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1、專題2課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) 青城山高級(jí)中學(xué)一、選擇題1PCR技術(shù)要求使用耐高溫的DNA聚合酶,這種酶要能忍受93左右的高溫。如果請(qǐng)你來尋找這種耐高溫的酶,你會(huì)去哪里尋找( ) A土壤中 B海水中 C熱泉中 D冷庫中2下列能選擇出分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基是( ) AKH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、尿素、瓊脂、水 BKH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、瓊脂、水 CKH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、尿素、瓊脂、水 DKH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、牛肉膏

2、、蛋白胨、瓊脂、水; 3.某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均值為234,那么每克樣品中的菌落數(shù)是(涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.1mL)( ) A2.34×108 B2.34×109 C234 D23.44.在做分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí),A同學(xué)從對(duì)應(yīng)106培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落,而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落。A同學(xué)的結(jié)果產(chǎn)生原因( ) 由于土樣不同 由于培養(yǎng)基污染 由于操作失誤 沒有設(shè)置對(duì)照 A B C D5.關(guān)于土壤取樣的敘述錯(cuò)誤的是( ) A土壤取樣,應(yīng)選取肥沃、濕潤(rùn)的土壤 B先鏟去表層土3cm左右,再取樣 C取樣用的小鐵鏟和信封在使

3、用前不用滅菌 D應(yīng)在火焰旁稱取土壤6.下列關(guān)于從土壤中分離細(xì)菌的操作步驟中,正確的是( ) 土壤取樣 稱取10g土壤取出加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中 吸取0.1mL進(jìn)行平板涂布 依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107稀釋度 A B C D7.下列關(guān)于測(cè)定土壤中細(xì)菌數(shù)量的敘述,正確的是( ) A一般選用103107倍的稀液分別涂布 B測(cè)定放線菌的數(shù)量,一般選用103、lO 4和105倍稀釋 C測(cè)定真菌的數(shù)量,一般選用103、104和105倍稀釋 D當(dāng)?shù)谝淮螠y(cè)量某種細(xì)菌的數(shù)量,可以將101107倍的稀釋液分別涂布到平板上培養(yǎng)8.下列關(guān)于微生物的培養(yǎng)敘述錯(cuò)誤的是( )

4、A細(xì)菌一般在3037的溫度下培養(yǎng)12 d B放線菌一般在2528的溫度下培養(yǎng)57 d C霉菌一般在2528的溫度下培養(yǎng)34 d D不同種類的微生物,一般需要相同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間9.下列操作需要在火焰旁進(jìn)行的一組是( ) 土壤取樣 稱取土壤 稀釋土壤溶液 涂布平板 微生物的培養(yǎng) A B C D10.下列可以鑒定出分解尿素的細(xì)菌的方法是 ( ) A以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加人酚紅指示劑 B以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑 C以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹試劑 D以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑11.土壤取樣時(shí)最好選擇哪種環(huán)境中的土壤做分離細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)( ) A街道旁 B花盆

5、中 C公園里 D菜園里12可用于菌落數(shù)目統(tǒng)計(jì)的培養(yǎng)基是( ) A 固體培養(yǎng)基 B液體培養(yǎng)基 C半固體培養(yǎng)基 D天然培養(yǎng)基13產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是( ) A一個(gè)細(xì)菌 液體培養(yǎng)基 B許多細(xì)菌 液體培養(yǎng)基 C一個(gè)細(xì)菌 固體培養(yǎng)基 D許多細(xì)菌 固體培養(yǎng)基14要從多種細(xì)菌中分離某種細(xì)菌,培養(yǎng)基要用( )A加入青霉素的培養(yǎng)基 B 固體培養(yǎng)基 C液體培養(yǎng)基 D加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基15下表資料表明在各種培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長(zhǎng),SCM為簡(jiǎn)單培養(yǎng),U、V、X、Y、Z代表加入培養(yǎng)基的不同物質(zhì),問哪一種物質(zhì)細(xì)菌不能合成( )培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)SCM-SCM+V+Z -SCM+U+Y+SCM+Z+X-S

