磺胺在蜂蜜中的提取方法摸索(elisa酶聯(lián)免疫分析)

1、蜂蜜中磺胺類藥物的蜂蜜中磺胺類藥物的ElisaElisa檢測的前處理方法研究檢測的前處理方法研究2012-08-24工作總結(jié)工作總結(jié)稱取蜂蜜1.000.02 g于50 mL離心管中，加入1mL1M鹽酸鹽酸溶液漩渦混合30s，放入37培育培育箱中孵育；加入1mL1M氫氧化鈉氫氧化鈉溶液，渦動混勻，再加入乙腈乙腈8 mL，漩渦混合5 min，4000 r/min離心5 min；取上清液4mL于10 mL離心管中，5060 氮?dú)獯蹈?；加入PBS緩沖液1mL(稀釋2倍)，漩渦混合 30s ；取50 l用于分析檢測。編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度

2、(ppb)回收率%BK1.2311.2354.9247 100BK1.2291.3124.5456 100SM21.0431.097.0285 1007.0285 1070.29SM21.0270.9987.8880 1007.8880 1078.88 方法方法1：稱取蜂蜜1.00 0.02 g于50 mL離心管中，加入1mL1M鹽酸鹽酸溶液，漩渦混合30s，超聲超聲10min；加入1mL1M氫氧化鈉氫氧化鈉溶液，加入1mL0.2M PB溶液，渦動混勻，再加入乙酸乙酯乙酸乙酯6 mL ，漩渦混合5 min，4000 r/min離心5 min；取上清液3mL于10 mL離心管中，5060 氮?dú)獯?/p>

3、干；加入PBS緩沖液1mL(稀釋2倍)，漩渦混合 30s ；取50 l用于分析檢測。 方法方法2：超聲10min改為 37孵育孵育30min，其它同方法1方法方法3： 乙酸乙酯6 mL改為乙腈乙腈6 mL，其它同方法1編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%方法1BK1.7191.7252.9178 100BK1.6411.6943.2197 100SM21.4171.3885.1962 1005.1962 5103.92SM21.3371.5174.9713 1004.9713 599.43方法2BK1.7491.682.95

4、76 100BK1.6621.4513.9344 100SM21.5211.5154.2178 1004.2178 584.36SM21.4611.4294.8122 1004.8122 596.24方法3BK1.1731.1985.9675100BK1.0931.1526.8266100SM20.9190.84511.40710011.4075228.14SM20.9320.93710.197610010.1975203.95稱取蜂蜜1.00 0.02 g于50 mL離心管中，按要求加入磺胺類藥物標(biāo)準(zhǔn)溶液，漩渦混合30 s；加入娃哈哈娃哈哈純凈水純凈水1mL渦旋混合至蜂蜜溶解，加入乙酸乙酯乙

5、酸乙酯 A: 4 mL, B: 6mL , C: 8mL ，漩渦混合5 min，4000 r/min離心5 min；分別取上清液A:2 mL，B:3mL，C:4mL，于10 mL離心管中，5060 氮?dú)獯蹈桑患尤隤BS緩沖液 1 mL復(fù)溶，取50l用于分析檢測。（稀釋2倍）方法編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%ABK1.8181.7971.2348 BK1.7811.8391.2281 SM21.6211.6631.7760 1001.7760 535.52 SM21.7181.6881.5533 1001.5533 53

6、1.07 BBK1.8141.7991.2375 BK1.7821.7641.3320 SM21.5931.6341.8907 1001.8907 537.81 SM21.5641.6062.0128 1002.0128 540.26 CBK1.7281.7351.4591 BK1.6851.7141.5653 SM21.4491.482.6225 1002.6225 552.45 SM21.4121.353.1503 1003.1503 563.01 稱取蜂蜜1.00 0.02 g于50 mL離心管中，按要求加入磺胺類藥物標(biāo)準(zhǔn)溶液，漩渦混合30 s；加娃哈哈純娃哈哈純凈水凈水 2 mL，渦旋

7、至溶解，加入乙酸乙酯乙酸乙酯12 mL，漩渦混合5 min，4000 r/min離心5 min；取上清液6mL于10 mL離心管中，5060 氮?dú)獯蹈桑患尤隤BS緩沖液 1mL(稀釋2倍)，漩渦混合 1min ；取50 l用于分析檢測。編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率(%)方法1BK1.6171.7571.4186100BK1.5961.6971.5698100SM21.481.462.44031002.4403548.81SM21.3641.5362.56541002.5654551.31方法方法1：稱取蜂蜜1.00 0

