診斷——臨床常用免疫學檢查PPT課件

1、p免疫功能檢查 (immunological function) 血清免疫球蛋白檢測 血清補體檢測 細胞免疫檢測(immunoglobulin, complements, cell immune)p自身免疫檢測 (auto-antibodies) 類風濕因子測定 抗核抗體檢測 組織和細胞抗體檢測 (RF ANA other antibodies)p感染免疫檢測 (infectious immunology) 細菌感染免疫檢測 病毒感染免疫檢測 其它(寄生蟲感染、性病等）(bacterial , virus and so on )q腫瘤標志物檢測 (tumor markers) 蛋白質類腫瘤標志

2、物 糖脂類腫瘤標志物 酶類腫瘤標志物(proteins, glycolipid, enzymes markers) q器官與骨髓移植的檢測 (organ and bone marrow transplantation)p病毒肝炎血清標志物 (virus hepatitis markers)p其它 循環(huán)免疫復合物檢測、冷球蛋白檢測、丙種反應性蛋白檢測第1頁/共101頁l 血清免疫球蛋白檢測血清免疫球蛋白檢測( (Immunoglobulin test) ) l 血清補體檢測 (Complements)l 細胞免疫檢測 (Cell immune)第2頁/共101頁n概念：具有抗體活性和抗體樣結構的

3、球蛋白，由漿細胞產生，存在于體液，血液，外分泌液和一些細胞膜上。n分類: 用超速離心、免疫電泳方法可將免疫球蛋白分為五類： IgG、IgA、IgM、 IgD 、 IgE第3頁/共101頁第4頁/共101頁第5頁/共101頁第6頁/共101頁u IgG最多、占75%85%抗體活性u IgA血清型和分泌型兩種u IgM是有效的凝聚和溶解細胞的因子。最早；最先u IgD功能尚不完全清楚u IgE與變態(tài)反應有關(0.002%)第7頁/共101頁第8頁/共101頁ADCC第9頁/共101頁第10頁/共101頁 多克隆(Polyclonal)增高: IgG IgA IgM均增高 單克隆(Monoclona

4、l)增高: 僅某一種Ig增高而其他種不增高 第11頁/共101頁增高：p多克隆性增高(polyclonal elevate) 慢性感染、慢性肝病、自身免疫性疾病(chronic infection, chronic hepatitis, AID)p 單克隆性增高(monoclonal elevate) 免疫增殖性疾病 ( proliferative disease) 第12頁/共101頁第13頁/共101頁概念：單克隆B淋巴細胞異常增殖產生免疫球蛋白，具有相同結構和電泳遷徙速度，但不具有抗體活性。第14頁/共101頁第15頁/共101頁第16頁/共101頁減低：p 先天性(congenital

5、) 體液免疫缺陷和聯(lián)合免疫缺陷（先天性無（低）丙種球蛋白血癥等）p獲得性(acquired) 腎病綜合征（大量流失蛋白）、淋巴網(wǎng)狀系統(tǒng)腫瘤、病毒感染、免疫抑制劑應用第17頁/共101頁p血清免疫球蛋白檢測(Immunoglobulin test) p血清補體檢測(Complements)p細胞免疫檢測細胞免疫檢測 ( (Cell immune) )第18頁/共101頁第19頁/共101頁 p 組成：由傳統(tǒng)途徑的9種成分c1（c1q 、c1r 、c1s ）c9,旁路途徑的3種成分及其衍生物B、D 、 P 、H 、I等因子組成。p 作用：參與滅活病原體的免疫反應，也可破壞自身組織或自身細胞造成免疫

