遺傳分析儀的日常維護(hù)

1、遺傳分析儀的日常維護(hù)肖懷東 Field Application SpecialistTel: 8008208982; 4008208982E-mail: CNAPMsupport提 要遺傳分析儀的開(kāi)關(guān)機(jī)順序遺傳分析儀日常維護(hù)保養(yǎng)及其重要性遺傳分析儀常見(jiàn)故障及解決方法電腦與遺傳分析儀的開(kāi)機(jī)與關(guān)機(jī)順序開(kāi)機(jī)順序： UPS電腦遺傳分析儀（綠燈亮后）Data Collection關(guān)機(jī)順序： 先退出應(yīng)用程序（Data Collection、Genemapper），再關(guān)遺傳分析儀，最后關(guān)掉電腦。 請(qǐng)嚴(yán)格按照此順序進(jìn)行開(kāi)關(guān)機(jī)！ 好的開(kāi)頭等于成功了一半開(kāi)機(jī)儀器開(kāi)機(jī)成功的標(biāo)志：綠燈長(zhǎng)亮。打開(kāi)數(shù)據(jù)收集軟件： 31X

2、X： NT系統(tǒng)，有4個(gè)運(yùn)行的窗口；2000或XP，有2個(gè)運(yùn)行的窗口。 3500系列：vista系統(tǒng)，2個(gè)運(yùn)行窗口，Demon-DOS和數(shù)據(jù)收集窗口。運(yùn)行過(guò)程中，每個(gè)窗口都不能關(guān)閉。日常維護(hù)保養(yǎng)及其重要性耗材使用注意事項(xiàng)甲酰胺：分裝（使用量），-20 C保存，以避免反復(fù)凍融。膠：4C保存，用之前半小時(shí)從冰箱中取出回溫；并且不同種類的膠不能混用；建議每周更換一次，并使用Replenish Polymer Wizard。水：請(qǐng)使用電導(dǎo)率為18.2兆歐的水。Buffer：新鮮配制 (3500為預(yù)裝好的）。毛細(xì)管：未使用過(guò)的毛細(xì)管請(qǐng)置于干燥的地方保存；用過(guò)的毛細(xì)管兩端一定不能離開(kāi)水。為什么要使用新的甲酰

3、胺？甲酰胺的作用 保持DNA熱變性后的單鏈狀態(tài)。甲酰胺離子化后的影響 競(jìng)爭(zhēng)DNA進(jìn)樣過(guò)程 長(zhǎng)片段的影響較大 建議：甲酰胺使用Hi-Di，且存放不要超過(guò)一年。208 S 1180 S 408 S 338 S Data Collection Scan NumberFigure 14.3, J.M. Butler (2005) Forensic DNA Typing, 2nd Edition 2005 Elsevier Academic Press為什么要換分析膠？分析膠的作用 高分子網(wǎng)格結(jié)構(gòu)，具有分子篩效應(yīng)，能夠按 分子量大小分離不同DNA片段。過(guò)期后的情況 化學(xué)鍵斷裂，分子網(wǎng)格崩解，分子篩效應(yīng)消

4、失。 建議：膠需要每周更換，使用 Replenish Polymer Wizard。為什么需要更換緩沖液？緩沖液的作用 維持穩(wěn)定的PH值，保證DNA遷移率的穩(wěn)定， 保證片段分型的可靠。 建議：需要每次電泳前或每24小時(shí)更換。(A) Good resolutionD8S1179D21S11D7S820CSF1POD3S1358TH01D13S317D16S539D2S1338D19S433D18S51TPOXVWAAMELD5S818FGAGS500 LIZ size standard(B) Poor resolutionBad Capillary in 3100 ArrayGood Capil

5、lary in 3100 ArrayIdentifiler dataButler, J.M., Buel, E., Crivellente, F., McCord, B.R. (2004) Forensic DNA typing by capillary electrophoresis: using the ABI Prism 310 and 3100 Genetic Analyzers for STR analysis. Electrophoresis, 25: 1397-1412. 毛細(xì)管每天要做的事情運(yùn)行前檢查block有無(wú)氣泡（注意：下膠塊V字型區(qū)域）檢查DC軟件儀表盤各消耗品的指征(

6、3500)檢查膠的體積是否滿足電泳用量（310，31XX）檢查buffer及水的高度，必要時(shí)進(jìn)行更換檢查儀器是否漏膠或液體注意機(jī)器的環(huán)境衛(wèi)生檢查激光風(fēng)扇出口是否被堵住3500 DC軟件儀表盤消耗品讀數(shù)3100/ 3100-A3130/ 3130XL3500/ 3500XL為什么要清除氣泡？氣泡會(huì)中斷電泳通路，阻隔電流。尤其是下膠塊內(nèi)的氣泡會(huì)產(chǎn)生放電導(dǎo)致下膠塊管路燒焦，閥門密封損壞。每周要做的事情 更換新鮮的膠（Replenish Polymer Wizard）。 清洗注射器（310，3100/3100-A）。 更換測(cè)序儀 PDP water seal trap中的水。每周要做的事情Changi

