生物大分子的分離純化與鑒定_第1頁
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1、生物大分子分離純化和鑒定2 2、植物組織：、植物組織：1010小時(shí)內(nèi)置小時(shí)內(nèi)置-4 -30-4 -30冰箱儲(chǔ)藏備用冰箱儲(chǔ)藏備用3 3、微生物：胞外產(chǎn)物（如發(fā)酵液），低溫短時(shí)儲(chǔ)藏。、微生物：胞外產(chǎn)物（如發(fā)酵液），低溫短時(shí)儲(chǔ)藏。 胞內(nèi)產(chǎn)物，則應(yīng)收集菌體或細(xì)胞，制成凍干粉于胞內(nèi)產(chǎn)物，則應(yīng)收集菌體或細(xì)胞，制成凍干粉于44保存保存（數(shù)月不變質(zhì)）（數(shù)月不變質(zhì)） 除了體液和微生物胞外的某些蛋白質(zhì)和多肽以外除了體液和微生物胞外的某些蛋白質(zhì)和多肽以外, ,大多數(shù)生物大多數(shù)生物大分子都存在于細(xì)胞之內(nèi)大分子都存在于細(xì)胞之內(nèi). .蛋白質(zhì)的分離純化蛋白質(zhì)的分離純化3 3、有機(jī)溶劑分級(jí)法、有機(jī)溶劑分級(jí)法 有機(jī)溶劑引起蛋白

2、質(zhì)沉淀的主要原因之一是改變介質(zhì)的介電常數(shù)，水是高介電常數(shù)（20時(shí)，80），有機(jī)溶劑是低介電常數(shù)物質(zhì)（20時(shí)，甲醇33，乙醇24，丙酮21.4），因此有機(jī)溶劑的加入使水溶液的介電常數(shù)降低。這樣，蛋白質(zhì)分子表面的可解離基團(tuán)的離子化程度減弱，水化程度降低，因此促進(jìn)了蛋白質(zhì)分子的聚集和沉淀。有機(jī)溶劑引起蛋白質(zhì)沉淀的另一重要方式可能與鹽析相似，與蛋白質(zhì)爭(zhēng)奪水化（膜）水，致使蛋白質(zhì)聚集體的形成并沉淀。 有機(jī)溶劑沉淀法一般與等電點(diǎn)沉淀法聯(lián)合使用。即操作時(shí)溶液的pH值應(yīng)控制在欲分離蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)附近。層析技術(shù)成成分的電泳。分的電泳。蛋白質(zhì)分離純化及鑒定蛋白質(zhì)分離純化及鑒定分級(jí)沉淀法與等電點(diǎn)沉淀法聯(lián)合使用得到初步分

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