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文檔簡介

1、1. 微生物:是一切體形微小單細(xì)胞或個(gè)體結(jié)構(gòu)簡單的多細(xì)胞,甚至沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的低等生物的統(tǒng)稱。2. 種(species):是一個(gè)基本分類單位;是一大群表型特征高度相似、親緣關(guān)系極其接近,與同屬內(nèi)其他種有明顯差別的菌株的總稱。 3. 菌株(strain): 表示任何由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞繁殖而成的純種群體及其一切后代菌株強(qiáng)調(diào)的是遺傳型純的譜系4. 微生物分類:原核生物:真細(xì)菌(放線菌、支原體、立克次氏體、衣原體、藍(lán)細(xì)菌)、古細(xì)菌真核生物:酵母菌、霉菌、原生動物、單細(xì)胞藻類非細(xì)胞結(jié)構(gòu)生物:病毒、 亞病毒(類病毒、擬病毒、朊病毒)5. 觀察細(xì)菌形態(tài)時(shí),為什么要用染色法,常用的染色方法有幾種?一般微生物

2、菌體小且無色透明,在光學(xué)顯微鏡下細(xì)胞體液及結(jié)構(gòu)的折光率與其背景相差很小,因此用壓法或懸滴法進(jìn)行觀察時(shí),只能看到其大體形態(tài)和運(yùn)動情況,若要在光學(xué)顯微鏡下觀察其細(xì)致形態(tài)和主要結(jié)構(gòu),一般都需要對他們?nèi)旧瑥亩柚伾姆匆r作用提高觀察樣品不同部位的反差。細(xì)菌染色法:活菌:用沒藍(lán)或TTC等做活菌染色 死菌:1 負(fù)染色(背景著色法)【莢膜染色】 2 正染色:簡單染色法(形態(tài))和鑒別染色法(結(jié)構(gòu))(革蘭氏染色法、抗酸性染色法、芽孢染色法、)7. 原生質(zhì)體:通過溶菌酶去除細(xì)胞壁或使用青霉素抑制細(xì)胞壁合成,而得到的僅有細(xì)胞膜包裹的圓球狀滲透敏感細(xì)胞。8. 球狀體:還殘留著部分細(xì)胞壁的圓球狀滲透敏感細(xì)胞9. L

3、型細(xì)菌:通過自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺陷菌株。10. 支原體:在長期進(jìn)化過程中形成后適應(yīng)自然生活條件的無細(xì)胞壁的原核生物11. 糖被:包被于某些細(xì)菌細(xì)胞壁外地一層厚度不定的膠狀物質(zhì)被稱糖被12. 芽孢:某些細(xì)菌在某生長發(fā)育后期,在細(xì)胞,內(nèi)形成一個(gè)圓形或橢圓形,厚壁 含水量極低 抗逆性極強(qiáng)的休眠體13. 伴孢晶體: 少數(shù)芽孢 桿菌在形成芽孢的同時(shí),會在芽孢旁邊形成一個(gè)菱形或雙錐形的堿溶性蛋白晶體稱伴胞晶體。14. 菌落:分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長繁殖帶一定程度可以形成肉眼可見的,有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞生長群體。15. 假絲酵母:有些酵母菌與其子代細(xì)胞在一起成為鏈狀,稱

4、為假絲酵母16. 芽殖:一個(gè)酵母能形成的芽數(shù)平均24個(gè)出芽方式:多邊出芽、兩端出芽、三邊出芽、單邊出芽17. 革蘭氏染色的主要步驟和關(guān)鍵步驟各是什么,機(jī)理如何主要步驟: 方法:結(jié)晶紫初染碘液媒染乙醇脫色番紅復(fù)染油鏡觀察關(guān)鍵步驟:脫色 脫色長短會影響菌體的鑒別 (假陽性和假陰性)機(jī)理: 初染時(shí)結(jié)晶紫透過細(xì)胞壁進(jìn)入細(xì)胞,媒染所用的碘液與結(jié)晶紫反應(yīng)生成不溶性的復(fù)合物,但這種復(fù)合物可以溶于乙醇。當(dāng)用乙醇脫色時(shí),G-中的復(fù)合物被洗去,但在G+中由于存在厚厚的肽聚糖,乙醇使肽聚糖脫水以致肽聚糖層空隙變小 復(fù)合物無法通過細(xì)胞壁而存在細(xì)胞中使細(xì)胞仍呈現(xiàn)紫色。番紅復(fù)染將G-染成紅色,G+的紫色覆蓋紅色仍呈現(xiàn)紫色

5、。18. 芽孢是如何形成的,其耐熱機(jī)制是什么芽孢的形成分為7個(gè)階段:DNA濃縮,束狀染色質(zhì)形成、隔膜的形成(前芽孢的雙成隔膜)、前芽孢形成 細(xì)胞發(fā)生不對稱分裂,小體積部分為前芽孢、 皮層形成、芽孢衣形成、芽孢合成完成、芽孢裂解 機(jī)制:芽孢衣對多價(jià)陽離子和水分的透性很差和皮層的離子強(qiáng)度很高,皮層有極高的滲透壓,奪取核心部分的水分,造成皮層充分膨脹,核心部位生命物質(zhì)高度失水,從而具有極高的耐熱性19. 溶酶菌和青霉素的作用點(diǎn)溶菌酶作用細(xì)菌壁肽聚糖二塘的B-1-4糖苷鍵青霉素使細(xì)胞壁中肽聚糖的肽橋無法連接20. G-細(xì)菌LPS層功能,其穩(wěn)定性與什么有關(guān)構(gòu)成某些革蘭氏陰性細(xì)菌致病物質(zhì)內(nèi)毒素的物質(zhì)基礎(chǔ);

