檢驗(yàn)操作規(guī)程

1、目錄目錄1第一節(jié)環(huán)氧乙烷殘留量分析方法1第二節(jié)持粘性檢驗(yàn)操作規(guī)范3第三節(jié)剝離強(qiáng)度檢驗(yàn)操作規(guī)范5第四節(jié)無菌檢驗(yàn)操作規(guī)程7第五節(jié)pH值測定操作規(guī)程15第六節(jié)電導(dǎo)率檢查法操作規(guī)程18第七節(jié)酸堿度試驗(yàn)方法22第八節(jié)蒸發(fā)殘?jiān)囼?yàn)方法25第九節(jié)沉降菌檢測方法26第十節(jié)敷料中甲殼素含量測定29第十一節(jié)醫(yī)用高分子夾板檢測項(xiàng)目及操作步驟31第十二節(jié)純化水檢測32附錄：原材料及產(chǎn)品的檢驗(yàn)規(guī)程33第一節(jié)環(huán)氧乙烷殘留量分析方法一、比色分析1、原理：環(huán)氧乙烷在酸性條件下水解成乙二醇，乙二醇經(jīng)高碘酸氧化生成甲醛，甲醛與品紅一亞硫酸試液反應(yīng)產(chǎn)生紫紅色化合物，通過比色分析可求得環(huán)氧乙烷的含量。2、試劑的配制0.lmol/L鹽

2、酸：取9m1鹽酸稀釋至1000m10.5%高碘酸溶液：稱取高碘酸0.5g稀釋至100mt硫代硫酸鈉溶液：稱取硫代硫酸鈉1g,釋至100m1a10%E硫酸鈉溶液：稱取10.0g無水亞硫酸鈉，溶解后稀釋至100m1品紅一亞硫酸試液：稱取0.1g品紅，加入120m1熱水溶解，冷卻后加入10%IE硫酸鈉溶液20m1,鹽酸2m1,置于暗處。試液應(yīng)無色，若發(fā)現(xiàn)有微紅色，應(yīng)重新配制。乙二醇標(biāo)準(zhǔn)貯備液：取一外部干燥、清潔的50m1容量瓶，加水約30m1,精確稱重。移取0.5m1乙二醇，迅速加入瓶中，搖勻，精密稱取重量。兩次稱重之差即為溶液年所含乙二醇的重量，加水至刻度，混勻，按式計(jì)算其濃度：C=(W/50)X

3、1000式中:C一乙二醇標(biāo)準(zhǔn)貯備液濃度，g/LW一溶液中乙二醇重量，g乙二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液(濃度C1=CX10-3：精確移取標(biāo)準(zhǔn)貯備液1.Oml,用水稀釋至1000m13、試液制備試液制備應(yīng)在取樣后立即進(jìn)行，否則應(yīng)將試樣封存?zhèn)溆?。將樣品截?mmfc碎塊，稱取2.0g置于具塞的玻璃容器中，加入0.lmol/L鹽酸10m1密塞，室溫放置1小時(shí)。4、試驗(yàn)步驟：a、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：取五支納氏比色管，精密加入0.lmol/L鹽酸2m1,再精確加入0.5m1,1.0ml,1.5ml,2.0ml.2.5ml、乙二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液。另一支納氏比色管，精確加入0.lmol/L鹽酸2ml作為空白對照。于上述各管中分加盟加入

4、0.5%高碘酸溶液0.4ml,放置1小時(shí)。然而，分別滴加硫代硫酸鈉溶液至出現(xiàn)的黃色恰好消失。再分別加入品紅一亞硫酸試液0.2m1,用蒸儲(chǔ)水稀釋至lOml,室溫放置1小時(shí)，于560nm波長處以空白液作為參比，測定吸光度。繪制吸光度一體積標(biāo)準(zhǔn)曲線。b、樣品測定：精確移取試液2.Oml于納氏比色管中，按標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下方法同法試驗(yàn)，以測得吸光度并從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得試液相應(yīng)的體積。5、結(jié)果計(jì)算環(huán)氧乙烷殘留量用絕對含量或相對含量表示。按下式計(jì)算樣品中環(huán)氧乙烷的絕對含量：WE0=1.775vl.cl.m式中WO一單位產(chǎn)品中環(huán)氧乙烷絕對含量，mg（即每個(gè)樣品中乙二醇的含量）V1標(biāo)準(zhǔn)曲線上找出的試液相應(yīng)的體積，ml

5、Cl一乙二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，g/Lm一單位產(chǎn)品的質(zhì)量，g.按下式計(jì)算樣品中環(huán)氧乙烷的相含量：WE0=1.775vl.cl.mWeo一單位產(chǎn)品中環(huán)氧乙烷相對含量，mg/kgV1標(biāo)準(zhǔn)曲線上找出的試液相應(yīng)的體積，mlCl一乙二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，g/Lo第二節(jié)持粘性檢驗(yàn)操作規(guī)范1 .目的：規(guī)范持粘性檢驗(yàn)的操作標(biāo)準(zhǔn)。2 .范圍：適用于本公司生產(chǎn)的無菌敷料貼類產(chǎn)品出廠檢驗(yàn)。3 .責(zé)任：技術(shù)質(zhì)量部QC負(fù)責(zé)實(shí)施。4 .內(nèi)容：1)使用儀器：高溫老化試驗(yàn)箱不銹鋼板滾子儀器狀態(tài)：工作正常2)試驗(yàn)方法：4.1 試驗(yàn)前將粘貼膠帶卷或粘貼膠帶片進(jìn)行狀態(tài)調(diào)節(jié)24h04.1.1 對于條狀試樣，試驗(yàn)前將粘貼膠帶卷以約30cm/s的

6、速度展開，裁取60mm£的試片后立即試驗(yàn)。如果供試材料寬度大于25mm則在25mm勺試樣寬度上進(jìn)行；4.1.2 對于片狀試樣，試驗(yàn)前去除保護(hù)物，裁取相應(yīng)尺寸的試樣后立即進(jìn)行試驗(yàn)；4.1.3 試驗(yàn)期間注意不弄臟粘貼表面。4.2 將備好的試樣一端粘貼與不銹鋼板的清潔表面接觸，使試樣的端部的整個(gè)寬度與距鋼板端面25mm處對齊，使試樣兩邊平等于鋼板的長邊，試樣未粘貼端懸于鋼板該端面以外。注：粘貼試樣時(shí)，要確保試樣與鋼板之間沒有氣泡。4.3 用滾子向試樣粘貼部分施加壓力，以約60cm/min的速度沿試樣長度方向滾壓四次，并使其在標(biāo)準(zhǔn)大氣壓下停放10min。4.4 在試樣端線部做一標(biāo)記線，在試樣

