第五章巴比妥類藥物的分析

1、第十章 巴比妥類藥物的分析 巴比妥類藥物是一類臨床常用的催眠鎮(zhèn)靜藥。由于這巴比妥類藥物是一類臨床常用的催眠鎮(zhèn)靜藥。由于這類藥物應用廣泛，容易因不合理使用而引起中毒。因類藥物應用廣泛，容易因不合理使用而引起中毒。因此，需要對本類藥物的原料、制劑進行分析，有時也此，需要對本類藥物的原料、制劑進行分析，有時也需要對生物樣品中微量巴比妥類藥物進行分析。需要對生物樣品中微量巴比妥類藥物進行分析。 巴比妥類藥物劑量由小到大，中樞抑制作用相繼表現(xiàn)巴比妥類藥物劑量由小到大，中樞抑制作用相繼表現(xiàn)為鎮(zhèn)靜、催眠、抗驚厥和麻醉作用，其中苯巴比妥還為鎮(zhèn)靜、催眠、抗驚厥和麻醉作用，其中苯巴比妥還具有抗癲癇的作用。具有抗癲

2、癇的作用。2巴比妥類藥物的分析3基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)1 1鑒別試驗鑒別試驗2 2特殊雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)檢查3 3含量測定含量測定4 4一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì) （一）基本結(jié)構(gòu)4CCCONONC OR1R2R3543216HH環(huán)狀丙二酰脲類化合物5CCCONONC OR1R2R3543216HH環(huán)狀丙二酰脲類化合物環(huán)狀丙二酰脲類化合物CCONCONHHHHNNCO6典型藥物CCCONONC OH5C2H5C2HH巴比妥CCCONONC OH5C2HH苯巴比妥(Phenylbarbital)(barbital)7CCCONONC ONaCH2CHCH2CHCH3C

3、3H7H司可巴比妥鈉(Secobarbital)CNHCNHCOOOH5C2CH3(CH2)2CHCH3戊巴比妥(Pentobarbital)催眠、鎮(zhèn)靜、抗驚厥（小催眠、鎮(zhèn)靜、抗驚厥（小兒高熱驚厥、破傷風驚厥、兒高熱驚厥、破傷風驚厥、子子癎癎、癲癇持續(xù)狀態(tài)）和、癲癇持續(xù)狀態(tài)）和麻醉前給藥麻醉前給藥失眠失眠, ,更年期綜合癥更年期綜合癥, ,高熱驚厥高熱驚厥, ,兒兒科科, ,婦產(chǎn)科婦產(chǎn)科, ,精神科精神科8硫噴妥鈉HCCCONONCSNaC2H5CH3CH2CH2CHCH3一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)靜脈全麻藥。用于全麻誘導，復合全麻及小兒基礎(chǔ)麻醉。靜脈全麻藥。用于全麻誘導，復

4、合全麻及小兒基礎(chǔ)麻醉。9一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)( (二二) )主要性質(zhì)主要性質(zhì)u性狀性狀白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末u溶解度溶解度微溶或極微溶于水，易溶于乙醇等有機溶劑微溶或極微溶于水，易溶于乙醇等有機溶劑 鈉鹽易溶于水，難溶于有機溶劑鈉鹽易溶于水，難溶于有機溶劑1.1.弱酸性弱酸性 ( (pKapKa:7.3:7.3 - - 8.4)8.4)CO NHCNCOOHR1R2+ NaOHCO NHCNCOONaR1R2+ H2O10CCCONONCOHR1R2HCCCONONCOR1R2HHCCCONONCOR1R2HCCCONONCOR1R2+ H+ H+pK

5、1=8+ H+ H+pK2=12一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)一級電離二級電離烯醇互變11一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)2.2.水解反應水解反應NHNOOOHR2R1+5NaOHCHCOONaR1R2+2Na2CO3+NH3NHNOOOHR1CHCOONaR1R2+2NH3CR1R2COONaCONHCONH2H2OH2O12一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)NHNONaOO+2H2OONHNH2O+NaHCO3pH6789分解率(%)261741pH對苯巴比妥分解率的影響20C放置一年巴比妥鈉注射液不能預先配制進行加熱滅菌，須巴比妥鈉注射液不能預先配制進

