之間、適于計(jì)數(shù)的平板。、適于計(jì)數(shù)的平板。 細(xì)菌稀釋度為細(xì)菌稀釋度為10104 4、10105 5、10106 6 放線菌稀釋度為放線菌稀釋度為10103 3

12、、10104 4、10105 5 真菌稀釋度為真菌稀釋度為10102 2、10103 3、10104 4為什么分離為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度不同的微生物要采用不同的稀釋度？實(shí)驗(yàn)時(shí)要對培養(yǎng)皿實(shí)驗(yàn)時(shí)要對培養(yǎng)皿作好標(biāo)記作好標(biāo)記。注明。注明培養(yǎng)培養(yǎng)基類型、培養(yǎng)時(shí)間、稀釋度、培養(yǎng)物基類型、培養(yǎng)時(shí)間、稀釋度、培養(yǎng)物等。等。一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下（相同（相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時(shí)間的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時(shí)間），同種我微），同種我微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。包括菌落生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。包括菌落的的形狀、大小、隆起程度和顏色形狀、大小、隆起程度和顏色等方面。等

13、方面。菌落特征可作為菌種鑒定的重要依據(jù)。菌落特征可作為菌種鑒定的重要依據(jù)。P25為了提高效率，在操作時(shí)更加有條不紊，應(yīng)為了提高效率，在操作時(shí)更加有條不紊，應(yīng)當(dāng)當(dāng)事先制定計(jì)劃事先制定計(jì)劃。1 1下列是關(guān)于下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是（敘述，其中錯(cuò)誤的是（ ）A A用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板壓滅菌后倒平板B B取取10104 4、10105 5、10106 6倍的土壤稀釋液和無菌水各倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 0.1 mLmL，分別涂布于各組平板上，分別涂布于各組

14、平板上C C將實(shí)驗(yàn)組和對照組平板倒置，將實(shí)驗(yàn)組和對照組平板倒置，37 37 恒溫培養(yǎng)恒溫培養(yǎng)242448 h48 hD D確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300300以上的實(shí)驗(yàn)以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù) D D2 2. .判斷：判斷：利用稀釋涂布平板法既能分離微生物也能對微生物進(jìn)利用稀釋涂布平板法既能分離微生物也能對微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)行計(jì)數(shù)接種時(shí)連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得接種時(shí)連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單個(gè)菌落單個(gè)菌落以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌素分解菌3 3

15、尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，同學(xué)的微生物種類和數(shù)量繁多，同學(xué)們試圖探究土壤中微生物對尿素們試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，并成功篩選到能高效降解尿驗(yàn)，并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌（目的菌），培養(yǎng)基成素的細(xì)菌（目的菌），培養(yǎng)基成分如表所示，實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示，請分析回答問題：分如表所示，實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示，請分析回答問題：（1 1）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選到）培養(yǎng)基中加入尿素的目的

16、是篩選到_，這，這種培養(yǎng)基從功能上屬于種培養(yǎng)基從功能上屬于_培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。（2 2）“目的菌目的菌”生長所需的氮源來自培養(yǎng)基中的生長所需的氮源來自培養(yǎng)基中的_，其同化作用類型是，其同化作用類型是_。目的菌目的菌選擇選擇異養(yǎng)型異養(yǎng)型尿素尿素將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到容到100mL100mL（3 3）下圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接）下圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖。則獲得圖種后培養(yǎng)的效果圖。則獲得圖A A效果的接種方法是效果的接種方法是_，圖，圖B B效果的接種方法是效果的接種方法是_，一同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的

17、菌落一同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是連成一片，最可能的原因是_（答（答出一條即可）。出一條即可）。稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法平板劃線法平板劃線法菌液濃度過高菌液濃度過高（4 4）在進(jìn)行分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，某同學(xué)從）在進(jìn)行分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，某同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約培養(yǎng)基上篩選出大約150150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約出大約5050個(gè)菌落，該同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能個(gè)菌落，該同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有有_（填序號）（填序號）由于土樣不同由于土樣不同 由于培養(yǎng)基污染由于培養(yǎng)基污染 由于操作由于操作失誤失誤