6、損傷第20頁/共101頁 第21頁/共101頁total hemolytic complement activity CH50正常值：50100 ku/L臨床意義 ： 減低 1.先天性 2.合成減少 hepatitis ,營養(yǎng)不良 3.消耗或者丟失過多 SLE 增高急性炎癥、組織損傷、某些腫瘤等。第22頁/共101頁p 補體C3檢測 C3在補體系統(tǒng)各成分中含量最多，是傳統(tǒng)途徑和旁路途徑被激活的關鍵物質。 正常值：0.851.7g/L p 補體C4檢測 C4代表補體傳統(tǒng)活化途徑，在補體活化、促進吞噬、防止免疫復合物沉著和中和病毒等方面發(fā)揮作用 。 正常值：0.220.34g/L第23頁/共101

7、頁p參見CH50減低和增高的臨床意義p C3增高在急性炎性反應更敏感p C4對判斷免疫復合物形成時補體消耗性減低更有意義第24頁/共101頁p血清免疫球蛋白檢測(Immunoglobulin test) p血清補體檢測(Complements)p細胞免疫檢測細胞免疫檢測 ( (Cell immune) )第25頁/共101頁 細胞免疫檢測(Cell immune)(Cell immune)T細胞免疫檢測B細胞免疫檢測自然殺傷細胞檢測(NK cell)細胞因子檢測(cytokine)第26頁/共101頁 T T細胞分化抗原測定細胞分化抗原測定 ( (免疫熒光法免疫熒光法; ;流式細胞）流式細胞）

8、 CDCD3 3總T T細胞 正常值： 69.4%4.86% 4.86% CDCD4 4T T輔助細胞（T TH H） 正常值： 41.17%5.28% 5.28% CDCD8 8T T抑制細胞（T TS S） 正常值： 24.58%4.02% 4.02% CD CD4 4 /CD /CD8 8 2.20.7/1 0.7/1 第27頁/共101頁第28頁/共101頁臨床意義：CDCD4 4降低病毒感染（CMV,HIV,HBV) CDCD4 4/ CD/ CD8 8增高惡性腫瘤、自身免疫性疾病、變態(tài)反應、排異反應 CDCD4 4/ CD/ CD8 8減低見于艾滋病(HIV)(HIV)、惡性腫瘤、

9、傳單及乙肝急性期。 CDCD3 3 CD CD4 4 CD CD8 8均增高T T細胞型淋巴細胞惡性疾病 (T lymphocytes malignant disease)(T lymphocytes malignant disease)第29頁/共101頁 B B細胞分化抗原測定： 應用CDCD1919、CDCD2020、 CDCD21 21 、 CDCD2222 和CDCD4040等單克隆抗體標記單個核細胞B B細胞，通過免疫熒光或流式細胞術進行檢測。 CDCD1919 為全部B B細胞共有的表面標志，B B細胞活化后不消失，是最重要的B B細胞標記分子。 CDCD22 22 為成熟B B

10、細胞的表面標志。 參考值：CDCD19 19 11.743.73 % 3.73 % 第30頁/共101頁臨床意義 升高B B細胞型急性淋巴細胞性白血病、慢性淋巴細胞白血病、BurkittBurkitt淋巴瘤等 減低無丙種球蛋白血癥、長期免疫抑制劑應用后第31頁/共101頁 自然殺傷細胞免疫檢測I.I.自然殺傷細胞（NKNK）介導天然免疫應答，它不依賴抗體和補體即能殺傷靶細胞II.II. 自然殺傷細胞（NKNK）活性可作為判斷機體抗腫瘤和抗病毒感染的指標之一第32頁/共101頁 細胞因子（cytokinecytokine）是由活化的免疫細胞和某些基質細胞分泌的，介導和調節(jié)免疫、炎癥反應的小分子多

11、肽。 IL-2IL-2、IL-6IL-6、IL-8IL-8、IL-10IL-10和TNFTNF、IFNIFN第33頁/共101頁p免疫功能檢查 p自身免疫檢測p腫瘤標志物檢測p感染免疫檢測 (infectious immune)p器官與骨髓移植的檢測 p病毒肝炎血清標志物p其它 第34頁/共101頁p類風濕因子測定p抗核抗體檢測p組織和細胞抗體檢測 第35頁/共101頁第36頁/共101頁 概念： RF是變性IgGIgG刺激機體產生的一種自身抗體，主要存在于類風濕性關節(jié)炎患者的血清和關節(jié)液內。 分型：可分為IgMIgM型、IgGIgG型、IgAIgA型等，用膠乳凝集法測出的主要是IgMIgM型