6、行加熱滅菌，須制成粉針劑，臨用時溶解。制成粉針劑，臨用時溶解。13CCOCONHNCONaR1R2白色難溶性二銀鹽白色難溶性二銀鹽CCOCONNCONaR1R2AgAgNO3Na2CO3滴加AgNO3AgCCOCONNCOR1R2Aga a、與銀鹽的反應、與銀鹽的反應3.3.與金屬離子反應與金屬離子反應14一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)3.3.與金屬離子反應與金屬離子反應b.b.與銅鹽的反應與銅鹽的反應巴比妥類藥物在吡啶溶液中生成烯巴比妥類藥物在吡啶溶液中生成烯醇式異構(gòu)體醇式異構(gòu)體, ,可與吡啶試劑反應形可與吡啶試劑反應形成穩(wěn)定的配位化合物成穩(wěn)定的配位化合物, ,產(chǎn)生類似雙產(chǎn)生類

7、似雙縮脲的呈色反應縮脲的呈色反應153.3.與金屬離子反應與金屬離子反應b.b.與銅鹽的反應與銅鹽的反應巴比妥類紫色或紫色沉淀硫巴比妥類硫巴比妥類綠色綠色NNOOOR1R2HH水-吡啶NNOOR1R2OH部分離子化NNOOR1R2O-NNOOR1R2O-NCuN2+NNNHOOR1R2OCuHNNOOR1R2ONNNCuN+ CuSO42+SO42-銅吡啶試劑216c.c.與鈷鹽的反應與鈷鹽的反應紫堇色鈷鹽巴比妥類藥物堿性 CO NHCONHCOR1R22+Co2+4(CH3)2CHNH2+CoR2R1CONHCONCOR2R1NCONHCOCONHCH(CH3)2NHCH(CH3)2(CH3

8、)2CHN+H32Co(NO3)2、CoO、Co(Ac)2異丙胺無水無水甲醇或乙醇甲醇或乙醇一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)17d.d.與汞鹽的反應與汞鹽的反應一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)巴比妥類藥物巴比妥類藥物+ +汞鹽汞鹽白色白色（可溶于氨試液）（可溶于氨試液）NHNOOOR1R2NNOR1R2OHgNO3OHNHNOOR1R2OHgNO3H+ Hg(NO3)2-HNO3+NNOR1R2OHgNO3OHNH3+ H2ONNOR1R2OHgOHONH4+NH4NO31818一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)4.4.香草醛反應香草醛反應( (Vanilli

9、nVanillin) )棕紅色香草醛巴比妥類藥物濃硫酸戊巴比妥鑒別戊巴比妥鑒別： 取戊巴比妥取戊巴比妥10mg10mg，加香草醛約，加香草醛約10mg10mg和硫酸和硫酸2ml2ml，混合，混合后在水浴上加熱后在水浴上加熱2min2min，顯棕紅色。放冷，小心加入乙顯棕紅色。放冷，小心加入乙醇醇5ml5ml，即顯紫色并變成藍色，即顯紫色并變成藍色。19一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)5.5.紫外吸收光譜特征紫外吸收光譜特征(nm)2902702502300.51.01.5A巴比妥類藥物的紫外吸收光譜ABC240nm255nmA.H2SO4液(0.05mol/L,未電離)B.pH9.