6、起細(xì)菌自我保護(hù)作用.重要的抗原因子;是許多噬菌體吸附的受體。吸附Mg2+、Ca2+等陽離子以提高其在細(xì)胞表面濃度的作用。LPS層的穩(wěn)定性與Ca2+有關(guān),如果用EDTA等螯合劑去除Ca2+和降低離子鍵強(qiáng)度,就會使LPS解體。21. 如何通過實(shí)驗(yàn)方法確定細(xì)菌有無鞭毛從固體形態(tài)培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)判斷:該菌長出的菌落大,薄且不規(guī)則,邊緣也不圓整,說明有鞭毛;反之,外形圓整,邊緣光滑,厚度較大則說明無鞭毛。半固體瓊脂穿刺培養(yǎng):若穿刺線周圍有呈渾濁的擴(kuò)散區(qū)則說明有鞭毛。特殊鞭毛染色法:是染料沉積在鞭毛上,用光學(xué)顯微鏡觀察加粗后的鞭毛。暗視野具滴法:根據(jù)其運(yùn)動方法用光學(xué)顯微鏡判斷其有無鞭毛。電子顯微鏡(最直

7、接的方法)22. 細(xì)菌、酵母菌、霉菌的菌落各有何特點(diǎn),掌握這些知識有何實(shí)際意義細(xì)菌:較小,濕潤,易被接種環(huán)挑起球菌形成隆起菌落,有鞭毛細(xì)菌常形成不規(guī)則菌落,具有莢膜的細(xì)菌菌落表面較透明,邊緣光滑整齊,有芽孢的細(xì)菌菌落表面干燥皺著酵母菌菌落與細(xì)菌菌落相似但較大較厚,菌落表面濕潤粘稠,易被挑起,多為乳白色霉菌:較大,質(zhì)地疏松,外觀干燥,不透明,呈現(xiàn)或緊或松的蛛網(wǎng)狀絨毛狀或棉絮狀,菌落與培養(yǎng)基接觸緊密不易挑取,菌落正反面及中心與邊緣顏色常不一致不同微生物在特定培養(yǎng)上生長形成的菌落或菌苔一般都具有穩(wěn)定特征,可成為對該微生物鑒別分類的重要依據(jù)23. 比較細(xì)菌、酵母菌、霉菌細(xì)胞壁的特殊成分,設(shè)想他們的原生

8、質(zhì)體的制備方法細(xì)胞壁成分的異同:細(xì)菌分為G+和G-,G+肽聚糖含量高,G-含量低;G+磷壁酸含量較高,而G-不含磷壁酸;G+類脂質(zhì)一般無,而G-含量較高;G+不含蛋白質(zhì),G-含量較高。放線菌為G-,其細(xì)胞壁具有G-所具有的特點(diǎn)。酵母菌和霉菌為真菌,酵母菌的細(xì)胞壁外層為甘露聚糖,內(nèi)層為葡聚糖;而霉菌的細(xì)胞壁成分為幾丁質(zhì)、蛋白質(zhì)、葡聚糖。原生質(zhì)體制備方法:G+菌原生質(zhì)體獲得:青霉素、溶菌酶 。 G-菌原生質(zhì)體獲得:EDTA鰲合劑處理,溶菌酶。 放線菌原生質(zhì)體獲得:青霉素、溶菌酶。霉菌原生質(zhì)體獲得:纖維素酶。酵母菌原生質(zhì)體獲得:蝸牛消化酶。24. 比較原核生物和真核生物的異同真核生物有核膜包被,原核

9、生物沒有。真核生物有線粒體、葉綠體、高爾基體、核糖體等,原核生物只有核糖體。原核生物細(xì)胞較小,而真核生物較大。原核生物細(xì)胞壁多為肽聚糖而真核生物為纖維素。原核生物細(xì)胞質(zhì)不流動 真核生物流動26. 真菌孢子的類型分為無性孢子和有性孢子,有性孢子(卵孢子,接合孢子,子囊孢子,擔(dān)孢子),無性孢子(孢囊孢子,分生孢子,節(jié)孢子,厚壁孢子)其中,擔(dān)孢子節(jié)孢子厚壁孢子分生孢子為外省,其他為內(nèi)生27. 試比較營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入微生物細(xì)胞的幾種方式的基本特點(diǎn)自由擴(kuò)散:又濃度高的地方向濃度低的地方擴(kuò)散,不需要載體和ATP協(xié)助擴(kuò)散:不受濃度的限制,需要載體不需要ATP主動運(yùn)輸:不受濃度的限制,需要載體和ATP內(nèi)吞外排:通

10、過細(xì)胞膜的流動性而運(yùn)輸大分子物質(zhì)28. 什么是培養(yǎng)基?用于固體培養(yǎng)基的凝固劑有幾種。為什么說瓊脂的最好的凝固劑。培養(yǎng)自養(yǎng)微生物常用什么做凝固劑,為什么?定義:由人工配制的、適合于不同微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物用的營養(yǎng)基質(zhì)(混合養(yǎng)料)。用于固體培養(yǎng)基的凝固劑有:瓊脂、明膠、硅膠不能不為微生物分解;不因消毒滅菌被破壞,在為生物生長溫度內(nèi)保持固態(tài),凝固點(diǎn)溫度不能太低,對微生物無害,透明度好,粘著力強(qiáng)。培養(yǎng)自養(yǎng)微生物常用明膠,因?yàn)槊髂z不含有機(jī)物29. 微生物在培養(yǎng)基中,pH為什么會發(fā)生改變,如何保持培養(yǎng)基中pH的相對穩(wěn)定?微生物在生長繁殖和積累代謝產(chǎn)物過程中,培養(yǎng)基PH會發(fā)生如下變化:1.如微生物在

11、含糖基質(zhì)上生長,會產(chǎn)酸而使PH下降2.微生物在分解蛋白質(zhì)和氧基酸時(shí),會產(chǎn)NH3而使PH上升。3.以(NH4)2SO4作N源,會過剩SO42-,而使PH下降。4.分解李永陽離子化合物如:NaNO3,會過剩Na而使PH上升。 為了維持培養(yǎng)基PH值得相對恒定,常常在培養(yǎng)基中加入緩沖液物質(zhì)如磷酸鹽,碳酸鹽,以緩和PH變化的劇烈?;蚣铀峒訅A30. 微生物的營養(yǎng)類型分幾種,主要劃分依據(jù)是什么?1光能無機(jī)自養(yǎng)型(光能自養(yǎng)型) 能以CO2為唯一或主要碳源; 進(jìn)行光合作用獲取生長所需要的能量;以無機(jī)物如H2、H2S、S、H2O等作為供氫體或電子供體,使CO2還原為細(xì)胞物質(zhì); 2光能有機(jī)異養(yǎng)型(光能異養(yǎng)型) 不能

