復(fù)旦大學(xué)分析化學(xué)AII第十一章毛細(xì)管電泳

1、 在電解質(zhì)溶液中，位于電場中的帶電離子在電場力的作在電解質(zhì)溶液中，位于電場中的帶電離子在電場力的作用下，以不同的速度向其所帶電荷相反的電極方向遷移的現(xiàn)用下，以不同的速度向其所帶電荷相反的電極方向遷移的現(xiàn)象，稱之為象，稱之為電泳電泳。由于不同離子所帶電荷及性質(zhì)的不同，遷由于不同離子所帶電荷及性質(zhì)的不同，遷移速率不同，可實(shí)現(xiàn)分離。移速率不同，可實(shí)現(xiàn)分離。 19371937年，年， TiseliusTiselius，瑞典，瑞典) )將蛋白質(zhì)混合將蛋白質(zhì)混合液放在兩段緩沖溶液之間，兩端施以電壓進(jìn)行自由溶液電液放在兩段緩沖溶液之間，兩端施以電壓進(jìn)行自由溶液電泳，第一次將人血清提取的蛋白質(zhì)混合液分離出白蛋

2、白和泳，第一次將人血清提取的蛋白質(zhì)混合液分離出白蛋白和、球蛋白；球蛋白； 發(fā)現(xiàn)樣品的遷移速度和方向由其電荷和淌度決定；發(fā)現(xiàn)樣品的遷移速度和方向由其電荷和淌度決定； 第一次第一次的的自由溶液電泳；自由溶液電泳；第一臺電泳儀第一臺電泳儀； 1948年，年，獲諾貝爾化學(xué)獎。獲諾貝爾化學(xué)獎。 利用利用電泳電泳現(xiàn)象對某些化學(xué)或生物物質(zhì)進(jìn)行分離分析的方現(xiàn)象對某些化學(xué)或生物物質(zhì)進(jìn)行分離分析的方法和技術(shù)叫法和技術(shù)叫電泳法電泳法或或電泳技術(shù)電泳技術(shù)。 按形狀分類：U型管電泳、柱狀電泳、板電泳； 按載體分類：濾紙電泳、瓊脂電泳、聚丙烯酰胺電泳、自由電泳； 傳統(tǒng)電泳分析：操作煩瑣，分離效率低，定量困難，無法與其他分

3、析相比。 1981年，Jorgenson和Luckas，用75m內(nèi)徑石英毛細(xì)管進(jìn)行電泳分析，柱效高達(dá)40萬/m，促進(jìn)電泳技術(shù)發(fā)生了根本變革，迅速發(fā)展成為可與GC、HPLC相媲美的嶄新的分離分析技術(shù)高效毛細(xì)管電泳高效毛細(xì)管電泳。 毛細(xì)管的采用使產(chǎn)生的熱量能夠較快散發(fā)，大大減小 了溫度效應(yīng)，使電場電壓可以很高。 電壓升高，電場推動力大，又可進(jìn)一步使柱徑變小， 柱長增加， 高效毛細(xì)管電泳的柱效遠(yuǎn)高于高效液相色譜，理論塔 板數(shù)高達(dá)幾十萬塊/米，特殊柱子可以達(dá)到數(shù)百萬。(1).(1).電泳：電泳：是指帶電離子在電場中的定向移動，它可是指帶電離子在電場中的定向移動，它可用淌度用淌度描述：即單位場強(qiáng)描述：即

4、單位場強(qiáng)(E)下離子的平均電泳速度下離子的平均電泳速度，ep=/E1.1.絕對淌度絕對淌度(absolute mobility)(absolute mobility)abab 無限稀釋溶液中帶電離子在單位電場強(qiáng)度下的平均遷移無限稀釋溶液中帶電離子在單位電場強(qiáng)度下的平均遷移 速度，簡稱淌度?？稍谑謨灾胁殚?。速度，簡稱淌度?？稍谑謨灾胁殚?。 2.2.有效淌度有效淌度(effective mobility)(effective mobility)efef 實(shí)際溶液中的淌度實(shí)際溶液中的淌度( (實(shí)驗(yàn)中測定的實(shí)驗(yàn)中測定的) )。 efef=ai=aii i a aii溶質(zhì)溶質(zhì)i i的解離度；的解離度；i