7、的懸掛端按每厘米0.8N(80g)貼一重物，施力要均勻分布與整個(gè)帶寬上。4.5 將鋼板懸掛于36c38c熱空氣烘箱內(nèi)30min,使鋼板與垂直呈2傾斜。以防止試樣與鋼板剝離，并能使重物懸掛。對另外4個(gè)試樣重復(fù)這一步驟。4.6 對于彈性很大的產(chǎn)品，在所施加的重力與試樣之間貼一段相同寬度的無伸展性的粘貼帶。4.7 如果供試材料的寬度是25mm需在試樣上貼一段非彈性的粘貼膠帶（長約60mm寬度與試樣相同），使膠帶的未粘貼部分懸掛于不銹鋼板的端部，使其懸掛生物時(shí)受力均勻。檢測結(jié)果:句號(hào)項(xiàng)目12345678不合格數(shù)持粘性單項(xiàng)結(jié)論：經(jīng)檢測標(biāo)準(zhǔn)要求第三節(jié)剝離強(qiáng)度檢驗(yàn)操作規(guī)范1 .目的：規(guī)范剝離強(qiáng)度檢驗(yàn)的操作標(biāo)

8、準(zhǔn)。2 .范圍：適用于本公司生產(chǎn)的無菌敷料貼類產(chǎn)品出廠檢驗(yàn)。3 .責(zé)任：技術(shù)質(zhì)量部QC負(fù)責(zé)實(shí)施。4 .內(nèi)容：1）使用儀器：數(shù)顯拉力計(jì)高溫老化試驗(yàn)箱不銹鋼板滾子儀器狀態(tài)：工作正常2）試驗(yàn)方法：2.1 試驗(yàn)前將粘貼膠帶卷或粘貼膠帶片進(jìn)行狀態(tài)調(diào)節(jié)24h02.1.1 對于條狀試樣，試驗(yàn)前將粘貼膠帶卷以約30cm/s的速度展開，裁取400m#的試片后立即試驗(yàn)。如果供試材料寬度不足25mm則用整個(gè)寬度。如果供試材料寬度大于25mm則在25mm勺試樣寬度上進(jìn)行；2.1.2 對于片狀試樣，試驗(yàn)前去除保護(hù)物，裁取相應(yīng)尺寸的試樣后立即進(jìn)行試驗(yàn)；2.1.3 試驗(yàn)期間注意不弄臟粘貼表面。2.2 將試樣貼于不銹鋼板的清

9、潔表面的中央，使試樣的兩邊平行于鋼板的兩個(gè)長邊。2.3 用滾子向試樣粘貼部分施加壓力，以約60cm/min的速度沿試樣長度方向滾壓四次，并使其在標(biāo)準(zhǔn)大氣壓下停放10min。2.4 用力值讀數(shù)在滿量程的15豚85叱間的適宜的測力儀器，測定從鋼板剝離試樣所需的力（施加角為180°,剝離速度為270mm/min330mm/mii）。2.5 觀測第一個(gè)25mnfe度處施加的作用力，每30mmp!測一次作用力，取六個(gè)讀數(shù)的平均值。2.6 對另外4個(gè)試樣重復(fù)進(jìn)行試驗(yàn)，計(jì)算5個(gè)試樣的平均值。檢測結(jié)果：單位N、編號(hào)項(xiàng)目、12345不合格數(shù)第一次計(jì)數(shù)第二次計(jì)數(shù)第三次計(jì)數(shù)第四次計(jì)數(shù)第五次計(jì)數(shù)第六次計(jì)數(shù)剝

10、離強(qiáng)度（寬1cnj）剝離強(qiáng)度（寬1cnj）修約值單項(xiàng)結(jié)論：經(jīng)檢測標(biāo)準(zhǔn)要求第四節(jié)無菌檢驗(yàn)操作規(guī)程1目的通過無菌檢驗(yàn)，確保滅菌后產(chǎn)品能夠達(dá)到無菌的要求。2適用范圍適用于滅菌后醫(yī)療器械產(chǎn)品的無菌檢驗(yàn)。3檢驗(yàn)依據(jù)本廠企業(yè)注冊標(biāo)準(zhǔn)中國藥典二部（2010年版）GB14233.2-2005醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法第2部分：生物學(xué)試驗(yàn)方法4儀器、設(shè)備百級層流超凈工作臺(tái)、電熱干燥箱、電熱恒溫培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、壓力蒸汽滅菌器、集菌儀（器）、電子天平、PH計(jì)、冰箱、恒溫水浴鍋、酒精燈、三角燒瓶，接種環(huán)、無菌棉簽、銀子，試管架，大試管若干等。5無菌檢驗(yàn)室的環(huán)境要求5.1 無菌檢驗(yàn)應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級下

11、的局部百級的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。5.2 緩沖區(qū)與外界環(huán)境、無菌檢驗(yàn)室與緩沖區(qū)之間空氣應(yīng)保持正壓，陽性對照室與緩沖區(qū)之間空氣應(yīng)保持負(fù)壓。無菌檢驗(yàn)室與室外大氣之間靜壓差應(yīng)大于10Pa。無菌檢驗(yàn)室白室溫應(yīng)保持1826C,相對濕度：4565%5.3 無菌檢驗(yàn)室的單向流空氣區(qū)、工作臺(tái)面及環(huán)境應(yīng)定期按醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行懸浮粒子、沉降菌的監(jiān)測。每季度至少檢測一次。5.4 無菌檢驗(yàn)過程中應(yīng)同時(shí)檢查超凈工作臺(tái)單向流空氣中的菌落數(shù)：每次操作時(shí)在層流空氣所及臺(tái)面的左中右置3個(gè)營養(yǎng)瓊脂平板，暴露30min,于3035c培養(yǎng)48小時(shí)，菌落數(shù)平均應(yīng)不超過1CFU片板

