T∕CCCMHPIE 1.3-2016 植物提取物 橙皮苷

1、TICS 11.120C 25中國醫(yī)藥保健品進(jìn)出口商會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)T/CCCMHPIE 1.32016植物提取物 橙皮苷Plant extractHesperidin2017-06-21 發(fā)布2017-07-01 實(shí)施中國醫(yī)藥保健品進(jìn)出口商會(huì)發(fā) 布前言本標(biāo)準(zhǔn)按照 GB/T 1.12009 和 GB/T 2004.12016 給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由中國醫(yī)藥保健品進(jìn)出口商會(huì)提出。本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國商務(wù)部歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：成都?xì)W康醫(yī)藥股份有限公司。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：趙卓君、劉炯、魏柳麗。IT/CCCMHPIE 1.32016植物提取物 橙皮苷1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了植物提取物 橙皮苷的技術(shù)要求、檢

2、驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則、包裝、運(yùn)輸、貯存及保質(zhì)期要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于以蕓香科植物酸橙或甜橙的干燥幼果經(jīng)提取和純化制成的提取物橙皮苷。2 規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB 4789.2 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測定GB 4789.3 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群計(jì)數(shù)GB 4789.4 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門氏菌檢驗(yàn)GB 4789.15 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)霉菌和酵母計(jì)數(shù)GB 4789.38 食品安全國家

3、標(biāo)準(zhǔn)食品 微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸埃希氏菌計(jì)數(shù)GB 5009.3 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中水分的測定 ( 第一法 )GB 5009.12 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中鉛的測定GB 5009.4 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中灰分的測定GB 5009.15 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中鎘的測定GB 5009.17 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中總汞及有機(jī)汞的測定GB 5009.11 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中總砷及無機(jī)砷的測定GB 5009.74 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑中重金屬限量試驗(yàn)3 技術(shù)要求3.1 工藝要求3.1.1 植物原料以蕓香科植物酸橙 Citrus aurantium L. 或甜橙 Citrus sine

4、nsis Osbeck 的干燥幼果為植物原料，每年 5-6 月收集自落的果實(shí)，除去雜質(zhì)，曬干或低溫干燥。3.1.2 工藝過程原料水提結(jié)晶精制干燥產(chǎn)品3.2 產(chǎn)品要求3.2.1 感官要求應(yīng)符合表 1 的規(guī)定。11表 1感官要求項(xiàng) 目要 求色澤淡黃色至黃棕色氣味無臭外觀均勻、無可見異物的粉末3.2.2 理化指標(biāo)應(yīng)符合表 2 的規(guī)定。表 2理化指標(biāo)項(xiàng) 目指 標(biāo)鑒別符合要求橙皮苷含量（以干燥品計(jì)）/% 85.0粒度（80 目的通過率）/% 95堆密度松密度 /(g/mL) 0.4緊密度 /(g/mL) 0.6水分 /% 5.0灰分 /% 0.5重金屬 ( 以 Pb 計(jì) )/(mg/kg) 10砷 (A

5、s)/(mg/kg) 1.0汞 (Hg)/(mg/kg) 0.1鎘 (Cd)/(mg/kg) 0.5鉛 (Pb)/(mg/kg) 2.03.2.3 微生物要求應(yīng)符合表 3 的規(guī)定。表 3微生物要求項(xiàng) 目指 標(biāo)細(xì)菌總數(shù) /（CFU/g） 1000霉菌及酵母菌數(shù) /（CFU/g） 100大腸桿菌不得檢出沙門氏菌不得檢出大腸菌群 /(MPN/g)不得檢出3.2.4 其他污染物其他污染物限量要求，依據(jù)不同要求，應(yīng)符合我國相關(guān)法規(guī)的規(guī)定。對(duì)于出口產(chǎn)品，應(yīng)符合出口目的國相關(guān)法規(guī)的規(guī)定。4 檢驗(yàn)方法4.1 感官檢驗(yàn)啟開試樣后，立即嗅其氣味；另取試樣適量置于白色瓷盤中，在自然光線下，觀察其色澤、外觀，并檢查有