10、9緩沖液(一級電離)C.pH13NaOH液(1mol/L,二級電離)1,5,5-1,5,5-三取代巴比妥類三取代巴比妥類藥物不存在二級電離，藥物不存在二級電離，最大吸收波長不變。最大吸收波長不變。20一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)3202802402000.80.50.2(nm)A238287304硫代巴比妥的紫外吸收光譜硫代巴比妥的紫外吸收光譜A.HCl液(0.1mol/L)B.NaOH液(0.1mol/L)6.6.薄層色譜行為特征薄層色譜行為特征217.7.顯微結(jié)晶顯微結(jié)晶一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì) 藥物本身晶形反應產(chǎn)物晶形22二、鑒別試驗二、鑒別試驗u(

11、(一一) )丙二酰脲類的鑒別試驗丙二酰脲類的鑒別試驗u取供試品約取供試品約0.1g0.1g，加碳酸鈉試液，加碳酸鈉試液1ml1ml與水與水10ml10ml，振搖，振搖2min2min，濾過，濾液中逐滴加入硝酸銀試液，即生成濾過，濾液中逐滴加入硝酸銀試液，即生成白色沉淀白色沉淀，振搖，振搖，沉淀即溶解；繼續(xù)滴加過量的硝酸銀試液，沉淀即溶解；繼續(xù)滴加過量的硝酸銀試液，沉淀不再溶解沉淀不再溶解。u取供試品約取供試品約50mg50mg，加吡啶溶液，加吡啶溶液(110)5 ml(110)5 ml，溶解后，加銅，溶解后，加銅吡啶試液吡啶試液1ml1ml，即，即顯紫色或生成紫色沉淀顯紫色或生成紫色沉淀。銀鹽

12、反應銅鹽反應共性反應共性反應個性反應個性反應23u( (二二) )測定熔點測定熔點二、鑒別試驗二、鑒別試驗 巴比妥類的鈉鹽酸巴比妥類的鈉鹽酸 游離巴比妥類藥物游離巴比妥類藥物 過過濾濾 洗滌洗滌 干燥干燥 測熔點測熔點 u( (三三) )利用特殊取代基或元素的鑒別試驗利用特殊取代基或元素的鑒別試驗 利用利用不飽和取代基不飽和取代基的鑒別試驗的鑒別試驗( (司可巴比妥鈉司可巴比妥鈉) ) 利用利用芳環(huán)取代基芳環(huán)取代基的鑒別試驗的鑒別試驗( (苯巴比妥鈉苯巴比妥鈉) ) 硫色素硫色素反應反應( (硫代巴比妥類硫代巴比妥類) )24二、鑒別試驗二、鑒別試驗u1.1.司可巴比妥鈉的鑒別司可巴比妥鈉的鑒

13、別NHNNaOOOCH3CH3CH2I2NHNNaOOOCH3CH3CH2II褪色NHNNaOOOCH3CH3CH2Br BrBr2NHNNaOOOCH3CH3CH2OH OHKMnO425二、鑒別試驗二、鑒別試驗u2.2.苯巴比妥的鑒別苯巴比妥的鑒別黃色苯巴比妥423SOHKNOa.a.硝化反應硝化反應 b.b.硫酸硫酸- -亞硝酸鈉反應亞硝酸鈉反應 苯巴比妥與苯巴比妥與NaNONaNO2 2-H-H2 2SOSO4 4反應生成反應生成橙黃色橙黃色橙紅色橙紅色c.c.甲醛甲醛- -硫酸反應硫酸反應 苯巴比妥與甲醛苯巴比妥與甲醛-H-H2 2SOSO4 4反應生成反應生成玫瑰紅色環(huán)玫瑰紅色環(huán)

14、區(qū)分苯巴比妥與不含芳環(huán)取代的巴比妥類藥物。26二、鑒別試驗二、鑒別試驗u3.3.硫代巴比妥類的鑒別硫代巴比妥類的鑒別NHNOOSNaH3CCH3H3C+Pb2+NaOHNHNOOSH3CCH3H3C2PbPbS硫代巴比妥類與巴比妥類的區(qū)別硫代巴比妥類與巴比妥類的區(qū)別27三、特殊雜質(zhì)試驗三、特殊雜質(zhì)試驗u( (一一) )苯巴比妥苯巴比妥C2H5OH,H2SO4水解酯化CH2CONH2，CH2COOC2H5C2H5ONa OCOC2H5OC2H5CCONaCOOC2H5COOC2H5HCl酸化 ，消除CHCOOC2H5COOC2H5CCOOC2H5COOC2H5C2H5C2H5Br乙基化28三、特