12、。6無菌檢驗(yàn)前的準(zhǔn)備6.1 器具滅菌、消毒6.1.1 滅菌：試驗(yàn)過程中與供試品接觸的所有器具必須采用可靠方法滅菌。可經(jīng)電熱干燥箱180c以上干烤2小時(shí)，或置壓力蒸汽滅菌器內(nèi)121c蒸汽滅菌30分鐘后使用（根據(jù)滅菌效果驗(yàn)證決定滅菌參數(shù)）。所有的滅菌物品不應(yīng)超過2周即用畢，否則應(yīng)重新滅菌。6.1.2 消毒：凡檢驗(yàn)中使用的器材無法滅菌處理的，使用前必須經(jīng)消毒處理。如無菌檢驗(yàn)室的試管架、電子天平、工作臺(tái)面、工作人員的手、橡膠吸頭等。可采用消毒劑浸泡或擦拭。消毒劑應(yīng)每月更換，以防止產(chǎn)生耐藥菌株。6.1.3 標(biāo)識(shí)：器具的滅菌、消毒后必須做好標(biāo)識(shí)，標(biāo)明滅菌、消毒時(shí)間和使用有效期。6.2 人員、物料進(jìn)入無菌檢

13、驗(yàn)室6.2.1 開啟紫外線燈或臭氧發(fā)生器進(jìn)行空間滅菌處理，消毒時(shí)間不得少于30min。6.2.2 物料進(jìn)入無菌檢驗(yàn)室流程6.2.2.1 脫包：進(jìn)入無菌檢驗(yàn)室的物品若有雙重包裝的，需將外包裝在傳遞窗/緩沖間拆除后，傳入試驗(yàn)室。6.2.2.2 消毒：進(jìn)入無菌操作室的所有培養(yǎng)基、供試品等的外表都應(yīng)采用適用的方法進(jìn)行消毒處理，以避免將外包裝污染的微生物帶入無菌檢驗(yàn)室。6.2.2.3 傳遞：查看所有進(jìn)入無菌檢驗(yàn)室的器具上的滅菌、消毒標(biāo)識(shí)，是否在有效期內(nèi)。符合要求的經(jīng)傳遞窗傳入無菌檢驗(yàn)室。6.2.3 人員進(jìn)入無菌檢驗(yàn)室流程6.2.3.1 更鞋脫衣：在一更區(qū)脫去一般區(qū)工作鞋，穿上無菌檢驗(yàn)室工作鞋；脫去一般區(qū)

14、工作服。6.2.3.2 洗手：首先用肥皂或洗手液在手上揉擦出泡沫，再用流水連續(xù)沖洗20秒，洗凈泡沫。6.2.3.3 更衣：在二更區(qū)按照從上到下的順序穿戴無菌工作服（包括衣、帽、口罩等），要求褲子掖在上衣里，口罩掩住口鼻，帽子包裹所有頭發(fā)。6.2.3.4 手消毒：用消毒液浸泡雙手5秒以上或用浸過消毒液的棉球擦拭雙手。消毒液可用洗必泰、新潔爾滅、碘伏、75%酉精等。6.2.3.5 人員進(jìn)入：經(jīng)緩沖間進(jìn)入無菌檢驗(yàn)室。6.2.4 人員進(jìn)入無菌檢驗(yàn)室后，進(jìn)一步用消毒液擦拭工作臺(tái)面，戴無菌手套。7無菌檢驗(yàn)操作要求7.1 全過程必須嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，防止微生物污染。7.2 使用玻璃器皿應(yīng)輕取輕放，避免破損，

15、以防培養(yǎng)物擴(kuò)散。7.3 所有操作均應(yīng)在近火焰區(qū)進(jìn)行，且不得有大幅度或快速動(dòng)作，以免攪動(dòng)空氣中的塵埃微粒。7.4 使用金屬接種器具時(shí)，用前、用后均需灼燒滅菌。7.5 在接種培養(yǎng)物時(shí)，動(dòng)作應(yīng)輕、準(zhǔn)，防止培養(yǎng)物濺出，產(chǎn)生汽溶膠，造成污染。7.6 操作過程中所有的帶菌物品，用后均應(yīng)作消毒、滅菌處理。可在檢驗(yàn)過程中隨用隨時(shí)放入消毒液缸內(nèi)浸泡或消毒桶內(nèi)，或在檢驗(yàn)完成后經(jīng)傳遞窗傳至一般區(qū)，立即用壓力蒸汽滅菌鍋121c滅菌30分鐘。8培養(yǎng)基制備8.1 需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基（硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基）的制備8.1.1 所用試劑酪陳（胰酶水解）15.0g葡萄糖5.0gL-胱氨酸0.5g硫乙醇酸鈉0.5g（或硫乙醇酸）

16、（0.3ml）酵母浸出粉5.0g氯化鈉2.5g新配制的0.1%刃天青溶液1.0ml瓊脂0.75g水1000ml8.1.2 制備除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微溫溶解，調(diào)節(jié)pH為弱堿性，煮沸，濾清，加入葡萄糖和刃天青溶液，搖勻，調(diào)節(jié)pH為7.1±0.2。8.1.3 硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)劑氧化層的顏色要求在供試品接種前，培養(yǎng)基氧化層白高度不得超過培養(yǎng)基深度的1/5,否剛需經(jīng)100c水浴加熱到粉紅色消失（不超過20分鐘）迅速冷卻，只限加熱一次，并應(yīng)防止被污染。8.2 霉菌培養(yǎng)基（改良馬丁培養(yǎng)基）的制備8.2.1 所用試劑凍5.0g酵母浸出粉2.0g葡萄糖20.0g磷酸二氫鉀1.0g

17、硫酸鎂0.5g水1000m8.2.2 制備除葡萄糖外，取上述成分混和，微溫溶解，調(diào)節(jié)pH值約為6.8,煮沸，加葡萄糖溶解后，搖勻，濾清，調(diào)節(jié)pH為6.4±0.2。8.3 還可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基，按照使用說明書配制。8.4 培養(yǎng)基配制后應(yīng)盡快滅菌，避免微生物繁殖。一般采用高壓蒸汽121c滅菌30分鐘。8.5 制備好的培養(yǎng)基應(yīng)在225c保存，在3周內(nèi)使用。8.6 培養(yǎng)基的無菌性檢查每批配制的培養(yǎng)基均應(yīng)進(jìn)行無菌性檢查（可與產(chǎn)品無菌檢驗(yàn)同步進(jìn)行）。檢查時(shí)，每批培養(yǎng)基隨機(jī)取不少于5支（瓶）培養(yǎng)14天，應(yīng)無菌生長。8.7 液、沖洗液的制備9.1 0.1%蛋白陳水溶液取蛋白陳1.