12、以CO2為主要或唯一的碳源;以有機(jī)物作為供氫體,利用光能將CO2還原為細(xì)胞物質(zhì);在生長時(shí)大多數(shù)需要外源的生長因子; 3化能無機(jī)自養(yǎng)型(化能自養(yǎng)型) 生長所需要的能量來自無機(jī)物氧化過程中放出的化學(xué)能;以CO2或碳酸鹽作為唯一或主要碳源進(jìn)行生長時(shí),利用H2、H2S、Fe2+、NH3或NO2-等無機(jī)物作為電子供體使CO2還原成細(xì)胞物質(zhì)。4.化能有機(jī)異養(yǎng)型(化能異養(yǎng)型)碳源是有機(jī)物,有機(jī)物作為電子傳體所用能源為化學(xué)能 31. 天然培養(yǎng)基:含化學(xué)成分還不清楚或化學(xué)成分不恒定的天然有機(jī)物32. 組合培養(yǎng)基:由化學(xué)成分完全了解的物質(zhì)配制而成33. 選擇培養(yǎng)基:根據(jù)某種或某一類群微生物的特殊營養(yǎng)需要或?qū)δ郴?/p>

13、物的敏感性不同而設(shè)計(jì)出來的培養(yǎng)基34. 鑒別培養(yǎng)基:在普通培養(yǎng)基中加入能與某代謝產(chǎn)物發(fā)生反應(yīng)的指示劑或化學(xué)藥品,而產(chǎn)生某種明顯的變化35. 簡述微生物的營養(yǎng)要素,在配制培養(yǎng)基時(shí),一般選擇哪些物質(zhì)?微生物的營養(yǎng)物質(zhì)要素有五類:碳源,氮源,無機(jī)鹽,生長因子和水在實(shí)驗(yàn)室一般用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)細(xì)菌 一般用麥芽汁培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌 一般用高氏一號合成培養(yǎng)基放線菌 一般用查氏合成培養(yǎng)基培養(yǎng)霉菌36. 現(xiàn)有的微生物保藏方法分幾類,保藏原理各是什么?低溫保存:菌種管置于4C冰箱保存定時(shí)傳代;原理:低溫下微生物代謝強(qiáng)度明顯下降石蠟油低溫保存:橡膠塞風(fēng)口或覆蓋石蠟油;原理:降低微生物的代謝水平液氮超低溫保存法:菌種

14、置于保護(hù)劑中預(yù)凍后保存在液氮超低溫冰箱內(nèi)(-196C,50年);原理:微生物處于冷凍狀態(tài)代謝作用停止(是用于各種微生物)干燥保存法:將菌種置于土壤 濾紙 細(xì)沙 硅膠等干燥材料上保存;原理:微生物處于干燥狀態(tài)下生命活動處于休眠狀態(tài)(適用于保存放線菌,芽孢菌和其他真菌保存)真空冷凍干燥法:加油保護(hù)劑的菌懸液在凍結(jié)狀態(tài)下予以真空保存;原理:微生物處于干燥缺氧及低溫狀態(tài)下生命活動處于休眠37. 一般來說,嚴(yán)格的無菌操作是一切微生物學(xué)工作的基本要求,但在分離與培養(yǎng)極端嗜鹽菌時(shí),常在沒有點(diǎn)酒精燈的普通試驗(yàn)臺上傾倒培養(yǎng)平板,在日常生活中直接打開皿蓋觀察和挑取菌落,而其研究結(jié)果并沒有因此受到影響,這是為什么?

15、培養(yǎng)極端嗜鹽菌的培養(yǎng)平板需要添加很高濃度的氯化鈉,實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中的一般微生物都不能在這種選擇培養(yǎng)基上生長,因此在實(shí)驗(yàn)過程中即使不采用無菌操作技術(shù),實(shí)驗(yàn)結(jié)果仍不會受到影響38. 如果希望從環(huán)境中分離得到厭氧固氮菌,該如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)?(1)根據(jù)選擇分離的原理設(shè)計(jì)不含氮的培養(yǎng)基,在這種培養(yǎng)基上生長的細(xì)菌,其氮素應(yīng)來自固氮作用。(2)將環(huán)境樣品(例如土樣)稀釋涂布到選擇平板上,放置于厭氧罐中。對厭氧罐采用物理、化學(xué)方法除去氧氣,保留氮?dú)?。培養(yǎng)后在平板上生長出來的細(xì)菌應(yīng)是厭氧固氮菌或兼性厭氧固氮菌。(3)挑取一定數(shù)量的菌落,對應(yīng)點(diǎn)種到兩塊缺氮的選擇平板上,分別放置于厭氧罐內(nèi)、外保溫培養(yǎng)。在厭氧罐內(nèi)外均能生長

16、的為兼性厭氧固氮菌,而在厭氧罐外的平板上不能生長,在厭氧罐內(nèi)的平板上生長的即為可能的厭氧固氮菌。39. 與促進(jìn)擴(kuò)散相比,微生物通過主動運(yùn)輸吸收營養(yǎng)物質(zhì)的優(yōu)點(diǎn)是什么?在于可以逆濃度運(yùn)輸營養(yǎng)物質(zhì)。通過促進(jìn)擴(kuò)散將營養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸進(jìn)入細(xì)胞,需要環(huán)境中營養(yǎng)物質(zhì)濃度高于胞內(nèi),而在自然界中生長的微生物所處環(huán)境中的營養(yǎng)物質(zhì)含量往往很低,在這種情況下促進(jìn)擴(kuò)散難以發(fā)揮作用。主動運(yùn)輸則可以逆濃度運(yùn)輸,將環(huán)境中較低濃度營養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸進(jìn)入胞內(nèi),保證微生物正常生長繁殖。40. 以伊紅美藍(lán)(EMB)培養(yǎng)基為例,分析鑒別培養(yǎng)基的作用原理。鑒別性培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入能與某菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑,從肉眼就能將其與其他外