6、無異物。4.2 鑒別試驗(yàn)按附錄 A 中 A.2.1 規(guī)定的檢驗(yàn)方法進(jìn)行測定，紅外光譜圖與標(biāo)準(zhǔn)圖譜比較，主要吸收峰的位置和相對(duì)強(qiáng)度應(yīng)一致。按附錄 A 中 A.2.2 規(guī)定的檢驗(yàn)方法進(jìn)行測定，供試品色譜中應(yīng)呈現(xiàn)與標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰保留時(shí)間相同的色譜峰。按附錄 A 中 A.2.3 規(guī)定的檢驗(yàn)方法進(jìn)行測定，供試品色譜中，在與標(biāo)準(zhǔn)品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色熒光斑點(diǎn)。4.3 理化檢測4.3.1 粒度按附錄 A 中 A.3 規(guī)定的檢驗(yàn)方法進(jìn)行測定。4.3.2 堆密度堆密度分為松密度和緊密度，按附錄 A 中 A.4 規(guī)定的檢驗(yàn)方法進(jìn)行測定。4.3.3 水分按 GB 5009.3 第一法進(jìn)行測定，稱樣量約 2g（精

7、確至 0.0001g），干燥溫度 130。4.3.4 灰分按 GB 5009.4 進(jìn)行測定，稱樣量 1.000g-2.000g，灰化溫度 560。4.3.5 橙皮苷含量橙皮苷的含量按附錄 A 中 A.5 規(guī)定的檢驗(yàn)方法進(jìn)行測定。4.3.6 重金屬(以 Pb計(jì)) 按 GB 5009.74 進(jìn)行測定。4.3.7 砷按 GB 5009.11 中第一法進(jìn)行測定。4.3.8 汞按 GB 5009.17 中第一法進(jìn)行測定。4.3.9 鎘按 GB 5009.15 中第一法進(jìn)行測定。4.3.10 鉛按 GB 5009.12 中第一法進(jìn)行測定。4.4 微生物指標(biāo)4.4.1 細(xì)菌總數(shù)按 GB 4789.2 中規(guī)定

8、的方法進(jìn)行測定。4.4.2 大腸菌群按 GB 4789.3 中規(guī)定的方法進(jìn)行測定。4.4.3 沙門氏菌按 GB 4789.4 中規(guī)定的方法進(jìn)行測定。4.4.4 霉菌和酵母菌按 GB 4789.15 中規(guī)定的方法進(jìn)行測定。4.4.5 大腸埃希氏菌按 GB 4789.38 中規(guī)定的方法進(jìn)行測定。5 檢驗(yàn)規(guī)則5.1 批檢驗(yàn)：同一工藝，在一定時(shí)間間隔內(nèi)，連續(xù)生產(chǎn)的均質(zhì)產(chǎn)品為一批。以每批的 10% 以上的包裝袋中抽取樣品，但至少不少于 3 袋。每袋按取樣計(jì)劃抽取樣品，迅速混勻后用四分法取其中的兩份，每份數(shù)量滿足最少一次全檢量，分別裝入兩個(gè)潔凈干燥的容器中，貼上標(biāo)簽，一份作檢驗(yàn)，一份留存?zhèn)洳椤?.2 檢驗(yàn)