8、.02 g于50 mL離心管中，按要求加入磺胺類藥物標(biāo)準(zhǔn)溶液，漩渦混合30 s；加PBS 1 mL，渦旋至溶解，加入乙酸乙酯乙酸乙酯12 mL，漩渦混合5 min，4000 r/min離心5 min；取上清液6mL于10 mL離心管中，5060 氮?dú)獯蹈?；加入PBS緩沖液 0.5mL(不稀釋不稀釋)，漩渦混合 30s ；取50 l用于分析檢測。方法方法2：稱取蜂蜜1.00 0.02 g于50 mL離心管中，按要求加入磺胺類藥物標(biāo)準(zhǔn)溶液，漩渦混合30 s；加PBS 1 mL，渦旋至溶解，加入乙酸乙酯乙酸乙酯20 mL，漩渦混合5 min，4000 r/min離心5 min；取上清液5mL于10

9、mL離心管中，5060 氮?dú)獯蹈桑患尤隤BS緩沖液 0.5mL(稀釋稀釋2倍倍)，漩渦混合 30s ；取50 l用于分析檢測。編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率(%)方法1BK1.6341.6220.8220 100BK1.5181.571.0141 100SM21.1721.182.5443 1002.5443 550.89 SM21.131.162.7493 1002.7493 554.99 方法2BK1.6121.4562.0795 100BK1.4991.4742.3417 100SM21.3651.383.1138

10、 1003.1138 562.28 SM21.391.3283.2206 1003.2206 564.41 編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%方法1BK1.9882.0560.4916 BK2.051.9370.5225 SM21.4351.4531.6938 1001.6938 533.88 SM21.5591.5391.3529 1001.3529 527.06 SMD0.4590.45314.0356 8051.7436 534.87SMD0.4990.48213.0366 8051.6195532.39 方法2BK

11、1.4751.3981.7212 BK1.3991.481.7102 SM20.8680.8895.6820 1005.6820 5113.64 SM20.8820.9185.4265 1005.4265 5108.53 SMD0.2030.2123.9415 8052.9741559.48 SMD0.2050.21723.7120 8052.9456558.91 方法方法1：稱取蜂蜜1.00 0.02 g于50 mL離心管中，按要求加入磺胺類藥物標(biāo)準(zhǔn)溶液，漩渦混合30 s；加PBS 2 mL，渦旋至溶解，超聲超聲30min，加入乙酸乙酯乙酸乙酯12 mL，漩渦混合5 min，4000 r/m

12、in離心5 min；取上清液6mL于10 mL離心管中，5060 氮?dú)獯蹈桑患尤隤BS緩沖液 0.5mL(不稀釋不稀釋)，漩渦混合 1min ；取50 l用于分析檢測。方法方法2：乙酸乙酯12 mL改為乙腈乙腈12 mL，其它同方法1稱取蜂蜜1.00 0.02 g于50 mL離心管中，按要求加入磺胺類藥物標(biāo)準(zhǔn)溶液，漩渦混合30 s；加PBS 2 mL，渦旋至溶解，超聲超聲20min，加入乙腈乙腈8 mL，漩渦混合5 min，4000 r/min離心5 min；取上清液4mL于10 mL離心管中，5060 氮?dú)獯蹈桑患尤隤BS緩沖液 0.5mL(不稀釋)，漩渦混合 1min ；取50 l用于分析

13、檢測。編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%BK1.2541.3141.4834 100BK1.3211.3091.3755 100SM20.8150.7724.9028 1004.9028 598.06 SM20.8040.7615.0360 1005.0360 5100.72 SM20.6670.7136.3095 1006.3095 1063.09 SM20.7520.6636.0460 1006.0460 1060.46 直接上樣：直接上樣：稱取蜂蜜1.00 0.02 g于50 mL離心管中，按要求加入磺胺類藥物標(biāo)準(zhǔn)溶

14、液，漩渦混合30 s；加PBS 1 mL，渦旋至溶解，超聲超聲30min，漩渦混合1min，4000 r/min離心5 min；取上清液50 l用于分析檢測。編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%BK0.2980.31219.3906BK0.3330.31418.6379SM20.3190.31418.919210018.91925378.38SM20.3370.31818.47910018.4795369.58蜂蜜中磺胺類藥物的蜂蜜中磺胺類藥物的Elisa檢測的前處檢測的前處理方法研究理方法研究2012.09.102012.

