藥大天然藥化第十一章

1、1診斷試劑在結構測定中的應用常用的診斷試劑： 甲醇鈉(NaOCH3) 醋酸鈉(NaOCOCH3) 醋酸鈉/硼酸(NaOCOCH3/H3BO3) 三氯化鋁(AlCl3) 三氯化鋁/鹽酸(AlCl3/HCl)2診斷試劑在結構測定中的應用1. NaOMe：堿性強，酚OH易形成鈉鹽。PhOHPhO-Na+，從而增加電子云密度和流動性 紅移。2. NaOAc： 未熔融: 堿性較弱，只能使黃酮母核上酸性較強 的酚OH解離而使UV譜紅移。 熔 融：堿性,表現出與NaOMe類似的效果。3診斷試劑在結構測定中的應用3. NaOAc/H3BO3：用于鑒定鄰二酚OH。 在醋酸鈉堿性下，鄰二酚OH與硼酸絡合，引起峰帶

2、紅移。4診斷試劑在結構測定中的應用4. AlCl3 5. AlCl3 /HCl： 分子中有3-OH，5-OH，鄰二酚OH時，可與Al3+絡合，引 起吸收峰紅移。鋁絡合物穩(wěn)定性： 黃酮醇3-OH 黃酮5-OH 二氫黃酮5-OH 鄰二酚OH 二氫黃酮醇3-OH5診斷試劑對黃酮類化合物UV譜圖的影響及結構的關系診斷試劑帶II帶I歸屬NaOCH3紅移40-60nm, 強度不降示有4-OH紅移50-60nm, 強度下降示有3-OH, 但無4-OH吸收譜隨時間延長而衰退示有對堿敏感的取代方式NaOAc（未熔融）紅移5-20nm在長波一側有明顯肩峰示有7-OH示有4-OH，但無3或7-OHNaOAc（熔融）

3、紅移40-65nm強度下降示有4-OH吸收譜隨時間延長而衰退示有對堿敏感的取代方式6診斷試劑帶II帶I歸屬NaOAc/H3BO3紅移5-10nm示A環(huán)有鄰二酚羥基，但不包括5,6-二羥基紅移12-30nm示B環(huán)有鄰二酚羥基AlCl3及AlCl3/HClAlCl3/HCl譜圖 = AlCl3譜圖 示結構中無鄰二酚羥基AlCl3/HCl譜圖 AlCl3譜圖 示結構中可能有鄰二酚羥基帶I或Ia紫移30-40nm示B環(huán)有鄰二酚羥基帶I或Ia紫移50-65nm示A、B環(huán)上均有鄰二酚羥基AlCl3/HCl譜圖 = CH3OH譜圖 示無3-或5-OHAlCl3/HCl譜圖 CH3OH譜圖 示可能有3-或5-

4、OH帶I紅移35-55nm示只有5-OH帶I紅移60nm示只有3-OH帶I紅移50-60nm示可能同時有3-和5-OH帶I紅移17-20nm除5-OH外，還有6-含氧取代診斷試劑對黃酮類化合物UV譜圖的影響及結構的關系7練習-蘆丁的UV光譜CH3OHNaOCH3AlCl3AlCl3/HClNaOCOCH3NaOCOCH3/H3BO3259, 266sh, 299sh, 359272, 327, 410275, 303sh, 433271, 300, 364sh, 402271, 325, 393262, 298, 3878練習-由UV光譜推斷結構CH3OHNaOCH3AlCl3AlCl3/HC

5、lCH3OHNaOCOCH3NaOCOCH3/H3BO3259,266sh,299sh,359272,327,410275,303sh,433271,300,364sh,402259,266sh,299sh,359271,325,393262,298,387紅移51nm有4-OH紫移31nmB環(huán)有鄰二酚羥基紅移43nm只有5-OH紅移12nm有7-OH紅移28nm示B環(huán)有鄰二酚羥基9氫核磁共振在黃酮類結構分析中的應用常用溶劑: CDCl3、DMSO-d6、C5H5N;當用DMSO-d6 時: 5-OH: 12.40; 7-OH: 10.93; 3-OH: 9.70。加入D2O交換后，OH信號消

6、失。10氫核磁共振基礎知識（一）11氫核磁共振基礎知識（二）102345678910111213C3CH C2CH2 C-CH3環(huán)烷烴0.21.5CH2Ar CH2NR2 CH2S CCH CH2C=O CH2=CH-CH31.73CH2F CH2Cl CH2Br CH2I CH2O CH2NO224.70.5(1)5.568.510.512CHCl3 (7.27)4.65.9910OH NH2 NHCR2=CH-RRCOOHRCHO常用溶劑的質子的化學位移值D特征質子化學位移1201.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0Chemical shift (d, ppm)Cl