17、形相似的菌落區(qū)分。EMB培養(yǎng)基中大腸桿菌,因其強(qiáng)烈分解乳糖而產(chǎn)生大量的混合酸,菌體帶H+,故可染上酸性染料伊紅,又因伊紅與美藍(lán)結(jié)合,使菌落呈深紫色。從菌落表面反光還可看到綠色金屬閃光。而產(chǎn)酸弱的菌株的菌落呈棕色。不發(fā)酵乳酸的菌落無色透明。41. 以大腸桿菌烯醇丙酮磷酸-磷酸糖轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)(PTS)為例解釋基團(tuán)轉(zhuǎn)位。大腸桿菌PTs由5種蛋白質(zhì)(酶I、酶a、酶b、酶c及熱穩(wěn)定蛋白質(zhì)Hn)組成,酶a、酶b、酶c 3個(gè)亞基構(gòu)成酶。酶I和HPr為非特異性細(xì)胞質(zhì)蛋白,酶a也是細(xì)胞質(zhì)蛋白,親水性酶b與位于細(xì)胞膜上的疏水性酶c相結(jié)合。酶將一個(gè)葡萄糖運(yùn)輸進(jìn)入胞內(nèi),磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)上的磷酸基團(tuán)逐步通過酶I

18、和HPr的磷酸化和去磷酸化作用,最終在酶的作用下轉(zhuǎn)移到葡萄糖,這樣葡萄糖在通過PTs進(jìn)入細(xì)胞后加上了一個(gè)磷酸基團(tuán)。42. 某學(xué)生利用酪素培養(yǎng)基(見表4-13)平板篩選產(chǎn)胞外蛋白酶細(xì)菌,在酪素培養(yǎng)基平板上發(fā)現(xiàn)有許多菌的菌落周圍有蛋白酶水解圈,是否能僅憑蛋白水解圈與菌落直徑比大,就斷定該菌株產(chǎn)胞外蛋白酶的能力就大。而將其選擇為高產(chǎn)蛋白酶的菌種?為什么?不能。因?yàn)椋?1)不同微生物的營養(yǎng)需求、最適生長溫度等生長條件有差別,在同一平板上相同條件下的生長及生理狀況不同;(2)不同微生物所產(chǎn)蛋白酶的性質(zhì)(如最適催化反應(yīng)溫度、pH、對底物酪素的降解能力等)不同;(3)該學(xué)生所采用的是一種定性及初步定量的方法

19、,應(yīng)進(jìn)一步針對獲得的幾株菌分別進(jìn)行培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件優(yōu)化,并在分析這些菌株所產(chǎn)蛋白酶性質(zhì)的基礎(chǔ)上利用搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn)確定蛋白酶高產(chǎn)菌株。 43. 如果要從環(huán)境中分離能利用苯作為碳源和能源的微生物純培養(yǎng)物,你如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)?(1)從苯含量較高的環(huán)境中采集土樣或水樣;(2)配制培養(yǎng)基,制備平板,一種僅以苯作為惟一碳源(A),另一種不含任何碳源作為對照(B);(3)將樣品適當(dāng)稀釋(十倍稀釋法),涂布A平板;(4)將平板置于適當(dāng)溫度條件下培養(yǎng),觀察是否有菌落產(chǎn)生;(5)將A平板上的菌落編號并分別轉(zhuǎn)接至B平板,置于相同溫度條件下培養(yǎng)(在B平板上生長的菌落是可利用空氣中C02的自養(yǎng)型微生物);(6)挑取在A平板上

20、生長而不在B平板上生長的菌落,在一個(gè)新的A平板上劃線、培養(yǎng),獲得單菌落,初步確定為可利用苯作為碳源和能源的微生物純培養(yǎng)物;(7)將初步確定的目標(biāo)菌株轉(zhuǎn)接至以苯作為惟一碳源的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn),利用相應(yīng)化學(xué)分析方法定量分析該菌株分解利用苯的情況。 44. 胃八疊球菌和運(yùn)動發(fā)酵蛋白菌產(chǎn)生乙醇的方式有什么不同?糖酵解:最著名和研究最徹底的糖酵解形式是雙磷酸已糖降解途徑。另一途徑是脫氧酮糖酸途徑)運(yùn)動發(fā)酵單胞菌是唯一一種通過脫氧酮糖酸葡萄糖酵解途徑(ED)將葡萄糖和果糖轉(zhuǎn)化為乙醇的細(xì)菌。 胃八疊球菌和腸桿菌在厭氧條件下也可通過EMP途徑進(jìn)行乙醇發(fā)酵。45. 光合細(xì)菌分幾類,細(xì)菌的光合作用與綠

21、色植物的光合作用之間有什么不同?根據(jù)光合細(xì)菌所含光合色素和電子供體的不同而分為產(chǎn)氧光合細(xì)菌(藍(lán)細(xì)菌、原綠菌)和不產(chǎn)氧光合細(xì)菌(紫色細(xì)菌和綠色細(xì)菌)。46. 一酵母突變株的糖酵解途徑中,從乙醛到乙醇的路徑被阻斷,它不能在無氧條件下的葡萄糖平板上生長,但可在有氧條件下的葡萄糖平板上存活。試解釋這一現(xiàn)象。從乙醛到乙醇的路徑被阻斷,僅僅阻斷的是無氧呼吸的最后一步,即糖酵解過程中產(chǎn)生的NADPH中的氫將乙醛還原為乙醇。 但是在有氧的情況下,糖酵解過程中產(chǎn)生的氫將不再用于把乙醛還原為乙醇,而是直接運(yùn)送到線粒體中進(jìn)行氧化產(chǎn)生水,即不經(jīng)過從乙醛到乙醇的這一階段,因此可以在有氧條件下的葡萄糖平板上存活。47.