18、0g,加水1000ml,微溫溶解，濾清，分裝后置入壓力蒸汽滅菌器內(nèi)，121c滅菌30分鐘后，于4c保存?zhèn)溆茫盅b后置入壓力蒸汽滅菌器內(nèi)，121C滅菌30分鐘后，于4c保存?zhèn)溆?.2 pH7,0氯化鈉-蛋白凍緩沖液取磷酸二氫鉀3.56g、磷酸氫二鉀7.23g、氯化鈉4.30g、蛋白陳1.0g,加水1000m1。微溫溶解，濾清，分裝后置入壓力蒸汽滅菌器內(nèi)，121c滅菌30分鐘后，于4c保存?zhèn)溆谩?.3 浸提介質(zhì)：9g/L無菌氯化鈉溶液，可直接從有證單位采購大輸液。10對照菌液制備10.1 無菌檢驗(yàn)所用的菌株傳代次數(shù)不得超過5代。10.2 取金黃色葡萄球的普通瓊脂斜面培養(yǎng)物，接種一白金耳至營養(yǎng)瓊脂培

19、養(yǎng)基內(nèi)，在3035c培養(yǎng)1824h后備用，同時(shí)制備0.9%氯化鈉溶7加入在6支小試管內(nèi)，每支試管內(nèi)加9.0ml的0.9%氯化鈉溶液，在壓力鍋內(nèi)經(jīng)121c滅菌30min備用。將已配好的金黃色葡萄球菌培養(yǎng)菌液取1.0ml加入第一支小試管內(nèi)，稀釋成濃度1:10的菌液；取第一支試管內(nèi)1.0ml菌液加入第二支小試管內(nèi)，稀釋成濃度1:100的菌液，同法稀釋成濃度1:106（每ml含菌量0100CFU即可）。10.3 采用平皿計(jì)數(shù)法測定活菌數(shù)。10.4 檢驗(yàn)培養(yǎng)溫度硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基，置3035c培養(yǎng)。改良馬丁培養(yǎng)基,置2328c培養(yǎng)。10.5 檢驗(yàn)12.1 如產(chǎn)品注冊標(biāo)準(zhǔn)中明確“產(chǎn)品應(yīng)經(jīng)過一個(gè)確認(rèn)過的滅

20、菌過程”，則執(zhí)行12.1項(xiàng)下各項(xiàng)。12.1.1 放樣每個(gè)滅菌批次按已驗(yàn)證的滅菌工藝，在滅菌柜內(nèi)相應(yīng)的位置放置適量菌片，滅菌后對菌片進(jìn)行無菌檢驗(yàn)。12.1.2 菌片貯存火菌前、后菌片應(yīng)按菌片說明書規(guī)定條件保存。（REVENt"司菌貯存溫度為1527C）12.1.3 接種開啟超凈工作臺(tái)單向?qū)恿鳎诖谁h(huán)境下，分別將滅菌后的菌片成對放入已滅菌的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基中。同時(shí)以未滅菌的菌片作陽性對照，以未接種的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基和未接種的改良馬丁培養(yǎng)基作為陰性對照。12.1.4 培養(yǎng)陽性對照管于3035c細(xì)菌培養(yǎng)箱培養(yǎng)4872小時(shí)。其余硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基于3035c培養(yǎng)7天。改良馬丁培養(yǎng)基于

21、2328c培養(yǎng)7天。12.1.5 結(jié)果判定培養(yǎng)后，陽性對照應(yīng)有菌生長，陰性對照和被檢樣品未見需氣菌、厭氣菌和霉菌生長的為合格。12.2 如產(chǎn)品注冊標(biāo)準(zhǔn)中明確產(chǎn)品應(yīng)進(jìn)行無菌檢驗(yàn)，則執(zhí)行12.2.112.2.5。12.2.1 抽樣根據(jù)各自的產(chǎn)品注冊標(biāo)準(zhǔn)和相應(yīng)產(chǎn)品出廠檢驗(yàn)規(guī)程的規(guī)定，對成品庫內(nèi)的產(chǎn)品進(jìn)行抽樣。一般同一個(gè)滅菌批產(chǎn)品檢驗(yàn)311個(gè)單位供試品。12.2.2 供試液準(zhǔn)備優(yōu)先采用將供試品或具有代表性的各部分直接投放入培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)的方法，如供試品不適宜直接投放，可按下列方法制備供試液，應(yīng)使浸提介質(zhì)充分洗提供試品的浸提表面，供試液制備應(yīng)按無菌操作法進(jìn)行，在制備后2小時(shí)內(nèi)使用。根據(jù)供試品具體特性選擇下

22、列方法：a）管類器具：按管內(nèi)表面積每10cm2流過管內(nèi)腔1ml浸提介質(zhì)，流量約為10ml/min,收集到無菌的容器內(nèi)。b）容器類器具：按容器內(nèi)表面積每10cm2加入浸提介質(zhì)1ml的比例，振搖數(shù)次。c）實(shí)體類器具：實(shí)體類器具按表面及每10cm2加入浸提介質(zhì)1ml,振搖數(shù)次。收集上述沖洗液或浸提介質(zhì)于無菌容器中。12.2.3 接種12.2.3.1 薄膜過濾法：優(yōu)先采用封閉式薄膜過濾器（集菌器），也可使用開放式薄膜過濾器。濾膜孔經(jīng)不大于0.45仙m0濾器和濾膜使用前應(yīng)采用適宜的方法滅菌，或直接采用無菌集菌器。a、如采用封閉式薄膜過濾器，取一副三聯(lián)式集菌器，將供試液通過集菌儀過濾，使通過每只培養(yǎng)管的量

