MERSCoV實驗室生物安全+采樣送樣要求(中東呼吸綜合征冠狀病毒(MERSCoV)實驗室生物安全)

1、 中東呼吸綜合征（中東呼吸綜合征（MERS）MERS病毒是一種新型的冠狀病毒，與SARS類似，大多數(shù)MERS病毒感染病例發(fā)生在沙特，因此又被命名為中東呼吸綜合征冠狀病毒（ Middle East Respiratory Syndrome ,MERS）。從2012年夏天開始，從沙特逐步擴散到其它國家。u 2015年5月27日晚10時世界衛(wèi)生組織通報：韓國一例確診中東呼吸綜合征(MERS)病例的密切接觸者經(jīng)香港入境廣東省惠州市，已出現(xiàn)發(fā)熱癥狀。u2015年5月29日，我國出現(xiàn)首例輸入性中東呼吸綜合征（MERS）確診病例。最新進展最新進展On 29 May 2015, the National He

2、alth and Family Planning Commission (NHFPC) of China notified WHO of one confirmed case of Middle East Respiratory Syndrome Coronavirus (MERS-CoV)./csr/don/30-may-2015-mers-china/en/中東呼吸綜合征冠狀病毒實驗室生物安全中東呼吸綜合征冠狀病毒實驗室生物安全依據(jù)：依據(jù)：病原微生物實驗室生物安全管理條例病原微生物實驗室生物安全管理條例 中華人民共和國國務(wù)院令（第中華人民共和國國務(wù)院令（第

3、424424號）號）20042004. .11 11. .12 12起實施起實施可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定 衛(wèi)生部第衛(wèi)生部第4545號令，號令，20062006年年2 2月月1 1日起施行日起施行 人間傳染的高致病性病原微生物實驗室和實驗活動生物安全審批管理辦法人間傳染的高致病性病原微生物實驗室和實驗活動生物安全審批管理辦法 衛(wèi)生部第衛(wèi)生部第5050號令，號令，20062006年年8 8月月15 15日起施行日起施行人間傳染的病原微生物菌（毒）種保藏機構(gòu)管理辦法人間傳染的病原微生物菌（毒）種保藏機構(gòu)管理辦

4、法 衛(wèi)生部第衛(wèi)生部第6868號令，號令， 2009 2009年年10 10月月1 1日起施行日起施行人間傳染的病原微生物名錄人間傳染的病原微生物名錄 衛(wèi)生部（衛(wèi)科教發(fā)衛(wèi)生部（衛(wèi)科教發(fā)200615200615號），號），20062006年年1 1月月11 11日發(fā)布日發(fā)布實驗室生物安全通用要求實驗室生物安全通用要求 中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)（中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)（GB19489-2008GB19489-2008）根據(jù)國家衛(wèi)生和計劃生育委員會頒布的人間傳播的病原微生物名錄中的SARS風(fēng)險和相關(guān)規(guī)定，2012年經(jīng)過專家委員會論證，中東呼吸綜合征病毒按照管理。凡涉及病毒的分離、培養(yǎng)和動物實驗需在生物安

5、全三級（BSL-3）實驗室內(nèi)進行；未經(jīng)培養(yǎng)的感染材料需在生物安全三級（BSL-3）實驗室內(nèi)進行；滅活材料和無感染性材料的操作可在生物安全2級（BSL-2）實驗室內(nèi)進行。一、病原微生物樣本采集n 具有與采集病原微生物標(biāo)本所需要的生物安全防護水平相適應(yīng)的設(shè)備；n 具有掌握相關(guān)專業(yè)知識和操作技能的工作人員；n 具有有效的防止病原微生物擴散和感染的措施；n 具有保證病原微生物樣本質(zhì)量的技術(shù)方法和手段。n 樣本的來源、采集過程和方法等作詳細(xì)記錄。病原微生物實驗室生物安全管理條例1.采集標(biāo)本者基本素質(zhì)采集標(biāo)本者基本素質(zhì) 經(jīng)過專門培訓(xùn)。經(jīng)過專門培訓(xùn)。 采集標(biāo)本前要穿戴好防護裝置。采集標(biāo)本前要穿戴好防護裝置。