9、分類5.2.1 出廠檢驗(yàn)產(chǎn)品出廠前應(yīng)由生產(chǎn)廠質(zhì)量檢驗(yàn)部門按本標(biāo)準(zhǔn)逐批次進(jìn)行檢驗(yàn)。出廠檢驗(yàn)項(xiàng)目：橙皮苷含量、粒度、堆密度、水分、灰分、重金屬和微生物。5.2.2 型式檢驗(yàn)型式檢驗(yàn)項(xiàng)目：除出廠檢驗(yàn)項(xiàng)目外，還有感官檢驗(yàn)、鑒別、砷、汞、鎘、鉛。型式檢驗(yàn)每 3 個(gè)月進(jìn)行一次，有下列情況之一者，亦應(yīng)進(jìn)行：a) 原料有較大變化時(shí)；b) 調(diào)整關(guān)鍵工藝時(shí)；c) 更換設(shè)備或停產(chǎn)后，重新恢復(fù)生產(chǎn)時(shí)；d) 出廠檢驗(yàn)與上次型式檢驗(yàn)結(jié)果有較大差異時(shí)。5.3 判定規(guī)則5.3.1 當(dāng)檢驗(yàn)結(jié)果有一項(xiàng)不符合本標(biāo)準(zhǔn)要求時(shí)，應(yīng)從同批產(chǎn)品中重新隨即抽取兩倍量的樣品進(jìn)行復(fù)檢，并以復(fù)檢結(jié)果為準(zhǔn)。若復(fù)檢仍有一項(xiàng)指標(biāo)不合格時(shí)，則判該批產(chǎn)品為不

10、合格。5.3.2 微生物項(xiàng)目中有任何一項(xiàng)不符合本標(biāo)準(zhǔn)要求時(shí)，即判為不合格，不再復(fù)檢。5.3.3 型式檢驗(yàn)的判定同出廠檢驗(yàn)。6 包裝、標(biāo)簽、運(yùn)輸、貯存和保質(zhì)期6.1 包裝包裝材料應(yīng)符合 GB 9685 食品容器、包裝材料用添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的要求，使用前應(yīng)對(duì)所用包裝材料進(jìn)行嚴(yán)格的衛(wèi)生檢查。6.2 標(biāo)簽包裝標(biāo)簽上應(yīng)標(biāo)注：產(chǎn)品名稱、產(chǎn)品批號(hào)、產(chǎn)品規(guī)格、凈含量、生產(chǎn)日期、保質(zhì)期、生產(chǎn)廠名、廠址、產(chǎn)地、執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)、貯存條件。外包裝桶體上應(yīng)標(biāo)有：防潮、防曬、勿重壓、朝上（朝下）等字樣或標(biāo)志。標(biāo)簽內(nèi)容清晰可見，標(biāo)簽應(yīng)粘貼牢固。6.3 運(yùn)輸運(yùn)輸時(shí)必須輕裝輕卸，不得與有毒、有害和易污染物品混裝載運(yùn)，嚴(yán)防雨淋、暴曬

11、。6.4 貯存產(chǎn)品應(yīng)貯存于清潔和干燥的倉庫中。堆碼距墻壁和地面20cm 以上、并有墊隔物，堆放高度不得超過4 桶。避免與有毒、有害、易腐、易污染等物品一起堆放。6.5 保質(zhì)期在符合規(guī)定的貯運(yùn)條件和包裝完整、未經(jīng)開啟封口的情況下，保質(zhì)期為 24 個(gè)月。附 錄A（規(guī)范性附錄） 檢驗(yàn)方法A.1 一般規(guī)定本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑和水，在沒有注明其他要求時(shí)，均指分析純?cè)噭┖?GB/T6682-2008 規(guī)定的三級(jí)水。試驗(yàn)中所用標(biāo)準(zhǔn)溶液、雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液、制劑及制品，在沒有注明有其他要求時(shí)，均按 GB/T601、GB/T602、 GB/T603 的規(guī)定制備。實(shí)驗(yàn)中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時(shí)，均指水溶液。A.2 鑒

12、別A.2.1 紅外光譜法 (IR)A.2.1.1 試劑和儀器A.2.1.1.1 溴化鉀，光譜純。A.2.1.1.2 紅外分光光度計(jì)。A.2.1.1.3 瑪瑙研缽。A.2.1.2 操作程序取供試品約 1mg，置瑪瑙研缽中，加入干燥的溴化鉀細(xì)粉約 200mg，充分研磨混勻，置于壓片磨具中， 使鋪布均勻，加壓制片；同法取干燥的溴化鉀細(xì)粉約 200mg 制成空白片。用紅外分光光度計(jì)，在 4000cm- 1400cm-1 范圍內(nèi)測定紅外光譜圖，與標(biāo)準(zhǔn)圖譜比較，主要吸收峰的位置和相對(duì)強(qiáng)度應(yīng)一致。A.2.2 高效液相色譜法（HPLC）在含量測定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)品溶液主峰的