23、基本均勻。然后通過集菌儀一只加120ml改良馬丁培養(yǎng)基，另兩只分別加入120ml硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基（其中一只做陽性對照，內(nèi)加金黃色葡萄球菌液1ml）o另取一副二聯(lián)集菌器，用同批的沖洗液或浸提介質(zhì)120ml通過集菌儀過濾（每只約50ml）,同法一只加硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基120ml,另一只加改良馬丁培養(yǎng)基120ml分別作陰性對照。b、如用一般薄膜過濾器，將供試液過濾后取出濾膜，將其剪成3等份，分別置于含50ml硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基及改良馬丁培養(yǎng)基的容器中，其中兩份作檢驗(yàn)，一份作陽性對照。12.2.3.2 直接接種法：適用于一次性使用的各種無菌敷料產(chǎn)品。a、敷料供試品：取規(guī)定數(shù)量，每個(gè)包裝以無菌操作拆開，

24、于不同部位剪取約120mg或1cmx3cm的供試品，接種于各管足以浸沒供試品的適量培養(yǎng)基中0b、無菌小型器具：直接投入含15ml以上硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基及改良馬丁培養(yǎng)基的容器中。c、一次性使用的材料：拆散或切成小碎斷，接種于各管足以浸沒供試品的適量培養(yǎng)基中。供試品按規(guī)定量分別接種至各含硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基及改良馬丁培養(yǎng)基的容器中，其中一份作陽性對照。每個(gè)容器中培養(yǎng)基的用量應(yīng)符合：接種的供試品體積不得大于培養(yǎng)基體積的10%或培養(yǎng)基的裝量足以浸沒供試品。每管培養(yǎng)基的最低用量一一硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基每管裝量不少于15ml,改良馬丁培養(yǎng)基每管裝量不少于10ml.12.2.4 培養(yǎng)、觀察上述含培養(yǎng)基的容

25、器分別置規(guī)定溫度的恒溫培養(yǎng)箱中，除陽性對照管培養(yǎng)4872小時(shí)外，其余管培養(yǎng)14天。培養(yǎng)期間應(yīng)逐日觀察并記錄是否有菌生長。如在加入供試品后、或在培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁，培養(yǎng)14天后，不能從外觀上判斷有無微生物生產(chǎn)，可取該培養(yǎng)液適量轉(zhuǎn)種至同種新鮮培養(yǎng)基中或劃線接種于斜面培養(yǎng)基上，細(xì)菌培養(yǎng)2天,真菌培養(yǎng)3天,觀察是否再出現(xiàn)渾濁或斜面有無菌生長；或取培養(yǎng)液涂片，染色，鏡檢，判斷是否有菌。12.2.5 結(jié)果判斷培養(yǎng)結(jié)束后，陽性對照管應(yīng)有菌生長，陰性對管應(yīng)澄清。否則，就判結(jié)果無效。所有供試品管均澄清，或雖顯渾濁但經(jīng)確證無菌生長，判供試品符合規(guī)定。若供試品管中任何1管顯渾濁并確證有菌生長判供試品不符合規(guī)

26、定。以一次檢出為準(zhǔn)，不得復(fù)試。當(dāng)符合下列至少一個(gè)條件時(shí)，可判試驗(yàn)結(jié)果無效；1）無菌檢驗(yàn)所用的設(shè)備及環(huán)境的微生物監(jiān)控結(jié)果不符合無菌檢驗(yàn)法的要求；2）回顧無菌實(shí)驗(yàn)過程，發(fā)現(xiàn)有可能引起微生物污染的因素；3）陰性對照管有菌生長；4）供試品管中生長的微生物經(jīng)鑒定后，確證是因無菌檢驗(yàn)中所使用的物品和（或）無菌操作技術(shù)不當(dāng)引起的；13質(zhì)量記錄附件：1、產(chǎn)品無菌檢驗(yàn)操作規(guī)程2、無菌檢驗(yàn)原始記錄菌種外購、轉(zhuǎn)種記錄培養(yǎng)基制備記錄實(shí)驗(yàn)中廢棄的帶菌物品滅菌處理記錄實(shí)驗(yàn)用稀釋液、沖洗液、緩沖液制備記錄濃菌液制備使用記錄潔凈區(qū)域凈化系統(tǒng)運(yùn)行記錄第五節(jié)pH值測定操作規(guī)程1 .目的：建立pH值測定操作規(guī)程，以達(dá)到對該項(xiàng)目檢查

27、操作規(guī)范，結(jié)果可靠。2 .范圍：本規(guī)程適用于樣品pH值的測定。3 .責(zé)任：QC負(fù)責(zé)執(zhí)行本規(guī)程的實(shí)施。4 .內(nèi)容：4.1 除另有規(guī)定外，水溶液的pH值應(yīng)以玻璃電極為指示電極，用酸度計(jì)進(jìn)行測定。酸度計(jì)應(yīng)定期檢定，使精密度和準(zhǔn)確度符合要求。4.2 儀器校正用的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液：應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)緩沖物質(zhì)配制，配制方法如下4.2.1 鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)緩沖液：將鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)緩沖液塑料袋剪開，將粉末倒入250ml容量瓶中，少量物二氧化碳蒸儲(chǔ)水沖洗塑料袋內(nèi)壁，并稀釋到刻度搖勻，即得到鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)緩沖液。4.2.2 混合磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液：將混合磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液塑料袋剪開，將粉末倒入250ml容量瓶中，少量物二

28、氧化碳蒸儲(chǔ)水沖洗塑料袋內(nèi)壁，并稀釋到刻度搖勻，即得到混合磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液。4.2.3 四硼酸鈉標(biāo)準(zhǔn)緩沖液：將四硼酸鈉標(biāo)準(zhǔn)緩沖液塑料袋剪開，將粉末倒入250ml容量瓶中，少量物二氧化碳蒸儲(chǔ)水沖洗塑料袋內(nèi)壁，并稀釋到刻度搖勻，即得到四硼酸鈉標(biāo)準(zhǔn)緩沖液。不同溫度時(shí)標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的pH值如下頁表。溫度鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)緩混合磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖四硼酸鈉標(biāo)準(zhǔn)緩沖C沖液0.5M液0.025M液0.01M104.006.929.33154.006.909.28204.006.889.23254.006.869.18304.016.859.14354.026.849.10404.036.849.07454.046.83