6、2.標(biāo)本的采集標(biāo)本的采集 由受過培訓(xùn)的人員采集標(biāo)本；由受過培訓(xùn)的人員采集標(biāo)本； 所有操作均要戴手套；所有操作均要戴手套； 規(guī)定的程序和方法；規(guī)定的程序和方法； 置于適當(dāng)容器中運至實驗室。置于適當(dāng)容器中運至實驗室。3.采集標(biāo)本的包裝采集標(biāo)本的包裝 螺口塑料管。螺口塑料管。 A、B類包裝類包裝/專用標(biāo)本運輸箱；專用標(biāo)本運輸箱；4. 記錄記錄（一）（一） 依據(jù)依據(jù) 可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定衛(wèi)生部第45號令 2006年2月1日起施行 審批范圍：第一類病原微生物菌（毒）種或樣本第二類病原微生物菌（毒）種或樣本第三類病原微生物運輸包裝分類為A類的病原微生物菌（毒）種或樣本

7、疑似高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本二、病原微生物樣本運輸A類感染性物質(zhì)的包裝與標(biāo)簽B類感染性物質(zhì)的包裝與標(biāo)簽 （二）（二） 包裝包裝（三）運輸審批（三）運輸審批運輸審批申請材料運輸審批申請材料：1. 運輸申請表；2. 法人資格證明材料（復(fù)印件）；3. 接收高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的單位（簡稱接收單位)同意接收的證明文件；4. 接收單位的有關(guān)證明文件（復(fù)印件）； (1) 具有法人資格； (2) 具備從事高致病性病原微生物實驗活動資格的實驗室； (3) 取得有關(guān)政府主管部門核發(fā)的從事高致病性病原微生物實驗活動、菌（毒）種或樣本保藏、生物制品生產(chǎn)等的批準(zhǔn)文件；5. 容器或包裝材料的批準(zhǔn)

8、文號、合格證書（復(fù)印件）或者高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸容器或包裝材料承諾書；6. 其它有關(guān)資料。 未經(jīng)批準(zhǔn)，不得運輸。省內(nèi)運輸，省內(nèi)審批跨省運輸，由運輸出發(fā)地省級衛(wèi)生行政部門進行初審；符合要求的，上報衛(wèi)生部審批。根據(jù)疾病控制工作的需要，應(yīng)當(dāng)向中國疾病預(yù)防控制中心運送高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的，由中國疾病預(yù)防控制中心審批。緊急運輸多次運輸（四）運輸要求（四）運輸要求運輸之前的包裝以及送達(dá)后包裝的開啟，應(yīng)當(dāng)在符合生物安全規(guī)定的場所中進行。運輸前應(yīng)當(dāng)仔細(xì)檢查容器和包裝是否符合安全要求，所有容器和包裝的標(biāo)簽以及標(biāo)本登記表是否完整無誤，容器放置方向是否正確。 有專人護送，護送人員不

9、得少于兩人。護送過程中采取相應(yīng)的防護措施。 護送人員應(yīng)進行相關(guān)的生物安全知識培訓(xùn)。（五）冷藏或冷凍樣品（五）冷藏或冷凍樣品 使用冰或干冰時，必須有內(nèi)部支撐物，以保證在冰或干冰消融后輔助包裝仍處于原位。如果使用冰，外包裝或合成包裝件必須防漏；如果使用干冰，包裝設(shè)計和構(gòu)造 必須留有能排出二氧化碳的孔， 以防產(chǎn)生可能使包裝破裂的壓力。 主容器和輔助包裝材料必須能承受制冷劑的溫度，并承受失去制冷作用后所產(chǎn)生的溫度和壓力。（六）實驗室間轉(zhuǎn)運（六）實驗室間轉(zhuǎn)運應(yīng)制定對危險材料運輸?shù)恼吆统绦?，包括危險材料在實驗室內(nèi)、實驗室所在機構(gòu)內(nèi)及機構(gòu)外部的運輸，應(yīng)符合國家和國際規(guī)定的要求。應(yīng)以防止污染人員或環(huán)境的方式