15、09.10工作匯報工作匯報稱取蜂蜜1.00 0.02 g于50 mL離心管中，按要求加入磺胺類藥物標(biāo)準(zhǔn)溶液，漩渦混合30 s；加PBS緩沖液 2 mL，渦旋至溶解，超聲20min后，加入乙腈乙腈8 mL，漩渦混合5 min，4000 r/min離心5 min；取上清液4mL于10 mL離心管中，5060 氮?dú)獯蹈桑患覲BS緩沖液0.5mL，漩渦混合 30s ；取50 l用于分析檢測。（不稀釋）編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%BK1.5471.4922.1526 BK1.6241.631.7026 SM21.0711.10

16、55.5185 1005.5185 5110.37 SM21.1971.074.9970 1004.9970 599.94 SMD0.4490.39723.5466 5824.0458 580.92 SMD0.4390.36724.5968 5824.2262 584.52 SMM0.5090.44820.8612 6693.1183 562.37 SMM0.5310.45520.2116 6693.0212 560.42 SMTZ1.1461.0915.1632 985.2686 5105.37 SMTZ1.1541.1424.8414 984.9402 598.80 SQ1.4111.36

17、82.8585 426.8060 5136.12 SQ1.4381.3812.7365 426.5154 5130.31 SMZ1.5011.4772.3007 1812.7817 10127.82 SMZ1.5111.5762.0428 1811.3488 10113.49 SIZ1.3971.4192.7454 1815.2524 10152.52 SIZ1.4281.3832.7605 1815.3358 10153.36 稱取蜂蜜1.00 0.02 g于50 mL離心管中，按要求加入磺胺二甲嘧啶標(biāo)準(zhǔn)溶液，漩渦混合30 s；加入PBS緩沖液2mL渦旋混合至蜂蜜溶解，超聲30min后，加入

18、乙腈A:4 mL，B:6mL，C:8mL，漩渦混合5 min，4000 r/min離心5 min；分別取上清液A:3 mL，B:4mL，C:5mL，于10 mL離心管中，5060 氮?dú)獯蹈?；加入PBS緩沖液 0.5 mL復(fù)溶，取50l用于分析檢測。 （不稀釋）編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%A01.7171.6370.7567 A01.5991.5870.9171 A10.9970.9553.7638 1003.7638 575.28 A10.9120.9334.2540 1004.2540 585.08 A21.631

19、1.6260.8456 184.6976 593.95 A21.6661.630.8087 184.4926 589.85 B01.5681.4991.0509 B01.5151.4921.1256 B10.8520.8814.8356 1004.8356 596.71 B10.9080.9194.3425 1004.3425 586.85 B21.3961.3841.4594 188.1079 5162.16 B21.4191.3741.4379 187.9882 5159.76 C01.4271.3981.3862 C01.3851.321.5902 C10.7730.8395.5536

20、1005.5536 5111.07 C10.8650.8744.8025 1004.8025 596.05 C21.4071.4171.3878 187.7098 5154.20 C21.4181.3781.4329 187.9608 5159.22 編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%BK1.5651.5110.9667 BK1.5881.5460.9046 BK1.5851.7320.7337 BK1.7171.6370.7033 BK1.5911.5820.8651 BK1.6321.6860.7329 SM20.84

21、50.8274.8190 1004.8190 596.38 SM20.8260.7445.4156 1005.4156 5108.31 SMD0.1810.18821.4011 5823.6772 573.54 SMD0.1990.15221.8464 5823.7537 575.07 SMM0.1830.21620.6789 6693.0910 561.82 SMM0.190.16421.7715 6693.2543 565.09 SQ1.3231.3011.6214 423.8605 577.21 SQ1.2631.1941.9628 424.6734 593.47 SMZ1.4781.4

