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文檔簡(jiǎn)介

1、 環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的影響吉林大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心 盧 維 環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)犄影響氣候因素:溫度、濕度、氣流、風(fēng)速等。理化因素:氧、二氧化碳、粉塵、臭氣、光照、殺蟲劑、消毒劑、有害化學(xué)物質(zhì)居住因素:房舍、飼養(yǎng)籠具、墊料、給食器、供水器等。營(yíng)養(yǎng)因素:飼料、水、蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)、維生素等。生物因素:動(dòng)物的飼養(yǎng)密度、微生物、與人和其他個(gè)體之間的關(guān)系等環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的影響 環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響 影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的各種因素環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響 環(huán)境因素的重要性 環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響 溫度 濕度 氣流、氣流速度及換氣次數(shù) 音響和噪聲 照明

2、空氣中的微生物、粉塵和有害氣體 籠具、墊料和飲用水影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的主要因素R=(A+B+C)R=(A+B+C)D DE E R:動(dòng)物的總反應(yīng) A:動(dòng)物種的共同反應(yīng) B:動(dòng)物品種、品系特有的反應(yīng) C:動(dòng)物的個(gè)體反應(yīng) D:環(huán)境因素(包括實(shí)驗(yàn)處理) E:實(shí)驗(yàn)誤差 A,B,C是由實(shí)驗(yàn)動(dòng)物本身的遺傳因素決定的,被選擇 的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,在嚴(yán)格控制環(huán)境因素D或改變其中某 一條件后就可能得到一個(gè)理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果R影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的主要因素 動(dòng)物因素 環(huán)境因素 營(yíng)養(yǎng)因素 實(shí)驗(yàn)技術(shù)因素 生物因素動(dòng)物因素對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的影響 種屬因素 品系因素 年齡和體重因素 性別因素 生理狀態(tài)因素 健康狀態(tài)因素動(dòng)物因素對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的影響 同種

3、動(dòng)物因素:社會(huì)地位,勢(shì)力范圍和飼養(yǎng)密度等 動(dòng)物的爭(zhēng)斗和社會(huì)地位影響內(nèi)分泌系統(tǒng)功能 飼養(yǎng)密度大,動(dòng)物活動(dòng)受到限制,同時(shí)由于排泄 物大量增加,使溫度、濕度、有害氣體的濃度增加,患傳染病的機(jī)會(huì)增大,內(nèi)分泌和代謝也隨之發(fā)生變化同種動(dòng)物因素:社會(huì)地位、勢(shì)力范圍和飼養(yǎng)社會(huì)地位、勢(shì)力范圍和飼養(yǎng)密度等。密度等。 1.動(dòng)物為社會(huì)地位和勢(shì)力范圍相互斗動(dòng)物為社會(huì)地位和勢(shì)力范圍相互斗爭(zhēng),在同爭(zhēng),在同 一籠內(nèi)飼養(yǎng)數(shù)只雄鼠時(shí)經(jīng)常能看到。一籠內(nèi)飼養(yǎng)數(shù)只雄鼠時(shí)經(jīng)常能看到。沙鼠、倉(cāng)鼠沙鼠、倉(cāng)鼠 在配種時(shí)常有一只被咬死在配種時(shí)常有一只被咬死 2.動(dòng)物的爭(zhēng)斗影響內(nèi)分泌系統(tǒng)功能動(dòng)物的爭(zhēng)斗影響內(nèi)分泌系統(tǒng)功能 3.飼養(yǎng)密度大飼養(yǎng)密度大,