22、論述不同微生物在不同條件下丙酮酸的去向厭氧性微生物:丙酮酸可以生成乳酸或乙醇。好氧性微生物:丙酮酸繼續(xù)氧化分解為水及二氧化碳。48. 化能異養(yǎng)微生物的生物氧化中,糖酵解有幾條主要途徑?EMP途徑:兩個(gè)階段:耗能階段 產(chǎn)能階段 HMP途徑:單磷酸已糖途徑ED途徑:可不依賴EMP和HMP的途徑TCA途徑:檸檬酸循環(huán)49. 糖酵解形成的丙酮酸代謝有幾種主要類型,各有哪些類型的微生物參與?EMP-原核生物 酵母菌 HM-大多數(shù)好氧兼性厭氧微生物 ED-廣泛在于革蘭氏陰性菌 磷酸解酮酶途徑 50. 細(xì)菌的乙醇發(fā)酵有幾種類型,與酵母菌的一型乙醇發(fā)酵相比有什么特點(diǎn)?1.以運(yùn)動發(fā)酵單細(xì)胞菌和厭氧菌發(fā)酵單細(xì)胞

23、ED途徑-乙醇 2、厭氧菌(胃八疊球菌 腸桿菌) EMP途徑-乙醇 酵母菌的一型:無氧條件,經(jīng)EMP途徑產(chǎn)物為乙酸特點(diǎn):還原途徑多種多樣 ED途徑不依賴EMP HM 而獨(dú)立存在,是EMP途徑的替代 51. 微生物的能量轉(zhuǎn)換有幾種類型氧化磷酸化:物質(zhì)在生物氧化過程中形成的NADH和FADH2可通過傳遞系統(tǒng)將電子傳遞給氧或其他氧化型物質(zhì),這個(gè)過程偶聯(lián)著ATP的合成,這種產(chǎn)生ATPDE方式為底物水平磷酸化:物質(zhì)在生物氧化過程中,常生成一些含有高能鍵的化合物 而這些化合物課直接和ATP或GTP的合成,這種產(chǎn)生ATP的方式為底物水平磷酸化光合磷酸化:光能轉(zhuǎn)變?yōu)榛瘜W(xué)能的過程中,當(dāng)1個(gè)葉綠素分子吸收光量子時(shí)

24、,葉綠素被激活,導(dǎo)致葉綠素釋放1個(gè)電子而被氧化,釋放出的電子在電子傳遞系統(tǒng)中逐步釋放能量52. 呼吸鏈:由一系列氧化還原不同的氫傳遞組成的一組鏈狀傳遞順序53. 循環(huán)光合磷酸化:在光能的驅(qū)動下通過電子的循環(huán)式傳遞完成磷酸化產(chǎn)能反應(yīng)。54. 非循環(huán)光合磷酸化:高等植物和藍(lán)細(xì)菌與其光合細(xì)菌不同,他們可以裂解水,以提供細(xì)胞合成的還原能力55. 氧化磷酸化:物質(zhì)在生物氧化過程中形成的NADH和FADH2可通過傳遞系統(tǒng)將電子傳遞給氧或其他氧化型物質(zhì),這個(gè)過程偶聯(lián)著ATP的合成,這種產(chǎn)生ATP的方式為56. 底物水平磷酸化:物質(zhì)在生物氧化過程中,常生成一些含有高能鍵的化合物 而這些化合物課直接和ATP或G

25、TP的合成,這種產(chǎn)生ATP的方式為底物水平磷酸化57. 發(fā)酵:微生物細(xì)胞將有機(jī)物氧化釋放后電子直接交給底物本身未完全氧化的某種中間產(chǎn)物,同時(shí)釋放能量并產(chǎn)生各種不同的代謝物58. 糖酵解:生物體內(nèi)葡萄糖被降解為丙酮酸的過程59. 有氧呼吸:是以分子氧作為最終電子受體的氧化過程60. 無氧呼吸:以外源無機(jī)氧化物中的氧作為最終電子受體的氧化作用61. 酶活性調(diào)節(jié):是指一定數(shù)量的酶,通過其分子構(gòu)象或分子結(jié)構(gòu)的改變來調(diào)節(jié)其催化反應(yīng)的速率。62. 酶合成調(diào)節(jié):指通過調(diào)節(jié)酶分子的合成量來調(diào)節(jié)其催化反應(yīng)的速率63. 次級代謝:是指微生物在一定生長時(shí)期,以初級代謝產(chǎn)物為前提,合成一些對微生物的生命活動無明確功能

26、的物質(zhì)的過程。64. 次級代謝產(chǎn)物:是指微生物在一定生長時(shí)期,以初級代謝產(chǎn)物為前提,合成一些對微生物的生命活動無明確功能的物質(zhì),這一過程的產(chǎn)物,即為次級代謝產(chǎn)物。65. 化能自養(yǎng)細(xì)節(jié)中,硝酸細(xì)菌是如何獲得其生命活動所需APT和還原力【H】的?ATP:通過還原態(tài)NH3和NO-2經(jīng)硝酸細(xì)菌氧化產(chǎn)生的。還原力H:通過耗ATP的無機(jī)氫的逆呼吸傳遞而產(chǎn)生。66. 分支代謝途徑中存在哪些主要的反饋抑制類型?1、同工酶反饋抑制 2、協(xié)同反饋抑制 3、積累反饋抑制 4、順序反饋抑制67. 試分析影響微生物生長的主要因素及它們影響微生物生長繁殖的機(jī)制。1、營養(yǎng)物質(zhì):營養(yǎng)不足導(dǎo)致微生物生長所需要的能量、碳源、氮源

27、、無機(jī)鹽等成分2、水:微生物在生化過程中,對培養(yǎng)基的水活度aw有一定要求aw過高或低于要求aw都會影響培養(yǎng)基的滲透壓度而影響微生物生長3、溫度:影響酶的活性 影響細(xì)胞質(zhì)膜的流動性 影響物質(zhì)的溶解度 4、PH:PH通過影響細(xì)胞質(zhì)膜的特性,膜結(jié)構(gòu)的溫度性和物質(zhì)的溶解性或電離性來影響營養(yǎng)物質(zhì)的吸收,從而影響微生物的生長速率 5、氧:不同類型的菌對的需求不同68. 控制微生物生長繁殖的主要方法及原理有哪些?物理方法:高溫滅菌,引起蛋白質(zhì)、核酸等大部分變性,失活 過濾除菌法,用一定孔徑濾膜過濾 干燥,引起胞內(nèi)蛋白質(zhì)性和鹽類濃度的提高,抑制微生物生長 輻射作用,降低蛋白質(zhì)和核酸打的活性化學(xué)方法:抗微生物劑