22、181.1878 186.5988 5131.98 SMZ1.4981.4621.1039 186.1328 5122.66 SIZ1.5791.5130.9492 185.2731 5105.46 SIZ1.5521.5690.9182 185.1010 5102.02 稱取蜂蜜1.00 0.02 g于50 mL離心管中，按要求加入磺胺類藥物標(biāo)準(zhǔn)溶液，漩渦混合30 s；加PBS緩沖液 2 mL，渦旋至溶解，超聲30 min后，加入乙腈乙腈4 mL，漩渦混合5 min，4000 r/min離心5 min；取上清液3 mL于10 mL離心管中，5060 氮?dú)獯蹈?；加PBS緩沖液0.5mL，漩渦混

23、合 30s ；取50 l用于分析檢測。（不稀釋）編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%BK1.5631.6161.1673 BK1.7041.6590.9658 BK1.5641.6021.1831 BK1.5231.5781.2650 BK1.5361.5361.3034 BK1.5451.4851.3610 SM20.6770.6957.5089 1007.5089 1075.09 SM20.5940.5869.1510 1009.1510 1091.51 SMD0.1090.11124.6002 5824.2268 10

24、42.27 SMD0.1160.11824.2480 5824.1663 1041.66 SMM0.0950.09425.3984 6693.7965 1037.96 SMM0.0970.08625.5559 6693.8200 1038.20 SQ0.9240.8554.9374 4211.7558 10117.56 SQ0.8510.8545.3285 4212.6869 10126.87 SMZ1.2121.2472.4507 1813.6151 10136.15 SMZ1.2521.2892.2522 1812.5123 10125.12 SIZ1.2051.1852.6313 181

25、4.6181 10146.18 SIZ1.1691.2292.6097 1814.4981 10144.98 準(zhǔn)確稱取蜂蜜1.00 0.02 g于50 mL離心管中，按要求加入磺胺類藥物標(biāo)準(zhǔn)溶液，漩渦混合30 s；加PBS緩沖液 2 mL，渦旋至溶解，超聲30 min后，加入乙腈乙腈4 mL，漩渦混合5 min，4000 r/min離心5 min；取上清液3 mL于10 mL離心管中，5060 氮?dú)獯蹈?；加PBS緩沖液1mL，漩渦混合 30s ；取50 l用于分析檢測。（稀釋1倍）蜂蜜中磺胺類藥物的蜂蜜中磺胺類藥物的Elisa檢測的前處檢測的前處理方法研究理方法研究2012.09.242012

26、.09.24工作匯報工作匯報 準(zhǔn)確稱取蜂蜜1.00 0.02 g于50 mL離心管中，按要求加入磺胺類藥物標(biāo)準(zhǔn)溶液，漩渦混合30 s；加PBS緩沖液 2 mL，渦旋至溶解，超聲30 min后，加入乙腈乙腈4 mL，漩渦混合5 min，4000 r/min離心5 min；取上清液3 mL于10 mL離心管中，5060 氮?dú)獯蹈?；加PBS緩沖液1mL，漩渦混合 30s ；取50 l用于分析檢測。（稀釋1倍）編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%BK1.5371.5691.36 100BK1.5151.6811.21 100SM21

27、.1171.0974.35 1004.35 587.09 SM20.9381.1924.86 1004.86 597.19 SMD0.2450.27639.76 5826.83 5136.63 SMD0.2840.25938.63 5826.64 5132.76 SMM0.3250.30634.44 6695.15 5102.95 SMM0.2570.28838.53 6695.76 5115.19 SQ1.251.2932.83 426.75 5134.92 SQ1.271.2083.08 427.34 5146.87 SMZ1.5511.4991.46 188.12 1081.17 SMZ

28、1.5091.5541.44 187.98 1079.80 SIZ1.5581.5811.30 187.23 1072.26 SIZ1.5121.5251.49 188.26 1082.56 編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%BK1.6251.6041.57 100 BK1.5991.6641.51 100 SM21.1731.2444.17 100 4.17 5 83.43 SM21.2011.2683.92 100 3.92 5 78.38 SMD0.3640.36731.60 582 5.43 5 108.57 SM

29、D0.3470.33733.43 582 5.74 5 114.88 SMM0.370.39930.19 669 4.51 5 90.24 SMM0.3660.40929.97 669 4.48 5 89.59 SQ1.5481.5191.91 42 4.55 5 91.01 SQ1.541.5531.85 42 4.41 5 88.21 SMZ1.6231.6161.55 18 8.64 10 86.37 SMZ1.6451.6031.54 18 8.54 10 85.44 SIZ1.5981.6561.53 18 8.48 10 84.82 SIZ1.6161.6271.55 18 8.6

