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文檔簡介
1、F分析外周血細胞的儀器分析外周血細胞的儀器 分析對象以外周血中成熟細胞(紅細胞、白細胞、血小板)為主F不同發(fā)展水平的產(chǎn)品不同發(fā)展水平的產(chǎn)品 白細胞二分類白細胞二分類 三分類三分類 五分類。五分類。 模塊式自動化。模塊式自動化。u五分類五分類+推推/染片機染片機+讀片機讀片機單機自動化:篩選單機自動化:篩選F五分類儀器的發(fā)展概要五分類儀器的發(fā)展概要 u完善對成熟細胞分析的方法學(xué)完善對成熟細胞分析的方法學(xué) EO/BA、血小、血小板板u檢測幼稚細胞檢測幼稚細胞 第一代:第一代:EO、BA分析分析 第二代:第二代:RETIC分析(全自動、分類)分析(全自動、分類) 第三代:其他幼稚細胞分析(第三代:其
2、他幼稚細胞分析(NRBC、幼稚、幼稚 白細胞);血小板雙方法白細胞);血小板雙方法 網(wǎng)絡(luò)功能、擴展功能網(wǎng)絡(luò)功能、擴展功能q網(wǎng)絡(luò)時代的產(chǎn)品:多媒體功能、數(shù)據(jù)處理、遠程診斷、在線質(zhì)控q處理速度快,篩選能力強q解決第二代五分類所不能解決的問題q血小板準確性q幼稚細胞檢測q有核紅細胞檢測F方法學(xué)方法學(xué) 物理(激光、射頻、電阻)物理(激光、射頻、電阻) 細胞化學(xué)(細胞染色)細胞化學(xué)(細胞染色) 物理物理-分子生物學(xué)技術(shù)(核酸熒光染色)分子生物學(xué)技術(shù)(核酸熒光染色)F第三代物理光源:半導(dǎo)體激光第三代物理光源:半導(dǎo)體激光 壽命長:壽命長:7 - 10年年 體積小體積小 對穩(wěn)壓要求低對穩(wěn)壓要求低 更為經(jīng)濟更為
3、經(jīng)濟半導(dǎo)體激光的流式細胞術(shù)半導(dǎo)體激光的流式細胞術(shù) 側(cè)向熒光側(cè)向熒光(RNA/DNA含量)含量) 激光激光(波長(波長633nm) 側(cè)向散射側(cè)向散射(細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu),如(細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu),如核的大小)核的大?。┣跋蛏⑸涔馇跋蛏⑸涔?(細胞大?。毎笮。〧核酸染料核酸染料Polymethine(多次甲基)的作(多次甲基)的作用:用: IG:準確的未成熟粒細胞:準確的未成熟粒細胞 OTHER:異常淋巴、原粒細胞:異常淋巴、原粒細胞 更準確的更準確的WBC分類結(jié)果分類結(jié)果FIG-不成熟粒細不成熟粒細胞。胞。F可精確計數(shù)不成可精確計數(shù)不成熟粒細胞。熟粒細胞。Aty LymphBlastImmature G
4、ranBlastRFDCRBC ghostHPCHPC應(yīng)用于應(yīng)用于PBSCT與與CD-34, CFU有良好的相關(guān)性有良好的相關(guān)性分析時間僅分析時間僅40秒,不需前處理秒,不需前處理 PLT ClumpIMIIMI檢測通道檢測通道單獨通道和試劑 幼稚細胞檢測幼稚細胞檢測專用檢測通道和專用試劑專用檢測通道和專用試劑HPC 用于末梢血干細胞移植用于末梢血干細胞移植Immature GranBlastRFDCRBC ghostHPCn和和CD-34+細胞良好的相關(guān)性細胞良好的相關(guān)性,n無需任何前處理,只需無需任何前處理,只需40秒檢測時間秒檢測時間n即得知捕獲末梢血干細胞即得知捕獲末梢血干細胞 的最佳
5、時間的最佳時間PLT Clump IG 精確測定未成熟粒細胞精確測定未成熟粒細胞 Fluorescence(RNA): Polymethine & oxazine染料染料Forward Scatter(Volume)MFRHFRLFRPLTRBC-ORETWBCIRF全自動全自動RET檢測檢測DNA、RNA染色染色 IRF 用于檢測紅細胞生成用于檢測紅細胞生成前向散射光前向散射光 (體積體積)MFRHFRLFRPLT-ORBC-ORETWBCIRFn未成熟網(wǎng)織紅細胞比率未成熟網(wǎng)織紅細胞比率n有效預(yù)測下列情況的參數(shù)有效預(yù)測下列情況的參數(shù)骨髓抑制骨髓抑制 紅細胞生成的恢復(fù)期紅細胞生成的恢復(fù)期(Im