12、，速率散射比濁檢測準確定量分析，用ELISAELISA法可檢出其它型。第37頁/共101頁第38頁/共101頁A. 參考值： 陰性 30 U/L1：100為陽性 第54頁/共101頁臨床意義： 1、ANAANA陽性最多見于未治療的SLESLE，陽性率達80%80%100%100%（活動期幾乎100%100%陽性） 2 2、ANAANA陽性是結締組織病的標志，是SLESLE最佳篩選試驗。 3 3、其它疾病, ,如原發(fā)性膽汁性肝硬化( (Primary biliary cirrhosis) )、慢性肝病、慢性感染、腫瘤等也可出現(xiàn)陽性第55頁/共101頁第56頁/共101頁 2.2.抗脫氧核糖核酸抗

13、體 （anti-DNA antibodyanti-DNA antibody） 其中抗雙鏈DNADNA（double stranded-DNA,ds-double stranded-DNA,ds-DNADNA）抗體的靶抗原是細胞核中的DNADNA雙螺旋結構，識別雙堿基對的DNADNA。 正常結果：陰性 臨床意義：1.1. 為SLESLE特異性抗體( (Specific antibody for Specific antibody for SLE)SLE)，特異性率95%100%95%100%；敏感性30-50%30-50%。2.2.與活動程度相關3.3.特別在并發(fā)狼瘡性腎炎時起重要作用。4.4.

14、其它風濕病中抗ds-DNAds-DNA抗體也可陽性。第57頁/共101頁 3.3.可提取性核抗原多肽抗體譜 ENAENA（extractable antinuclear antigenextractable antinuclear antigen）由多種相對分子質量不同的多肽構成，利用免疫印跡試驗可對這些抗原的自身抗體進行檢測，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)2020余種。 第58頁/共101頁 抗體抗體靶抗原靶抗原意義意義方法方法SmRNA和核蛋白和核蛋白SLE標記抗體，陽性標記抗體，陽性3 040%雙向免疫擴散雙向免疫擴散U1RNP小核糖核蛋白小核糖核蛋白MCTD陽性陽性90%;SLESS SSc PM/DM

15、DID;EIASSA(Ro)小細胞質核糖核蛋白小細胞質核糖核蛋白PSS 40 95%;SCLE 70 90%DID;EIASSB(La)小細胞核核糖核蛋白小細胞核核糖核蛋白SS高度特異性高度特異性DID;EIArRNP60S核糖體大亞基核糖體大亞基SLE高度特異性抗體，陽性高度特異性抗體，陽性1040%。與腦病有關。與腦病有關。EIAScl-70拓撲異構酶拓撲異構酶1SSc特異性抗體特異性抗體,預后不良。預后不良。EIAJo-1tRNA合成酶合成酶PM/DM標記抗體標記抗體20 30%DID,IB第59頁/共101頁第60頁/共101頁第61頁/共101頁第62頁/共101頁Scl-70第63

16、頁/共101頁第64頁/共101頁第65頁/共101頁第66頁/共101頁第67頁/共101頁第68頁/共101頁第69頁/共101頁第70頁/共101頁第71頁/共101頁Jo-1第72頁/共101頁掌指關節(jié)和近端指間關節(jié)伸側出現(xiàn)萎縮性掌指關節(jié)和近端指間關節(jié)伸側出現(xiàn)萎縮性丘疹和斑疹，伴少量鱗屑，稱丘疹和斑疹，伴少量鱗屑，稱GottronGottron征征第73頁/共101頁第74頁/共101頁第75頁/共101頁第76頁/共101頁第77頁/共101頁第78頁/共101頁*Rheumatoid factor*Anti-Nuclear Antibody*tissue and cell anti