28、:一類是能夠殺死微生物的如消毒劑,另一類抑制微生物生長的防腐劑 抗生素:抑制細(xì)胞壁的合成,破壞細(xì)胞膜功能,抑制蛋白質(zhì)合成,干擾核酸代謝69. 細(xì)菌耐藥性機(jī)制是哪些?如何避免抗藥性的產(chǎn)生? 耐藥性機(jī)制:1、細(xì)胞膜的透性改變,阻止藥物進(jìn)入細(xì)胞;2、合成了修飾抗生素的酶,使其失活;3、藥物作用的靶改變,對抗生素不敏感;4、抗性菌株發(fā)生遺傳變異。措施:1、第一次使用藥物劑量要足;2、避免在一個(gè)時(shí)期或長期多次使用同種抗生素;3、不同抗生素混合使用;4、對現(xiàn)有抗生素進(jìn)行改造;5、篩選新的更有效的抗生素。70. 試舉例說明日常生活中采用的防腐、消毒和滅菌的方法及原理。1) 煮沸消毒法 a) 將水加熱至100

29、,煮沸15min30min。(加1%Na2CO3或2-5%石炭酸殺菌效果好)2) 巴斯德消毒法(Pasteurization):a) 62.930min處理牛奶 b) 71.615s處理牛奶3) 超高溫滅菌法(Ultrapasteurization): a) 140(135150 )左右2-6s,急劇冷卻至75. 4) 間歇滅菌法:5) 80-100蒸煮15-60min,冷卻后擱置室溫(28-37)下過夜,并重復(fù)三遍以上。原理:6) 冷藏法:5,微生物斜面菌種放置冷藏箱中可保存數(shù)周至數(shù)月而不衰竭死亡;食品保鮮7) 冷凍法:食品工業(yè)中采用-10左右的冷凍溫度較長時(shí)間地保藏食品;冷凍法也可用作菌種

30、保藏,但所需溫度更低,如-80低溫冰箱、或-78干冰、或-80液氮中冷凍保存。原理:低溫是通過降低酶反應(yīng)速度使微生物生長受到抑制。71. 生長:微生物細(xì)胞吸收營養(yǎng)物質(zhì),進(jìn)行新陳代謝,當(dāng)同化作用大于異化作用時(shí),生命個(gè)體的重量和體積不斷增大的過程。繁殖:生長到一定階段后,通過特定方式產(chǎn)生新的生命個(gè)體,是有機(jī)體數(shù)量增加的生物學(xué)過程。72. 滅菌:指利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的所有微生物的一種措施。73. 消毒:利用某種方法殺死或滅活物質(zhì)或物體中所有病原微生物的一種措施。74. 防腐:是在某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子作用下,防止或抑制微生物生長的一種措施。75. 化療:是指利用具有選擇性的化學(xué)物質(zhì)如

31、磺胺、抗生素等對生物體內(nèi)部被微生物感染的組織或病變細(xì)胞進(jìn)行治療,以殺死組織內(nèi)的病原微生物或病變細(xì)胞,但對機(jī)體本身無毒性或毒性很小的治療措施。76. 同步生長及其獲得方式。同步生長:一個(gè)細(xì)胞群體中各個(gè)細(xì)胞都處于同一生長階段,在同一時(shí)間進(jìn)行分裂的狀態(tài)。獲得方式:1、機(jī)械法:密度梯度離心法、過濾離心法、硝酸纖維濾膜法。2環(huán)境條件有道法:溫度、培養(yǎng)基成分、光照獲得方式:1、誘導(dǎo)法:、化學(xué)誘導(dǎo);b、物理誘導(dǎo);2、篩選法:a、過濾法;b、區(qū)帶密度梯度法;c、膜洗脫法。77. 什么是微生物的典型生長曲線?各期的主要特點(diǎn),研究的意義。生長曲線:以時(shí)間為橫坐標(biāo),以菌數(shù)為縱坐標(biāo),根據(jù)不同培養(yǎng)時(shí)間里細(xì)菌數(shù)量的變化可

32、以作出一條反映細(xì)菌在整個(gè)培養(yǎng)期間細(xì)菌數(shù)的變化規(guī)律曲線。1、遲緩期:特點(diǎn):1、比生長速率常數(shù)=0;2、細(xì)胞形態(tài)變大或增長;3、細(xì)胞內(nèi)RNA特別是rRNA含量增高;4、合成代謝活躍,易產(chǎn)生誘導(dǎo)酶;5、對外界不良條件敏感。意義:1、在發(fā)酵工業(yè)上需設(shè)法盡量縮短遲緩期;2、在食品工業(yè)上,盡量在此期進(jìn)行消毒或滅菌。2、對數(shù)期:特點(diǎn):1、比生長速率常數(shù)最大,而代時(shí)最短;2、細(xì)胞平衡生長,菌體生長、形態(tài)、生理特征等比較一致;3、代謝最旺盛;4、細(xì)胞對理化因素較敏感。意義:1、增值噬菌體的最適菌齡,生產(chǎn)上用作接種的最佳菌齡;2、食品工業(yè)上,盡量防止有害微生物進(jìn)入此期;3、發(fā)酵工業(yè)上,盡量延長該期,達(dá)到較高的菌體

33、密度;4、是生理代謝及遺傳研究或進(jìn)行染色、形態(tài)觀察等的良好材料。3、穩(wěn)定期:特點(diǎn):1、新增殖的細(xì)胞數(shù)與老細(xì)胞的死亡數(shù)幾乎相等,培養(yǎng)物中的細(xì)胞數(shù)達(dá)到最高值;2、細(xì)胞分裂速率下降,形成積累內(nèi)含物,產(chǎn)芽孢的細(xì)菌開始產(chǎn)芽孢;3、開始合成次生代謝產(chǎn)物。意義:1、發(fā)酵生產(chǎn)形成的重要時(shí)期;2、穩(wěn)定期細(xì)胞數(shù)目及產(chǎn)物積累達(dá)到最高。4、衰亡期:特點(diǎn):1、細(xì)胞死亡數(shù)增加,群體中的菌數(shù)目急劇下降,出現(xiàn)次生長;2、細(xì)胞內(nèi)顆粒更加明顯,細(xì)胞出現(xiàn)多形態(tài),畸形或衰退形,芽孢開始釋放;3、產(chǎn)生自溶的菌,生長曲線表現(xiàn)為向下跌落的趨勢。78. 什么叫連續(xù)培養(yǎng)?比較恒濁器和恒化器的特點(diǎn)。連續(xù)培養(yǎng):是在微生物的整個(gè)培養(yǎng)期間,通過一定的