5、i溶質(zhì)溶質(zhì)i i在解離狀態(tài)下的絕對淌度在解離狀態(tài)下的絕對淌度 只發(fā)生電泳時的有效淌度：只發(fā)生電泳時的有效淌度： ef ef =ef ef (L /V) =(L /V) =( l / tl / tm m ) )(L /V) (L /V) 毛細(xì)管有效長度毛細(xì)管有效長度毛細(xì)管總長度毛細(xì)管總長度遷移時間遷移時間電壓電壓 當(dāng)固體與液體接觸時，固體表面由于某種原因帶一種電當(dāng)固體與液體接觸時，固體表面由于某種原因帶一種電荷，則因靜電引力使其周圍液體帶有相反電荷，在液荷，則因靜電引力使其周圍液體帶有相反電荷，在液- -固界固界面形成雙電層，二者之間存在電位差。面形成雙電層，二者之間存在電位差。 當(dāng)液體兩端施加

6、電壓時，就當(dāng)液體兩端施加電壓時，就會發(fā)生液體相對于固體表面的移會發(fā)生液體相對于固體表面的移動，這種液體相對于固體表面的動，這種液體相對于固體表面的移動的現(xiàn)象叫移動的現(xiàn)象叫電滲現(xiàn)象電滲現(xiàn)象。 電滲現(xiàn)象中整體移動著的液電滲現(xiàn)象中整體移動著的液體叫體叫電滲流電滲流（electroosmotic flow ，簡稱簡稱EOF）。）。 在高電場的作用下，帶正電荷的溶液表面及擴(kuò)散層向陰在高電場的作用下，帶正電荷的溶液表面及擴(kuò)散層向陰極移動，由于這些陽離子實(shí)際上是溶劑化的，故將引起柱中極移動，由于這些陽離子實(shí)際上是溶劑化的，故將引起柱中的溶液整體向負(fù)極移動，速度的溶液整體向負(fù)極移動，速度電滲流電滲流。電滲流的

7、大小可用淌度電滲流的大小可用淌度(eo)或電滲流系數(shù)表示或電滲流系數(shù)表示: eo =eo / E = lef /( teoE ) 電滲流速度電滲流速度毛細(xì)管有效長度毛細(xì)管有效長度電滲流流出時間電滲流流出時間電場強(qiáng)度電場強(qiáng)度 電滲流的方向取決于毛細(xì)管內(nèi)表面電荷的性質(zhì)：電滲流的方向取決于毛細(xì)管內(nèi)表面電荷的性質(zhì)： 內(nèi)表面帶負(fù)電荷，溶液帶正電荷，電滲流流向陰極；內(nèi)表面帶負(fù)電荷，溶液帶正電荷，電滲流流向陰極； 內(nèi)表面帶正負(fù)電荷，溶液帶負(fù)電荷，電滲流流向陽極；內(nèi)表面帶正負(fù)電荷，溶液帶負(fù)電荷，電滲流流向陽極； 石英毛細(xì)管；帶負(fù)電荷，電滲流流向陰極；石英毛細(xì)管；帶負(fù)電荷，電滲流流向陰極；改變電滲流方向的方法：

8、改變電滲流方向的方法： （1 1）毛細(xì)管改性）毛細(xì)管改性 表面鍵合陽離子基團(tuán)； （2 2）加電滲流反轉(zhuǎn)劑）加電滲流反轉(zhuǎn)劑 內(nèi)充液中加入大量的陽離子表面活性劑，將使石英毛細(xì)管壁帶正電荷，溶液表面帶負(fù)電荷。電滲流流向陽極。 電滲流的速度約等于一般離子電泳速度的電滲流的速度約等于一般離子電泳速度的5 57 7倍；倍； 各種電性離子在毛細(xì)管柱中的遷移速度為：各種電性離子在毛細(xì)管柱中的遷移速度為： + + = =電滲流電滲流 + + +ef +ef 陽離子運(yùn)動方向與電滲流一致；陽離子運(yùn)動方向與電滲流一致； - - = =電滲流電滲流 - - -ef -ef 陰離子運(yùn)動方向與電滲流相反；陰離子運(yùn)動方向與電

