第二章農(nóng)殘檢測(cè)的樣品采集和前處理方法

1、 及前處理方法及前處理方法學(xué)習(xí)指南學(xué)習(xí)指南觀察思考觀察思考課外閱讀課外閱讀復(fù)習(xí)自測(cè)復(fù)習(xí)自測(cè)退出本章退出本章演示文稿演示文稿本章目錄本章目錄 一、樣品的種類一、樣品的種類二、取樣方法二、取樣方法三、樣品的包裝、記錄和貯存三、樣品的包裝、記錄和貯存四、樣品的預(yù)處理四、樣品的預(yù)處理本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章 1 1、主觀樣品、主觀樣品 殘留試驗(yàn)樣品為研究研究農(nóng)藥殘留量與各種因素的關(guān)系，從設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)區(qū)域內(nèi)采集的樣品。 2 2、客觀樣品、客觀樣品 監(jiān)測(cè)監(jiān)測(cè)樣品和執(zhí)法樣品，測(cè)定的農(nóng)藥殘留種類是未知的或施藥背景不清楚的樣品。本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章1 1、實(shí)驗(yàn)室樣品、實(shí)驗(yàn)室樣品 從群體采集的送

2、到殘留分析實(shí)驗(yàn)室的樣品。2 2、檢測(cè)樣品、檢測(cè)樣品 實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過縮分減量或經(jīng)過精制后的樣品。3 3、檢測(cè)樣份、檢測(cè)樣份 從檢測(cè)樣品中稱取的用于分析的樣品。4 4、檢測(cè)溶液、檢測(cè)溶液 經(jīng)過提取、凈化后進(jìn)入待測(cè)狀態(tài)。本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章1 1、取樣原則、取樣原則 代表性 方法與目的保持一致 精度要求 防止化學(xué)變化或丟失 防止污染本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章1 1、殘留試驗(yàn)的樣品采集、殘留試驗(yàn)的樣品采集 隨機(jī)法、 對(duì)角線法、 五點(diǎn)法 有選擇地采樣避免有病、過小、未成熟。果樹時(shí) （上、下、內(nèi)、外、向陽和背陰）果實(shí)密集 避免在地頭或邊沿采樣，采可食用部分，符合采 收要求 先采對(duì)照區(qū)的樣品，

3、再按從小到大劑量采集。（2 2）、采集量及采樣部位）、采集量及采樣部位 按照表2-2確定采樣部位及采樣量 土壤樣品采集0-15cm耕作層，每小區(qū)設(shè)5-10個(gè)采樣點(diǎn)，采樣量不少于1kg。 水樣多點(diǎn)取樣約5000ml混勻后取1000-2000ml（1）、抽樣）、抽樣 商品檢測(cè)樣品抽樣必須按照國(guó)際或相關(guān)國(guó)家規(guī)定。 認(rèn)定抽樣的總體，從總體中選擇并取出正確的總樣品，將每一總樣本減少到能能滿足分析技術(shù)要求的最低值。（2）、采集）、采集 商品檢測(cè)樣品的方法基本同殘留實(shí)驗(yàn)樣品(1)、水樣的采集 ：取樣體積一般為500-1000ml， 盛水樣的容器應(yīng)干凈，水樣不超過瓶的2/3。(2)、大氣樣品的采集：采用富集法

4、，液液吸收 法。(3)、土壤樣品的采集：和殘留試驗(yàn)的方法一樣。樣品處理原則樣品處理原則 在樣品的采集、包裝和預(yù)處理要避免樣品表面殘留農(nóng)藥的損失； 遇光降解的農(nóng)藥，避光保存。 采集和運(yùn)輸過程中樣品的損壞及變質(zhì)而影響殘留量。 土壤等雜物要去除，避免交叉污染。 采用合適的方法縮分將采集的樣品處理成實(shí)驗(yàn)室樣品。 四分法分析 用分樣板先將樣品混合均勻，用分樣板先將樣品混合均勻，然后按然后按2/42/4的比例分取樣品的過的比例分取樣品的過程，叫做四分法分樣。程，叫做四分法分樣。 操作步驟：操作步驟：1、將樣品倒在光滑平坦的桌面或玻璃板上；、將樣品倒在光滑平坦的桌面或玻璃板上；2、用分樣板把樣品混全均勻；、