10、運輸危險材料，并有可靠的安保措施。危險材料應(yīng)置于被批準(zhǔn)的本質(zhì)安全的防漏容器中運輸。不同的標(biāo)本檢測生物安全級別要求如下：疑似標(biāo)本或病例接觸者的分裝可在生物安全二級實驗室的生物安全柜內(nèi)進行；確診病例的標(biāo)本分裝、滅活應(yīng)在生物安全三級實驗室進行；病毒培養(yǎng)物的滅活應(yīng)在生物安全三級實驗室進行。滅活標(biāo)本的抗原快速檢測和ELISA檢測血清抗體時，可在生物安全二級實驗室內(nèi)操作； 非滅活的中東呼吸綜合征冠狀病毒相關(guān)實驗應(yīng)在生物安全三級實驗室里進行。陽性標(biāo)本和分離物的保存及銷毀應(yīng)按照病原微生物實驗室生物安全管理條例（國務(wù)院第424號令）執(zhí)行。中東呼吸綜合征冠狀病毒相關(guān)動物實驗應(yīng)在動物BSL-3實驗室進行，并且按照動

11、物BSL-3實驗室操作要求進行。三、實驗活動四、樣本保藏與銷毀集中保藏。制定嚴(yán)格的安全保管制度，作好病原微生物菌（毒）種和樣本進出和儲存的記錄，建立檔案制度，并指定專人負(fù)責(zé)。對高致病性病原微生物菌（毒）種和樣本應(yīng)當(dāng)設(shè)專庫或者專柜單獨儲存。實驗室在相關(guān)實驗活動結(jié)束后，應(yīng)當(dāng)依照國務(wù)院衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門的規(guī)定，及時將病原微生物菌（毒）種和樣本就地銷毀或者送交保藏機構(gòu)保管。五、廢物處置實驗室危險廢物處理和處置的管理應(yīng)符合國家或地方法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的要求。廢水、廢氣及固體廢物分類處置廢水廢水處理設(shè)備廢氣HEPA固體廢物高壓蒸汽滅菌分類收集容器暫存實驗室工作人員應(yīng)穿戴合適正確的個人防護設(shè)備（PPE）；

12、生物安全三級實驗室工作人員應(yīng)穿戴N95或以上的防護口罩、連體防護服、戴眼罩、雙層手套、鞋套等。六、個體防護七、人員培訓(xùn)及健康管理u從事中東呼吸綜合征冠狀病毒檢測的技術(shù)人員應(yīng)經(jīng)過生物安全培訓(xùn)，并取得相應(yīng)資格和具備相應(yīng)的實驗技能。u實驗室工作人員應(yīng)進行健康監(jiān)測，每年組織進行體檢，并建立健康檔案；u凡是具有發(fā)熱、患有基礎(chǔ)性疾病、免疫力低下、免疫抑制、免疫缺陷的人群以及年老體弱者和孕婦不適合操作本實驗。u實驗室工作人員出現(xiàn)與MERS-CoV有關(guān)的感染臨床癥狀或者體征時，實驗室負(fù)責(zé)人應(yīng)當(dāng)向負(fù)責(zé)實驗室感染控制工作的機構(gòu)或者人員報告，同時派專人陪同及時就診；實驗室工作人員應(yīng)當(dāng)將近期所接觸的病原微生物的種類和

13、危險程度如實告知診治醫(yī)療機構(gòu)。根據(jù)風(fēng)險評估編寫實驗室意外事故應(yīng)急處置預(yù)案應(yīng)急預(yù)案要經(jīng)過評審，正式發(fā)布應(yīng)急物資配備要齊全應(yīng)急物資儲備要充分對實驗室工作人員進行應(yīng)急處置的培訓(xùn)定期組織實驗室工作人員進行應(yīng)急演練出現(xiàn)意外事故要及時上報八、應(yīng)急處置 二、醫(yī)院感染預(yù)防與控制二、醫(yī)院感染預(yù)防與控制建筑布局和工作流程-醫(yī)院隔離技術(shù)規(guī)范消毒用品和防護用品-數(shù)量充足、符合要求醫(yī)務(wù)人員遵守標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防與額外預(yù)防原則落實手衛(wèi)生、口罩及隔離等防護措施醫(yī)務(wù)人員轉(zhuǎn)運疑似與確診患者時做好防護22（一）發(fā)熱（一）發(fā)熱門（急）診門（急）診（二）收治疑似或確診病人的病區(qū)（房）二）收治疑似或確診病人的病區(qū)（房）23建筑布局和工作流程 符

