正式論文劉剛

1、本科生畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）題 目: 金錢草提取物對草酸結(jié)石大鼠脾、腎組織結(jié) 構(gòu)的影響 姓 名: 劉 剛 學(xué) 院: 動物科學(xué)學(xué)院 專 業(yè): 動 物 醫(yī) 學(xué) 班 級: 2011級動醫(yī)3班 學(xué) 號: 1222110312 指導(dǎo)教師: 李 立 順 職稱: 副 教 授 2015 年 5 月 25日安徽科技學(xué)院教務(wù)處制目錄摘要.2關(guān)鍵詞.2引言.21試驗(yàn)材料與方法.31.1試驗(yàn)材料.31.1.1試驗(yàn)動物.31.1.2試劑及藥品.31.1.3試驗(yàn)飼料.31.1.4試驗(yàn)儀器和器材.31.2試驗(yàn)方法.31.2.1動物分組.31.2.2試驗(yàn)藥品配制.31.2.3動物飼養(yǎng).41.3樣品采集與處理.41.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析.

2、42結(jié)果.42.1 宰前活重和腎、脾臟指標(biāo)的變化.42.2 各組腎、脾臟切片觀察.53討論.73.1 試驗(yàn)過程中大鼠的精神狀態(tài)以及成石液對機(jī)體的影響效果. 83.2 金錢草可能發(fā)揮的抗結(jié)石成分以及對腎、脾臟的保護(hù)作用.83.3金錢草對草酸鈣結(jié)石大鼠腎體比和脾體比以及對其組織結(jié)構(gòu)的影響 8 4結(jié)論.9致謝.9參考文獻(xiàn).10英文摘要.11英文關(guān)鍵詞.11金錢草提取物對草酸結(jié)石大鼠脾、腎組織結(jié)構(gòu)的影響動物醫(yī)學(xué)專業(yè)2011級3班 劉剛指導(dǎo)教師 李立順 副教授摘要：目的 研究金錢草提取物對草酸結(jié)石大鼠脾、腎組織結(jié)構(gòu)的影響。方法 按體重相近為原則將18只大鼠分為3組，對照組、成石組和金錢草組。對照組大鼠自

3、由飲用自來水，金錢草組和成石組大鼠自由飲用由1%氯化銨和1%乙二醇配制成的成石液，對照組、成石組大鼠每日灌服生理鹽水0.3g/kg，金錢草組大鼠每日灌服金錢草水提取液0.3g/kg。持續(xù)灌服28天后，空腹一夜，稱取大鼠體重，乙醚吸入麻醉，然后取出脾、腎稱重，計(jì)算臟體比。腎臟和脾臟采用中性甲醛固定，常規(guī)石蠟切片，HE染色，觀察腎、脾組織結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果 金錢草組腎體比與成石組相比有所降低（P0.05），但不顯著；腎臟切片腎小管排列緊密，腎小球與周圍界限明顯，無結(jié)晶；成石組圖3腎小管破裂，擴(kuò)張，圖4腎小球腫大，腎小管排列松散，管壁增厚；圖5、圖6腎小管排列仍有一些松散，但是比成石組好轉(zhuǎn)，圖4腎小球

4、有腫大，圖6個別腎小球結(jié)構(gòu)模糊。脾臟圖11、12與9、10相比，組織結(jié)構(gòu)稍微完整。結(jié)論 金錢草通過利尿和排石的作用治療結(jié)石病，抵抗因結(jié)石引起的炎癥反應(yīng)，金錢草預(yù)防腎結(jié)石、保護(hù)腎臟的作用可能主要是通過增加尿中尿酸結(jié)晶的排泄，減少其在腎內(nèi)堆積而達(dá)到的，具體體現(xiàn)在增強(qiáng)輸尿管蠕動，增加尿量；降低血清尿酸、抑制草酸鈣結(jié)晶形成過程。關(guān)鍵詞：金錢草；草酸結(jié)石；大鼠；HE染色；臟體比；成石液 泌尿系統(tǒng)結(jié)石是機(jī)體異常的、病理性砂石狀或泥沙狀礦化產(chǎn)物1，主要發(fā)病部位在腎、輸尿管、膀胱。泌尿系結(jié)石2是泌尿系統(tǒng)各部位結(jié)石的統(tǒng)稱，是泌尿系統(tǒng)最常見的疾病之一。其主要礦物成分為草酸鈣,尿石中約40%左右為純草酸鈣晶體3.草