4、使動(dòng)物活動(dòng)受到限制使動(dòng)物活動(dòng)受到限制,同同時(shí)由于排泄時(shí)由于排泄 物大量增加,使溫度、濕度、有害物大量增加,使溫度、濕度、有害氣體的濃度增氣體的濃度增 加,患傳染病的機(jī)會(huì)增大,內(nèi)分泌加,患傳染病的機(jī)會(huì)增大,內(nèi)分泌和代謝也隨之和代謝也隨之 發(fā)生變化發(fā)生變化異種動(dòng)物因素:不同品種品系的動(dòng)物應(yīng)分室飼養(yǎng)例1.小鼠和貓?jiān)谕环块g內(nèi)飼養(yǎng)時(shí),就會(huì)出現(xiàn)小 鼠性周期不規(guī)則的現(xiàn)象例2.健康的豚鼠如放入有隱性感染支氣管敗血桿 菌的兔房中,豚鼠就會(huì)發(fā)病病原微生物的影響:動(dòng)物潛在性感染往往無(wú)臨床 體征和癥狀, 一旦外界條件適當(dāng)或機(jī)體免疫 功能低下時(shí),疾病便可表現(xiàn)出來。在進(jìn)行動(dòng) 物實(shí)驗(yàn)時(shí)容易激活一些潛在的病原體引起發(fā) 病,

5、影響試驗(yàn)結(jié)果。最好用SPF級(jí)的動(dòng)物進(jìn)行 實(shí)驗(yàn)環(huán)境因素對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的影響 影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的環(huán)境因素很多,所以應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行 例. 進(jìn)行毒性實(shí)驗(yàn)時(shí),室溫應(yīng)設(shè)定在22-24。在用大鼠、小鼠所做的急性毒性試驗(yàn)中,在不同室溫下所做的半數(shù)致死量不同 動(dòng)物的許多機(jī)能有年、月、日節(jié)律性的變化 例.犬和兔對(duì)輻射的反應(yīng),春夏季對(duì)輻射比在冬季敏感,所以春夏季經(jīng)輻射照射后死亡率高營(yíng)養(yǎng)因素對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的影響 蛋白質(zhì)缺乏的影響 碳水化合物缺乏的影響 脂肪缺乏的影響 礦物質(zhì)缺乏對(duì)的影響 維生素缺乏的影響 水缺乏的影響實(shí)驗(yàn)技術(shù)因素對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響 動(dòng)物的選擇準(zhǔn)備因素 實(shí)驗(yàn)季節(jié)因素 生物鐘因素 麻醉控制 實(shí)驗(yàn)技巧 實(shí)驗(yàn)用藥其他影

6、響因素 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)要按照實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范(GLP)和標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP)嚴(yán)格執(zhí)行。這些法規(guī)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、實(shí)驗(yàn)室條件、工作人員素質(zhì)、技術(shù)水平和操作方法都有明確要求??蒲腥藛T必須接受實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的培訓(xùn),持證上崗 動(dòng)物受虐待、創(chuàng)傷等刺激時(shí),其內(nèi)分泌系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)、機(jī)體代謝都與正常時(shí)不同。所以應(yīng)善待動(dòng)物,并熟練掌握各項(xiàng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù),減少對(duì)動(dòng)物的不良刺激考試題 什么是近交系動(dòng)物?近交系動(dòng)物有何特性?如何進(jìn)行命名?簡(jiǎn)述人類疾病動(dòng)物模型的分類。寫出小鼠常用生理生化指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的環(huán)境設(shè)施及控制 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,新建的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施,應(yīng)避開自然疫源地,選在環(huán)境空氣質(zhì)量及自然環(huán)境條件較好的區(qū)域,遠(yuǎn)離鐵路、碼頭、飛機(jī)場(chǎng)、交