5、用分樣板把樣品混全均勻；3、將樣品攤成等厚度的正方形；、將樣品攤成等厚度的正方形；4、用分樣板在樣品上劃兩條對(duì)角線，分成兩、用分樣板在樣品上劃兩條對(duì)角線，分成兩個(gè)對(duì)頂角的三角形；個(gè)對(duì)頂角的三角形；5、任取其中兩個(gè)三角形為樣本；、任取其中兩個(gè)三角形為樣本；6、將剩下的樣本再混合均勻，再按以上方法、將剩下的樣本再混合均勻，再按以上方法反復(fù)分??；直至最后剩下的兩個(gè)對(duì)頂角三角反復(fù)分?。恢敝磷詈笫Ｏ碌膬蓚€(gè)對(duì)頂角三角的樣品接近所需試樣重量為止。的樣品接近所需試樣重量為止。樣品處理原則樣品處理原則 小的或輕的樣品 用四分法縮分成 實(shí)際需要的試驗(yàn)樣品； 中等大小樣品 在充分混合的 樣品中隨機(jī)選取足夠量的實(shí)驗(yàn)樣

6、品。 大的樣品 有足夠代表性 的樣品 1 1、樣品的縮分、樣品的縮分 農(nóng)產(chǎn)品；在對(duì)樣品縮分前，首先需要挑選出樣品的分析部位，去除不需要的部分。預(yù)處理方法見表2-4，縮分方法是四分法。 1 1、樣品的縮分、樣品的縮分 水和其他液體樣品；過濾去除漂浮物、沉淀物和泥土。一般最后預(yù)處理的液體樣品體積為1000ml。 土壤 土壤樣品先出去其中石塊、動(dòng)植 物殘?bào)w等雜物。超過5%，應(yīng)該記錄雜物質(zhì)量。采用四分法縮分、粉碎、過20目篩，最后預(yù)處理的樣品重量為250-500g。1 1、樣品的預(yù)處理、樣品的預(yù)處理 樣品預(yù)處理是指將抽取的樣品按其特性進(jìn)行預(yù)先混合、縮樣、包裝和存儲(chǔ)的過程。 液態(tài)樣品；可用離心或過濾的方

7、法，去除漂浮物、沉淀物和泥土。一般最后預(yù)處理的液體樣品體積為1000ml。盡量在樣品可能發(fā)生任何物理化學(xué)前完成分析工作。 1 1、樣品的預(yù)處理、樣品的預(yù)處理 固體樣品；土壤，充分混勻后，過1mm篩，采用四分法取適量樣品（250g），并取100g均勻的土壤樣品，置于105烘至恒重，冷卻后重新稱重，測(cè)出土壤干重。動(dòng)物和植物樣品，取可食用部分切成小塊后用高速搗碎機(jī)搗碎后，分別取適量樣品供分析用。1 1、樣品的存儲(chǔ)、樣品的存儲(chǔ) 樣品在實(shí)驗(yàn)室一般存儲(chǔ)在1-5下，并應(yīng)盡快進(jìn)行檢測(cè)（3-5d內(nèi)）。如果需要存儲(chǔ)較長(zhǎng)時(shí)間，則樣品必須在-20 條件下冷凍保存，在檢測(cè)時(shí)應(yīng)該先解凍然后馬上檢測(cè)。 檢測(cè)后的樣品先保存大