30、0 10 85.95 編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%BK2.1582.1991.39 100.00 BK2.0412.1751.59 100.00 SM21.2541.2198.15 100.00 8.15 10.00 81.49 SM21.2761.2257.94 100.00 7.94 10.00 79.37 SMD0.180.25355.35 582.00 9.51 10.00 95.10 SMD0.2160.24853.76 582.00 9.24 10.00 92.37 SMM0.2050.21855.87

31、669.00 8.35 10.00 83.51 SMM0.2610.20853.51 669.00 8.00 10.00 79.98 SQ1.6751.7293.40 42.00 8.09 10.00 80.93 SQ1.6761.6943.51 42.00 8.36 10.00 83.56 SMZ1.7491.6263.49 18.00 19.41 20.00 97.03 SMZ1.6611.6163.83 18.00 21.28 20.00 106.38 SIZ1.7351.7553.14 18.00 17.42 20.00 87.10 SIZ1.6831.7043.45 18.00 19

32、.19 20.00 95.94 編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%BK1.4721.3731.37 100BK1.3631.4431.45 100SM20.8050.8027.76 1007.76 1077.56 SM20.7680.7129.26 1009.26 1092.62 SMD0.1160.12252.54 5829.03 1090.27 SMD0.1350.14649.48 5828.50 1085.01 SMM0.1130.13551.81 6697.74 1077.44 SMM0.1480.13849.13

33、 6697.34 1073.44 SQ1.0871.0563.67 428.73 1087.31 SQ1.0231.1473.53 428.41 1084.08 SMZ1.1120.9983.84 1821.33 20106.67 SMZ1.0671.1323.39 1818.84 2094.19 SIZ1.0581.1543.33 1818.50 2092.50 SIZ1.1731.0613.23 1817.94 2089.70 樣本號12345678910測定值1.3579 1.2073 1.5734 1.5104 1.3890 1.5857 1.3748 1.4519 1.0059 1.

34、3519 樣本號11121314151617181920測定值1.3276 1.5798 1.4807 1.3397 1.1673 0.9658 1.1831 1.2650 1.3034 1.3610 平均值1.3859 標(biāo)準(zhǔn)差0.12101檢測限1.7489 磺胺類藥物的提取匯報人 : 盧宏濤單 位 : 武漢飛遠(yuǎn)科技有限公司時 間 ：2012年9月24日20份空白測定值平均值標(biāo)準(zhǔn)差檢測限1.358 1.5861.675 1.580 1.376 0.192 1.9531.207 1.675 1.452 1.081 1.573 1.452 1.306 1.340 1.010 1.306 1.75

35、2 1.267 1.389 1.752 1.328 1.502 稱取蜂蜜1.00 0.02 g于50 mL離心管中，按要求加入磺胺類藥物標(biāo)準(zhǔn)溶液，漩渦混合30 s；加PBS緩沖液 2 mL，渦旋至溶解，超聲30 min后，加入乙腈乙腈4 mL，漩渦混合5 min，4000 r/min離心5 min；取上清液3 mL于10 mL離心管中，5060 氮?dú)獯蹈?；加PBS緩沖液1mL，漩渦混合 30s ；取50 l用于分析檢測。表表1 蜂蜜的檢測限蜂蜜的檢測限蜂蜜樣品提取方法蜂蜜樣品提取方法編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%BK1

36、.5371.5691.3579 100.0000 BK1.5151.6811.2073 100.0000 SM21.1171.0974.3545 100.0000 4.3545 587.09 SM20.9381.1924.8595 100.0000 4.8595 597.19 SMD0.2450.27639.7596 5826.8315 5136.63 SMD0.2840.25938.6332 5826.6380 5132.76 SMM0.3250.30634.4377 6695.1476 5102.95 SMM0.2570.28838.5324 6695.7597 5115.19 SQ1.2