7、通要道以及散發(fā)大量粉塵和有害氣體的工廠、儲(chǔ)存、堆場(chǎng)等有嚴(yán)重空氣污染、振動(dòng)或噪聲干擾的區(qū)域,距居民區(qū)至少50m以外,周圍最好有一定的綠化面積。生產(chǎn)和科研單位的動(dòng)物室,應(yīng)成為一個(gè)單獨(dú)區(qū)域,以防交叉感染,并保證飼養(yǎng)人員和研究人員的安全實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的環(huán)境設(shè)施及控制 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施 各等級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施及飼養(yǎng)管理實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施 飼養(yǎng)室 隔離檢疫室 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室 洗刷消毒室 庫(kù)房 工作人員用房 廢物處理設(shè)備等級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施及飼養(yǎng)管理 開放系統(tǒng) 屏障系統(tǒng) 隔離系統(tǒng)開放系統(tǒng)屏障系統(tǒng)屏障環(huán)境設(shè)施圖二屏障環(huán)境設(shè)施圖三突發(fā)停電事故,突發(fā)停電事故,“緊急預(yù)案緊急預(yù)案”的操作規(guī)程的操作規(guī)程1.動(dòng)物房必須具備雙路供電或備用電

8、機(jī),定期演練備用發(fā)電機(jī)和風(fēng)機(jī)的啟動(dòng),電源的切換和發(fā)電,確保每天24小時(shí)供電及送、排風(fēng)不間斷。2. 通知各有關(guān)人員把關(guān),在停電、停送、排風(fēng)期間,任何人不得進(jìn)出屏障區(qū)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施(繁育生產(chǎn)設(shè)施及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施)。3. 隔離環(huán)境設(shè)施在停電前、緊急發(fā)電后操作規(guī)程(1) 停電前10分鐘堵高效過濾盤的進(jìn)風(fēng)口、出風(fēng)口。(2) 緊急發(fā)電后,迅速啟動(dòng)送、排風(fēng),然后立即打開進(jìn)風(fēng)口、出風(fēng)口。 4. 屏障環(huán)境設(shè)施在停電前、緊急發(fā)電后操作規(guī)程(1) 停電前10分鐘關(guān)閉進(jìn)風(fēng)口、出風(fēng)口; 密封緩沖間、傳遞窗、淋浴間外側(cè)四周縫隙。(2)緊急發(fā)電后,迅速啟動(dòng)送、排風(fēng),然后立即打開進(jìn)風(fēng)口、出風(fēng)口及各縫隙。 工作人員操作高溫高壓滅菌

9、器藥液渡槽傳遞窗(pass box)屏障通道-淋浴室屏障區(qū)內(nèi)物品準(zhǔn)備間 屏障區(qū)內(nèi)物品儲(chǔ)藏室屏障區(qū)內(nèi)物品準(zhǔn)備間 屏障區(qū)內(nèi)飼育員更換籠具屏障區(qū)內(nèi)飼育員更換動(dòng)物飲用水屏障區(qū)內(nèi)育成動(dòng)物觀察1屏障區(qū)內(nèi)育成動(dòng)物觀察2屏障區(qū)內(nèi)育成動(dòng)物觀察3工作人員每日工作完畢清潔工作(亞清潔走廊) 屏障區(qū)內(nèi)日常維持消毒1 3.層流架 (laminar air flow rack) 1 原理與種類: 層流架的原理與種類比較多,方式也不盡相同,但性能主要有兩個(gè):即正壓型與負(fù)壓型。正壓型層流架主要用于清潔動(dòng)物或SPF動(dòng)物的飼養(yǎng)。這種類型的層流架一般都采用背面、頂部或以空氣幕的方式將潔凈的氣體送到潔凈區(qū),使?jié)崈魠^(qū)內(nèi)保持正壓。空氣經(jīng)

10、初效、高效過濾器,把過濾的氣體均勻地送入柜內(nèi)各個(gè)潔凈區(qū)。柜內(nèi)動(dòng)物代謝產(chǎn)生的污濁氣體,由統(tǒng)一的排氣管排到室外,還可以用內(nèi)外壓差,經(jīng)層流架門的縫隙排到室外。一般用于飼養(yǎng)的層流架,排除的氣體不進(jìn)行任何處理。并且,還要防止未經(jīng)過濾處理的氣體流入潔凈區(qū)。 負(fù)壓型層流架,主要用于感染動(dòng)物的飼養(yǎng)。這種負(fù)壓柜阻止了污染空氣外流,防止工作人員污染。為了實(shí)驗(yàn)操作方便,柜內(nèi)可以分為若干個(gè)小的區(qū)域,它們之間是完全隔離的,可防止動(dòng)物之間的交叉污染。進(jìn)入該柜的空氣是從室內(nèi)直接吸入并經(jīng)過初效、高效過濾器過濾后,由送風(fēng)機(jī)將潔凈的空氣送到層流架內(nèi)。污染的氣體通過背面的回風(fēng)小孔進(jìn)入回風(fēng)管。然后再經(jīng)過初效、高效過濾處理。超凈工作臺(tái)