29、9.04504.066.839.02注：測定pH值時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格按儀器的使用說明書操作，并注意下列事項(xiàng)。4.3 注意事項(xiàng)：4.3.1 測定前，按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，選擇二種標(biāo)準(zhǔn)緩沖液，使供試液的pH值處于二者之間。4.3.2 取與供試液pH值較接近的第一種標(biāo)準(zhǔn)緩沖液對儀器進(jìn)行校正（定位），使儀器示值與表列數(shù)值一致。4.3.3 儀器定位后，再用第二種標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的表列數(shù)值相符。重復(fù)上述定位與斜率調(diào)節(jié)操作，至儀器示值與標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的規(guī)定數(shù)值相差不大于0.02pH單位。否則，須檢查儀器或更換電極后，再行校正至符合要求。4.3.4 每次更換標(biāo)準(zhǔn)緩沖液或供試液前，應(yīng)用純化水充分洗滌電極，然后將水吸盡，也可用所換的

30、標(biāo)準(zhǔn)緩沖液或供試液洗滌。4.3.5 在測定高pH值的供試品時(shí)，應(yīng)注意堿誤差的問題，必要時(shí)選用適當(dāng)?shù)牟Ａщ姌O測定。4.3.6 對弱緩沖液（如水）的pH值測定，先用鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)緩沖液校正儀器后測定供試液，并重取供試液再測，直至pH值的讀數(shù)在1分鐘內(nèi)改變不超過±0.05為止；然后再用四硼酸鈉標(biāo)準(zhǔn)緩沖液校正儀器，再如上法測定；二次pH值的讀數(shù)相差應(yīng)不超過0.1,取二次讀數(shù)的平均值為其pH值。4.3.7 配制標(biāo)準(zhǔn)緩沖液與溶解供試品的水，應(yīng)是新沸過的冷蒸儲(chǔ)水，其pH值應(yīng)為5.57.0。4.3.8 標(biāo)準(zhǔn)緩沖液一般可保存23個(gè)月，但發(fā)現(xiàn)有渾濁、發(fā)霉或沉淀等現(xiàn)象時(shí)，不能繼續(xù)使用。5 .pH試紙測

31、定pH值：5.1 檢測方法：取一小塊試紙?jiān)诒砻婷蠡虿Ａ?，用沾有待測液的玻璃棒或膠頭滴管點(diǎn)于試紙的中部，觀察顏色的變化，判斷溶液的性質(zhì)。5.2 注意：5.2.1 試紙不可直接伸入溶液。5.2.2 試紙不可接觸試管口、瓶口、導(dǎo)管口等。5.2.3 測定溶液的pH時(shí)，試紙不可事先用蒸儲(chǔ)水潤濕，因?yàn)闈櫇裨嚰埾喈?dāng)于稀釋被檢驗(yàn)的溶液，這會(huì)導(dǎo)致測量不準(zhǔn)確。正確的方法是用蘸有待測溶液的玻璃棒點(diǎn)滴在試紙的中部，待試紙變色后，再與標(biāo)準(zhǔn)比色卡比較來確定溶液的pH。5.2.4 取出試紙后，應(yīng)將盛放試紙的容器蓋嚴(yán)，以免被實(shí)驗(yàn)室的一些氣體沾污。第六節(jié)電導(dǎo)率檢查法操作規(guī)程1 .目的：建立電導(dǎo)率檢查法操作規(guī)程，達(dá)到該項(xiàng)目檢

32、查操作規(guī)范，結(jié)果可靠。2 .范圍：本標(biāo)準(zhǔn)適用于對本公司工藝用水電導(dǎo)率的檢查。3 .責(zé)任：QC負(fù)責(zé)執(zhí)行本規(guī)程。4 .內(nèi)容：4.1 本法是用于檢查制藥用水的電導(dǎo)率進(jìn)而控制水中電解質(zhì)總量的一種測定方法。4.1.1 電導(dǎo)率是表征物體導(dǎo)電能力的物理量，其值為物體電阻率的倒數(shù)，單位是S/cm(Siemens)或nS/cm。4.1.2 純水中的水分子也會(huì)發(fā)生某種程度的電離而產(chǎn)生氫離子與氫氧根離子，所以純水的導(dǎo)電能力盡管很弱，但也具有可測定的電導(dǎo)率。水的電導(dǎo)率與水的純度密切相關(guān)，水的純度越高，電導(dǎo)率越小，反之亦然。當(dāng)空氣中的二氧化碳等氣體溶于水并與水相互作用后，便可形成相應(yīng)的離子，從而使水的電導(dǎo)率增高。水中含

33、有其它雜質(zhì)離子時(shí)，也會(huì)使水的電導(dǎo)率增高。另外，水的電導(dǎo)率還與水的PH值與溫度有關(guān)。4.2 儀器和操作參數(shù)測定水的電導(dǎo)率必須使用精密的并經(jīng)校正的電導(dǎo)率儀，電導(dǎo)率儀的電導(dǎo)池包括兩個(gè)平行電極，這兩個(gè)電極通常由玻璃管保護(hù)，也可以使用其他形式的電導(dǎo)池。根據(jù)儀器設(shè)計(jì)功能和使用程度，應(yīng)對電導(dǎo)率儀定期進(jìn)行校正，電導(dǎo)池常數(shù)可使用電導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)溶液直接校正，或間接進(jìn)行儀器比對，電導(dǎo)池常數(shù)必須在儀器規(guī)定數(shù)值的土2%£圍內(nèi)。進(jìn)行儀器校正時(shí)，電導(dǎo)率儀的每個(gè)量程都需要進(jìn)行單獨(dú)校正。儀器最小分辨率應(yīng)達(dá)到0.1ps/cm,儀器精度應(yīng)達(dá)到±0.1ps/cm。4.2.1 溫度對樣品的電導(dǎo)率測定值有較大影響，電導(dǎo)率儀