6、mature Reticulicyte Fraction)FNRBC-有核紅細胞單有核紅細胞單獨檢測計數(shù)。獨檢測計數(shù)。F可得到更準確的白細可得到更準確的白細胞分類與計數(shù)結(jié)果。胞分類與計數(shù)結(jié)果。F自動扣除自動扣除NRBC,得,得到準確的到準確的WBC。FNR Dye核酸染色:核酸染色: Polymethine染料染料NRBC散點圖散點圖WBC區(qū)域區(qū)域NRBC區(qū)域區(qū)域紅細胞碎片紅細胞碎片一般血液分析儀:一般血液分析儀:只能通過體積大小提只能通過體積大小提供供NRBC 的提示的提示W(wǎng)BC直方圖下限直方圖下限上翹上翹散點圖體積區(qū)域散點圖體積區(qū)域NRBC常常被誤算為常常被誤算為淋巴細胞淋巴細胞復(fù)檢工作量
7、大復(fù)檢工作量大NRBC檢測檢測NRBC散點圖散點圖兩步處理,兩步處理,NRBC和和WBC分界明晰分界明晰1、NR Lyse溶血素對細胞作用溶血素對細胞作用:qWBC細胞膜打孔,使活的和死亡細胞膜打孔,使活的和死亡WBC染色程度相同染色程度相同qNRBC裸核,體積與小淋巴可以區(qū)別裸核,體積與小淋巴可以區(qū)別qRBC無無DNA、RNA2、NR Dye核酸染色:核酸染色: Polymethine染料染料RBC碎片碎片NRBCWBCflfsNRBC檢測檢測專用檢測通道和專用試劑專用檢測通道和專用試劑F單獨計數(shù)單獨計數(shù)有核紅細有核紅細胞,白細胞,白細胞結(jié)果更胞結(jié)果更準確。準確。一般血液分析儀新型五分類RB
8、C/PLT通道:通道:鞘流電阻法鞘流電阻法q優(yōu)點:優(yōu)點: 電阻抗每次檢測顆粒數(shù)多,達電阻抗每次檢測顆粒數(shù)多,達20-25萬個細胞,而萬個細胞,而RET通道內(nèi)激光法每次只能檢測通道內(nèi)激光法每次只能檢測6萬個細胞,其中萬個細胞,其中PLT僅僅3000個個電阻抗法的電阻抗法的PLT數(shù)目的準確性與重復(fù)性比較好數(shù)目的準確性與重復(fù)性比較好q缺點:缺點:異常標本中的小異常標本中的小RBC、WBC碎片容易混作碎片容易混作PLT計數(shù)計數(shù)特殊病例(如化療)容易錯誤判斷出血傾向特殊病例(如化療)容易錯誤判斷出血傾向激光形態(tài)檢測激光形態(tài)檢測PLT更準確的更準確的PLT檢測結(jié)果檢測結(jié)果兩種方法檢測兩種方法檢測PLTRE
9、T/PLT-O通道通道:激光形態(tài)檢測激光形態(tài)檢測q優(yōu)點優(yōu)點激光法對激光法對PLT的形態(tài)鑒別能力強的形態(tài)鑒別能力強異常標本中的小異常標本中的小RBC、WBC碎片、或碎片、或PLT數(shù)目較少數(shù)目較少時,激光法能更準確地將時,激光法能更準確地將PLT鑒別出來鑒別出來q缺點缺點檢測顆粒數(shù)少,重復(fù)性不如電阻抗法檢測顆粒數(shù)少,重復(fù)性不如電阻抗法試劑消耗成本較電阻抗法高試劑消耗成本較電阻抗法高 激光形態(tài)檢測激光形態(tài)檢測PLT更準確的更準確的PLT檢測結(jié)果檢測結(jié)果兩種方法檢測兩種方法檢測PLTPLT-I報告報告PLT-O 用于明顯的病理性標本用于明顯的病理性標本正常正常存在存在RBC碎片,異常直方圖碎片,異常直方圖等等等等低可信度低可信度?PLT-OPLT-I/O 散射圖散射圖 直方圖直方圖( (直流阻抗法直流阻抗法)散射圖散射圖(光學(xué)法光學(xué)法)激光形態(tài)檢測激光形態(tài)檢測PLT更寬的線性范圍更寬的線性范圍0-10
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