8、約半年的時(shí)間，以供復(fù)檢。 一、農(nóng)藥殘留分析試劑提純方法 1、為了不影響樣品測(cè)定結(jié)果的判定。 二、器皿的洗滌 1、分析器皿的洗滌 農(nóng)藥殘留分析屬于跡量分析范疇，對(duì)于器皿干凈程度的要求比一般化學(xué)分析要高，干凈的器皿應(yīng)該是內(nèi)壁能被水均勻濕潤(rùn)而無水的條紋且不掛水珠。 一、樣品制備（sample preparation）一般包括從樣品中提取殘留農(nóng)藥、濃縮提取液和去除提取液中干擾性雜質(zhì)的分離凈化等步驟，是將檢測(cè)樣品處理成適合測(cè)定的檢測(cè)溶液的過程。 一、樣品制備的目的和原理 1、樣品制備的目的 提高靈敏度和降低最小檢出限。 提高測(cè)試精度；色素、油脂、蛋白質(zhì)等，通過前處理的方法去除這些干擾的雜質(zhì)，提高結(jié)果的重

9、現(xiàn)性和準(zhǔn)確度。 提高方法的選擇性； 延長(zhǎng)儀器的壽命； 利用殘留農(nóng)藥與樣品基質(zhì)的物理化學(xué)差物理化學(xué)差異異，使其從檢測(cè)系統(tǒng)有干擾作用的樣品基質(zhì)中提取分離出來（相似相溶）。就是指溶質(zhì)和溶劑的化學(xué)組成、分子量和分子結(jié)構(gòu)相同或相似，因而分子間引力也相似。 極性極性-溶解度、分配系數(shù)；揮發(fā)性揮發(fā)性-蒸汽壓。1 1、極性、極性 提取、凈化條件的依據(jù)。相似相溶原理：使用與農(nóng)藥極性相近的溶劑為提取劑，使殘留農(nóng)藥在溶劑中達(dá)到最大溶解度。使殘留農(nóng)藥在溶劑中達(dá)到最大溶解度。極性判斷：電負(fù)性、雙鍵、對(duì)稱性表示：氧化鋁吸附劑上洗脫供試溶質(zhì)的能力本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章2 2、水溶性、水溶性 農(nóng)藥的極性決定其在溶劑

10、中的溶解性。影響溶解性的其他因素影響溶解性的其他因素 溫度：高溶解性高 含鹽量：鹽會(huì)降低有機(jī)物的溶解度。 pH：影響可解離的農(nóng)藥的溶解度本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章極 性溶劑強(qiáng)度溶 劑溶解度（2025）溶劑在水中溶劑在水中（% %）水在溶劑中水在溶劑中（% %）非極性強(qiáng)反相弱正相正己烷0.000950.0111異辛烷微溶微溶四鹵化碳0.0770.010三鹵甲烷0.8150.072二鹵甲烷2-四氫呋喃任意混溶任意混溶乙乙 醚醚6.046.041.4681.468乙酸乙酯8.082.94丙丙 酮酮任意混溶任意混溶任意混溶任意混溶乙乙 腈腈任意混溶任意混溶任意混溶任意混溶異丙醇任意混溶任意混溶甲

11、 醇任意混溶任意混溶水任意混溶任意混溶極 性弱反相強(qiáng)正相醋 酸任意混溶任意混溶分配定律：分配定律：在一對(duì)互不相溶的兩相溶劑系統(tǒng)中，由于物質(zhì)在非極性相和極性相非極性相和極性相中的溶解度不同，當(dāng)達(dá)到平衡時(shí)，物質(zhì)在該兩相中的濃度比在一定條件下為常數(shù)的定律。K KD D （分配系數(shù)） = A= A非極性相非極性相 / B/ B極性相極性相 本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章?lián)]發(fā)性：揮發(fā)性：液態(tài)或固態(tài)物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)闅鈶B(tài)的物理性能。揮發(fā)性決定：物質(zhì)在氣-液或氣-固兩相中的分布。分為沸點(diǎn)和蒸汽壓。蒸汽壓：固態(tài)、液態(tài)氣態(tài)本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章 提取提取是指通過溶解、吸附（吸著）或揮發(fā)等方式將樣品中的殘留農(nóng)