15、殊雜質(zhì)試驗三、特殊雜質(zhì)試驗CCOOC2H5COOC2H5C2H5CH3ONa環(huán)合CH2NH2NOCCONaC2H5CONHCONCCOC2H5CONHCONH酸析HCl29三、特殊雜質(zhì)試驗三、特殊雜質(zhì)試驗u1.1.酸度酸度中間體中間體乙基化不完全時，乙基化不完全時，與尿素縮合產(chǎn)生的雜質(zhì)與尿素縮合產(chǎn)生的雜質(zhì)COHHNHHNCHCOHNCOHNOCHCOOC2H5COOC2H5苯基丙二酰脲酸性較強檢查方法：檢查方法：取本品取本品0.20g0.20g，加水，加水10ml10ml，煮沸攪拌，煮沸攪拌1min1min，放冷，濾過后，取濾，放冷，濾過后，取濾液液5ml5ml，加甲基橙指示液，加甲基橙指示液

16、1 1滴，滴，不得顯紅色不得顯紅色30u2.2.乙醇溶液澄清度乙醇溶液澄清度三、特殊雜質(zhì)試驗三、特殊雜質(zhì)試驗檢查中間體、等乙醇中不溶物。取本品1.0g，加乙醇5ml，加熱回流3min，溶液應澄清 u3.3.中性或堿性物質(zhì)中性或堿性物質(zhì)( (提取重量法提取重量法, ,溶解度差異溶解度差異) ) 副產(chǎn)物：2-苯基丁酰(胺)脲或分解產(chǎn)物 不溶于NaOH T.S.而溶于醚分液漏斗NaOH T.S.乙醚H2O過濾干燥濾紙蒸發(fā)皿1051hr3mg取本品1.0g 乙醚，H2O洗3 次 濾液 蒸干 殘渣31u( (一一) ) 銀量法銀量法 ( (ArgentometryArgentometry) )巴比妥類藥

17、物在適當?shù)膲A性溶液中,易與重金屬離子反應,并可定量地形成鹽,因而可用銀量法進行滴定.在滴定過程中,可以通過生成沉淀進產(chǎn)生的混濁指示滴定終點.但容易出現(xiàn)誤差.改用甲醇及3%的無水碳酸鈉溶劑系統(tǒng),采用Ag-玻璃電極系統(tǒng)電位法指示終點,方法改善,為Chp2010所用.四、含量測定四、含量測定320.2g甲醇 40ml異戊巴比妥測定3%無水碳酸鈉電位滴定法(AgNO3)指示電極(Ag)參比電極(玻璃/甘汞)討論討論1) 1) 化學計量關(guān)系：化學計量關(guān)系：1:11:12) 2) 優(yōu)點優(yōu)點: : 操作簡便、專屬性強操作簡便、專屬性強3) 3) 缺點缺點: a. : a. 近終點時近終點時, , 生成二銀鹽

18、速度慢生成二銀鹽速度慢 b. b. 溫度影響大溫度影響大 c. c. 克服方法克服方法: : 以甲醇為溶劑以甲醇為溶劑 電位法指示終點電位法指示終點4) Na4) Na2 2COCO3 3的作用的作用34四、含量測定四、含量測定( (二二) ) 溴量法溴量法:溴過量溴過量, ,再用再用KIKI反應反應, ,再用硫代硫酸鈉滴定再用硫代硫酸鈉滴定. . 司可巴比妥鈉測定NHNOONaOCH2CH3CH32Na2S2O3 測定方法測定方法 供試品供試品( (鈉鹽鈉鹽) ) 碘瓶碘瓶 溶液溶液 立即立即密塞并振搖密塞并振搖, , 暗處暗處15min15min KI KI TSTS Na Na2 2S