34、可根據(jù)測定樣品的溫度自動(dòng)補(bǔ)償測定值并顯示補(bǔ)償后讀數(shù)。水的電導(dǎo)率采用溫度修正的計(jì)算方法所得數(shù)值誤差較大，因此本法采用非溫度補(bǔ)償模式，溫度測量的精確度應(yīng)在±2C以內(nèi)。4.3 測定法4.3.1 純化水可使用在線或離線電導(dǎo)率儀，記錄測定溫度。在表1中，測定溫度對應(yīng)的電導(dǎo)率即為限度值。如測定溫度未在表1中列出，則判為符合規(guī)定；如測定的電導(dǎo)率值大于限度值，則判為不符合規(guī)定。表1溫度和電導(dǎo)率的限度(純化水)溫度/C電導(dǎo)率/SS/cm溫度/C電導(dǎo)率/叱S/cm02.4608.1103.6709.1204.3759.7255.1809.7305.4909.7406.510010.2507.1內(nèi)插法的計(jì)

35、算公式為：T-T0K=()(ki-k0)k0Ti-T0式中k為測定溫度下的電導(dǎo)率限度值；K為表1中高于測定溫度的最接近溫度對應(yīng)的電導(dǎo)率限度值；K0為表1中低于測定溫度的最接近溫度對應(yīng)的電導(dǎo)率限度值；T為測定溫度；T1為表1中高于測定溫度的最接近溫度；T。為表1中低于測定溫度的最接近溫度；4.4 注射用水4.4.1 可使用在線或離線電導(dǎo)率儀。在表2中，不大于測定溫度的最接近溫度值，對應(yīng)的電導(dǎo)率值即為限度值。如測定的電導(dǎo)率值不大于限度值，則判為符合規(guī)定；如測定的電導(dǎo)率值大于限度值，則繼續(xù)按4.4.2進(jìn)行下一步測定4.4.2 取足夠量的水樣(不少于100ml),置適當(dāng)容器中，攪拌，調(diào)節(jié)溫度至25C,

36、劇烈攪拌，每隔5分鐘測定電導(dǎo)率，當(dāng)電導(dǎo)率值的變化小于0.1ps/cm時(shí)，記錄電導(dǎo)率值。如測定的電導(dǎo)率不大于2.1ps/cm,則判定符合規(guī)定。；如測定的電導(dǎo)率大于2.1ps/cm,繼續(xù)按4.4.3進(jìn)行下一步測定。表2溫度與電導(dǎo)率的限度（注射用水）溫度/C電導(dǎo)率/11S/cm溫度/C電導(dǎo)率/11S/cm00.6552.150.8602.2100.9652.4151.0702.5201.1752.7251.3802.7301.4852.7351.5902.7401.7952.9451.81003.0501.94.4.3 應(yīng)在上一步測定后5分鐘內(nèi)進(jìn)行，調(diào)節(jié)溫度至25C,在同一水樣中加入飽和氯化鉀溶液（

37、每100ml水樣中加入0.3ml）,測定PH值，精確值0.1PH單位（附錄VIH）,在表3中找到對應(yīng)的電導(dǎo)率限度，并與4.4.2中測得的電導(dǎo)率值比較。如4.4.2中測得的電導(dǎo)率值不大于該限度值，則判為符合規(guī)定；如4.4.2中測得的電導(dǎo)率值超出該限度值或PH值不在5.07.0范圍內(nèi),則判為不符合規(guī)定。4.5滅菌注射用水調(diào)節(jié)溫度至25C,使用離線電導(dǎo)率儀進(jìn)行測定。標(biāo)示裝量為10ml或10ml以下時(shí)，電導(dǎo)率限度為5sZcm0測定的電導(dǎo)率值不大于限度值，則判為符合規(guī)定；如測定的電導(dǎo)率值大于限度值，則判為不符合規(guī)定。表3PH值和電導(dǎo)率的限度PH值電導(dǎo)率/11S/cmPH值電導(dǎo)率/11S/cm5.04.7

38、6.12.45.14.16.22.55.23.66.32.45.33.36.42.35.43.06.52.25.52.86.62.15.62.66.72.65.72.56.83.15.82.46.93.85.92.47.04.66.02.4第七節(jié)酸堿度試驗(yàn)方法方法一1 .儀器酸度計(jì)：應(yīng)符合測定精度要求。2 .溶液的配制標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液(校正酸度計(jì)用)：按照使用說明書的方法配制。3 .供試溶液制備按產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)要求的方法制備供試溶液。4 .試驗(yàn)步驟按酸度計(jì)的使用說明書校準(zhǔn)酸度計(jì)。取供試溶液及空白對照液分別測定其pH值，計(jì)算兩者之差。注對于pH值難以穩(wěn)定的供試溶液，通常采取在相同時(shí)間內(nèi)分別測定空白對照液和

39、供試液。方法二1 .儀器分析天平：精度為0.1mg。2 .溶液的配制a) c(NaOH)=0.1mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液：配制：稱取110g氫氧化鈉，溶于100mL無二氧化碳的水中，搖勻，注入聚乙烯容器中，密閉放置至溶液清亮。用塑料管量取上層精液5.4mL,用無二氧化碳的水稀釋至1000mL搖勻。標(biāo)定：稱取于105c110c電烘箱中干燥至恒重的工作基準(zhǔn)試劑鄰苯二甲酸氫鉀0.75g,精確稱重，加無二氧化碳的水50mL容解，加2滴酚吹指示液(10g/L),用配制好的氫氧化鈉溶液滴定至溶液呈粉紅色，并保持30so同時(shí)做空白試驗(yàn)。計(jì)算：氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度以mol/L表示，按照下式計(jì)算。c(N

40、aOH)=m1000(V1-v2)m式中：m-鄰苯二甲酸氫鉀白準(zhǔn)確稱取質(zhì)量,g;V1一氫氧化鈉溶液的體積，mLV2空白試驗(yàn)氫氧化鈉溶液的體積，mLM一鄰苯二甲酸氫鉀的摩爾質(zhì)量，克每摩爾(g/mol)M(KHC8H4Q4=204.22。b) c(NaQH)=0.01mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液：臨用前精確移取a)氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液加水準(zhǔn)確稀釋10倍。c) c(HCl)=0.1mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：配制：量取9mL鹽酸，溶于1000mLzK中，搖勻。標(biāo)定：稱取于270c300c高溫爐中灼燒至恒重的工作基準(zhǔn)試劑無水碳酸鈉0.2g,用水50mL溶解，力口10滴澳甲酚綠-甲基紅指示液，用配制好的鹽酸溶液滴