14、合醫(yī)院隔離技術(shù)規(guī)范要求防護用品和消毒用品 應(yīng)當(dāng)配備數(shù)量充足、符合要求及時采取隔離措施及時采取隔離措施 疑似患者和確診患者應(yīng)當(dāng)分開安置 疑似患者單間隔離，確診的同類患者可以置于多人房間病房管理具體措施病房管理具體措施醫(yī)務(wù)人員進入/離開隔離病房時，應(yīng)當(dāng)遵循醫(yī)院隔離技術(shù)規(guī)范的有關(guān)要求，并正確穿脫防護用品。原則上患者的活動限制在隔離病房內(nèi)，若確需離開時，應(yīng)當(dāng)采取措施防止交叉感染疑似患者的聽診器、溫度計、血壓計等醫(yī)療器具實行專人專用。非專人專用的復(fù)用器具使用后應(yīng)按要求進行消毒清潔?；颊叱鲈骸⑥D(zhuǎn)院后應(yīng)當(dāng)按照要求進行終末處理嚴(yán)格探視制度，不設(shè)陪護?；颊卟≡瓕W(xué)檢測連續(xù)兩次陰性， 可根據(jù)相應(yīng)規(guī)定解除隔離措施。醫(yī)

15、務(wù)人員防護原則與具體措施醫(yī)務(wù)人員防護原則與具體措施標(biāo)準(zhǔn)防護飛沫隔離空氣隔離接觸隔離25額外額外預(yù)防預(yù)防防護用品應(yīng)當(dāng)符合國家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。每次（每個操作）接觸患者前后正確進行手衛(wèi)生。防護用品被污染后應(yīng)當(dāng)及時更換，進入和離開隔離病房時應(yīng)當(dāng)按要求穿脫防護用品醫(yī)用防護口罩執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)醫(yī)用防護口罩執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)強制性國強制性國家標(biāo)準(zhǔn)家標(biāo)準(zhǔn)2010版增加版增加密合性要求密合性要求2010-09-02發(fā)布發(fā)布 2011-08-01實施實施醫(yī)用外科口罩執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)醫(yī)用外科口罩執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)強制性行強制性行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)2011-12-31發(fā)布發(fā)布 2013-06-01實施實施醫(yī)用一次性防護服技術(shù)要求醫(yī)用一次性防護服技術(shù)要求國家質(zhì)量監(jiān)督

16、檢驗檢疫總局發(fā)布2003/04/29發(fā)布；2003/04/29實施GB-19082-2003-GB-19082-2009關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)合成血穿透不低于2級（1.75kPa）；關(guān)鍵部位斷裂強力不小于45N；伸長率不小于15%；關(guān)鍵部分材料及接縫處過濾效率不小于70%標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防視所有病人，均為具有潛在感染性的病人；視所有病人，均為具有潛在感染性的病人；即認(rèn)為病人的血液、體液、分泌物、排泄物、均具有即認(rèn)為病人的血液、體液、分泌物、排泄物、均具有傳染性，必須進行隔離；傳染性，必須進行隔離；不論是否有明顯的血液污染或是否接觸非完整的皮膚不論是否有明顯的血液污染或是否接觸非完整的皮膚與粘膜

17、，接觸上述物質(zhì)者，必須采取防護措施。與粘膜，接觸上述物質(zhì)者，必須采取防護措施。29額外預(yù)防額外預(yù)防 接觸疑似（具有重要流行病學(xué)意義的感染者）或確接觸疑似（具有重要流行病學(xué)意義的感染者）或確診的患者，應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)防護的基礎(chǔ)上，針對傳播途徑增診的患者，應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)防護的基礎(chǔ)上，針對傳播途徑增加防護加防護呼吸道防護（醫(yī)用防護口罩，通風(fēng)，負(fù)壓病房等）呼吸道防護（醫(yī)用防護口罩，通風(fēng)，負(fù)壓病房等）接觸防護接觸防護 （防護服與手衛(wèi)生、環(huán)境衛(wèi)生）（防護服與手衛(wèi)生、環(huán)境衛(wèi)生）額外預(yù)防額外預(yù)防以傳播途徑為基礎(chǔ)的預(yù)防措施以傳播途徑為基礎(chǔ)的預(yù)防措施根據(jù)導(dǎo)致感染的風(fēng)險采取相應(yīng)防護措施根據(jù)導(dǎo)致感染的風(fēng)險采取相應(yīng)防護措施接觸患者的