19、S2 2O O3 3 指示劑使用指示劑使用：近終點加：近終點加過量Br2HCl蘭色消失蘭色消失淀粉指示液水/堿溶解討論討論1) 1) 化學計量關(guān)系：化學計量關(guān)系： 1:21:22) 2) 密塞目的密塞目的3) 3) 近終點時加指示劑的原因近終點時加指示劑的原因4) 4) 空白試驗校正空白試驗校正37四、含量測定四、含量測定u( (三三) ) 酸堿滴定法酸堿滴定法 水-乙醇混合溶劑中滴定(改變藥物在水中溶解度) 膠束水溶液中滴定（表面活性劑能改變藥物的 電離平衡，增強酸性） 非水滴定法38四、含量測定四、含量測定異戊巴比異戊巴比妥妥水醇溶解溶解麝香草酚酞N aO H淡藍色淡藍色u1.1.水水-

20、-乙醇混合溶液乙醇混合溶液HNHNOOOCH3CH3CH3+NaOHHNHNNaOOOCH3CH3CH3+H2O39u2.2.膠束水溶液膠束水溶液四、含量測定四、含量測定正膠束反膠束H2O溴化十六烷基三甲基芐銨Cetyltrimethylbenzylammonium bromide，CTMA氯化四癸基二甲基芐銨Tetradecyldimethylbenzylammonium chloride，TDBA正膠束：由表面活性劑溶于極性溶劑形成的膠束反膠束：由表面活性劑溶于非極性溶劑形成的膠束膠束性質(zhì)： 膠束具有和藥物之間的靜電作用、疏水作用、增溶作用膠束具有和藥物之間的靜電作用、疏水作用、增溶作用和

21、空間位阻作用。和空間位阻作用。 綜合協(xié)同作用可改變巴比妥類藥物的離解平衡，使綜合協(xié)同作用可改變巴比妥類藥物的離解平衡，使KaKa增增大，即酸性增強，使滴定終點變化明顯。大，即酸性增強，使滴定終點變化明顯。巴比妥類表面活性劑溶解麝香草酚酞指示劑NaOH滴定41四、含量測定四、含量測定u3.3.非水酸量法非水酸量法 溶溶 劑劑：二甲基甲酰胺、甲醇、丙酮、三氯甲烷、無：二甲基甲酰胺、甲醇、丙酮、三氯甲烷、無水乙醇、苯、吡啶、甲醇水乙醇、苯、吡啶、甲醇- -苯、乙醇苯、乙醇- -三氯甲烷三氯甲烷 滴定劑滴定劑：甲醇甲醇鈉（鉀）、氫氧化四丁基胺鈉（鉀）、氫氧化四丁基胺 指示劑指示劑：麝香草酚藍：麝香草酚

22、藍 , ,也可以用電位法指示終點也可以用電位法指示終點42四、含量測定四、含量測定u( (四四) ) 紫外分光光度法紫外分光光度法 5,5-5,5-雙取代雙取代1,5,5-1,5,5-三取代三取代酸性酸性無明顯吸收無明顯吸收pH9.9pH9.9240nm240nm240nm240nmpH13pH13255nm255nm240nm240nm硫代巴比妥硫代巴比妥238238、287nm287nm304304、255nm255nm304nm304nm43四、含量測定四、含量測定注射用硫噴妥鈉含量測定取裝量差異項下的內(nèi)容物，混合均勻，精密稱取取裝量差異項下的內(nèi)容物，混合均勻，精密稱取適量適量( (約相