9、滲流相反； 0 0 = =電滲流電滲流 中性粒子運(yùn)動方向與電滲流一致；中性粒子運(yùn)動方向與電滲流一致；（1 1）可一次完成陽離子、陰離子、中性粒子的分離；）可一次完成陽離子、陰離子、中性粒子的分離；（2 2）改變電滲流的大小和方向可改變分離效率和選擇性，如）改變電滲流的大小和方向可改變分離效率和選擇性，如同改變同改變LCLC中的流速；中的流速；（3 3）電滲流的微小變化影響結(jié)果的重現(xiàn)性；）電滲流的微小變化影響結(jié)果的重現(xiàn)性； 在在HPCEHPCE中，控制電滲流非常重要中，控制電滲流非常重要。 電場作用下，毛細(xì)管柱中出現(xiàn)：電泳現(xiàn)電泳現(xiàn)象和電滲流現(xiàn)象象和電滲流現(xiàn)象。 帶電粒子的帶電粒子的遷移速度遷移速

10、度= =電泳電泳+ +電滲流；電滲流；兩種速度的矢量和兩種速度的矢量和。 正離子正離子：兩種效應(yīng)的運(yùn)動方向一致，在負(fù)極最先流出；兩種效應(yīng)的運(yùn)動方向一致，在負(fù)極最先流出； 中性粒子無電泳現(xiàn)象，受電滲流影響，在陽離子后流出；中性粒子無電泳現(xiàn)象，受電滲流影響，在陽離子后流出； 陰離子陰離子：兩種效應(yīng)的運(yùn)動方向相反兩種效應(yīng)的運(yùn)動方向相反。動畫演示(1).(1).電場強(qiáng)度的影響電場強(qiáng)度的影響 電滲流速度和電場強(qiáng)度成正比，當(dāng)毛細(xì)管長度一定時，電滲流速度正比于工作電壓。(2).(2).毛細(xì)管材料的影響毛細(xì)管材料的影響 不同材料毛細(xì)管的表面電荷特性不同，產(chǎn)生的電滲流大小不同；（a a）溶液）溶液pHpH的影響

11、的影響 對于石英毛細(xì)管，溶液pH增高時，表面電離多，電荷密度增加，管壁zeta電勢增大，電滲流增大，pH=7pH=7，達(dá)到最大，達(dá)到最大； pH3，完全被氫離子中和，表面電中性，電滲流為零。分析時，采用緩沖溶液來保持pH穩(wěn)定。（b b）陰離子的影響）陰離子的影響 在其他條件相同，濃度相同而陰離子不同時，毛細(xì)管中的電流有較大差別，產(chǎn)生的焦耳熱不同。 緩沖溶液離子強(qiáng)度，影響雙電層的厚度、溶液黏度和工作電流，明顯影響電滲流大小。緩沖溶液離子強(qiáng)度增加，Zeta電位減小,電滲流下降。 毛細(xì)管內(nèi)溫度的升高，使溶液的黏度下降，電滲流增大。毛細(xì)管內(nèi)溫度的升高，使溶液的黏度下降，電滲流增大。溫度變化來自于溫度變

12、化來自于“焦耳熱焦耳熱”； 焦耳熱焦耳熱：毛細(xì)管溶液中有電流通過時，產(chǎn)生的熱量；：毛細(xì)管溶液中有電流通過時，產(chǎn)生的熱量； HPCEHPCE中的焦耳熱與背景電解質(zhì)的摩爾電導(dǎo)、濃度及電場強(qiáng)中的焦耳熱與背景電解質(zhì)的摩爾電導(dǎo)、濃度及電場強(qiáng)度成正比。度成正比。 溫度每變化溫度每變化1 1，將引起背景電解質(zhì)溶液黏度變化，將引起背景電解質(zhì)溶液黏度變化2%2%3%3%；（1）加入濃度較大的中性鹽，如K2SO4，溶液離子強(qiáng)度增大，使溶液的黏度增大，電滲流減小。（2）加入表面活性劑，可改變電滲流的大小和方向； 加入不同陽離子表面活性劑來控制電滲流。 加入陰離子表面活性劑，如十二烷基硫酸鈉（SDS），可以使壁表面負(fù)

