PBS緩沖液的配制方法

1、PBS緩沖液配方不管是免疫組化，還是細胞培養(yǎng)中，常用到 PBSPBS 緩沖液，下面是常用配方，供大家參考。用于細胞培養(yǎng)的 PBSPBS 需含有氯化鉀稱取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2Pd溶于800ml蒸儲水中，用HCl調(diào)節(jié)溶液的pH值至7.4,最后加蒸儲水定容至1L,滅菌即可。0.01MPBS0.01MPBS 緩沖液稱取NaCl8g,KCl0.2g,Na2HPO4?12H2O3.63g,KH2PO40.24g,溶于900ml雙蒸水中，用鹽酸調(diào)pH值至7.4,加水定容至1L,常溫保存?zhèn)溆谩Ｒ话忝庖呓M化用 PBS,PBS,主要用來清洗，都只包含Na2HPO

2、4?12H2O(磷酸氫二鈉)和NaH2PO4?2H2O(磷酸二氫鈉)兩種組分，母液的配制：0.2MNa2HPO4:稱取71.6gN&HPO4-12H2O,溶于1000ml水0.2MNaH2PO4:稱取31.2gNaH2PO4-2H2O,溶于1000ml水各種濃度PB(pH=7.4)的配制：先配0.2MPB(pH=7.4,100ml):取19ml0.2mol/L的NaH2PO4,81ml0.2mol/L的Na2HPO4,即可。然后只需將0.2MPB(pH=7.4)按相應(yīng)比例適當(dāng)稀釋即可，如：0.1MPB(PH=7.4):取500ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml即可。0.01MPB(PH=

3、7.4):取50ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml即可。0.02MPB(PH=7.4):取100ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml即可。若需要NaCL的話，加入NaCL至0.9%(g/100ml)即可。PH0.2MNaH2PO4(ml)0.2MNa2HPO4(ml)5.793.56.55.89285.990106.087.712.36.185156.281.518.56.377.522.56.473.526.56.568.531.56.662.537.56.756.543.56.851496.945557.038627.133677.228727.323777.419ml81ml7

4、.516847.613877.710.50.57.97938.05.394.7關(guān)于磷酸緩沖溶液的一些問答PBS可以為三種溶液的英文縮寫，分別是1.磷酸鹽緩沖溶液(phosphatebufferedsolution)、2.磷酸鹽緩沖鹽水(phosphatebufferedsaline)及3.磷酸鹽緩沖鈉(phosphatebufferedsodium),其配制方法不同，pH值不同，發(fā)揮的生物學(xué)作用亦不完全相同。如無特殊說明，生物學(xué)上常用的PBS是中性磷酸鹽緩沖溶液(phosphatebufferedsolution)。無鈣鎂離子磷酸緩沖鹽水(PBS)(0.15Mol/LPH7.2)NaCl8.0

5、gKCl0.2gNa2HPO41.15g(如為Na2HPO412H2O,貝U為2.89g)KH2PO40.2g將上述試劑依次溶于1000ml去離子水中，完全溶解后，115c高壓滅菌10min15min,存在4c冰箱中備用。此液可用于配制和稀釋細胞分散劑以及洗滌細胞培養(yǎng)物。常用7.88.591.5的都是第二種。問題1:磷酸鹽緩沖鹽水(phosphatebufferedsodium),為什么用第三種或第一種呢：這么多年以來我都以為PBS就是磷酸鹽緩沖溶液，其他兩種說法的英語名稱常見到，不過我一直都以為他們是差不多的東西。不同的漢語翻譯倒是第一次聽說。我們公司用的PBS有很多種，抗體組用的中和PBS

6、配方就比較簡單，沒有K+離子，只起到緩沖PH的作用；Na2HPO4+KH2P04按照不同比例混勻，可以得到不同PH的緩沖液，用于不同目的，這個在分子生物學(xué)中用得很多；用于活細胞或者細菌處理的，為了保持滲透壓，會加入其他的溶液，最常見的就是NaCl和KCl調(diào)節(jié)離子濃度。以上是個人的理解，歡迎批評。：問題2:既然抗體組的PBS是起到緩沖PH的作用，那加入80G的NACL作用是什么？需要平衡滲透壓嗎？還有加入K離子的是不是因為細胞上NA-K泵的原因啊，血清里面又沒有細胞，何來NA-K泵一說啊？我覺得之所以這么配，其實就是對血清中緩沖環(huán)境的一種模擬罷了，血清里面又沒有細胞，何來NA-K泵一說?。繂栴}3:不加NACL會怎么樣?。慷嗍″X啊在中和磷酸鹽緩沖液中，NaCl的主要作用應(yīng)當(dāng)是保持一定的離子濃度，以維持抗體的活性。在離子濃度過高或過低的情況下，蛋白質(zhì)都會變性，抗體當(dāng)然不例外。ps:哺乳類需用生理鹽水濃度是0.9%。稱取0.9克氯化鈉，溶解在少量蒸儲水中，稀釋到100毫升