5、酸鈣晶體有3種不同的水合物形式,分別為一水合草酸鈣(COM)、二水合草酸鈣(COD)、三水合草酸鈣(COT).草酸鈣的一水化合物和二水化合物常可在尿結(jié)石中見到，而三水草酸鈣由于熱力學(xué)的不穩(wěn)定性,很少在尿石中發(fā)現(xiàn)4。泌尿系統(tǒng)結(jié)石會造成機(jī)體一系列的損傷，例如腎小管阻塞、腎小管上皮細(xì)胞受損和繼發(fā)性感染，臨床癥狀表現(xiàn)為尿路梗阻，下腹部輕微或劇烈疼痛或腎絞痛、尿血，排尿不暢易引起尿路繼發(fā)性細(xì)菌性感染，嚴(yán)重甚至影響腎臟正常功能。中醫(yī)藥在治療泌尿系結(jié)石方面取得較好的排石效果5。脾臟是體內(nèi)最大的淋巴器官，并且定居著其他免疫細(xì)胞，所以其是產(chǎn)生免疫應(yīng)答的重要場所。脾臟還具有血液濾過作用、滯留淋巴細(xì)胞作用，產(chǎn)生吞噬

6、細(xì)胞增強(qiáng)素作用等。脾臟分為被膜和實(shí)質(zhì)，實(shí)質(zhì)由白髓和紅髓兩部分組成6。中藥在預(yù)防腎結(jié)石方面具有無創(chuàng)傷性、副作用小、療效顯著的優(yōu)點(diǎn)，尤其對較小的泌尿系結(jié)石具有良好的治療及防復(fù)發(fā)的效果，而西藥對小結(jié)石和泥沙樣結(jié)石治療方面存在著效果差或無效的缺陷。體外內(nèi)藥理研究表明，金錢草中含有多種化學(xué)成分，具有利尿和排石作用7。金錢草的正品為報(bào)春花科(Primulaceae)過路黃(Lysimachia christinaeHance)的干燥全草8。金錢草對泌尿結(jié)石治療效果具體體現(xiàn)在增強(qiáng)輸尿管蠕動，增加尿量；降低血清尿酸、抑制草酸鈣結(jié)晶形成過程；調(diào)節(jié)體內(nèi)pH值；具有抗炎、殺菌、鎮(zhèn)痛、增強(qiáng)細(xì)胞免疫、抗脂質(zhì)氧化、抑制肝

7、臟脂質(zhì)過氧化等作用。金錢草作為臟器移植或自我免疫疾病的免疫抑制劑是有益的。本試驗(yàn)采用金錢草水提液對自由飲用氯化銨和乙二醇成石溶液的大鼠進(jìn)行干預(yù)性灌胃給藥，然后稱取大鼠體重，乙醚吸入麻醉，然后取出脾、腎稱重，計(jì)算臟體比，制做腎、脾臟石蠟切片并HE染色，觀察腎臟草酸鈣結(jié)晶及腎、脾臟的病理學(xué)變化，以探討金錢草抑制尿酸結(jié)石形成的干預(yù)作用及金錢草對腎、脾臟組織結(jié)構(gòu)的影響，進(jìn)一步探討金錢草的藥理作用，對尿結(jié)石的治療和機(jī)體免疫起到臨床指導(dǎo)作用。1試驗(yàn)材料與方法 1.1 試驗(yàn)材料1.1.1 試驗(yàn)動物由安徽省實(shí)驗(yàn)動物中心提供的SPF級SD大鼠18只，雄性，60日齡，體重范圍130g170g，動物生產(chǎn)許可證號SC

8、XK(皖)2011-002。實(shí)驗(yàn)鼠顆粒飼料中鈣含量1.43，磷含量0.87。大鼠飼養(yǎng)環(huán)境溫度2024，濕度5065%，光照1213h。1.1.2試劑及藥品氯化銨（NH4Cl），滬試生產(chǎn)，批號：F20050621，分析純；乙二醇（C2H6O2），國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，批號：T20110608，分析純；圖4 成石組大鼠腎臟組織切片 （HE，100×）1.1.3 試驗(yàn)飼料實(shí)驗(yàn)鼠顆粒飼料，安徽長臨河醫(yī)藥科技有限公司生產(chǎn)。1.1.4試驗(yàn)儀器和器材IEICA-RM-2128型切片機(jī)，LY-1型展片機(jī)；OLYMPUS-CH30顯微攝影系統(tǒng)；乙醇、二甲苯、伊紅、蘇木精等均為國產(chǎn)級，分析純。1