13、電荷增加，zeta電勢增大，電滲流增大；（3）加入有機(jī)溶劑如甲醇、乙腈，使電滲流增大。2apefeffeoef2Vl(+)Vlln=2DL2DL(1).(1).遷移時間（保留時間）遷移時間（保留時間） HPCEHPCE兼具有電化學(xué)的特性和色譜分析的特性。有關(guān)色譜兼具有電化學(xué)的特性和色譜分析的特性。有關(guān)色譜理論也適用。理論也適用。VLLELLtapefapefapef V外加電壓；L毛細(xì)管總長度；ap表觀遷移速度；ap表觀淌度(2).(2).分離效率（塔板數(shù)）分離效率（塔板數(shù)） 在在HPCEHPCE中，僅存在縱向擴(kuò)散，中，僅存在縱向擴(kuò)散，2 2=2=2DtDtm m 擴(kuò)散系數(shù)小的溶質(zhì)比擴(kuò)散系數(shù)大

14、的分離效率高，分離生擴(kuò)散系數(shù)小的溶質(zhì)比擴(kuò)散系數(shù)大的分離效率高，分離生物大分子的依據(jù)。物大分子的依據(jù)。21/2xn=5.54()W 影響分離度的主要因素；工作電壓影響分離度的主要因素；工作電壓V V；毛細(xì)管有效長度；毛細(xì)管有效長度與總長度比；有效淌度差。分離度可按譜圖直接由下式計算：與總長度比；有效淌度差。分離度可按譜圖直接由下式計算：1212)(2WWttReff1eff2effseffeoeffeo1/2effeffeoefseffeoeffeo1/2effefefeffeo1/2seffeffeo-nR =(); =;4+(+)Vln1R =()=442DL+Vl = , LlDL+4 2

15、VR =0.177D+gggg當(dāng) （）（）(1).(1).縱向擴(kuò)散的影響縱向擴(kuò)散的影響 在在HPCEHPCE中，縱向擴(kuò)散引起的峰展寬：中，縱向擴(kuò)散引起的峰展寬：2 2=2=2DtDt 由擴(kuò)散系數(shù)和遷移時間決定。大分子的擴(kuò)散系數(shù)小，由擴(kuò)散系數(shù)和遷移時間決定。大分子的擴(kuò)散系數(shù)小，可可獲得更高的分離效率，大分子生物試樣分離的依據(jù)。獲得更高的分離效率，大分子生物試樣分離的依據(jù)。(2).(2).進(jìn)樣的影響進(jìn)樣的影響 當(dāng)進(jìn)樣塞長度太大時，引起的峰展寬大于縱向擴(kuò)散。分當(dāng)進(jìn)樣塞長度太大時，引起的峰展寬大于縱向擴(kuò)散。分離效率明顯下降；理想情況下，進(jìn)樣塞長度：離效率明顯下降；理想情況下，進(jìn)樣塞長度： Winj=

16、(24D t )1/2實(shí)際操作時進(jìn)樣塞長度小于或等于毛細(xì)管總長度的實(shí)際操作時進(jìn)樣塞長度小于或等于毛細(xì)管總長度的1%1%2%2%。 電泳過程產(chǎn)生的焦耳熱可由下式計算：電泳過程產(chǎn)生的焦耳熱可由下式計算：22EcLrIVQbm m電解質(zhì)溶液的摩爾電導(dǎo)；I工作電流：cm電解質(zhì)濃度； 散熱過程中，在毛細(xì)管內(nèi)形成溫度梯度（中心溫度高），散熱過程中，在毛細(xì)管內(nèi)形成溫度梯度（中心溫度高），破壞了塞流，導(dǎo)致區(qū)帶展寬。破壞了塞流，導(dǎo)致區(qū)帶展寬。 改善方法：改善方法： （1 1）減小毛細(xì)管內(nèi)徑；）減小毛細(xì)管內(nèi)徑； （2 2）控制散熱；）控制散熱； 存在吸附與疏水作用，造成譜帶展寬；存在吸附與疏水作用，造成譜帶展寬；