18、沒有設(shè)置對照沒有設(shè)置對照4.飼養(yǎng)動物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質(zhì)，飼養(yǎng)動物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質(zhì)，很難被動物吸收利用，還影響對其他營養(yǎng)物質(zhì)的利用。很難被動物吸收利用，還影響對其他營養(yǎng)物質(zhì)的利用。若在飼料中添加植酸酶，則能催化其水解成為可以吸若在飼料中添加植酸酶，則能催化其水解成為可以吸收利用的磷酸鹽等。以下是科研人員從作物根部土壤收利用的磷酸鹽等。以下是科研人員從作物根部土壤中分離產(chǎn)植酸酶的菌株的過程示意圖。請分析作答。中分離產(chǎn)植酸酶的菌株的過程示意圖。請分析作答。(1)培養(yǎng)基中除了添加植酸鈣以外，應(yīng)含有培養(yǎng)基中除了添加植酸鈣以外，應(yīng)含有_、_、水、無機(jī)鹽等基本營養(yǎng)物

19、質(zhì)。、水、無機(jī)鹽等基本營養(yǎng)物質(zhì)。碳源碳源氮源氮源(2)分離產(chǎn)植酸酶的菌株，需先配制合適的培養(yǎng)基，配分離產(chǎn)植酸酶的菌株，需先配制合適的培養(yǎng)基，配制培養(yǎng)基時(shí)，在各成分都溶化后和分裝前，要進(jìn)行的制培養(yǎng)基時(shí)，在各成分都溶化后和分裝前，要進(jìn)行的是是_和滅菌。對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的常用方法和滅菌。對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的常用方法是是_。通常每種稀釋液需涂布通常每種稀釋液需涂布_個(gè)平板，個(gè)平板，取其平均值。若將最后一個(gè)試管中的菌液每次吸取取其平均值。若將最后一個(gè)試管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培養(yǎng)后獲得平均值是涂布培養(yǎng)后獲得平均值是C，則，則1g土壤中含有土壤中含有此菌的菌株數(shù)是此菌的菌株數(shù)是_個(gè)。個(gè)。調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)pH

20、值值高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌3C106(3)為防止雜菌污染，要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿等進(jìn)行為防止雜菌污染，要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿等進(jìn)行_，而且須將接種后的培養(yǎng)皿呈，而且須將接種后的培養(yǎng)皿呈_狀態(tài)放置。狀態(tài)放置。(4)接種以前進(jìn)行的一系列操作，目的是在培養(yǎng)皿表面接種以前進(jìn)行的一系列操作，目的是在培養(yǎng)皿表面形成形成_。根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種。根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的_就能大致就能大致推測出樣品中的活菌數(shù)。推測出樣品中的活菌數(shù)。滅菌滅菌倒置倒置單個(gè)菌落單個(gè)菌落菌落數(shù)菌落數(shù)5微生物與人類關(guān)系密切。雖然有些微生物能使微生物與人類關(guān)系密切。雖然有些微生物

21、能使動植物患病，但多數(shù)微生物對人類是有益的，請回動植物患病，但多數(shù)微生物對人類是有益的，請回答下列有關(guān)問題：答下列有關(guān)問題：(1)下表為兩種微生物的培養(yǎng)基配方。下表為兩種微生物的培養(yǎng)基配方。KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O 葡萄糖葡萄糖 尿素尿素瓊脂瓊脂1.4 g2.1 g0.2 g10.0 g1.0 g 15.0 gB培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：纖維纖維素粉素粉NaNO3Na2HPO47H2OKH2PO4MgSO47H2OKCl酵母酵母膏膏水解水解酪素酪素5 g1 g1.2 g0.9 g0.5 g0.5 g 0.5 g0.5 gA培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：將上述兩種培養(yǎng)基中的物質(zhì)分別溶解后，均用蒸餾水

22、定將上述兩種培養(yǎng)基中的物質(zhì)分別溶解后，均用蒸餾水定容到容到1 000 mL。KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O 葡萄糖葡萄糖 尿素尿素瓊脂瓊脂1.4 g2.1 g0.2 g10.0 g1.0 g 15.0 gB培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：纖維纖維素粉素粉NaNO3Na2HPO47H2OKH2PO4MgSO47H2OKCl酵母酵母膏膏水解水解酪素酪素5 g1 g1.2 g0.9 g0.5 g0.5 g 0.5 g0.5 gA培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：(1)如果要進(jìn)行土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離，則需要選擇上如果要進(jìn)行土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離，則需要選擇上述哪種培養(yǎng)基？述哪種培養(yǎng)基？_，該培養(yǎng)基能分離尿素分解

