(完整版)表皮生長因子類藥物近期研究概況及展望

1、表皮生長因子類藥物近期研究概況及展望1表皮生長因子作用及特點(diǎn)表皮生長因子系列主要包括表皮生長因子（EGF）、胰島素生長因子（IGF-1）、堿性纖維原細(xì)胞生長因子（bFGF）、酸性纖維原細(xì)胞生長因子（aFGF）。其有滋潤皮膚，消除皺紋，修復(fù)創(chuàng)傷，預(yù)防色斑等作用，另外對于人體骨骼系統(tǒng)、血液、呼吸、分泌、生殖、免疫和神經(jīng)系統(tǒng)均都有很好的調(diào)節(jié)作用。但表皮生長因子作為蛋白質(zhì)多肽類藥物，存在分子量大，難以透過皮膚角質(zhì)層，穩(wěn)定性差，半衰期短，對溫度、PH等外界環(huán)境敏感等缺點(diǎn)。2表皮生長因子類國內(nèi)外研究概況2.1 國內(nèi)市售生長因子類產(chǎn)品概況目前，國內(nèi)市售的生長因子及其衍生物劑型均為外用制劑，包括溶液劑、凍干粉

2、、凝膠劑、滴眼液等。具體如下注射用鼠神經(jīng)生長因子、凍干鼠表皮生長因子、重組人表皮生長因子衍生物滴眼液、重組人表皮生長因子凝膠、重組人表皮生長因子滴眼液、重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子凝膠、外用重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子、外用重組人表皮生長因子衍生物、外用重組人表皮生長因子、外用重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子、重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子眼用凝膠、重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子外用溶液、重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子滴眼液、外用重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子（融合蛋白）、外用凍干重組人酸性成纖維細(xì)胞生長因子等。2.2 表皮生長因子傳統(tǒng)劑型研制及應(yīng)用概況由上海大江集團(tuán)股份有限公司制藥公司于2002年研制了

3、外用凍干重組人表皮生長因子，并申報(bào)國家一類新藥。2003年由上海信誼藥業(yè)有限公司研制出了重組人表皮生長因子噴霧劑的制備方法。2009年由河北東方康星生物制藥有限公司研制了外用凍干鼠皮生長因子。2009年由第四軍醫(yī)大學(xué)研制出了一種多肽、蛋白類藥物口腔黏膜吸收劑型的組方及制備方法。有關(guān)生長因子溶液劑、乳膏劑、凝膠劑臨床應(yīng)用及其與其他藥物連用治療皮膚創(chuàng)傷等報(bào)道較多，暫不詳述。中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院陸兵選取重組人表皮生長因子為模型藥物，研究了其穩(wěn)定性，并將其分別制備成親水性凝膠劑及W/0型乳膏劑，工藝簡單，質(zhì)量可靠，使用方便。此外重組人表皮生長因子滴眼液也有見報(bào)道。2.3 在表皮生長因子新劑型應(yīng)

4、用研究概況2.3.1 脂質(zhì)體、醇質(zhì)體脂質(zhì)體作為蛋白質(zhì)類藥物載體的研究報(bào)道較多。2009年中國科學(xué)院上海藥物研究所研制出了皮膚用表皮生長因子納米脂質(zhì)載體制劑，該制劑與皮膚有良好的相容性，提高了表皮生長因子的穩(wěn)定性。2010年由孫民富將表皮細(xì)胞生長因子EGF及透皮短肽融合蛋白包合起來，制成了一種能用于防治糖尿病足壞疽的脂質(zhì)體，既保護(hù)了生長因子的活性，又增強(qiáng)了對皮膚的滲透力。2012年溫州醫(yī)學(xué)院浙江格魯斯特生物科技有限公司采用薄膜分散-凍干再水化法將FGF-10包裹起來，增加了蛋白的穩(wěn)定性及其對皮膚的滲透力，并將其用于脫發(fā)疾病的治療。北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院的馮蘇云等將微針技術(shù)與乙醇脂質(zhì)體結(jié)合應(yīng)用于重組人酸性

5、成纖維細(xì)胞生長因子的透皮吸收研究中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)微針技術(shù)與乙醇脂質(zhì)體結(jié)合能夠取得較高的重組人酸性成纖維細(xì)胞生長因子透皮效果。2.3.2 微球國內(nèi)外許多報(bào)道都選擇將生長因子類藥物進(jìn)行微囊化來提高生長因子的穩(wěn)定性。制備方法有復(fù)乳液中干燥法如VEGF/聚乳酸-聚乙醇胺、IGF/PLGA等等，但存在包封率不高，具有突釋效應(yīng)等特點(diǎn)；另外有采用乳化交聯(lián)法的如廣東藥學(xué)院石靖圓采用乳化交聯(lián)法制備空白明膠微球，再通過反復(fù)振搖離心方法制備出了轉(zhuǎn)化生長因子明膠微球，體外初步釋放結(jié)果顯示該微球具有緩釋效果。但此種方法對于水相和油相的黏度要求較高；還有采用乳化冷凝法，該法制備的緩釋微球雖然包封率高，但是載藥量低，并具有一定