41、定至溶液由綠色變?yōu)榘导t色，煮沸2分鐘，冷卻后繼續(xù)滴定至溶液再呈暗紅色。同時(shí)做空白試驗(yàn)。計(jì)算：鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度以mol/L表示，按照下式計(jì)算。m1000c二(V1-V2)M式中：m無水碳酸鈉的準(zhǔn)確稱取質(zhì)量，g；V1鹽酸溶液的體積，mLV2一空白試驗(yàn)鹽酸溶液的體積，mLM一無水碳酸鈉的摩爾質(zhì)量，克每摩爾(g/mol)M(Na2CQ3=52.994。d) c(HCl)=0.01mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：臨用前精確移取c)鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，加水準(zhǔn)確稀釋10倍。e) Tashiro指示劑：溶解0.2g甲基紅和0.1g亞甲基藍(lán)于100mL95的(V/V)乙醇中3 .供試溶液制備按產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)要求的方法制備

42、供試溶液。4 .檢驗(yàn)步驟將0.1mLTashiro指示劑加入內(nèi)有20mL供試溶液的錐形瓶中，如果溶液顏色呈紫色，則用0.01mol/L的氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定；如果呈綠色，則用0.01mol/L的鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，直至顯灰色。以消耗0.01mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液或0.01mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（以毫升為單位）作為檢驗(yàn)結(jié)果第八節(jié)蒸發(fā)殘?jiān)囼?yàn)方法1 .儀器分析天平：精度為0.1mg。2 .供試溶液制備按產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)要求的方法制備供試溶液。3 .試驗(yàn)步驟將潔凈的蒸發(fā)皿預(yù)先在（105±1）C干燥箱中烘至包重。加入產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定體積的供試溶液，置于水浴上蒸干。將蒸發(fā)皿再次放入（105土1）

43、C干燥箱中烘至包重。同法處理空白對照液，空白對照液的蒸發(fā)殘?jiān)鼞?yīng)不超過0.5mg。4 .結(jié)果計(jì)算按下列公式計(jì)算：m二叫叫悵-慟1000式中：W-蒸發(fā)殘?jiān)馁|(zhì)量，mgW11未加入供試溶液的蒸發(fā)皿質(zhì)量，g;W12一加入供試溶液的蒸發(fā)皿質(zhì)量，g；W01未加入空白液的蒸發(fā)皿質(zhì)量，g；W02一加入空白液的蒸發(fā)皿質(zhì)量，g。第九節(jié)沉降菌檢測方法1內(nèi)容1.1 質(zhì)量檢驗(yàn)人員按規(guī)定對車間潔凈區(qū)沉降菌定期進(jìn)行檢驗(yàn)，按下表1確定好采樣點(diǎn)數(shù)，每個(gè)采樣點(diǎn)需做2個(gè)培養(yǎng)皿。表1采樣點(diǎn)數(shù)（明潔凈度300.000級100級10000級100.000級<1022-322>10-<202422>20-<4

44、02822>40-<10021642>100-<200380103>200-<4006160206>400-<1000134004013注：表中面積的韓藝瑟：對于單向流（層流）潔凈室，是指送風(fēng)面面積，對于亂流潔凈室是指房間面積。1.2每點(diǎn)培養(yǎng)皿數(shù)見下表（2）級別所需90mmi養(yǎng)皿數(shù)（以沉降0.5h計(jì)）100000級2300000級2100級1410000級21.3 工作區(qū)采樣點(diǎn)位置離地點(diǎn)。1.4 沉降菌測試規(guī)程1.4.1 測試人員：測試人員必須穿戴符含該環(huán)境級別的工作服，靜態(tài)測試時(shí)，室內(nèi)人員不得多于3人。1.4.2 測試方法1.4.2.1 所用的

45、主要儀器和設(shè)備高壓消毒鍋、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿1.4.2.2 培養(yǎng)基普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基。1.4.3 采樣方法-將己制備好的培養(yǎng)皿按規(guī)定的采樣點(diǎn)的要求放置，打開培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基表面暴露0.5小時(shí)，再將培養(yǎng)皿蓋上后倒置。1.4.4 培養(yǎng)1.4.4.1 全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置與恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。1.4.4.2 在37c培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于48h01.4.4.3 每批培養(yǎng)基應(yīng)有對照試驗(yàn)，檢驗(yàn)培養(yǎng)基基本身量分否污染，可每批選定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。1.4.5 菌落計(jì)數(shù)1.4.5.1 用肉眼直接計(jì)數(shù)，標(biāo)一記或在菌落器上點(diǎn)計(jì)，然后用5-10倍放大鏡檢查，是否遺漏。1.4.5.2 若培養(yǎng)皿上有2個(gè)或2

46、個(gè)以上的菌落重疊，可分辨時(shí)仍以2個(gè)或2個(gè)以上菌落計(jì)數(shù)。1.4.6 結(jié)果計(jì)算1.4.6.1 用計(jì)數(shù)方法得出各個(gè)培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。1.4.6.2 平均菌落數(shù)的計(jì)算平均菌落數(shù)M=（M1+M2fM3+Mn）/nM:平均菌落數(shù)M1:1號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)M2:2號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)Mn:n號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)n:培養(yǎng)皿總數(shù)1.4.7 結(jié)果評定：用平菌落數(shù)判定。1.4.7.1 潔凈室（區(qū)）內(nèi)的平菌落數(shù)必須低于所選定的評定標(biāo)準(zhǔn)。1.4.7.2 若某潔凈室（區(qū)）內(nèi)的平菌落數(shù)超過評定標(biāo)準(zhǔn)，則必須對此區(qū)域先進(jìn)行消毒，然后重新采樣兩次，測試結(jié)果均須合格。潔凈室（區(qū)）空氣潔凈度級別表潔凈度級別塵粒最大允許數(shù)/立方米微生物最大允許數(shù)>0.5am>5m浮游困/立方米沉降菌/皿100級350005110.000級35