11、(clean bench)層流柜(laminar air flow rack)大鼠層流軻(4層)尺寸:1350*700*1980mm小鼠層流架尺寸:1250*650*1950mm凈化工作臺(tái)(單人)4. 獨(dú)立送風(fēng)籠盒(IVC) 該產(chǎn)品由電氣主機(jī)箱、導(dǎo)風(fēng)通道籠架和籠盒三部分組成。其中電氣主機(jī)箱由送風(fēng)系統(tǒng)、排風(fēng)系統(tǒng)、電氣控制系統(tǒng)和溫濕度監(jiān)視系統(tǒng)組成。室內(nèi)空氣經(jīng)送風(fēng)系統(tǒng)預(yù)過濾和高效過濾器進(jìn)入導(dǎo)風(fēng)通道籠架,通過即插即用連接裝置送入到每個(gè)籠盒。從而為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物提供均勻的低流速潔凈空氣。動(dòng)物排放的廢氣經(jīng)籠架回風(fēng)管道進(jìn)入主機(jī)箱的排風(fēng)系統(tǒng),再進(jìn)行二級(jí)過濾后排放到室外?;\盒直接排放廢氣,可增加通風(fēng)效率,保持墊料干燥

12、,減少籠具更換次數(shù)。有效地防止動(dòng)物交叉感染,保障實(shí)驗(yàn)工作人員的健康安全。置于普通房間內(nèi)配合超凈工作臺(tái)可用于SPF動(dòng)物的培育、繁殖、保種和各類動(dòng)物實(shí)驗(yàn),尤其適用于飼養(yǎng)免疫缺陷動(dòng)物和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。IVC(Individually Ventilated Cages)IVC大鼠籠盒規(guī)格:470315260(mmIVC小鼠籠盒規(guī)格:310205180(mm)IVC大小鼠籠結(jié)構(gòu)圖 由籠盒、板式?jīng)_壓網(wǎng)蓋、飲水瓶及籠盒罩四部分組成。 隔離環(huán)境(Isolation condition) 1原理:隔離器必須具備五個(gè)條件(1)必須是嚴(yán)格對(duì)微生物密閉的容器,其內(nèi)部空間和內(nèi)容物能接受高壓蒸氣或化學(xué)藥品滅菌處理。(2)隔離

13、器的空間以及內(nèi)容物可隨時(shí)被觀察。(3)隔離器內(nèi)部應(yīng)隨時(shí)在視野下從外部進(jìn)行工作,但不破壞內(nèi)部的無(wú)菌環(huán)境。(4)必須裝置一個(gè)有內(nèi)外門的無(wú)菌通道,動(dòng)物或食物以及其它物品可以從外部無(wú)菌地輸送到隔離器內(nèi)部去,而不破壞內(nèi)部的無(wú)菌環(huán)境,送出時(shí)亦然。(5)必須裝置一個(gè)無(wú)菌進(jìn)出氣系統(tǒng),內(nèi)部保持適度的高氣壓。 塑料薄膜套蓋,一端在隔離器內(nèi),有內(nèi)蓋,一端在外界,有外蓋,兩蓋不能同時(shí)打開,此渡滄專為傳入傳出物品及動(dòng)物用。 2.隔離器的結(jié)構(gòu)隔離器的結(jié)構(gòu):隔離器是由隔離器體及其附屬設(shè)備組成。 (1)隔離器:常用薄膜隔離器是用0.30.5mm 厚的軟透明塑料薄膜(無(wú)毒聚乙烯)制成,呈長(zhǎng)方形箱狀(4550115cm),安放在