6、的突釋效應(yīng)。此外還有乳化分散法，冷凍噴霧干燥法等等制備方法。復(fù)合微球的出現(xiàn)，有效抑制了普通微球的突釋，所采用的方法包括在微球的表面再包裹上PLGA、殼聚糖等保護(hù)材料等，都取得了良好的緩釋效果；另有將經(jīng)過PEG修飾的水凝膠包封在生長因子緩釋微球表面,同時(shí)采用交聯(lián)劑抑制水凝膠的降解，也取得了良好的緩釋效果。2.3.3 納米粒與微球相比，納米粒物理穩(wěn)定性更好，且生物利用度更高，靶向性更好的優(yōu)點(diǎn)。Chung等開發(fā)了用于運(yùn)載VEGF的經(jīng)肝素修飾的PLGA納米粒，37天之內(nèi)未發(fā)生突釋，且靶向性良好。Tseng等將生物素酰化的EGF(Begf)/明膠緩釋納米粒與FITC標(biāo)記的中性亂敗訴結(jié)合形成了殼-核樣的結(jié)

7、構(gòu)，驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)該結(jié)構(gòu)靶向性較強(qiáng)。由于殼聚糖具有獨(dú)特的生理和化學(xué)活性，可以保護(hù)DNA在體內(nèi)不被降解，因此尹登科等嘗試采用殼聚糖為載體，制備了殼聚糖載基因納米粒，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該納米粒能夠有效地轉(zhuǎn)入成纖維細(xì)胞中，分泌的成堿性纖維細(xì)胞生長因子能促進(jìn)纖維細(xì)胞的增值。2.3.4 凝膠劑水凝膠劑經(jīng)皮給藥系統(tǒng)的優(yōu)勢是制備工藝簡單，載藥量高，能保持皮膚水花，促進(jìn)藥物的經(jīng)皮吸收。水凝膠應(yīng)用與皮膚局部的研究較多，但關(guān)于蛋白質(zhì)類藥物的應(yīng)用報(bào)道尚不多見。2011年由中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所研制出了一種具有攜氧、抑菌材料并含有人體表皮生長因子的外用凝膠制劑。2.4經(jīng)皮給藥新技術(shù)在表皮生長因子中應(yīng)用研究概況經(jīng)皮給藥新技術(shù)包括

8、微針技術(shù)、滲透促進(jìn)劑、離子導(dǎo)入、電致孔、超聲促滲、光機(jī)械波、磁導(dǎo)入等。2.4.1 微針技術(shù)Martanto等用微針對胰島素經(jīng)皮給藥進(jìn)行了體內(nèi)研究,用微針組成的微針陣列處理大鼠皮膚,在微針刺入的同時(shí)涂抹胰島素溶液于微針處理過的皮膚處,結(jié)果表明微針增加了胰島素的經(jīng)皮滲透率,且快速穩(wěn)定地降低了大鼠的血糖水平他們還通過組織切片比較了空心微針在插入皮膚后移除微針和不移除微針兩種方式對藥液滲透率的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)微針移除后藥物滲透速率顯著高于微針停留在皮膚時(shí)的滲透速率。2.4.2離子導(dǎo)入離子導(dǎo)入是應(yīng)用適當(dāng)?shù)碾娏鞔龠M(jìn)藥物分子經(jīng)皮吸收的物理促滲方法，該方法在多肽類蛋白質(zhì)藥物的經(jīng)皮吸收中也有廣泛的應(yīng)用。國際上離子

9、導(dǎo)入在胰島素、降血鈣蘇、促黃體激素釋放激素、精氨酸抗利尿激素等多肽蛋白質(zhì)類藥物中應(yīng)用均有報(bào)道。2.4.3 微針與離子導(dǎo)入復(fù)合Chem等用離子導(dǎo)入法協(xié)同微針技術(shù)顯著提高了胰島素的經(jīng)皮給藥滲透速率胰島素的皮膚透過率比單獨(dú)使用離子導(dǎo)入高713.3倍。韓曉等采用環(huán)形排布的微針，以持續(xù)時(shí)間5ms，電壓120v的電脈沖作用于皮膚，造成水性孔道以增強(qiáng)皮膚對胰島素的透過性。實(shí)驗(yàn)證明，未經(jīng)任何處理的皮膚胰島素完全無法透過，而以微針為電極的電穿孔裝置比單純使用微針能更有效地提高胰島素的透皮效果。2.4.4 微針與超聲波導(dǎo)入復(fù)合Chem等研究如何改善大分子藥物皮膚透過率和透過速率，采用低頻中孔微針對鈣黃綠素和牛血清