9、.2 試驗(yàn)方法1.2.1 動物分組實(shí)驗(yàn)用昆明大鼠18只，全雄性，60日齡，適應(yīng)性飼養(yǎng)1w后，按體重相近原則分為對照組、成石組、和金錢草組。每組大鼠各6只，標(biāo)記并編號。1.2.2 試驗(yàn)藥品配制成石液：1%氯化銨和1%乙二醇溶液的配制應(yīng)用電子天平稱取氯化銨5g，用10mL規(guī)格的量筒量取5mL的乙二醇，同時用500mL的量筒量取500mL的自來水，一并倒入量杯中，并用玻璃棒混勻，倒入藥瓶并標(biāo)記9。金錢草水提取物的制備：原料（采回后，切碎，在真空干燥箱中60,0.08MPa真空干燥后，置于干燥器中備用）水提（將粉碎后的稱取100g，加入八倍水浸泡，置于超聲波清洗器中進(jìn)行超聲提取，抽濾，濾渣再重復(fù)過濾兩

10、次，收集濾液，再用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至膏狀，定容到200ml容量瓶里，置于冰箱中冷藏備用）濃縮（將定容好的溶液脫水濃縮）浸膏噴霧干燥粉碎1.2.3 動物飼養(yǎng)大鼠飼養(yǎng)在蘇州市新區(qū)楓橋凈化設(shè)備廠生產(chǎn)的獨(dú)立送排風(fēng)籠具(Individual Ventitaled Cage,IVC)中進(jìn)行飼養(yǎng)，大鼠的飼養(yǎng)管理及飼養(yǎng)環(huán)境、用具的清洗、消毒均嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)范進(jìn)行。使用刨花作為大鼠墊料，墊料需經(jīng)過在陽光下曬干，紫外燈照射34h，121高溫蒸汽滅菌20min，60干燥箱內(nèi)鼓風(fēng)干燥后備用。 成石組和金錢草組大鼠自由飲用配制好的成石液，對照組大鼠自由飲用自來水，都自由采食。環(huán)境溫度2024，濕度5065%，光照1

11、213h，每周定期稱重一次。大鼠給藥采用灌胃方式，對照組和成石組灌胃生理鹽水0.3g/kg，金錢草組灌胃金錢草水提取液0.3g/kg，在持續(xù)灌胃28天后稱重并分別宰殺大鼠。試驗(yàn)過程中認(rèn)真進(jìn)行大鼠的一般檢查記錄大鼠的精神狀態(tài)、采食、飲水、活動、臨床癥狀、環(huán)境溫度與濕度及通風(fēng)等情況。1.3 樣品采集與處理 在4w時，大鼠禁食12h，不禁水過夜，逐只稱重，采血后的大鼠立即解剖去左右兩側(cè)腎和脾臟，并稱重，用濾紙吸去臟器表面血液，去除包膜，稱量腎臟和脾臟絕對重量（濕重），并按下式計(jì)算腎臟和脾臟的相對重量（腎體比和脾體比）：臟體比量（%）=臟器濕重（g）/宰前活重（g）×100。脾、右腎用4中性

12、甲醛固定，乙醇脫水、二甲苯透明、石蠟包埋。IEICA-RM-2128型切片機(jī)切片57m，HE染色，中性樹膠封片，顯微鏡下對各組織切片進(jìn)行觀察，選取結(jié)構(gòu)典型的切片用OLYMPUS-CH30顯微攝影系統(tǒng)拍攝。1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（M±SD）表示，P0.05差異顯著，P0.01差異極顯著。用spss17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析各數(shù)據(jù)之間的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2 結(jié)果2.1 宰前活重和腎、脾臟指標(biāo)的變化表1 28d各組宰前活重和腎、脾臟指標(biāo)的變化組別宰前活重（g） 腎體比（%）脾體比（%）對照組306.65±43.281.18±0.520.