37、51.2932.8332 426.7458 5134.92 SQ1.271.2083.0843 427.3436 5146.87 SMZ1.5511.4991.4610 188.1165 1081.17 SMZ1.5091.5541.4364 187.9798 1079.80 SIZ1.5581.5811.3006 187.2256 1072.26 SIZ1.5121.5251.4860 188.2555 1082.56 蜂蜜樣品蜂蜜樣品 5ppb 第一批第一批 2倍稀釋倍稀釋蜂蜜樣品蜂蜜樣品 5ppb 第二批第二批 2倍稀釋倍稀釋編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)

38、實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%BK1.6251.6041.5734 100.0000 BK1.5991.6641.5104 100.0000 SM21.1731.2444.1717 100.0000 4.1717 583.43 SM21.2011.2683.9192 100.0000 3.9192 578.38 SMD0.3640.36731.5952 5825.4287 5108.57 SMD0.3470.33733.4298 5825.7440 5114.88 SMM0.370.39930.1858 6694.5121 590.24 SMM0.3660.40929.9691

39、6694.4797 589.59 SQ1.5481.5191.9112 424.5506 591.01 SQ1.541.5531.8525 424.4107 588.21 SMZ1.6231.6161.5546 188.6365 1086.37 SMZ1.6451.6031.5379 188.5437 1085.44 SIZ1.5981.6561.5268 188.4824 1084.82 SIZ1.6161.6271.5471 188.5951 1085.95 編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%BK2.1582.1991

40、.3890 100.0000 BK2.0412.1751.5857 100.0000 SM21.2541.2198.1486 100.0000 8.1486 1081.49 SM21.2761.2257.9371 100.0000 7.9371 1079.37 SMD0.180.25355.3460 5829.5096 1095.10 SMD0.2160.24853.7580 5829.2368 1092.37 SMM0.2050.21855.8682 6698.3510 1083.51 SMM0.2610.20853.5062 6697.9979 1079.98 SQ1.6751.7293.

41、3992 428.0934 1080.93 SQ1.6761.6943.5095 428.3560 1083.56 SMZ1.7491.6263.4931 1819.4060 2097.03 SMZ1.6611.6163.8298 1821.2767 20106.38 SIZ1.7351.7553.1355 1817.4194 2087.10 SIZ1.6831.7043.4539 1819.1885 2095.94 蜂蜜樣品蜂蜜樣品 10ppb 第一批第一批 2倍稀釋倍稀釋蜂蜜樣品蜂蜜樣品 10ppb 第二批第二批 2倍稀釋倍稀釋編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)

42、實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%BK1.4721.3731.3748 100.0000 BK1.3631.4431.4519 100.0000 SM20.8050.8027.7556 100.0000 7.7556 1077.56 SM20.7680.7129.2618 100.0000 9.2618 1092.62 SMD0.1160.12252.5392 5829.0274 1090.27 SMD0.1350.14649.4750 5828.5009 1085.01 SMM0.1130.13551.8101 6697.7444 1077.44 SMM0.1480.13849.1

43、305 6697.3439 1073.44 SQ1.0871.0563.6670 428.7309 1087.31 SQ1.0231.1473.5312 428.4076 1084.08 SMZ1.1120.9983.8401 1821.3337 20106.67 SMZ1.0671.1323.3910 1818.8387 2094.19 SIZ1.0581.1543.3299 1818.4995 2092.50 SIZ1.1731.0613.2291 1817.9394 2089.70 蝦肉樣品的提取方法蝦肉樣品的提取方法（1）準(zhǔn)確稱取蝦肉組織2.00 0.02 g于50 mL離心管中。（2

44、）加入乙酸乙酯4 mL，漩渦混合5 min，4000 r/min離心5 min。（3）取上清液1 mL于10 mL離心管中，5060 氮?dú)獯蹈伞＃?） 加入正己烷1 ml溶解干燥殘留物， 漩渦混合1 min，再加入 PBS緩沖液 1 mL，漩渦混合 1 min ，4000 r/min離心10 min， 取下層水相50 l用于分析檢測。編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%BK1.663 1.646 1.4592 BK1.548 1.583 1.8383 SDM0.514 0.513 28.1906 450.8053 6.253

45、4 5125.07 SDM0.578 0.535 25.1982 450.8053 5.5896 5111.79 SM10.916 0.899 10.1358 312.6897 3.2415 564.83 SM10.832 0.851 12.0289 312.6897 3.8469 576.94 SD0.845 0.838 12.0289 307.5788 3.9108 578.22 SD0.792 0.812 13.3271 307.5788 4.3329 586.66 SM20.845 0.838 12.0289 241.4534 4.9819 599.64 SM20.832 0.873