14、工作臺(tái)上,一側(cè)裝有橡皮手套,飼養(yǎng)人員通過手套進(jìn)行操作,不直接接觸動(dòng)物。(2)鼓風(fēng)機(jī):是隔離器的動(dòng)力設(shè)備,將潔凈空氣通向隔離器,同時(shí)維持隔離器內(nèi)的換氣次數(shù),氣流速度及正壓,空氣通過排氣閥排出。(3)滅菌渡艙:裝在隔離器的一側(cè),呈桶狀,直徑30cm,長(zhǎng)度30cm其兩端具有(4)滅菌桶:移入物品多時(shí),可放在滅菌桶內(nèi),直徑30cm,長(zhǎng)度60 70cm,桶壁有通氣小孔,并放有多層空氣濾材,內(nèi)設(shè)有漏道,放一層金屬擱板,便于取放物品,桶口封以能耐高壓的薄膜。(5)連接袖:是由和隔離器同等質(zhì)量的塑料薄膜制成,桶狀,長(zhǎng)3060cm,直徑30cm,袖壁有通氣小孔,是隔離器與滅菌桶,或兩隔離器間連接的通道,傳遞動(dòng)物

15、或物品用。(6)滅菌渡槽:是一條塑料薄膜桶,一端附于隔離器上(或滅菌渡滄),一端浸于隔離器外的藥液滅菌槽,多用于剖腹取胎。隔離器(Isolator) SSII型不銹鋼手術(shù)隔離器隔離器(Isolator)手術(shù)隔離器(operating Isolator)隔離器操作隔離環(huán)境附件1傳遞桶(pass barrel) 不銹鋼水池1006080 不銹鋼傳遞桶隔離環(huán)境附件2對(duì)接架(connect rack)隔離環(huán)境附件4滅菌箱(disinfect box)三三 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)常用的 輔助設(shè)施輔助設(shè)施(assisted facility ) 這是指在動(dòng)物房舍設(shè)施內(nèi)使用于動(dòng)物飼養(yǎng)的器具和材料,主

16、要包括籠具、籠架、飲水裝置、運(yùn)輸籠和墊料等。這些器具和物品與動(dòng)物直接接觸,產(chǎn)生的影響最直接,務(wù)必予以重視。1.飲水設(shè)備和滅菌設(shè)備 普通實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲水應(yīng)符合GB 5749的要求 。 屏障和隔離環(huán)境內(nèi)飼養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水須經(jīng)滅菌處理。大型的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施,往往裝大型的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施,往往裝設(shè)無(wú)菌水生產(chǎn)設(shè)備,用過濾系統(tǒng)和紫外線照射,設(shè)無(wú)菌水生產(chǎn)設(shè)備,用過濾系統(tǒng)和紫外線照射,來清除細(xì)菌、真菌和病毒來清除細(xì)菌、真菌和病毒。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飲水一般無(wú)需作蒸溜、離子交換或反滲透等處理,有助于動(dòng)物對(duì)微量元素的利用。 2.籠具(cage)和籠架(rack) 籠具要求能對(duì)動(dòng)物提供足夠的活動(dòng)空提供足夠的活動(dòng)空間,通風(fēng)和采光良好間,通風(fēng)和采光良好;堅(jiān)固耐用,里面的堅(jiān)固耐用,里面的動(dòng)物不會(huì)逃逸,外面的動(dòng)物不會(huì)闖進(jìn)動(dòng)物不會(huì)逃逸,外面的動(dòng)物不會(huì)闖進(jìn);操操作方便,適合于消毒、清洗和儲(chǔ)運(yùn)作方便,適合于消毒、清洗和儲(chǔ)運(yùn);成本成本低廉,經(jīng)濟(jì)實(shí)用。低廉,經(jīng)濟(jì)實(shí)用?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有多家廠商

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