34、方式是微生物能以恒定的比生長速率生長并能持持生長下去的一種培養(yǎng)方法。恒化器特點(diǎn):維持營養(yǎng)成分亞適量,使其成為生長限制因子,菌體生長速率恒定且低于最高密度,產(chǎn)量低于最高菌體產(chǎn)量。 恒濁器特點(diǎn):基質(zhì)過量,以最高速率生長,并在允許范圍內(nèi)控制菌體密度。 裝置控制對象培養(yǎng)基培養(yǎng)基流速生長速率產(chǎn)物應(yīng)用范圍恒濁器菌體密度(內(nèi)控制)無限制生長因子不恒定最高大量菌體或與菌體形成相平行的產(chǎn)物生產(chǎn)為主恒化器培養(yǎng)基流速(外控制)有限制生長因子恒定低于最高不同生長速率的菌體實(shí)驗(yàn)室為主79. 什么叫最適生長溫度?對同一微生物的生長速度、生長量、代謝速度、各代謝產(chǎn)物累積的影響是否相同?研究這一問題有何實(shí)踐意義?最適生長溫度

35、:指微生物繁殖最快的溫度。 不同。 意義:1、微生物工業(yè)生產(chǎn)上,為其提供溫度參考;2、滅菌時(shí),提供溫度對其的影響。80. 從對分子氧的要求看,微生物可分為幾種類型?各有何特點(diǎn)?好氧菌:1專性好氧菌:特點(diǎn):通過呼吸鏈以分子氧作為最終受體,有SOD超氧化物歧化酶和H2O2酶。微好氧菌:特點(diǎn):在低氧分壓下正常生長通過呼吸鏈以分子氧作為最終氫受體,有SOD酶和H2O2酶。 厭氧菌:1耐氧厭氧菌:特點(diǎn):分子氧對它無毒害,不具呼吸鏈,靠發(fā)酵供能,有SOD酶,過氧化物酶,無過氧化氫酶。2專性厭氧菌:特點(diǎn):分子氧對它有毒害,通過發(fā)酵、無氧呼吸、循環(huán)光合磷酸化或甲烷發(fā)酵供能,無SOD酶,無H2O2酶。兼性厭氧菌

36、:特點(diǎn):有氧或無氧均可生長,有氧時(shí),呼吸產(chǎn)能。無氧時(shí),發(fā)酵或無氧呼吸產(chǎn)能,含有SOD酶和H2O2酶。81. 氧對厭氧菌的毒害機(jī)制是什么?過氧化氫酶、各氧化物酶、SOD各催化什么反應(yīng)?氧對厭氧菌的毒害機(jī)理:(SOD學(xué)說)嚴(yán)格厭氧微生物不是被氧所殺,而是因無法解除氧代謝產(chǎn)物的毒性而死亡,而氧還原為水時(shí),可形成有毒的中間產(chǎn)物(氧二負(fù)離子),氧二負(fù)離子為活性氧兼分子和離子的性質(zhì),可破壞膜和生物大分子,對微生物造成毒害或致死厭氧菌中因無SOD酶,而無法消除氧二負(fù)離子。82. 在發(fā)酵生產(chǎn)過程中,是否要求整個(gè)培養(yǎng)過程都保持同樣的溫度、通氣量和pH?為什么。不要求,因?yàn)樵诎l(fā)酵的各個(gè)階段對溫度,通氣量和PH的要

37、求不一樣。83. 在微生物培養(yǎng)中,引起pH改變的原因有哪些?在實(shí)踐中如何保證微生物處于較穩(wěn)定和合適的pH環(huán)境中?原因:微生物生長過程中營養(yǎng)物質(zhì)的利用和代謝產(chǎn)物的生成與積累,如大腸桿菌能產(chǎn)生有機(jī)酸使pH下降。 穩(wěn)定方式:內(nèi)源調(diào)節(jié):在培養(yǎng)基里加一些緩沖劑或不溶性的碳酸鹽;調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的碳氮比。 外源調(diào)節(jié):按實(shí)際需要不斷向發(fā)酵液流加酸或堿液實(shí)際中長時(shí)間穩(wěn)定pH是不可能的,只能一定時(shí)間延長穩(wěn)定,方法可以是“連續(xù)培養(yǎng)法”84. 加壓蒸汽滅菌時(shí),影響滅菌效果的因素有哪些?1.同培養(yǎng)基的性質(zhì)有關(guān):1酸堿性:酸性易滅菌2糖.蛋白質(zhì).脂質(zhì):增加熱炕,不易滅菌3鹽濃度2細(xì)胞的干濕程度:干細(xì)胞抗性增強(qiáng),不易滅菌85.

38、 抗代謝藥物和抗生素的作用機(jī)制各是什么?抗代謝藥物:利用生長因子的結(jié)構(gòu)類似物干擾抗體的正常代謝,達(dá)到抑制微生物生長的目的。抗生素作用機(jī)制:通過抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成,破壞細(xì)胞質(zhì)膜,作用于呼吸鏈以干擾氧化磷酸化,抑制蛋白質(zhì)和核酸合成等方式來抑制微生物的生長或殺死微生物。86. 病毒粒子: 成熟的巨頭侵染力的單個(gè)病毒,對稱病毒顆粒87. 包涵體:感染病毒的宿主細(xì)胞內(nèi),出現(xiàn)在光學(xué)顯微鏡下可見的大小形態(tài)數(shù)量不等的小體88. 噬菌斑:在宿主細(xì)菌的菌苔上,噬菌體使菌體表面裂解形成的空斑89. 類病毒:一種不具有蛋白質(zhì)外殼僅由一個(gè)裸露的大約由350個(gè)核苷酸組成的單鏈環(huán)狀RNA病原體90. 朊病毒:是一類能侵染動