10、白蛋白進(jìn)行經(jīng)皮給藥，實(shí)驗(yàn)表明微針穿刺與低頻超聲聯(lián)合使用使藥物累積透過量最大化，高于單獨(dú)使用低頻超聲給藥或微針穿刺給藥。3表皮生長因子類藥物經(jīng)皮給藥研究展望生長因子類藥物穩(wěn)定性差，半衰期短，分子量大不易透過皮膚角質(zhì)層。針對以上問題，結(jié)合國內(nèi)外研究現(xiàn)狀，現(xiàn)提出以下幾種制劑方向：3.1 醇質(zhì)體水凝膠劑含醇脂質(zhì)體,又稱乙醇脂質(zhì)體,是近年來頗受藥學(xué)和皮膚領(lǐng)域關(guān)注的新型的柔性脂質(zhì)體。乙醇脂質(zhì)體與普通脂質(zhì)體的主要區(qū)別在于乙醇包含在脂質(zhì)體囊泡中,沒有膽固醇的成分。乙醇脂質(zhì)體除了具有一般脂質(zhì)體可生物降解,無毒性,不產(chǎn)生皮膚刺激性的優(yōu)點(diǎn)外，還具有以下功能:可以與生物的細(xì)胞膜融合，將包裹的內(nèi)容物傳遞進(jìn)入細(xì)胞膜內(nèi)；易

11、于變形從而穿透皮膚屏障的各種孔隙，如穿透角質(zhì)層間的磷脂層以及毛囊皮脂腺等：乙醇脂質(zhì)體是一個(gè)兩性離子型表面活性劑，具有親油親水性，可以有效地包封各種化合物(脂溶性、水溶性分子包括蛋白質(zhì)多肽類分子)滲透到達(dá)皮膚深層。醇質(zhì)體外觀性質(zhì)為澄清、有乳光的黃色或乳白色溶液，臨床上不便于直接用于局部透皮給藥的治療，而且容易發(fā)生藥物的滲漏、聚集、融合等變化。而凝膠劑和水凝膠貼片就是一個(gè)新趨勢，此類制劑作為一種生物粘附制劑，具有載藥量大、無刺激、無致敏，生物相容性好，近年來逐漸成為臨床外用制劑的發(fā)展方向。國外有將醇質(zhì)體與凝膠、水凝膠帖片等劑型結(jié)合，或者與促滲劑、電致孔、微針等新型透皮給藥技術(shù)聯(lián)合使用，以提高經(jīng)皮給

12、藥效率。國內(nèi)也有類似報(bào)道，如閆菁華將甘草次酸醇質(zhì)體制備成水凝膠貼劑，與其空白醇質(zhì)體加甘草次酸水凝膠貼劑，甘草次酸水凝膠貼劑，甘草次酸醇水(32%)溶液水凝膠貼劑進(jìn)行體外透皮比較，結(jié)果表明甘草次酸醇質(zhì)體凝膠貼劑與其他組相比不僅能顯著增加甘草次酸的透皮速率，且增加了皮膚的累計(jì)透過量，達(dá)到緩釋效果。其他如中藥苦參方、酮洛芬、槲皮素、鹽酸青藤堿醇質(zhì)體凝膠制劑的制備研究均有報(bào)道。因此，為增加生長因子類藥物的經(jīng)皮滲透性和穩(wěn)定性并且方便給藥，降低刺激性，考慮可以將生長因子類藥物制成醇質(zhì)體凝膠制劑。3.2 傳遞體凝膠Cevc首次制備了柔性納米脂質(zhì)體（傳遞體）克服了皮膚屏障。傳遞體是一種自聚集泡囊，其主要組成成分為磷脂和表面活性劑（如膽酸鈉，去氧膽酸鈉等），通過其自身高度的變形性，在非閉合給藥的情況下以皮膚自身存在的水和梯度為驅(qū)動(dòng)力，能夠高效的通過比其自身小數(shù)倍的孔徑，水溶性、脂溶性的大分子和小分子以傳遞體作為載體能夠順利的穿過皮膚，到達(dá)體內(nèi)循環(huán)，發(fā)揮藥效?？祖面玫炔捎贸暦ê臀⑸淞鞣ㄖ苽涑隽艘葝u素傳遞體，并進(jìn)行了性能比較發(fā)現(xiàn)兩者方法制得的傳遞體包封率相近，穩(wěn)定性、變形性、透皮性均良好。舒泰神北京生物制藥股份有限公司發(fā)明了一種神經(jīng)生長因子組合物，其中，a-亞麻酸與微乳傳遞體發(fā)揮協(xié)同作用，大大提