46、11.6904 241.4534 4.8417 596.83 SDM1.004 0.963 8.3272 175.1780 4.7536 595.07 SDM0.902 0.898 10.3416 175.1780 5.9035 5118.07 ST1.393 1.470 2.6026 58.1407 4.4763 589.53 ST1.433 1.371 2.8096 58.1407 4.8324 596.65 SCPA1.517 1.618 1.8288 57.8175 3.1630 563.26 SCPA1.545 1.598 1.8099 57.8175 3.1303 562.61 E

47、sb31.420 1.510 2.3859 66.8194 3.5707 571.41 Esb31.423 1.505 2.3921 66.8194 3.5800 571.60 SMP1.540 1.450 2.2072 56.7285 3.8909 577.82 SMP1.495 1.534 2.0983 56.7285 3.6989 573.98 蝦肉樣品 5ppb 2倍稀釋下一步工作下一步工作剩余10種磺胺藥物在蜂蜜、豬肉，雞肉，雞蛋，魚肉和牛奶等組織樣品中的提取。工作匯報工作匯報磺胺在蜂蜜、牛奶、豬肉、雞肉、魚肉組織中的提取磺胺在蜂蜜、牛奶、豬肉、雞肉、魚肉組織中的提取祁慧雪2012年

48、10月15日豬肉、雞肉、魚肉樣品中磺胺提取方法豬肉、雞肉、魚肉樣品中磺胺提取方法（1）準(zhǔn)確稱取蝦肉組織2.00 0.02 g于50 mL離心管中。（2）加入乙酸乙酯4 mL，漩渦混合5 min，4000 r/min離心5 min。（3）取上清液1 mL于10 mL離心管中，5060 氮?dú)獯蹈?。?） 加入正己烷1 ml溶解干燥殘留物， 漩渦混合1 min，再加入 PBS緩沖液 1 mL，漩渦混合 1 min ，4000 r/min離心10 min， 取下層水相50 l用于分析檢測。蜂蜜中磺胺提取方法蜂蜜中磺胺提取方法（1）準(zhǔn)確稱取蜂蜜1.00 0.02 g于50 mL離心管中，按要求加入磺胺類

49、藥物標(biāo)準(zhǔn)溶液，漩渦混合30s（2）加PBS 2 mL，渦旋1min至溶解，超聲30min；（3）加入乙腈4 mL，漩渦混合5 min，4000 r/min離心5 min；（4）取上清液3mL于10 mL離心管中，5060 氮?dú)獯蹈?；?）加入PBS緩沖液 1mL(稀釋2倍)，漩渦混合 1min ；取50 l用于分析檢測。牛奶中磺胺提取方法牛奶中磺胺提取方法（1）準(zhǔn)確稱取蝦肉組織2.00 0.02 g于50 mL離心管中。（2）加入乙酸乙酯8 mL，漩渦混合5 min，4000 r/min離心5 min。（3）取上清液2 mL于10 mL離心管中，5060 氮?dú)獯蹈?。?） 加入正己烷1 ml溶

50、解干燥殘留物， 漩渦混合1 min，再加入 PBS緩沖液 1 mL，漩渦混合 1 min ，4000 r/min離心10 min， 取下層水相50 l用于分析檢測。編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%空白BK1.8731.8961.3387 BK1.9581.9061.2160 磺胺鄰二甲氧嘧啶SDM0.4980.4523.2388 451 5.1549 5103.10 SDM0.4250.426.3184 451 5.8381 5116.76 磺胺甲基嘧啶SM10.6850.61816.2266 313 5.1894 51

51、03.79 SM10.7010.69114.8293 313 4.7425 594.85 磺胺嘧啶SD0.6650.70815.1171 308 4.9149 598.30 SD0.7210.80113.0017 308 4.2271 584.54 磺胺二甲基異嘧啶SM20.7640.80712.3728 241 5.1243 5102.49 SM20.7540.89411.4455 241 4.7403 594.81 磺胺二甲氧嘧啶SDM0.8290.94710.0553 175 5.7400 5114.80 SDM0.9480.8959.3962 175 5.3638 5107.28 磺胺