7、ng the ABC and CBC（3500）:使緩沖液升至室溫。 檢查fill line。 確保內(nèi)壁無(wú)溶液。 安裝完成后，replenish the dashboard。 Run the Wash Pump and Channels wizard，使用Conditioning reagent （3500）。重新啟動(dòng)電腦和測(cè)序儀。檢查磁盤空間。為什么要更換泵頭密封圈里的水？密封圈的作用 清洗潤(rùn)滑石英活塞 溶解固體結(jié)晶 減輕活塞磨損換水注意事項(xiàng) 緩慢注入 擰緊封頭每月要做的事情清洗上下膠引導(dǎo)塊及管路系統(tǒng)（Water Wash Wizard，310，31XX）。清洗毛細(xì)管檢測(cè)窗口并做 Spati

8、al Calibration。Flush the pump trap(3500)。Empty the water trap waste container (3500)。為什么要清洗灌膠塊/泵？長(zhǎng)期電泳會(huì)產(chǎn)生的副產(chǎn)品 降解膠殘余物 樣品端進(jìn)入的熒光物質(zhì) 樣品伴隨的雜質(zhì)影響：會(huì)導(dǎo)致毛細(xì)管工作狀態(tài)變差。 建議：對(duì)于3500，3500XL，每周清洗膠泵1次；對(duì)于310，31XX，每月清洗膠泵次，注射器也要每月清洗1次。每月要做的事情Run a performance check (3500)。對(duì)電腦進(jìn)行碎片整理并備份相關(guān)數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)庫(kù)整理： - 3100系列采用cleanupDB.bat； - 313

9、0系列采用 cleanup processed plate 按鈕。為什么要清理數(shù)據(jù)庫(kù)？數(shù)據(jù)庫(kù)工作原理 暫存實(shí)時(shí)的熒光信號(hào)數(shù)據(jù) 電泳完成后從暫存記錄抽提數(shù)據(jù)生成文件數(shù)據(jù)庫(kù)滿載后的故障 可以正常電泳 無(wú)法暫存熒光數(shù)據(jù) 不能生成樣品文件每半年或一年要做的事情更換毛細(xì)管或根據(jù)需要更換3100需要每3個(gè)月或半年更換大小注射器根據(jù)需要（如spatial信號(hào)變低等）可聯(lián)系工程師對(duì)機(jī)器進(jìn)行保養(yǎng)電腦的維護(hù)和保養(yǎng)每周進(jìn)行一次重新啟動(dòng)碎片整理不裝第三方軟件注意防病毒定期備份數(shù)據(jù)（每周）定期清理硬盤空間（每400次電泳）DELL維修電話：8008580890/80085806143500/3500XL維護(hù)日程表通過(guò)M

10、aintain Instrument圖標(biāo)查看維護(hù)日程Maintenance Calendar任務(wù)類型:- Factory (F) + Factory Repeating (FR)，默認(rèn)設(shè)置，不能刪除和更改頻率，但優(yōu)先度可以改變； Repeating (R) 用戶自定義任務(wù)。紅色代表高度優(yōu)先；黃色代表一般。推薦:添加日常維護(hù)任務(wù)到日程表中；添加耗材更換警示。3500 Series Scheduled Maintenance每天查看維護(hù)通知，執(zhí)行相應(yīng)的維護(hù)任務(wù)。完成任務(wù)時(shí)，點(diǎn)擊 代表完成，點(diǎn)擊 代表未處理。完成或者未處理的任務(wù)均會(huì)從維護(hù)通知中移除，直到下次維護(hù)任務(wù)時(shí)間才會(huì)顯現(xiàn)。Maintenanc

11、e Calendar Notification RemindersMaintenance Notifications Log完成和未完成的任務(wù)均記錄在日志內(nèi)。日志包含的信息:3130 Wizards3500 Wizards常見(jiàn)故障及解決方法3130正常的開(kāi)機(jī)過(guò)程0秒按開(kāi)關(guān)19秒黃燈開(kāi)始閃37秒機(jī)器內(nèi)噠噠響（EP、15V、24V檢測(cè)）50秒開(kāi)始初始化PUMP55秒AutoSampler開(kāi)始初始化1分15秒AutoSampler回到Buffer位置1分29秒 綠燈亮，啟動(dòng)成功故障1 黃燈常亮不小心改了Computer NameFTP數(shù)據(jù)服務(wù)選項(xiàng)設(shè)置錯(cuò)誤（正確路徑C:Appliedbiosystem