13、23±0.42成石組240.73±56.07*1.32±0.570.26±0.12金錢草組216.85±39.65*1.32±0.270.19±0.34 注：與對照組比較*表示P<0.05，*表示P<0.01；與成石組比較表示P<0.05，表示P<0.01，下同由表1可以看出，與對照組相比，成石組腎體比差異不顯著(P0.05)，脾體比差異也不顯著(P0.05)，成石組的宰前活重與對照組相比有所下降，并且差異顯著（P0.05）；金錢草組宰前活重和與對照組相比有所降低，并且差異顯著（P0.05）,但腎體比

14、和脾體比差異都不顯著（P0.05）；金錢草組和成石組相比，腎體比差不多，脾體比有所降低，但差異都不顯著（P0.05）2.2 各組腎、脾臟切片觀察 圖1 對照組大鼠腎臟組織切片（HE，100×） 圖2 對照組大鼠腎臟組織切片（HE，100×） 圖3 成石組大鼠腎臟組織切片（HE,100×） 圖4成石組大鼠腎臟組織切片（HE,100×） 圖5金錢草組大鼠腎臟組織切片（HE,100×） 圖6金錢草組大鼠腎臟組織切片（HE,100×） 圖7 對照組大鼠脾臟組織切片（HE,100×） 圖8 對照組大鼠脾臟組織切片（HE,100

15、5;）圖9成石組大鼠脾臟組織切片（HE,100×） 圖10成石組大鼠脾臟組織切片（HE,100×） 圖11 金錢草組大鼠脾臟組織切片（HE,100×） 圖12金錢草組大鼠脾臟組織切片（HE，100×） 由上圖所示，對照組圖1中腎小管排列緊密，細(xì)胞分布均勻，圖2腎小球細(xì)胞核完整，與周圍界限明顯；成石組圖3中大鼠腎臟切片能明顯看見腎遠(yuǎn)曲小管中存在不規(guī)則的晶體和規(guī)則的四方形晶體（二水合草酸鈣）腎小管擴(kuò)張，管壁破裂細(xì)胞核不完整，圖4中可見腎小球細(xì)胞核破裂，囊腫，腎小管排列疏松，同時可見上皮細(xì)胞損傷，變性，脫落。由于尿酸不但可通過干擾尿液中酸性粘多糖(GAGs)的

16、抑制活性引起草酸鈣晶體沉積，而且尿酸晶體及尿酸結(jié)石碎片可以通過異相成核過程誘導(dǎo)草酸鈣形成和生長，因此，尿酸晶體常會與草酸鈣晶體互為附生生長，故而影像中可見。成石組圖3、4與對照組圖1、2比較，成石液對大鼠腎臟有損害作用，腎小球萎縮或囊腔水腫，同時腎小管能清晰可見透明不規(guī)則結(jié)晶體，成功的誘導(dǎo)成草酸結(jié)石大鼠模型。圖5、6所示，腎小管排列緊密，但細(xì)胞核分布不均勻。腎小球基本恢復(fù)正常情況，但有少數(shù)腎小球損傷。3 討論 研究表明，我國泌尿系結(jié)石成分中90%以上都為草酸鈣結(jié)石10。在我國一些地區(qū)，由于飼料資源緊缺，養(yǎng)殖場和養(yǎng)殖戶用棉副產(chǎn)品飼喂動物，從而使動物易發(fā)生尿結(jié)石（特別在產(chǎn)棉地區(qū)），直接影響了畜牧業(yè)

17、的發(fā)展和飼料資源的利用。乙二醇是草酸的前體物質(zhì)，在機(jī)體內(nèi)可轉(zhuǎn)化為草酸，從腎臟分泌排泄，氯化銨可酸化尿液，具有腎毒作用，可損害腎小管，二者協(xié)同，可形成泌尿系統(tǒng)的草酸鈣結(jié)晶11。正常對照組腎臟表面色澤均勻，切面鮮紅色，草酸鈣結(jié)石組大鼠腎臟腫大，但剖面未見異常。草酸鈣結(jié)石在腎小管的管腔內(nèi)和腎小管細(xì)胞內(nèi)形成12，金錢草干預(yù)組腎小管的管腔中未見結(jié)晶體，可能與金錢草的利水排石和溶石功效有關(guān)系，金錢草通過增加腎盂、輸尿管內(nèi)壓，促進(jìn)輸尿管蠕動13，利尿作用對腎小管起到機(jī)械性沖刷作用，可將結(jié)晶沖擊變小，有利于隨尿液排出體外，不利于結(jié)晶的形成，通過本試驗(yàn)的腎臟切片，可以看出金錢草在恢復(fù)腎小球萎縮，恢復(fù)腎小管的擴(kuò)張