7、2CHCH34 lines;quartet2 lines;doubletCH3CH核磁共振基礎知識（三）1301.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0Chemical shift (d, ppm)BrCH2CH34 lines;quartet3 lines;tripletCH3CH2核磁共振基礎知識（四）1401.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0Chemical shift (d, ppm)BrCH(CH3)27 lines;septet2 lines;doubletCH3CH核磁共振基礎知識（五）1501.02.03.04.05.06.07.0

8、8.09.010.0Chemical shift (d, ppm)OCH3HHHHClOCH3核磁共振基礎知識（六）16HHO2NHdoublet of doubletsdoubletdoublet核磁共振基礎知識（七）1701.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0Chemical shift (d, ppm)ClCH2CH3ClCH2CH2CH2CH2CH31H核磁共振基礎知識（八）181H-NMR在黃酮結構分析中的應用A 環(huán)質子 B環(huán)質子 C環(huán)質子 糖上質子 取代基團質子 芳環(huán)質子 芳環(huán)質子 與類型有關 端基質子 -OH、-CH3、 其他質子 -OCH3、-OCOCH

9、3 黃酮類化合物各質子的信號特征（、峰形狀、J、峰面積）符合芳環(huán)質子規(guī)律19黃酮類化合物A、B環(huán)的取代模式A環(huán)取代模式B環(huán)取代模式20黃酮類化合物1H-NMR譜6-H 5.76.9 (d, J = 2.5 Hz)8-H 5.76.9 (d, J = 2.5 Hz)6-H信號總比8-H高場H-6H-8黃酮、黃酮醇、異黃酮6.0-6.2, d6.3-6.5, d上述化合物7-O-糖苷6.2-6.4, d6.5-6.9, d二氫黃酮、二氫黃酮醇5.7-6.0, d5.9-6.1, d上述化合物7-O-糖苷5.9-6.1, d6.1-6.4, d5,7-二取代黃酮A環(huán)215,7-二取代黃酮實例芹菜素2

10、25-H 7.98.2 (d, J = 9.0 Hz) 6-H 6.77.1 (dd, J=9.0, 2.5 Hz) 8-H 6.77.0 (d, J = 2.5 Hz)黃酮、黃酮醇、異黃酮二氫黃酮、二氫黃酮醇H-57.9-8.2, d7.7-7.9, dH-66.7-7.1, dd6.4-6.5, ddH-86.7-7.0, d6.3-6.4, d7-取代黃酮A環(huán)黃酮類化合物1H-NMR譜237-取代黃酮實例刺槐亭24H-2,6H-3,5二氫黃酮類7.1-7.3, d6.5-7.1, d二氫黃酮醇類7.2-7.4, d異黃酮類7.2-7.5, d查耳酮類7.4-7.6, d橙酮類7.6-7.

11、8, d黃酮類7.7-7.9, d黃酮醇類7.9-8.1, dB環(huán)質子形成H-2,6及H-3,5兩組形成AABB系統(tǒng)總體比A環(huán)質子低場H-2,6比H-3,5低場4-取代黃酮B環(huán)黃酮類化合物1H-NMR譜254-取代黃酮實例芹菜素2601.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0Chemical shift (d, ppm)OCH3HHHHClOCH3AABB 取代模式27H-2H-6黃酮類3,4-OH及3-OH,4-OMe7.2-7.3, d7.3-7.5, dd黃酮醇類3,4-OH及3-OH,4-OMe7.5-7.7, d7.6-7.9, dd黃酮醇類3-OMe,4-OH7

12、.6-7.8, d7.4-7.6, dd黃酮醇類3,4-OH,3-O-糖7.2-7.5, d7.3-7.7, dd對于黃酮與黃酮醇H-5作為一個二重峰(d, J=8.5 Hz)出現在6.7-7.1處H-2(d, J=2.5 Hz)及H-6(dd, J=8.5, 2.5Hz)信號出現在7.2-7.9異黃酮、二氫黃酮及二氫異黃酮H-2,5,6作為一個多重峰出現在6.7-7.13,4-取代黃酮B環(huán)黃酮類化合物1H-NMR譜283,4-取代黃酮實例木犀草素29 若3 位和5 位取代基相同時，H-2 , H-6 作為一個單峰，出現在 6.50 7.50。 若3 位和5 位取代基不相同時， H-2 , H

13、-6 將以不同的化學位移分別作為二重峰出現，J=2.0Hz。3,4,5-取代黃酮B環(huán)黃酮類化合物1H-NMR譜30刺槐亭3,4,5-取代黃酮31 H-3常作為一個尖銳的單峰信號出現在6.3處，常會與H-6或H-8相混，應注意區(qū)別H-2常作為單峰出現在較低場區(qū) 7.6-7.8 (1H, s, CDCl3) 8.5-8.7 (1H, s, DMSO-d6)C環(huán)黃酮及異黃酮黃酮類C環(huán)1H-NMR譜32黃酮類C環(huán)1H NMR實例芹菜素黃酮33黃酮類C環(huán)1H NMR實例奧洛波爾異黃酮34黃酮類C環(huán)1H NMRH-2 5.2 (1H, dd, Jtrans=11.5, Jcis=5.0 Hz) H-3 2