18、血液、體液、分泌物、排泄物、嘔吐接觸患者的血液、體液、分泌物、排泄物、嘔吐物及污染物品時應(yīng)當(dāng)戴清潔手套，脫手套后洗手。物及污染物品時應(yīng)當(dāng)戴清潔手套，脫手套后洗手。可能受到患者血液、體液、分泌物等物質(zhì)噴濺時，可能受到患者血液、體液、分泌物等物質(zhì)噴濺時，應(yīng)當(dāng)戴外科口罩或醫(yī)用防護口罩、護目鏡、穿隔應(yīng)當(dāng)戴外科口罩或醫(yī)用防護口罩、護目鏡、穿隔離衣。離衣。對疑似、臨床診斷或確診患者進行氣管插管等有對疑似、臨床診斷或確診患者進行氣管插管等有創(chuàng)操作時，應(yīng)當(dāng)戴外科口罩或醫(yī)用防護口罩、醫(yī)創(chuàng)操作時，應(yīng)當(dāng)戴外科口罩或醫(yī)用防護口罩、醫(yī)用乳膠手套、護目鏡、防護面屏、穿防滲隔離衣。用乳膠手套、護目鏡、防護面屏、穿防滲隔離衣

19、。外科口罩、醫(yī)用防護口罩、護目鏡、隔離衣等防外科口罩、醫(yī)用防護口罩、護目鏡、隔離衣等防護用品被血液、體液、分泌物等污染時應(yīng)當(dāng)及時護用品被血液、體液、分泌物等污染時應(yīng)當(dāng)及時更換。更換。正確穿戴和脫摘防護用品，脫去手套或隔離衣后正確穿戴和脫摘防護用品，脫去手套或隔離衣后立即洗手或手消毒。立即洗手或手消毒。MERS-CoV感染標(biāo)本采集對象感染標(biāo)本采集對象l中東呼吸綜合征冠狀病毒感染疑似病例、臨床診斷病例及需要進一步研究的確診病例；l其它需要進行MERS-CoV感染診斷或鑒別診斷者。標(biāo)本采集要求1.從事MERS-CoV檢測標(biāo)本采集的技術(shù)人員應(yīng)經(jīng)過生物安全培訓(xùn)，培訓(xùn)合格且具備相應(yīng)的實驗技能。在標(biāo)本采集過

20、程中，采樣人員進行安全防護(采集人必須穿戴連體防護服、帽子、眼罩、N95口罩、腳套和手套)。住院病例住院病例的標(biāo)本由所在醫(yī)院醫(yī)護人員在當(dāng)?shù)丶部貦C構(gòu)專業(yè)人員指導(dǎo)下采集。密切接觸者密切接觸者標(biāo)本由當(dāng)?shù)丶部貦C構(gòu)負(fù)責(zé)采集。根據(jù)實驗室檢測工作的需要，結(jié)合病程再次采樣再次采樣。采集標(biāo)本種類和要求采集標(biāo)本種類和要求l呼吸道（上、下呼吸道）和其他樣品（血清、尿液和糞便）、尸檢標(biāo)本。l每個病例應(yīng)盡可能同時采集上、下呼吸道標(biāo)本，下呼吸道標(biāo)本最佳，建議同時采集糞便和尿液標(biāo)本。l應(yīng)盡可能采取發(fā)病初期和恢復(fù)期雙份血清標(biāo)本以確定是否感染，雙份血清樣品間隔1421天采集比較理想，第一份血清應(yīng)在發(fā)病第一周內(nèi)采集。但單份樣品的檢測對于確定疑似病例也有價值，如果只能采集一份樣品，應(yīng)該在出現(xiàn)癥狀后至少14天采集。l 標(biāo)本管標(biāo)識明確：患者姓名，性別，樣品類型，檢測指標(biāo)，采樣日期和送檢單位；與樣品送檢單一致。l 院內(nèi)轉(zhuǎn)運時，標(biāo)本應(yīng)該放置在耐用、防滲透的二級容器中進行轉(zhuǎn)運。為減少任何標(biāo)本破、漏的風(fēng)險，不要使用任何氣動傳輸系統(tǒng)來轉(zhuǎn)運任何可能疑似患者標(biāo)本。l 轉(zhuǎn)運至CDC的MERS-CoV標(biāo)本應(yīng)該充分包裹，轉(zhuǎn)運時不能開蓋或分裝標(biāo)本。標(biāo)本轉(zhuǎn)運應(yīng)該符合三重包裝系統(tǒng)要求：內(nèi)層是主要的容器（一個可密封的標(biāo)本袋纏繞以可吸收材料），第二層是防水、防滲漏的容器，外層是用于轉(zhuǎn)運的包裝。MERS-CoV感染