18、方面起到良好的保護(hù)作用，有利于恢復(fù)草酸結(jié)石小鼠的腎臟組織結(jié)構(gòu)。本試驗(yàn)中存在一些問題，測定的指標(biāo)和腎臟切片缺乏階段性采樣和數(shù)據(jù)，不能階段性地反映草酸鈣結(jié)石的形成過程和金錢草的治療過程。在臨床應(yīng)用中金錢草主要是復(fù)方應(yīng)用，也有提取黃酮類成分應(yīng)用，給藥途徑多為灌服，注射應(yīng)用較少，王涌泉等14采用尾靜脈注射金錢草提取液，其效果相對于口服給藥，用藥用量小、腎結(jié)石形成率相對低，腎中草酸和鈣相對降低，注射液靜脈給藥消除了胃腸吸收分解，其有效成分能更直接發(fā)揮防石作用有關(guān)，但金錢草靜脈注射給藥在臨床上推廣和應(yīng)用有一定難度。草酸鈣結(jié)石的形成是復(fù)雜的病理過程，受多種因素影響，金錢草中所含多種成分均可干預(yù)草酸鈣結(jié)石的形

19、成，且金錢草的不同給藥劑量和給藥途徑的效果也不同。金錢草所含成分較多，發(fā)揮溶石和排石作用與其利尿作用、影響鈣和草酸代謝有關(guān)，金錢草中的黃酮類化合物可能是發(fā)揮排石作用的主要成分15，此外金錢草多糖可能發(fā)揮溶石作用。此外，金錢草具有抗炎16、抗氧化17-18和護(hù)腎作用。金錢草所含多種化學(xué)成分均可通過不同作用途徑和功效防治泌尿系統(tǒng)草酸結(jié)石的形成，所以治療結(jié)石具有多方面的綜合性優(yōu)勢。在臨床應(yīng)用中可合理利用金錢草與利水通淋、化瘀散結(jié)、益氣補(bǔ)腎等中藥材的配伍，以加強(qiáng)溶石和排石效果，起到防止結(jié)石復(fù)發(fā)，加強(qiáng)治療細(xì)小結(jié)石和泥沙樣結(jié)石的效果。3.1 試驗(yàn)過程中大鼠的精神狀態(tài)以及成石液對機(jī)體的影響效果試驗(yàn)過程中，對

20、照組大鼠的精神狀態(tài)較好，刺激大鼠有很強(qiáng)的應(yīng)激；成石組和金錢草組大鼠的精神萎靡，不愿活動，毛色發(fā)黃，成石組主要由于成石液對機(jī)體的腎臟造成結(jié)晶損害，金錢草組主要是成石液和藥液對大鼠的胃黏膜以及腎臟刺激作用，使得這兩組大鼠的精神狀態(tài)較差。本試驗(yàn)采用1%乙二醇和1%氯化銨飲水誘導(dǎo)大鼠形成尿酸結(jié)石模型，由表1可知，成石組大鼠宰前活重較對照組有所降低，并且差異顯著。圖3、4所示成石液對機(jī)體有損害作用，腎小管上皮細(xì)胞損傷，變性，脫落，內(nèi)黏附結(jié)晶，通過腎臟的絕對重以及圖3、4成石組腎臟切片可以得出本次試驗(yàn)成功的誘導(dǎo)了大鼠結(jié)石的形成。3.2 金錢草可能發(fā)揮的抗結(jié)石成分以及對腎、脾臟的保護(hù)作用歷代醫(yī)家在治療本病，

21、常常使用金錢草、海金沙、車前子、石韋、萹蓄、瞿麥、滑石、冬葵子等清熱利濕、通淋排石的中藥。在諸多的排石藥物中，金錢草以其顯著的臨床療效，成為治療泌尿系結(jié)石的首選藥物?，F(xiàn)代藥理研究表明：金錢草化學(xué)成分主要為黃酮類、多糖、鞣質(zhì)、甾醇、氨基酸、膽堿、氯化鉀等。其有效成分是黃酮衍生物，黃酮衍生物中的羥基可以與Ca2+配位，降低尿液中Ca2+的濃度，減小草酸鈣(CaC2O4)等的過飽和度，從而抑制含鈣結(jié)石的生長14。對尿路結(jié)石的主要成分一水草酸鈣的結(jié)晶有抑制作用，且抑制作用隨濃度的增加而增加。由上圖成石組腎、脾臟切片與對照組相比較有明顯的結(jié)晶體，同時表1顯示，成石組大鼠的腎體比和脾體比都要高于對照組，由