17、 蛋白質(zhì)、多肽帶電荷數(shù)多，有較多的疏水基，吸附問題特別嚴(yán)重，是目前分離分析該類物質(zhì)的一大難題難題。 細(xì)內(nèi)徑毛細(xì)管柱，一方面有利于散熱，另一方面比表面積大，又增加了溶質(zhì)吸附的機(jī)會。 減小吸附的方法和途徑減小吸附的方法和途徑：加入兩性離子代替強(qiáng)電解質(zhì)，兩性離子一端帶正電，另一端帶負(fù)電，帶正電一端與管壁負(fù)電中心作用，濃度約為溶質(zhì)的100-1000倍時，抑制對蛋白質(zhì)吸附，又不增加溶液電導(dǎo)，對電滲流影響不大。（a a）電分散作用對譜帶展寬的影響）電分散作用對譜帶展寬的影響 當(dāng)溶質(zhì)區(qū)帶與緩沖溶液區(qū)帶的電導(dǎo)不同時，也造成譜帶展寬；盡量選擇與試樣淌度相匹配的背景電解質(zhì)溶液。試樣區(qū)帶試樣區(qū)帶s試樣區(qū)帶試樣區(qū)帶b

18、Es/Eb=eff(b) /eff(s) =s/b=Cb/Cs= 1,拖尾峰形；拖尾峰形；（b b）“層流層流”現(xiàn)象對譜帶展寬的影響現(xiàn)象對譜帶展寬的影響 一般情況下，HPCE中不存在層流，但當(dāng)毛細(xì)管兩端存在壓力差時，出現(xiàn)拋物線形的層流； 產(chǎn)生的原因產(chǎn)生的原因：毛細(xì)管兩端液面高度不同。 實(shí)際操作時，保持毛細(xì)管兩端緩沖溶液平面高度相同。 電壓：電壓：0 030kV30kV； 分離柱不涂敷任何固定液；分離柱不涂敷任何固定液； 紫外或激光誘導(dǎo)熒光檢測器；紫外或激光誘導(dǎo)熒光檢測器；（可檢測到：（可檢測到：1010-19-191010-21-21 mol/L mol/L）（a a）0 030 kV 30

19、kV 穩(wěn)定、連續(xù)可調(diào)的直流電源；穩(wěn)定、連續(xù)可調(diào)的直流電源；（b b）具有恒壓、恒流、恒功率輸出；）具有恒壓、恒流、恒功率輸出；（c c）電場強(qiáng)度程序控制系統(tǒng)；）電場強(qiáng)度程序控制系統(tǒng)；（d d）電壓穩(wěn)定性：）電壓穩(wěn)定性：0.1%0.1%；（e e）電源極性易轉(zhuǎn)換）電源極性易轉(zhuǎn)換；(2). (2). 毛細(xì)管柱毛細(xì)管柱 （1 1）材料：石英：各項(xiàng)）材料：石英：各項(xiàng)性能好；玻璃：光學(xué)、機(jī)性能好；玻璃：光學(xué)、機(jī)械性能差；械性能差； （2 2）規(guī)格：內(nèi)徑）規(guī)格：內(nèi)徑202075m75m，外徑，外徑350350400m400m；長度長度=1m電泳電泳時時, ,陰離子在陰離子在負(fù)極最后流出負(fù)極最后流出, ,在

20、這種情況下在這種情況下, ,不但不但可以按類分離可以按類分離, ,同種類離子由于同種類離子由于差差速遷移速遷移被相互分離。被相互分離。 最基本、應(yīng)用廣的分離模式；最基本、應(yīng)用廣的分離模式； 將聚丙烯酰胺等在毛細(xì)管柱內(nèi)交聯(lián)生成凝膠。將聚丙烯酰胺等在毛細(xì)管柱內(nèi)交聯(lián)生成凝膠。 其具有多孔性，類似分子篩的作用，試樣分子按大小分其具有多孔性，類似分子篩的作用，試樣分子按大小分離。能夠有效減小組分?jǐn)U散，所得峰型尖銳，分離效率高。離。能夠有效減小組分?jǐn)U散，所得峰型尖銳，分離效率高。 蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)、DNADNA等的電荷等的電荷/ /質(zhì)量比與分子大小無關(guān)，質(zhì)量比與分子大小無關(guān)，CZECZE模模式很難分離，采用