12、藥分離出來的操作步驟，也叫萃取萃取。避免：強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、高溫、劇烈操作極性-溶解度、分配系數(shù)；揮發(fā)性-蒸汽壓。本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章溶劑萃取溶劑萃取蒸餾技術(shù)蒸餾技術(shù)固相萃取固相萃取微波萃取微波萃取衍生化衍生化超臨界萃取超臨界萃取本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章溶劑萃?。喝軇┹腿。喝芙庑圆町悾x用對(duì)殘留農(nóng)藥溶解度大的溶劑，將分析物從樣品基質(zhì)中提取出來的方法。關(guān)鍵：關(guān)鍵：選擇合適的提取溶劑。本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章液液- -液萃取液萃取液液- -固萃取固萃取液液- -氣萃取（溶液吸收）氣萃?。ㄈ芤何眨┹腿?duì)象萃取對(duì)象 本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章兩種不相容兩種不相容的液體的液

13、體水溶劑：親水化合物進(jìn)入水溶劑：親水化合物進(jìn)入到水相中。到水相中。有機(jī)溶劑：疏水性化合物將進(jìn)有機(jī)溶劑：疏水性化合物將進(jìn)入有機(jī)相中的程度就越大。入有機(jī)相中的程度就越大。本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章利用樣品中不同組分分配在兩種不混溶的溶劑中溶解度溶解度或分配比分配比的不同來達(dá)到分離、提取或純化的目的。有機(jī)相有機(jī)相水相水相本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章KD = coc w有機(jī)物質(zhì)在有機(jī)溶劑中的溶解度一般比有機(jī)物質(zhì)在有機(jī)溶劑中的溶解度一般比在水相中的溶解度大，分配系數(shù)越大，水在水相中的溶解度大，分配系數(shù)越大，水相中的有機(jī)物可被萃取。相中的有機(jī)物可被萃取。 本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章nB0n

14、)VKVKV(mm式中，m m0 0是被萃取溶液中溶質(zhì)（X）的總含量， m mn n是經(jīng)過n次萃取后，X在溶劑中的剩余量， V V是被萃取溶液的體積， V VB B是每次萃取所用溶劑B的體積（均為VB）， n n是等量萃取的次數(shù)。本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章溶劑體積為樣品溶液的溶劑體積為樣品溶液的30303535。振蕩幾次振蕩幾次打開活塞打開活塞Gas蒸氣逸出（也叫放氣）蒸氣逸出（也叫放氣）本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章絮狀物絮狀物（乳化）（乳化）有機(jī)相有機(jī)相水相水相水相和絮狀物水相和絮狀物靜置分層靜置分層激烈振搖激烈振搖1 1 2min2min本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章有機(jī)相有機(jī)

15、相35次次本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章由于液-液萃取過程中劇烈振動(dòng)，經(jīng)常發(fā)生乳乳化現(xiàn)象化現(xiàn)象，特別是那些含脂肪脂肪的樣品。原因：原因：體系的性質(zhì)、離子濃度、有機(jī)相粘度、萃取溫度、pH等。溫度越低，溫度越低，有機(jī)相粘度越大，離子濃度越高越易產(chǎn)生乳化。本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章通過改變KD;改變?nèi)軇┗蚧瘜W(xué)平衡作用的添加劑（表面活性劑）;緩沖劑調(diào)節(jié)pH;鹽調(diào)節(jié)離子強(qiáng)度等。 離心法破乳。2000rmin，2min； 無水硫酸鈉研磨法破乳； 蒸干法，蒸干后，再用有機(jī)溶劑萃取。不適用揮發(fā)性物質(zhì)的萃取。本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章 電解質(zhì)破乳。加入無機(jī)鹽，通過提高體系中水相的比重使兩相分層；

16、破乳率與加入電解質(zhì)的量成正比。 lmolL的鹽酸； 無水乙醇溶解兩相液滴； 無水硫酸鈉漏斗過濾。本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章 玻璃棒攪動(dòng)，削弱吸附作用； 靜置一定的時(shí)間后，可自然分層。因?yàn)槿闈嵋菏且后w雜質(zhì)以微小珠滴散布在液體溶劑中的一種分散體系，是熱力學(xué)不穩(wěn)定體系。本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章固體萃取溶劑振蕩（加熱）離心/過濾分離欲萃取組分進(jìn)入溶劑。本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章 溶解和擴(kuò)散的過程溶解和擴(kuò)散的過程 分子擴(kuò)散：分子擴(kuò)散：固體樣品表面/溶劑接解處影響因素：溫度、分子大小和液體介質(zhì)的黏度。對(duì)流擴(kuò)散：對(duì)流擴(kuò)散：遠(yuǎn)離固體樣品表面處的擴(kuò)散影響因素：流動(dòng)液體的速度和狀態(tài)，液體的黏度