22、此表明本次試驗(yàn)造結(jié)石模型取得一定的成功；金錢草組大鼠腎體比和脾體比與成石組比較都有所降低，而與對照組差距不大，表明金錢草預(yù)防腎結(jié)石、保護(hù)腎臟的作用可能主要是通過增加尿中尿酸結(jié)晶的排泄，減少其在腎內(nèi)堆積而達(dá)到的15。3.3金錢草對草酸鈣結(jié)石大鼠腎體比和脾體比以及對其組織結(jié)構(gòu)的影響由表1可知，與對照組相比，成石組腎體比和脾體比有差異，但都不顯著，可能與飼喂方式與應(yīng)激有關(guān)，同時結(jié)合圖3、4能明顯看到腎小球和腎小管中有不規(guī)則的結(jié)晶存在，說明本次試驗(yàn)在一定程度上成功的誘導(dǎo)了大鼠的結(jié)石模型。金錢草組中腎體比和脾體比與成石組相比都有所下降，且較接近對照組的含量，但與對照組比較腎體比升高，而脾體比有所降低，這

23、可能與結(jié)晶的沉積或者炎性的刺激導(dǎo)致腎腫大有關(guān)。圖5、6與圖3、4相比顯示金錢草的干預(yù)作用能減少腎小管和腎小球中草酸結(jié)晶，并且對腎小球和腎小管起來保護(hù)作用。再對照圖9、10與11、12，說明金錢草對脾臟也有一定保護(hù)作用。說明金錢草對草酸結(jié)石大鼠有治療的效果，對腎、脾組織結(jié)構(gòu)有保護(hù)和預(yù)防的療效。 4 結(jié)論金錢草作為經(jīng)典治療泌尿系結(jié)石的中草藥，金錢草水提液能夠通過降低草酸鈣結(jié)石大鼠血清中和腎臟組織中的鈣含量干預(yù)草酸鈣結(jié)晶的形成和生長，金錢草水提液可減少腎小管內(nèi)草酸鈣結(jié)晶的大小和數(shù)量，減緩腎小球萎縮程度，發(fā)揮預(yù)防和治療草酸鈣結(jié)石的作用。并且可以增加尿中尿酸結(jié)晶的排泄，減少其在腎內(nèi)堆積而達(dá)到預(yù)防腎結(jié)石、

24、保護(hù)腎臟的作用，并且保護(hù)脾臟組織結(jié)構(gòu)的作用。通過本試驗(yàn)進(jìn)一步探究了其藥用價(jià)值，為開發(fā)防治尿石癥的藥物提供試驗(yàn)依據(jù)，同時也為人類防治泌尿系統(tǒng)結(jié)石病提供參考，但其詳細(xì)機(jī)制尚待進(jìn)一步研究。 致謝值此論文結(jié)束之際，非常感謝李立順老師和李靜老師對實(shí)驗(yàn)和論文的悉心指導(dǎo)，每次遇到難題，我最做的是向老師求助，而老師不管忙或閑，總會抽空幫我解決難題。老師在論文上嚴(yán)格要求、耐心指導(dǎo)、深入啟發(fā)，在論文的選題、設(shè)計(jì)、完成方面傾注了大量的心血。從老師身上我不僅學(xué)到了科研專業(yè)技能和如何發(fā)現(xiàn)解決科研問題，而且懂得了踏踏實(shí)實(shí)做人的道理，兢兢業(yè)業(yè)做科學(xué)研究的理念。特別在實(shí)驗(yàn)前為我們構(gòu)思和收集材料，在實(shí)驗(yàn)過程中給予我們及時的指導(dǎo)