6、CM+V+Y+SCM+U+X-SCM+Y+Z+A. U B. V C. Y D. Z16. 培養(yǎng)基中濃度過高抑制微生物生長(zhǎng)的原因是( )A含熱量太多 B 會(huì)使微生物失水 C 導(dǎo)致微生物休眠 D培養(yǎng)基中的碳源和氮源比例失衡17不同種類的細(xì)菌菌落表現(xiàn)為不同的特征,下列屬于菌落特征的是( )(1)菌落大小 (2) 菌落形狀 (3) 菌落的隆起程度 (4)菌落的顏色 (5) 菌落的透明度A(1)(2)(3) B(2)(3)(4)C(1)(3)(4) D(1)(2)(3)(4)(5)18某同學(xué)在、100、1000倍稀釋液的平均菌落數(shù)為2760、295、46,則菌落總數(shù)為( )A 27600 B 2950

7、0 C 46000 D 3775019.下列氮肥能被植物直接吸收的是( )(1)硝酸鹽 (2) 尿素 (3)磷酸二氫氨 (4) 氨A(1) (2) (3) (4) B(1) (3) (4) C (2) (3) (4) D (1) (3) 20將某種細(xì)菌接種到徹底滅菌的固體培養(yǎng)基上,經(jīng)過一段時(shí)間后能得到( )A無一定形態(tài)的群體 B 菌絲 C單個(gè)細(xì)菌 D菌落21在微生物學(xué)中,將允許特定種類的微生物生長(zhǎng),同時(shí)又能抑制或者阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基稱做()A鑒別培養(yǎng)基 B加富培養(yǎng)基C選擇培養(yǎng)基 D基礎(chǔ)培養(yǎng)基22用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)時(shí),通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能推測(cè)出樣品中的活菌數(shù)。

8、原因是()A平板上的一個(gè)菌落就是一個(gè)細(xì)菌B菌落中的細(xì)菌數(shù)是固定的C此時(shí)的一個(gè)菌落一般來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌D此方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)一定與活菌的實(shí)際數(shù)相同23本課題以土壤中的細(xì)菌為研究對(duì)象,要達(dá)到的目的是()。從土壤中分離出能夠分解尿素的細(xì)菌從土壤中分離出能夠分解氨的細(xì)菌統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中究竟含有多少分解尿素的細(xì)菌統(tǒng)計(jì)所取土壤樣品中究竟含有多少分解尿素的細(xì)菌A B C D24下列關(guān)于微生物分離和培養(yǎng)的有關(guān)敘述,不正確的是( )A分離土壤中不同的微生物,要采用不同的稀釋度B測(cè)定土壤樣品中的活菌數(shù)目,常用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法C提純和分離嚴(yán)格厭氧型微生物,一般不用稀釋涂布平板法D分離能分解尿素的細(xì)菌,要

9、以尿素作為培養(yǎng)基中唯一氮源25用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù),在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中,得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果,正確的是()。A涂布了一個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是230B涂布了兩個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是215和260,取平均值238C涂布了三個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、212和256,取平均值163D涂布了三個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210、240和250,取平均值233二、非選擇題26.統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目一般用稀釋涂布平板法,當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè) ,來源于樣品稀釋液中的一個(gè) 。計(jì)數(shù)時(shí)一般選擇菌落數(shù)在 _的平板計(jì)數(shù)。27.在做本課題實(shí)驗(yàn)時(shí),一位同學(xué)在稀釋倍數(shù)為

10、106的培養(yǎng)基中涂布了3個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別為21、212和256,該同學(xué)以這3個(gè)平板上菌落數(shù)的平均值163作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果。你認(rèn)為這一結(jié)果是否接近真實(shí)值?如果需要改進(jìn),如何改進(jìn)?28.在進(jìn)行操作本課題實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)特別注意: 、 、 。29在做本課題實(shí)驗(yàn)時(shí),甲同學(xué)篩選出的菌落與其他同學(xué)不同,并且他在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)并沒有設(shè)置對(duì)照。思考下列問題: (1)你認(rèn)為出現(xiàn)甲同學(xué)這種結(jié)果的原因可能是什么?(2)要幫助甲同學(xué)排除可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素,需要設(shè)置 ,實(shí)驗(yàn)方案有兩種:一種方案是可以由其他同學(xué)用與甲同學(xué) 進(jìn)行實(shí)驗(yàn),如果結(jié)果與甲同學(xué)一致,則證明甲同學(xué) ,如果結(jié)果不同,則證明甲同學(xué)存在操作 或 的配制有問題。另