14、.8 (1H, dd, J=17.0Hz, J=11.5Hz) (1H, dd, J=17.0Hz, J=5.0Hz)二氫黃酮35黃酮類C環(huán)1H NMR實例甘草素二氫黃酮36黃酮類C環(huán)1H NMR實例二氫黃酮醇二氫黃酮醇3-O糖苷H-24.8-5.0, d, J=11Hz5.0-5.6, d, J=11HzH-34.1-4.3, d, J=11Hz4.3-4.6 , d, J=11Hz二氫黃酮醇37黃酮類C環(huán)1H NMR實例二氫槲皮素二氫黃酮醇38黃酮類C環(huán)1H NMRH- 6.5-6.7 (1H, d, J=17.0Hz)H- 7.3-7.7 (1H, d, J=17.0Hz)芐氫 6.5-

15、6.7 (1H, s, CDCl3) 6.4-6.9 (1H, s, DMSO-d6)查耳酮及橙酮39黃酮類化合物1H-NMR譜糖上H-1黃酮醇3-O-鼠李糖苷5.0-5.1黃酮醇3-O-葡萄糖苷5.7-6.0黃酮類7-O-葡萄糖苷4.8-5.2黃酮類4-O-葡萄糖苷黃酮類5-O-葡萄糖苷黃酮類6-及8-C-糖苷二氫黃酮醇3-O-葡萄糖苷4.1-4.3二氫黃酮醇3-O-鼠李糖苷4.0-4.2糖40黃酮類1H NMR實例芹菜素-7-O葡萄糖苷41黃酮類化合物1H NMRHCH3甲基2.04-2.45 (3H,s)乙酰氧基2.30-2.45 (3H,s)甲氧基 3.45-4.10 (3H,s)5O

16、H： 12 ppm7OH： 11 ppm3OH： 10 ppm其他取代基42黃酮類型1H NMR實例5-OH7-OH4-OH3-OH木犀草素43質譜在黃酮類化合物鑒定中的應用方法：EI-MS（電子轟擊質譜）、FD-MS（場解吸質譜）、FAB-MS（快原子轟擊質譜）苷元：EI-MS可得到分子離子峰(強, 往往為基峰)；苷：用FD-MS、FAB-MS或將甙作成甲基化或三甲基硅醚化衍生物，再測EI-MS。44主要碎片離子峰為裂解途徑I 產生的A1和B1 母核確定及裂解途徑II產生的 B2+ A、B-環(huán)取代情況裂解途徑IRDA裂解EI-MS裂解規(guī)律45裂解途徑II 通常，上述兩種基本裂解途徑是相互競爭

17、、相互制約的。并且，途徑I裂解產生的碎片離子豐度大致與途徑II裂解產生的碎片離子的豐度互成反比。EI-MS裂解規(guī)律46結構研究中注意的問題化學法：將黃酮類化合物與結構相似的已知化合物的旋光度進行比較來測定構型。單晶X-衍射法 ：常用方法之一，可信度高，但化合物必須是晶體。核磁共振法： 需使用手性的氘代試劑，利用其引起的化學位移的差異來確定構型。圓二色光譜及CD激子手性法立體構型47習題有下列四種黃酮類化合物A、R1R2HB、R1H, R2RhaC、R1Glc, R2HD、R1Glc, R2Rha比較其酸性及極性的大小: 酸性( )( )( )( ) 極性( )( )( )( )比較這四種化合物

18、在如下三種色譜中Rf值大小順序:(1)硅膠TLC(條件CHCl3MeOH 4:1展開), Rf值( )( )( )( )(2)聚酰胺TLC(條件60%甲醇水展開), Rf值( )( )( )( )(3)紙色譜(條件8%醋酸水展開), Rf值( )( )( )( )48從某中藥中分離得到一淡黃色結晶I, 鹽酸鎂粉反應呈紫紅色, Molish反應陽性, FeCl3反應陽性, ZrOCl2反區(qū)呈黃色, 但加入枸櫞酸后黃色褪去. A經酸水解所得苷元ZrOCl2拘檬酸反應黃色不褪, 水解液中檢出葡萄糖和鼠李糖。A的UV光譜數據如下:MeOH259, 226, 299(sh), 359NaOMe272, 327, 410NaOAc271, 325, 393NaOAcH3BO4262, 298, 387AlCl3275, 303(sh), 433AlCl3HCl271, 300, 36