13、保留時(shí)間一致。A.2.3 薄層色譜法（TLC）A.2.3.1 試劑、溶液和儀器A.2.3.1.1 二甲基亞砜，分析純。A.2.3.1.2 甲醇，分析純。A.2.3.1.3 乙醇，分析純。A.2.3.1.4 無水甲酸，分析純。A.2.3.1.5 乙酸乙酯，分析純。A.2.3.1.6 丁酮，分析純。A.2.3.1.7 1% 三氯化鋁乙醇溶液（g/mL）：稱取三氯化鋁 1.0g，置 100mL 容量瓶中，加入 80mL 乙醇使溶解， 再用乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得。A.2.3.1.8 橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)品，購于中國食品藥品檢定研究院A.2.3.1.9 分析天平，感量為 0.1mg。A.2.3.1.10 硅膠

14、 G 薄層板。A.2.3.1.11 展開容器。A.2.3.1.12 點(diǎn)樣器。A.2.3.1.13 電吹風(fēng)。A.2.3.1.14 恒溫烘箱。A.2.3.1.15 三用紫外光儀。A.2.3.2 操作程序取供試品 50mg，加二甲基亞砜 5mL 使溶解，用甲醇稀釋至 25mL，作為供試品溶液。另取橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)品適量，按相同方法溶解并稀釋制成每 1mL 中含 2.0mg 的溶液，作為標(biāo)準(zhǔn)品溶液。吸取上述溶液各 2l，分別點(diǎn)在同一硅膠G 薄層板上，以乙酸乙酯- 丁酮- 甲酸- 水（5:3:1:1）為展開劑，展開后，晾干，噴以 1% 三氯化鋁乙醇溶液，在 105加熱 5 分鐘，置紫外光燈（365nm）下檢視

15、。供試品色譜中，在與標(biāo)準(zhǔn)品色譜相應(yīng)的位置上，應(yīng)顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。A.3 粒度A.3.1 儀器和設(shè)備A.3.1.1 分樣篩（帶篩蓋與接收盒），80 目。A.3.1.2 天平，感量為 0.1g。A.3.2 操作程序取接收盒，將分樣篩放在接收盒上，稱取約 100g（精確至 0.1g）供試品粉末，置于分樣篩內(nèi)，將篩蓋蓋好。將分樣篩保持水平狀態(tài)，左右往返輕輕篩動(dòng) 5min，稱量接收盒內(nèi)的樣品質(zhì)量。A.3.3 計(jì)算通過率以質(zhì)量分?jǐn)?shù) w1 計(jì)，數(shù)值以表示，按式（A.1）計(jì)算：式 中 ： W1橙皮苷通過率的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%； m1 供 試 品 質(zhì) 量 ，g； m2過篩后接收盒內(nèi)樣品質(zhì)量，g。A.4 堆密度W=

16、 m2 ´ 100 %1m1（A.1）A.4.1 設(shè)備A.4.1.1 電子天平，感量為 0.1g。A.4.1.2 玻璃量筒，100mL。A.4.2 操作程序A.4.2.1 松密度的測定取潔凈、干燥的 100mL 量筒，置電子天平上，去皮，加入通過 80 目篩的樣品至（80±5）mL 處，此時(shí)不可搖動(dòng)量筒，目視讀出此時(shí)量筒中的樣品體積刻度值 v1，記錄稱樣量 m1。A.4.2.2 緊密度的測定將上述松密度項(xiàng)下的量筒放在臺(tái)面上（鋪有約 5mm 厚的橡膠），由 2cm 左右的高度自墜到臺(tái)面上， 反復(fù)此操作約 100 次，量得壓緊后的粉末體積（v0，mL），繼續(xù)上述操作約 30 次