21、式很難分離，采用CGECGE能獲得良好分離，能獲得良好分離，DANDAN排序的重要手段。排序的重要手段。 特點(diǎn)特點(diǎn)：抗對流性好，散熱性好，分離度極高?？箤α餍院?，散熱性好，分離度極高。 無膠篩分技術(shù)無膠篩分技術(shù)：采用低粘度的線性聚合物溶液代替高粘采用低粘度的線性聚合物溶液代替高粘度交聯(lián)聚丙烯酰胺。柱便宜、易制備。度交聯(lián)聚丙烯酰胺。柱便宜、易制備。 1.1.緩沖溶液中加入離子型表面活性劑，其濃度達(dá)到臨界緩沖溶液中加入離子型表面活性劑，其濃度達(dá)到臨界濃度，形成一疏水內(nèi)核、外部帶負(fù)電的膠束濃度，形成一疏水內(nèi)核、外部帶負(fù)電的膠束。 在電場力的作在電場力的作用下，膠束在柱中用下，膠束在柱中移動。移動。

22、2. 2. 電泳流和電滲流的方向相反，且電泳流和電滲流的方向相反，且電滲流電滲流 電泳電泳 ，負(fù)電膠束以較慢的速度向負(fù)極移動；負(fù)電膠束以較慢的速度向負(fù)極移動； 5.5.色譜與電泳分離模式色譜與電泳分離模式的結(jié)合。的結(jié)合。 3.3.中性分子在膠束相和溶液（水相）間分配，疏水性強(qiáng)中性分子在膠束相和溶液（水相）間分配，疏水性強(qiáng)的組分與膠束結(jié)合的較牢，流出時間長；的組分與膠束結(jié)合的較牢，流出時間長； 4.4.可用來分離中性物質(zhì)，擴(kuò)展了高效毛細(xì)管電泳的應(yīng)用可用來分離中性物質(zhì)，擴(kuò)展了高效毛細(xì)管電泳的應(yīng)用范圍范圍； 1. 1. 根據(jù)等電點(diǎn)差別分離生物大分子的高分辨率電泳技術(shù)；根據(jù)等電點(diǎn)差別分離生物大分子的高

23、分辨率電泳技術(shù)； 2. 2. 毛細(xì)管內(nèi)充有兩性電解質(zhì)（合成的具有不同等電點(diǎn)范圍毛細(xì)管內(nèi)充有兩性電解質(zhì)（合成的具有不同等電點(diǎn)范圍的脂肪族多胺基多羧酸混合物），當(dāng)施加直流電壓（的脂肪族多胺基多羧酸混合物），當(dāng)施加直流電壓（6 68V8V）時，管內(nèi)將建立一個由陽極到陰極逐步升高的時，管內(nèi)將建立一個由陽極到陰極逐步升高的pHpH梯度；梯度； 3. 3. 氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽等的所帶電荷與溶液氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽等的所帶電荷與溶液pHpH有關(guān)，在有關(guān)，在酸性溶液中帶正電荷，反之帶負(fù)電荷。在其等電點(diǎn)時，呈電中酸性溶液中帶正電荷，反之帶負(fù)電荷。在其等電點(diǎn)時，呈電中性，淌度為零；性，淌度為零； 4. 4. 聚

24、焦：具有不同等電點(diǎn)的生物試樣在電場力的作用下聚焦：具有不同等電點(diǎn)的生物試樣在電場力的作用下遷移，分別到達(dá)滿足其等電點(diǎn)遷移，分別到達(dá)滿足其等電點(diǎn)pHpH的位置時，呈電中性，停止的位置時，呈電中性，停止移動，形成窄溶質(zhì)帶而相互分離；移動，形成窄溶質(zhì)帶而相互分離； 5. 5. 陽極端裝稀磷酸溶液，陰極端裝稀陽極端裝稀磷酸溶液，陰極端裝稀NaOHNaOH溶液；溶液； 6. 6. 加壓將毛細(xì)管內(nèi)分離后的溶液推出經(jīng)過檢測器檢測；加壓將毛細(xì)管內(nèi)分離后的溶液推出經(jīng)過檢測器檢測； 7. 7. 電滲流在電滲流在CIEFCIEF中不利，應(yīng)消除或減小。中不利，應(yīng)消除或減小。 1. 1. 將兩種淌度差別很大的緩沖液分別

