凍干人凝血因子Ⅷ濃制劑制造及檢定規(guī)程

1、凍干人凝血因子濃制劑制造及檢定規(guī)程本品系由乙型肝炎疫苗免疫健康人的新鮮血漿分離、提純、凍干并經(jīng)病毒滅活制成。主要成份為人凝血因子及少量纖維蛋白原，含適量枸櫞酸鈉，不含防腐劑。本品對(duì)缺秒人凝血因子所致的凝血機(jī)能缺陷具有糾正作用，專供防治甲型血友病患者的HYPERLINK l m17-0 t _blank o 書籍相關(guān)：出血 出血癥狀。1制造1.1制造要求1.1.1對(duì)血漿的要求1.1.1.1所用之血漿來源應(yīng)符合原料血漿采集（單采血漿術(shù)）規(guī)程要求，血漿應(yīng)無凝塊、無纖維蛋白析出，非脂血，無溶血。在采集時(shí)應(yīng)減少皮膚損傷，保持血流通暢，并與抗凝劑充分混合，用塑料袋采集。新鮮分離液體血漿或新鮮冰凍血漿及凍結(jié)

2、冷沉淀，均可用于生產(chǎn)。1.1.1.2分離后的血漿應(yīng)保持無菌，并應(yīng)及時(shí)冰凍保存。自采血到凍結(jié)一般在8小時(shí)內(nèi)完成。液體血漿應(yīng)在42貯放，貯放時(shí)間應(yīng)不超過小時(shí)，最長不得超過12小時(shí)。冰凍血漿（-30以下）保存期不超過6個(gè)月。1.1.2對(duì)制造工作室、設(shè)備及原材料的要求，與人血白蛋白（低溫乙醇法）制造及檢定規(guī)程中1.1.31.1.4項(xiàng)要求相同。1.2制造工藝1.2.1采用低溫乙醇法或凍融法制得冷沉淀，經(jīng)抽提、吸附、精制，亦可采用經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)的其他工藝制備，并經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)的適宜方法進(jìn)行病毒滅活處理。1.2.2分批同一制造工藝、同一容器混合的制品作為一批，不同濾器和不同機(jī)柜凍干的制品分為亞批。1.2.3穩(wěn)定

3、劑及防腐劑制品內(nèi)允許加穩(wěn)定劑，制品應(yīng)不含防腐劑。1.2.4除菌過濾及分裝本品應(yīng)用微孔薄膜過濾，可直接分裝無菌的成品瓶內(nèi)，每瓶裝量根據(jù)效價(jià)及規(guī)格確定。1.2.5半成品檢定每批半成品應(yīng)進(jìn)行效價(jià)測(cè)定及熱原質(zhì)試驗(yàn)，并按亞批做無菌試驗(yàn)。1.2.6凍干除菌過濾分裝的制品經(jīng)外觀檢查后立即凍結(jié)，并按人血白蛋白（低溫乙醇法）制造及檢定規(guī)程1。2。5項(xiàng)規(guī)定進(jìn)行凍干，但制品溫度不得超過35。1.3規(guī)格每瓶含人凝血因子的效價(jià)可有50、100、200、300、400IU五種，制品的效價(jià)應(yīng)標(biāo)示在瓶簽及包裝上。2成品檢定2.1抽樣每批制品應(yīng)抽樣作全面質(zhì)量檢定，不同機(jī)柜凍干的制品分別抽樣做無菌試驗(yàn)和水分測(cè)定。2.2物理檢查2

4、.2.1外觀應(yīng)為乳白色疏松體，無融化跡象。溶解后溶液澄清或輕微乳光，允許有微量細(xì)小蛋白顆粒。2.2.2真空度以高頻火花真空測(cè)定器檢測(cè)，瓶內(nèi)應(yīng)出現(xiàn)藍(lán)紫色輝光。2.2.3溶解時(shí)間從冰箱取出的制品應(yīng)先平衡至2537，然后按瓶簽標(biāo)示量加入適量3037滅菌注射用水，使其每ml含4IU。制品應(yīng)于30分鐘內(nèi)溶解。2.3化學(xué)檢定按生物制品化學(xué)檢定規(guī)程進(jìn)行。2.3.1水分水分含量應(yīng)3%（g/g）。2.3.2pH值取2.2.3項(xiàng)下溶解在202測(cè)定，pH值應(yīng)為6.87.6。2.3.3鈉離子測(cè)定取2.2.3項(xiàng)下溶液測(cè)定，鈉離子含量應(yīng)160mmol/L。2.3.4枸櫞酸離子測(cè)定取2.2.3項(xiàng)下溶液測(cè)定，如加枸櫞酸鈉作穩(wěn)

5、定劑，其枸櫞酸離子含量應(yīng)25mmol/L。2.4效價(jià)測(cè)定取2.2.3項(xiàng)下溶液用一步或二步法（見附錄）進(jìn)行測(cè)定，每瓶所含人凝血因子的效價(jià)應(yīng)不低于標(biāo)示量的80%。2.5比活性每mg蛋白質(zhì)所含人凝血因子的效價(jià)應(yīng)0.25IU。2.6HBsAg檢測(cè)用敏感性為1ng/ml以下的試劑盒檢測(cè)，應(yīng)為陰性。2.7抗HCV檢測(cè)用敏感的方法檢測(cè)，應(yīng)為陰性。2.8抗HIV-1及2檢測(cè)用敏感的方法檢測(cè)，應(yīng)為陰性。2.9無菌試驗(yàn)樣品溶解后按生物制品無菌試驗(yàn)規(guī)程進(jìn)行。2.10安全試驗(yàn)2.10.1豚鼠試驗(yàn)用體重300400g健康豚鼠2只，每只腹腔注射檢品15IU，注射后半小時(shí)內(nèi)動(dòng)物不應(yīng)有明顯的異常反應(yīng)，觀察7天，動(dòng)物均健存，每只體重增加者判為合格。如不符合上述要求，用4只豚鼠復(fù)試一次，判定標(biāo)準(zhǔn)同前。2.10.2小白鼠試驗(yàn)用體重1820g小白鼠5只，每只腹腔注射檢品1.5IU，半小時(shí)內(nèi)動(dòng)物不應(yīng)有明顯的異常反應(yīng)，繼續(xù)觀察7天，動(dòng)物均健存，每只體重增加者判為合格。如不符合上述要求，用10只小白鼠復(fù)試一次，判定標(biāo)準(zhǔn)同前。2.11熱原質(zhì)試驗(yàn)按生物制品熱原質(zhì)試驗(yàn)規(guī)程進(jìn)行，注射劑量按家兔體重注射10IU/kg。判定標(biāo)準(zhǔn)按該4.2項(xiàng)要求進(jìn)行。2.12鑒別試驗(yàn)用免疫雙擴(kuò)散法，僅與抗人的血清產(chǎn)生沉淀