25、幫助，讓我們能全身心投入到實(shí)驗(yàn)的操作當(dāng)中，使我們在實(shí)驗(yàn)中少犯錯誤，感謝他們經(jīng)常開拓我們思維，使我們的實(shí)驗(yàn)更具探究；感謝動物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室為本次實(shí)驗(yàn)提供了實(shí)驗(yàn)場所及實(shí)驗(yàn)儀器。參考文獻(xiàn)1 Ouyang J M, Duan L, Tieke B. Effects of carboxylic acids on the crystal growth of calcium oxalate nanoparticles in lecithin-water liposome systemsJ.Langmuir, 2003, 19: 8980-8985.2葉章群,鄧耀良.泌尿系結(jié)石M.北京:人民衛(wèi)生出版社,2003:

26、35-363Girija E K, Latha S C, Kalkura S N, et al Crystallization andmicrohardness of calcium oxalate monohydrateJ.Ma-ter. Chem. Phys.,1998,52:253-257.4歐陽健明.草酸鈣結(jié)石研究中的化學(xué)基礎(chǔ)J.化學(xué)通報(bào),2002,5:326-332.5邵紹豐,張愛鳴,劉耀,等.單味中藥金錢草、石韋、車前子對大鼠腎結(jié)石腎保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究P:浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志,2009,19(6):342.6鐘志勇,歐碧陽,鄭遠(yuǎn),等.金荊排石劑防治尿路結(jié)石的實(shí)驗(yàn)研究P:中成藥,200

27、7,29(7):981.7葛少祥,彭代銀,劉金旗,等.連錢草治療膽固醇結(jié)石的實(shí)驗(yàn)研究P;中藥材,2007(7):842.8周光巖主編 .免疫學(xué)原理 .上海：上?？萍嘉墨I(xiàn)出版社，20029楊玲娟,狄留慶,方蕓.中藥防治泌尿系結(jié)石概述J.中國醫(yī)院藥學(xué)志,2006,26(11):1401-1403.10張澤,李遜,歐莉莉.復(fù)雜腎結(jié)石化學(xué)成分分析J.臨床泌尿外科雜志,2003,18(12):724-725.11 鐘玲，蘇澤軒.乙二醇法復(fù)制腎結(jié)石模型給藥途徑和方法的比較J.中國病理生理雜志，2000，16(4)：381-382.12 Wahl C, Hess A. Kidney calculi is n

28、utrition a trigger or treatmentJ.Ther Umsch, 2000，57(3): 138- 145.13 曹萍，褚小蘭，范崔生.金錢草類中藥的研究概況J.江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2005，45(1)：110-113.14 王涌泉，朱寶軍，安瑞華，等. 金錢草注射液抑制鼠草酸鈣結(jié)石形成作用的研究J. 中華泌尿外科雜志，1999，20( 11)：689- 691.15 鄒志輝，崔維奇，諶輝鵬，等.金錢草黃酮提取物對大鼠腎臟草酸鈣結(jié)石形成的影響J. 中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19（4）：195-199.16 董良飛 ，高云濤 ，楊益林，等.金錢草提取物體外清除活性氧及抗氧

29、化作用研究J云南中醫(yī)中藥雜志，2006，27(3)：47-48.17 任雪峰，吳冬青，安紅鋼，等.金錢草、白玉蘭總黃酮的提取及體外抗氧化性研究J湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，(23)：120-122.18 黃海蘭，徐波，段春生.金錢草提取物的抗氧化活性及其成分研究J中國油脂，2006，31（12）：939-944.Loosestrife extract of oxalate stones rats spleen and kidney organization structureAnimal medical science 2011 (3) class Liu gangInstructor Li li

30、-shun Associate professorAbstract: objective to study the Loosestrife extract of oxalate stones rats spleen and kidney organization structure.methods According to the similar weight as the principle to 18 rats were divided into three groups, control group, stone group and Loosestrife.Freedom of the

31、control group rats drinking tap water, free Loosestrife and into stone group rats drink a mixture of 1% ammonium chloride and 1% ethylene glycol into liquid, control group, stone group rats daily irrigation saline 0.3 g/kg; Loosestrife group rats daily take Loosestrife extract water 0.3 g/kg.Continu

32、ous irrigation take 28 days, fasting overnight, weigh and rat body weight, ether inhalation anesthesia, weighing and then remove the spleen and kidney, dirty body than calculation.The kidney and spleen using neutral formaldehyde fixed, conventional paraffin section, HE stain, then observe the changes of the kidney, spleen organization structure.Results desmodium renal volume ratio and into stone group decreased (P > 0.0