12、sFirmware）數(shù)據(jù)線未連接、松動(dòng)、接反防火墻開(kāi)啟網(wǎng)卡設(shè)置錯(cuò)誤IP:DNS:在計(jì)算機(jī)處于關(guān)閉狀態(tài)時(shí)，開(kāi)啟儀器硬件問(wèn)題故障1 黃燈常亮如何找回原來(lái)的電腦名？E:AppliedBiosystemsGeneMapper里有一個(gè)install.log右鍵點(diǎn)擊My Computer，選擇Manage - Local Users and Groups察看以下用戶名：IUSR_Computer NameIWAM_Computer Name故障2 黃燈閃爍，無(wú)法進(jìn)入綠燈檢查Oven門的按鈕是否扣緊檢查儀器主門是否關(guān)緊故障3 主機(jī)紅燈亮啟動(dòng)時(shí)自檢失敗診斷辦法：Start Run Telnet 7001，在黃

13、燈閃爍兩下之后，回車截圖email給工程師進(jìn)一步判斷Telnet顯示高壓電源讀數(shù)異常故障4 DC軟件無(wú)法運(yùn)行Computer ManagementChecking for anti-virus software, third-part software.故障5 灰色Start和Spatial按鈕故障6 DC軟件紅燈閃實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)生故障查看Data collection軟件中的Event log中的錯(cuò)誤信息故障7 漏膠軟件提示：Leak detected during capillary filling.任何連接處都有可能漏膠泵的單向閥損壞，膠回流 毛細(xì)管損壞，注意觀察檢測(cè)窗有沒(méi)有膠滲出針閥關(guān)閉

14、不嚴(yán)注射器損壞（3100）可能的原因：提示信息Run failed, discharge was detectedAir bubbles may be in channel error message可能原因電泳系統(tǒng)中存在氣泡不正確的緩沖液濃度誤把水當(dāng)成緩沖液緩沖液液位過(guò)低潮濕、膠墊未擦干下膠塊閥門堵塞故障8 放電預(yù)防及解決措施4 C保存的膠應(yīng)在室溫下放置30-60分鐘，安裝時(shí)瓶蓋稍稍帶緊即可保持儀器潔凈，使用干布、無(wú)塵紙擦拭檢查系統(tǒng)是否有泄漏連接管正確連接、各連接處務(wù)必?cái)Q緊每次更換新毛細(xì)管，同時(shí)更換密封環(huán)、手柄檢查下膠塊、連接管有無(wú)燒過(guò)的痕跡定期清洗泵、下膠塊故障9 開(kāi)始采集數(shù)據(jù)時(shí)報(bào)錯(cuò)提示信

15、息： FIFO buffer over flow errors（一般發(fā)生在3100 DC1.1， NT操作系統(tǒng)）原因Spectral cal log文件夾里面存儲(chǔ)的信息太多解決辦法刪除Spectral cal log文件夾的全部?jī)?nèi)容進(jìn)入D:AppliedBio3100Bin，運(yùn)行cleanupDB.bat快速診斷技巧執(zhí)行空間校正檢查峰數(shù)量、形狀、高度峰間距13-16 pixels檢查Instrument Status窗口各項(xiàng)參數(shù)看懂EPT圖電泳電流電泳電壓激光功率CCD溫度爐溫激光電流室溫電流過(guò)高激光功率瞬間下降電流波動(dòng)案例分享案例1現(xiàn)象:空間校正結(jié)果突然變得異常，而一天前還非常好重新灌入新鮮膠,無(wú)改善用甲醇沖洗毛細(xì)管檢測(cè)窗,無(wú)改善更換新毛細(xì)管,無(wú)改善灌膠時(shí)明顯有膠滴出來(lái)原因下膠塊針閥處有結(jié)晶，導(dǎo)致閥門關(guān)閉不嚴(yán)解決辦法清洗下膠塊針閥運(yùn)行Water Wash Wizard案例2現(xiàn)象:3130，1000點(diǎn)就開(kāi)始出引物峰，每次水洗完之后跑試驗(yàn)都正常，但是故障在第二天開(kāi)機(jī)后的第一次實(shí)驗(yàn)就會(huì)重現(xiàn)線索膠在有效期內(nèi)，且是按要求保存緩沖液基本兩天一換每天正常關(guān)機(jī)后，用水瓶替代膠瓶，膠放回冰箱4 C保存每天開(kāi)機(jī)習(xí)慣是，先開(kāi)31