39、物并在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的小分子無免疫性的疏水蛋白質(zhì)91. 衛(wèi)星病毒:衛(wèi)星病毒是存在于自然界中的一種絕對缺損病毒,其形態(tài)結(jié)構(gòu)和抗原性都與輔助病毒不同,其基因組與輔助病毒的基因組也很少有同源性。92. 溫和噬菌體:吸附并侵入細(xì)胞后,噬菌體的DNA整合在宿主的染色體組上,并可長期隨宿主DNA的復(fù)制而同步復(fù)制93. 溶源菌 可穩(wěn)定遺傳,即溶源菌的子細(xì)胞一般也是溶原性的。 自發(fā)裂解(10-5)和誘發(fā)裂解具有抗同原噬菌體感染的“免疫性”溶源性細(xì)菌的復(fù)愈獲得新的生理特性(溶源性轉(zhuǎn)變)局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)94. 逆轉(zhuǎn)病毒: 一類含有逆轉(zhuǎn)錄酶的單股正鏈RNA病毒 一類含有逆轉(zhuǎn)錄酶的單股正病鏈毒95. 病毒的對稱體制有幾種,

40、舉例說明。螺旋對稱的病毒(桿狀) 煙草花葉病毒 二十面體對稱病毒粒子(球狀) 腺病毒 復(fù)合對稱的病毒粒子(蝌蚪狀) 大腸桿菌T4噬菌體 尾噬菌體97. 什么叫一步生長曲線,分為幾期。一步生長曲線:定量描述烈性噬菌體增殖規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線稱作一步生長曲線或一級生長曲線。潛伏期 從噬菌體吸附細(xì)菌細(xì)胞至細(xì)菌細(xì)胞釋放出新的噬菌體的最短時(shí)間。又可分為隱晦期和胞內(nèi)累積期。裂解期 從被感染的第一個(gè)細(xì)胞裂解至最后一個(gè)細(xì)胞裂解完畢所經(jīng)歷的時(shí)間。平穩(wěn)期 指被感染的宿主已全部裂解,溶液中噬菌體數(shù)達(dá)到最高點(diǎn)后的時(shí)期。 裂解量 每個(gè)被感染的細(xì)菌釋放新的噬菌體的平均數(shù) 98. 簡述烈性噬菌體的生活史。吸附侵入增殖成熟裂解10

41、0. 病毒區(qū)別于其他生物的特點(diǎn)是什么?根據(jù)你的理解,病毒應(yīng)如何定義?1)形體極其微小,在電鏡下才可以觀察 。2)不具有細(xì)胞結(jié)構(gòu),具有一般化學(xué)大分子的特征3)在離體條件下,能以無生命的生物大分子狀態(tài)存在4)每一種病毒只含一種核酸,DNA或RNA5)不能進(jìn)行獨(dú)立的代謝作用。6)只能利用活細(xì)胞進(jìn)行自身的繁殖定義:一類沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)但有遺傳復(fù)制等生命特征,主要有核酸和蛋白質(zhì)組分的大分子生物101. 病毒殼結(jié)構(gòu)有哪幾種對稱形式?毒粒的主要結(jié)構(gòu)類型有哪些?(1)螺旋對稱殼體(蛋白質(zhì)亞基有規(guī)律地沿著中心軸(核酸)呈螺旋排列,進(jìn)而形成高度有序、對稱的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)),二十面體對稱殼體(構(gòu)成對稱結(jié)構(gòu)殼體的第二種方式是蛋

42、白質(zhì)亞基圍繞具立方對稱的正多面體的角或邊排列,進(jìn)而形成一個(gè)封閉的蛋白質(zhì)的鞘),雙對稱結(jié)構(gòu)(若以一定數(shù)目的亞基排列成具有一定表面積的立方對稱實(shí)體,以二十面體容積為最大,能包裝更多的病毒核酸)。 (2)裸露的二十面體毒粒,裸露的螺旋毒粒,有包膜的二十面體毒粒和有包膜的螺旋毒粒。102. 病毒復(fù)制循環(huán)可分為那幾個(gè)階段?各個(gè)階段的主要過程如何?答:1、吸附 病毒表面蛋白與細(xì)菌受體的特異性結(jié)合,導(dǎo)致病毒附著于細(xì)胞表面,這是啟動病毒感染的第一步。2、侵入:以注射方式將噬菌體核酸注入細(xì)胞。3、增殖:病毒核酸侵入細(xì)胞內(nèi) 宿主細(xì)胞的代謝發(fā)生改變 病毒利用宿主的生物合成機(jī)構(gòu)和場所,使病毒核酸表達(dá)和復(fù)制,產(chǎn)生大量的

43、病毒蛋白質(zhì)和核酸。4、裝配:(噬菌體)裝配過程包括4個(gè)完全獨(dú)立的亞裝配途徑:無尾絲的尾部裝配,頭部的裝配,尾部與頭部自發(fā)結(jié)合,單獨(dú)裝配的尾絲與前已裝配好的顆粒相連。5、釋放:大多數(shù)噬菌體都是以裂解的形式釋放103. 病毒的非增值性感染有哪幾類?引起病毒非增值性感染的原因是什么?流產(chǎn)感染,限制性感染和潛伏染。由于病毒或宿主細(xì)胞的原因,導(dǎo)致病毒感染的不完全循環(huán),不產(chǎn)生有感染性的病毒子代。104. 噬菌體是如何感染宿主細(xì)胞的?敘述它與宿主細(xì)胞間的相互關(guān)系。1、吸附宿主細(xì)胞 2、侵入和脫殼 3、生物合成遺傳物質(zhì)和蛋白質(zhì) 4、遺傳物質(zhì)和蛋白質(zhì)的組裝 5、釋放子代病毒 它與宿主細(xì)胞是寄生關(guān)系105. 亞病毒有哪幾類?各自有何特點(diǎn)?衛(wèi)星病毒:衛(wèi)星病毒是一類基因組缺損、需要依賴輔助病毒,基因才能復(fù)制和表達(dá),才能完成增殖的亞病毒,不單獨(dú)存在,常伴隨著其他病

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