17、body第79頁/共101頁 組織和細胞抗體檢測 抗線粒體抗體（anti-mitochondria antibody,AMA） 抗甲狀腺球蛋白抗體（anti-thyroglobulin antibody,TG） 抗甲狀腺微粒體抗體（anti-thyroid mivrosome ntibody,TM） 抗平滑肌抗體（antismooth muscle antibidy,ASMA）等 如AMA、ASMA在原發(fā)性膽汁性肝硬化、慢性肝病、自身免疫性肝炎中常為陽性第80頁/共101頁第81頁/共101頁p免疫功能檢查p自身免疫檢測(auto-immune)p感染免疫檢測 p腫瘤標志物檢測p器官與骨髓移植

18、的檢測 p病毒肝炎血清標志物p其它 第82頁/共101頁（一）血清抗鏈球菌溶血素“O O” （anti-streptolysinanti-streptolysin“O O”，ASOASO） A組溶血性鏈球菌的莢膜抗原代謝產物鏈球菌溶血素“O”具有溶血活性，能溶解人類和一些動物的紅細胞。 將受檢病人血清倍比稀釋后，加入一定量的鏈球菌溶血素“O”，如病人血清中含有抗體（ASO），即能使鏈球菌溶血素“O”失去溶血能力，不溶血的管數(shù)越多表示ASO的效價越高。 參考值：膠乳凝集法為陰性 100IU/L第83頁/共101頁 臨床意義： 當機體受A組溶血性鏈球菌感染后23周，血清中即出現(xiàn)抗鏈球菌溶血素“O”

19、的抗體，這種抗體滴度直至病愈后數(shù)月到半年才下降至正常水平 ASO升高常見于活動性風濕熱、風濕性關節(jié)炎、急性腎小球腎炎等 假陽性見于高膽固醇血癥、黃疸、溶血等第84頁/共101頁第85頁/共101頁第86頁/共101頁第87頁/共101頁（二）傷寒和副傷寒Typhoid and paratyphoid 沙門菌免疫測定-肥達反應（Widal reactin WR） 人體被傷寒沙門菌感染后，菌體“O”抗原和鞭毛“H”抗原能刺激人體產生相應抗體。 副傷寒桿菌分甲、乙、丙三型參考值：傷寒WR“H” 1：160；“O” 1：80； 副傷寒WR甲、乙、丙均 1：80第88頁/共101頁第89頁/共101頁臨

20、床意義： 當感染傷寒沙門菌后一周可出現(xiàn)陽性，第二周陽性率上升為 60% 70%，第四周可達90%以上，動態(tài)觀察WR持續(xù)超過參考值，或較原效價升高4倍以上更有價值 假陽性結核病、風濕病 假陰性早期使用抗生素及免疫抑制劑治療 第90頁/共101頁p免疫功能檢查p自身免疫檢測p感染免疫檢測p腫瘤標志物檢測(tumor marker)p器官與骨髓移植的檢測 p病毒肝炎血清標志物p其它 第91頁/共101頁n腫瘤細胞分泌的標志物：蛋白質類、糖脂類、酶類 、激素類等n宿主產生的標志物：TNF、SFn不進入循環(huán)體液的標志物：第92頁/共101頁第93頁/共101頁胎兒早期肝臟和卵黃囊合成的血清糖蛋白，當肝細胞或生殖腺胚胎細胞惡變，基因激活，細胞合成AFP增加。參考值：20ng/ml意義： 1：原發(fā)性肝癌的診斷與鑒別診斷，10%陰性。 2：生殖腺胚胎癌、胃癌、胰腺癌可升高。 3：動態(tài)檢測原發(fā)性肝癌治療前后病情變化 4：孕婦可升高第94頁/共101頁胎兒早期消化管和一些組織合成，孕6月后減少，出生后極低。生理上孕婦可升高。參考值：15ng/ml意義： 1：90%胰腺癌、74%結腸癌、60%乳腺癌、肺癌等常明顯升高。 2