25、作為前導(dǎo)離子將兩種淌度差別很大的緩沖液分別作為前導(dǎo)離子( (充滿充滿毛細(xì)管毛細(xì)管) )和尾隨離子，試樣離子的淌度全部位于兩者之間，和尾隨離子，試樣離子的淌度全部位于兩者之間，并以同一速度移動。并以同一速度移動。 2. 2. 負(fù)離子分析時，前導(dǎo)電解質(zhì)的淌度大于試樣中所有負(fù)負(fù)離子分析時，前導(dǎo)電解質(zhì)的淌度大于試樣中所有負(fù)離子的。所有試樣都按前導(dǎo)離子的速度等速向陽極前進(jìn)，逐離子的。所有試樣都按前導(dǎo)離子的速度等速向陽極前進(jìn)，逐漸形成各自獨(dú)立的區(qū)帶而分離。陰極進(jìn)樣，陽極檢測。漸形成各自獨(dú)立的區(qū)帶而分離。陰極進(jìn)樣，陽極檢測。 3. 3. 不同離子的淌度不同，所形成區(qū)帶的電場強(qiáng)度不同不同離子的淌度不同，所形成

26、區(qū)帶的電場強(qiáng)度不同( (= =EE) )，淌度大的離子區(qū)帶電場強(qiáng)度??；，淌度大的離子區(qū)帶電場強(qiáng)度小； 沿出口到進(jìn)口，將不同區(qū)帶依次排序沿出口到進(jìn)口，將不同區(qū)帶依次排序1 1、2 2、3 3、4 4 電場強(qiáng)度依次增大。假設(shè)電場強(qiáng)度依次增大。假設(shè)“2”2”號中離子擴(kuò)散到號中離子擴(kuò)散到“3”3”號，該號，該區(qū)電場強(qiáng)度大，離子被加速，返回到區(qū)電場強(qiáng)度大，離子被加速，返回到“2”2”區(qū)；當(dāng)區(qū)；當(dāng)“2”2”號中號中離子跑到離子跑到“1”1”號區(qū)，離子被減速使之歸隊；號區(qū)，離子被減速使之歸隊； 4. 4. 特點(diǎn)：界面明顯，富集、濃縮作用；特點(diǎn)：界面明顯，富集、濃縮作用； 在毛細(xì)管壁上鍵合或涂漬高效液相色譜的

27、固定液，以電在毛細(xì)管壁上鍵合或涂漬高效液相色譜的固定液，以電滲流為流動相，試樣組分在兩相間的分配為分離機(jī)理的電動滲流為流動相，試樣組分在兩相間的分配為分離機(jī)理的電動色譜過程；色譜過程；陽離子分析陽離子分析 遷移方向和電滲流遷移方向和電滲流方向一致；方向一致； 4.5min4.5min內(nèi)分離了內(nèi)分離了2424種金屬離子；種金屬離子； 陽極進(jìn)樣，陰極檢測；陽極進(jìn)樣，陰極檢測； 具有很高的靈敏度；具有很高的靈敏度； 陰離子電泳方向和電滲流陰離子電泳方向和電滲流方向相反、速度接近，分析時方向相反、速度接近，分析時間長、效率低；間長、效率低； 質(zhì)量小、電荷密度大的離質(zhì)量小、電荷密度大的離子如：子如：SO

28、SO4 4-2-2、ClCl- -、F F- -等，電等，電泳速率大于電滲流，陽極端流泳速率大于電滲流，陽極端流出，在陰極端無法檢測；出，在陰極端無法檢測； 加入電滲流改性劑，十六加入電滲流改性劑，十六烷基三甲基溴化胺等，使電泳烷基三甲基溴化胺等，使電泳方向和電滲流方向一致，可在方向和電滲流方向一致，可在3.1min3.1min內(nèi)分離內(nèi)分離3636種陰離子；種陰離子；陰極進(jìn)樣，陽極檢測；陰極進(jìn)樣，陽極檢測；離子價態(tài)及存在形態(tài)分析；離子價態(tài)及存在形態(tài)分析； 檢測體液或細(xì)胞中檢測體液或細(xì)胞中某些代謝產(chǎn)物的分析；某些代謝產(chǎn)物的分析； 尿液中的氨基酸含尿液中的氨基酸含量作為臨床診斷糖尿病量作為臨床診斷糖尿病的輔助手段；的輔助手段； 采用毛細(xì)管區(qū)帶電采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳方式，在泳方式，在11min11min內(nèi)分離內(nèi)分離1717種藥物；種藥物；采用MEKC模式，鑒定違禁藥