17、，量得粉末體積（v2， mL）。當(dāng)v0 與 v2 相差小于 2mL 時(shí)，讀取體積（v3，mL），否則重復(fù)上述操作，直到符合為止。A.4.3 結(jié)果計(jì)算松密度和緊密度以質(zhì)量分?jǐn)?shù) 2 和 3 計(jì)，數(shù)值以 g/mL 表示，按式（A.2）、（A.3）計(jì)算：式 中 ： W2松密度的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，g/mL； W3緊密度的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，g/mL；W = m1v21v3W = m13 （A.2） （A.3）m1 樣 品 重 量 ，g； v1松密度測定的體積數(shù)值，mL； v3緊密度測定的體積數(shù)值，mL。A.5 含量測定A.5.1 試劑、溶液和儀器A.5.1.1 二甲基亞砜，分析純；A.5.1.2 磷酸，分析純；A.5.1

18、.3 甲醇，色譜純；A.5.1.4 水，二次蒸餾水。A.5.1.5 1% 磷酸溶液：量取磷酸 5.0mL，加入 400mL 水中，搖勻，定容至 500mL，搖勻，即得。A.5.1.6 橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)品：由“中國食品藥品檢定研究院”供應(yīng)。A.5.1.7 分析天平，感量為 0.01mg；A.5.1.8 超聲波清洗儀；A.5.1.9 高效液相色譜儀（附紫外檢測器）。A.5.2 色譜條件a) 色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠（C18）柱（4.6×150 mm，5m）；b) 流動(dòng)相：甲醇 - 水（38:62），用 1% 磷酸溶液調(diào)節(jié) pH 值至 3.2；c) 檢測波長：284nm；d) 柱溫：50；e

19、) 流速：1.50mL/min。A.5.3 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)柱效：理論塔板數(shù)按橙皮苷峰計(jì)算不得低于 2000。重復(fù)性：取標(biāo)準(zhǔn)品溶液 10l，重復(fù)進(jìn)樣 3 次，橙皮苷峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）不得大于 1.0%。拖尾因子：橙皮苷主峰的拖尾因子應(yīng)在 0.95 1.05 之間。分離度（R）：橙皮苷主峰與相鄰色譜峰之間的分離度應(yīng)大于 1.5。A.5.4 溶液的制備A.5.4.1 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備精密稱取橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)品適量（精確至0.01mg），加入二甲基亞砜，超聲處理使溶解后，取出，放冷至室溫， 加入流動(dòng)相并稀釋成每 1mL 約含 2mg 的溶液，搖勻，用 0.45m 微孔濾膜( 有機(jī)相) 過濾，取續(xù)

20、濾液，即得。A.5.4.2 供試品溶液的制備精密稱取供試品約 100mg（精確至 0.01mg），置 50mL 容量瓶中，加入 20mL 二甲基亞砜，超聲處理使溶解后，取出，放冷至室溫，加入流動(dòng)相并稀釋至刻度，搖勻。用 0.45m 微孔濾膜 ( 有機(jī)相 ) 過濾，取續(xù)濾液，即得。A.5.5 測定方法分別精密吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液、供試品溶液 10L，依次注入高效液相色譜儀，測定，按外標(biāo)百分比法計(jì)算含量。A.5.6 結(jié)果計(jì)算提取物中橙皮苷含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù) 計(jì)，數(shù)值以 % 表示，按公式（A.6）計(jì)算：6W = A1 ´ V1 ´C1 ´ P1´100%(A.6)式中：A2 ´ m1 ´(1- w4 )W6供試品中橙皮苷組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；A1供試品溶液中橙皮苷組分的峰面積； A2 標(biāo)準(zhǔn)品溶液中橙皮苷的峰面積； C1標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度，mg/mL； m1供試品的稱樣量，mg； V1供試品測試液體積，mL； P1橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)品的純