23、菌的原因，該培養(yǎng)基能分離尿素分解菌的原因是：是：在該培養(yǎng)基中可加入在該培養(yǎng)基中可加入_指示劑，根據(jù)指示劑的顏色可指示劑，根據(jù)指示劑的顏色可鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。從功能上來看，上述兩種培養(yǎng)基均屬于從功能上來看，上述兩種培養(yǎng)基均屬于_培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。A培養(yǎng)基培養(yǎng)基培養(yǎng)基中尿素為唯一氮源，只有能分解尿素的微生物才能培養(yǎng)基中尿素為唯一氮源，只有能分解尿素的微生物才能生長繁殖生長繁殖酚紅酚紅選擇選擇(2)把牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基倒入平板，等培養(yǎng)基冷凝后，把牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基倒入平板，等培養(yǎng)基冷凝后，應(yīng)將平板應(yīng)將平板_放置，這樣做的目的是可防止放置，這樣做的目的是可防止_

24、造成污染。造成污染。(3)微生物接種的方法很多，平板劃線法操作結(jié)束時(shí)，為什么微生物接種的方法很多，平板劃線法操作結(jié)束時(shí)，為什么仍需要灼燒接種環(huán)？仍需要灼燒接種環(huán)？_。(4)微生物培養(yǎng)過程中還有什么方法或步驟要防止其他微生物微生物培養(yǎng)過程中還有什么方法或步驟要防止其他微生物污染？污染？_、_、_。KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O 葡萄糖葡萄糖 尿素尿素瓊脂瓊脂1.4 g2.1 g0.2 g10.0 g1.0 g 15.0 gB培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：纖維纖維素粉素粉NaNO3Na2HPO47H2OKH2PO4MgSO47H2OKCl酵母酵母膏膏水解水解酪素酪素5 g1 g1.2 g0.9 g

25、0.5 g0.5 g 0.5 g0.5 gA培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：倒過來倒過來皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基殺死接種環(huán)上殘留菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者殺死接種環(huán)上殘留菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者培養(yǎng)基滅菌培養(yǎng)基滅菌接種環(huán)境滅菌接種環(huán)境滅菌接種過程無菌操作接種過程無菌操作6.尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，同學(xué)們試圖探究土壤中微生物同學(xué)們試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，并成功篩對

26、尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌選到能高效降解尿素的細(xì)菌(目的菌目的菌)。培養(yǎng)基成分如下。培養(yǎng)基成分如下表所示，實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示。請分析回答問題：表所示，實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示。請分析回答問題：KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO47H2O0.2 g葡萄糖葡萄糖10 g尿素尿素1 g瓊脂瓊脂15 g將上述物質(zhì)溶解后，用自來水定容到將上述物質(zhì)溶解后，用自來水定容到1 000 mL(1)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是培養(yǎng)基中加入尿素的目的是_，這種，這種培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。(2)“目的菌目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基生長所需的

27、氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的中的_和和_，實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，原因，實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，原因是是_。(3)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_，細(xì)菌合成的，細(xì)菌合成的_將尿素分解為氨，將尿素分解為氨，pH增高，增高，使指示劑變紅。使指示劑變紅。篩選目的菌種篩選目的菌種選擇選擇尿素尿素葡萄糖葡萄糖為目的菌提供氧氣為目的菌提供氧氣酚紅指示劑酚紅指示劑脲酶脲酶7.兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)。在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為菌數(shù)。在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為10的培養(yǎng)基中，得到以下兩的培養(yǎng)基中，得到以下兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果：種統(tǒng)計(jì)結(jié)果：A同學(xué)涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為同學(xué)涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為230；B同學(xué)涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別為同學(xué)涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別為21、212和和256，該同學(xué)以這三個(gè)平板上菌落數(shù)的平均值，該同學(xué)以這三個(gè)平板上菌落數(shù)的平均值163作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果。試回答：作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果。試