17、、樣品表面的性質(zhì)等。本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章1 1、索氏提取器、索氏提取器2 2、搗碎法：組織搗碎機(jī)；勻漿器、搗碎法：組織搗碎機(jī)；勻漿器3 3、振蕩法、振蕩法4 4、超聲波法、超聲波法5 5、消化法、消化法1 1、水樣、水樣2 2、氣體樣品、氣體樣品3 3、植物和動(dòng)物樣品、植物和動(dòng)物樣品4 4、土壤樣品、土壤樣品本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章1 1、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法1 1、K-DK-D濃縮器濃縮器3 3氮?dú)獯蹈煞ǖ獨(dú)獯蹈煞?、萃取劑的選擇性（極性） 2、穩(wěn)定性、毒性3、沸點(diǎn)：4080者為宜 4、萃取劑回收的難易與經(jīng)濟(jì)性5、色譜檢測(cè)器的響應(yīng) 本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章52第

18、四節(jié) 樣品制備新技術(shù)SPE ：Solid Phase Extractionn是一種液相色譜分離，利用固體吸附劑將液體樣品中的目標(biāo)化合物與干擾化合物分離，達(dá)到分離和富集目標(biāo)化合物的目的。53本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章流動(dòng)相：極性（水溶液）或中等極性固定相：非極性。分離對(duì)象：中等到非極性物質(zhì)。 54本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章分析物中的CH鍵 + 硅膠表面官能團(tuán)吸附極性溶液中的有機(jī)分析物保留在SPE。用非極性溶劑解吸吸附在固定相中的目標(biāo)物質(zhì)。 55本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章LC-18LC-18、LC-8 LC-8 ：標(biāo)準(zhǔn)的單鍵合硅膠ENVI-18ENVI-18、ENVI-8 ENV

19、I-8 ：聚合鍵合類填料ENVI-Chrom PENVI-Chrom P：苯乙烯：疏水 ENVI-CarbENVI-Carb：含碳 56本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章流動(dòng)相：非極性、中等極性固定相：極性。分析物質(zhì)：極性、中等極性、非極性57本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章 保留取決于分析物的極性官能團(tuán)與吸附劑表面的極性官能團(tuán)之間的相互作用。 用比樣品本身更極性的溶劑洗脫吸附的分析物質(zhì)。58 極性官能團(tuán)鍵合硅膠 LC-CN， LC-NH2， LC-Diol非離子表面活性劑， 9-10乙氧基群（辛基酚） 極性吸附物質(zhì) LC-Si， LC-Florisil（硅酸鎂）， ENVI-Florisil，

20、 LC-Alumina（氧化鋁）59流流動(dòng)動(dòng)相相60本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章適用于帶有電荷的化合物（水溶液、有機(jī)溶液）。原理：靜電吸引，化合物上的帶電荷基團(tuán)與鍵合硅膠上的帶電荷基團(tuán)之間的吸引。分為：陰離子交換和陽離子交換。61本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章LC-SAXLC-SAX、LC-NHLC-NH2 2：脂肪族季銨類鹽 + 硅膠62本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章LC-SCXLC-SCX：磺酸基；LC-WCXLC-WCX：羧酸基團(tuán)63本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章 目標(biāo)化合物在極性/非極性溶劑中的溶解度溶解度，這主要涉及淋洗液的選擇。 目標(biāo)化合物有無可能離子化離子化（可用調(diào)節(jié)pH值實(shí)現(xiàn)離子化）。64本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章篩板篩板篩板篩板篩板篩板65本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章66本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章67本節(jié)首頁本節(jié)首頁退出本章退出本章（1）、活化吸附劑 萃取之前要用適