11、一種方案是將甲同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加 的情況下進(jìn)行培養(yǎng),作為空白對(duì)照,以證明培養(yǎng)基是否受到 。(3)由此問題你得出的啟示是什么?30(10分)微生物與人類關(guān)系密切,雖然有些微生物能使動(dòng)植物患病,但多數(shù)微生物對(duì)人類是有益的,請(qǐng)回答下列有關(guān)問題。(1)下表為兩種微生物的培養(yǎng)基配方。A培養(yǎng)基KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂1.4 g2.1 g0.2 g10.0 g1.0 g15.0 gB培養(yǎng)基纖維素粉NaNO3Na2HPO4·7H2OKH2PO4MgSO4·7H2OKCl酵母膏水解酪素5 g1 g1.2 g0.9 g0.5 g0.5 g0.5

12、 g0.5 g上述兩種培養(yǎng)基中的物質(zhì)溶解后,均用蒸餾水定容到1 000 mL。如果要進(jìn)行土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離,則需要選擇上述哪種培養(yǎng)基?_,該培養(yǎng)基能分離尿素分解菌的原因是_。在該培養(yǎng)基中可加入_指示劑,根據(jù)指示劑的顏色可鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。從功能上來看,上述兩種培養(yǎng)基均屬于_培養(yǎng)基。(2)把牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基倒入平板,等培養(yǎng)基冷凝后,應(yīng)將平板_放置,這樣做的目的是可防止_造成污染。(3)微生物接種的方法很多,平板劃線法操作結(jié)束時(shí),為什么仍需要灼燒接種環(huán)?_。(4)微生物培養(yǎng)過程中還有什么方法或步驟要防止其他微生物污染?31.(8分)【生物生物技術(shù)實(shí)踐】下表為某微生物培養(yǎng)基的配

13、方,請(qǐng)回答相關(guān)問題:成分含量成分含量Na2HPO43g尿素1.0gK2HPO41gC6H12O630gMgSO4·7H2O0.5g瓊脂15gFeSO40.01gH2O1000mlNH4NO30.3g(1)該培養(yǎng)基按物理性質(zhì)分屬于_培養(yǎng)基,無論配制何種培養(yǎng)基,在原料稱量、溶解之后要_,然后分裝、包扎并滅菌,常用的滅菌方法是_。(2)根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷,該培養(yǎng)基能否用于分離土壤中分解尿素的細(xì)菌?_ ,原因是_。(3)為檢測(cè)尿素分解菌是否存在,還應(yīng)加入_,如果存在,將出現(xiàn)_反應(yīng)。(4)微生物常用的接種方法有_。一、1C 2A 3B 4A 5C 6C 7B 8D 9D 10A 11D12.

14、A 13.C 14.B 15.C 16.B 17.D 18.D選D。本題考查菌落計(jì)數(shù)法測(cè)定微生物的數(shù)目的方法。注意是計(jì)算不同稀釋度的平均菌落數(shù)。首先選擇平均菌落數(shù)在30300之間的,當(dāng)只有一個(gè)稀釋倍數(shù)的平均菌落數(shù)符合此范圍時(shí),則以該平均菌落數(shù)除以涂布平板時(shí)所用稀釋液體積(0.1 mL),再乘以稀釋倍數(shù)作為該樣品的細(xì)菌總數(shù);若有兩個(gè)稀釋倍數(shù)的平均菌落數(shù)均在30300之間,則按兩者菌落總數(shù)之比值來決定,若比值小于2應(yīng)采取兩者的平均數(shù),若大于2,則取其中較小的菌落總數(shù)。本題295、46在30300之間,46×103與295×102比值為1.6,應(yīng)取二者的平均數(shù)進(jìn)行計(jì)算。 19.B 20.D 21.C 22.C23.A 24.B 25.D二、26菌落 活菌 3030027不接近真實(shí)值,需要重新實(shí)驗(yàn)。 28無菌操作 做好標(biāo)記 制定計(jì)劃29(1)可能的原因有:一是由于土樣不同,二是由于培養(yǎng)基污染或操作失誤,三培養(yǎng)基中混入其它氮源。 (2)

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