23、當于硫噴妥鈉約相當于硫噴妥鈉0.25g0.25g) )，置，置500ml500ml量瓶中，搖勻，量瓶中，搖勻，量取此溶液用量取此溶液用0.4% NaOH0.4% NaOH溶液定量稀釋制成每溶液定量稀釋制成每1ml1ml中約中約含含5 5g g的溶液；的溶液；另取另取硫噴妥硫噴妥對照品，精密稱定，加對照品，精密稱定，加0.4%NaOH0.4%NaOH溶液溶解溶液溶解并定量稀釋制成每并定量稀釋制成每1ml1ml中約含中約含5 5g g的溶液。的溶液。用用1cm1cm吸收池，于吸收池，于304nm304nm波長處分別測定吸收度，以波長處分別測定吸收度，以0.4% NaOH0.4% NaOH溶液作空白

24、。根據(jù)每支的平均裝量計算。每溶液作空白。根據(jù)每支的平均裝量計算。每1mg1mg的硫噴妥鈉相當于的硫噴妥鈉相當于1.091mg1.091mg的的C C1111H H1919N N2 2NaONaO2 2S Su直接測定的直接測定的UVUV法法44四、含量測定四、含量測定USP24法測定苯巴比妥含量巴比妥類藥物適量，加水使其溶解后，加酸酸化，用巴比妥類藥物適量，加水使其溶解后，加酸酸化，用三氯甲烷提取巴比妥類藥物，三氯甲烷提取液加入三氯甲烷提取巴比妥類藥物，三氯甲烷提取液加入pH7.2-7.5pH7.2-7.5的緩沖液，振搖，分離棄去水相緩沖液層，的緩沖液，振搖，分離棄去水相緩沖液層，再用氫氧化鈉

25、自三氯甲烷中提取巴比妥類藥物，調(diào)節(jié)再用氫氧化鈉自三氯甲烷中提取巴比妥類藥物，調(diào)節(jié)堿提取液的堿提取液的pHpH值，然后選用相應的吸收波長進行測定。值，然后選用相應的吸收波長進行測定。提取后的提取后的UVUV分光光度法分光光度法, ,消除干擾消除干擾45 (五) HPLC法 （六）氣相色譜的方法 （七） 提取重量法案例：司可巴比妥鈉藥典標準3.1品名品名3.1.1中文名中文名司可巴比妥鈉3.1.2漢語拼音漢語拼音Sikebabituona3.1.3英文名英文名Secobarbital Sodium3.2結(jié)構(gòu)式結(jié)構(gòu)式3.3分子式與分子量分子式與分子量C12H17N2NaO3 260.273.4來源（

26、名稱）、含量（效價）來源（名稱）、含量（效價）本品為5-（1-甲基丁基）-5-（2-丙烯基）-2,4,6-（1H,3H,5H）-嘧啶三酮的鈉鹽。按干燥品計算，含C12H17N2NaO3不得少于98.5%。3.5性狀性狀本品為白色粉末；無臭，味苦；有引濕性。本品在水中易溶解，在乙醇中溶解，在乙醚中不溶。3.6鑒別鑒別（1）取本品1g，加水100ml溶解后，加稀醋酸5ml強力攪拌，再加水200ml，加熱煮沸使溶解成澄清溶液（液面無油狀物），放冷，靜置待析出結(jié)晶，濾過，結(jié)晶在70干燥后，依法測定（2010年版藥典二部附錄 C），熔點約為97。（2）取本品0.1g，加水10ml溶解后，加碘試液2ml，所顯棕黃色在5分鐘內(nèi)消失。（3）本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜（藥品紅外光譜集137圖）一致。（4）本品顯丙二酰脲類的鑒別反應（2010年版藥典二部附錄）。3.7檢查檢查3.7.1 溶液的澄清度取本品1.0g，加新沸過的冷水10ml溶解后，溶液應澄清。3.7.2 中性或堿性物質(zhì)取本品1.0g，照苯巴比妥項下的方法檢查，應符合規(guī)定。3.7.3 干燥失重取本品，在105干燥至恒重，減失重量不得過3.0%（2010年版藥典二部附錄 L）。3.7.4