52、噻唑ST1.5141.5862.6341 58 4.5306 590.61 ST1.5541.6012.4915 58 4.2854 585.71 磺胺氯噠嗪SCPA1.5611.6512.3519 58 4.0678 581.36 SCPA1.6581.6952.0392 58 3.5270 570.54 磺胺氯吡嗪Esb31.5871.6132.3806 67 3.5628 571.26 Esb31.681.5682.2678 67 3.3939 567.88 磺胺甲氧噠嗪SMP1.6121.6252.2932 57 4.0424 580.85 SMP1.6291.7062.0767 57

53、 3.6608 573.22 蜂蜜蜂蜜 5ppb編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%BK1.5421.5961.7566 1.5711.6061.6792 SDM0.3740.40127.0038 451 5.9901 5119.80 0.3970.41125.9927 451 5.7658 5115.32 SM10.6860.65214.0823 313 4.5036 590.07 0.6760.70113.4613 313 4.3050 586.10 SD0.6970.67213.5865 308 4.4172 588.

54、34 0.6530.68914.0174 308 4.5573 591.15 SM20.7020.71912.7935 241 5.2986 5105.97 0.6230.67914.6810 241 6.0803 5121.61 SDM0.8970.9058.2347 175 4.7007 594.01 0.8560.8758.9393 175 5.1030 5102.06 ST1.4661.5172.1015 58 3.6145 572.29 1.5451.5131.9269 58 3.3142 566.28 SCPA1.2331.3123.4874 58 6.0317 5120.63 1

55、.3591.2713.1609 58 5.4670 5109.34 Esb31.2771.2893.4037 67 5.0939 5101.88 1.3731.3013.0041 67 4.4958 589.92 SMP1.2971.2513.4753 57 6.1262 5122.52 1.3011.2813.3413 57 5.8900 5117.80 牛奶牛奶 5ppb編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%空白BK1.6611.6192.2220 BK1.6991.7061.9428 磺胺鄰二甲氧嘧啶SDM0.5050.

56、49325.7805 450.80535.7188 5114.38 SDM0.5450.49124.7494 450.80535.4900 5109.80 磺胺甲基嘧啶SM10.9640.82311.0465 312.68973.5327 570.65 SM10.8320.79113.1744 312.68974.2133 584.27 磺胺嘧啶SD0.6660.71217.1405 307.57885.5727 5111.45 SD0.7210.60118.2031 307.57885.9182 5118.36 磺胺二甲基異嘧啶SM21.0961.0617.4237 241.45343.07

57、46 561.49 SM21.0470.9988.3728 241.45343.4677 569.35 磺胺二甲氧嘧啶SDM1.0951.1726.5964 175.1783.7655 575.31 SDM1.0841.0957.2503 175.1784.1388 582.78 磺胺噻唑ST1.4191.4783.3529 58.14075.7668 5115.34 ST1.5641.3543.2781 58.14075.6382 5112.76 磺胺氯噠嗪SCPA1.5121.6292.5798 57.81754.4620 589.24 SCPA1.5591.6112.5007 57.81

58、754.3252 586.50 磺胺氯吡嗪Esb31.3871.3633.9264 66.81945.8761 5117.52 Esb31.3681.2894.3388 66.81946.4934 5129.87 磺胺甲氧噠嗪SMP1.7441.6132.0456 56.72853.6060 572.12 SMP1.7061.622.1149 56.72853.7281 574.56 豬肉豬肉 5ppb編號OD值-1OD值-2信號響應(yīng)濃度(ppb)交叉反應(yīng)率(%)實測濃度(ppb)添加濃度(ppb)回收率%BK1.7671.8622.2619 BK1.8561.8262.1348 SDM0.6

59、090.72727.5939 450.80536.1210 5122.42 SDM0.6250.78225.5373 450.80535.6648 5113.30 SM11.0120.9314.2466 312.68974.5561 591.12 SM11.0541.06811.7067 312.68973.7439 574.88 SD1.0941.05311.3917 307.57883.7037 574.07 SD1.0071.04512.6356 307.57884.1081 582.16 SM21.1011.2129.5048 241.45343.9365 578.73 SM21.1691.1929.0199 241.45343.7357 574.71 SDM1.3661.2047.1810 175.1784.0993 581.99 SDM1.2581.2747.4850 175.1784.2728 585.46 ST1.