2.腫瘤標(biāo)志物類定量檢測(cè)試劑注冊(cè)申報(bào)資料指導(dǎo)原則

1、123456789101112131415161718192021222324腫瘤標(biāo)志物類定量檢測(cè)試劑注冊(cè)申報(bào)資料指導(dǎo)原則一、前言本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊(cè)申請(qǐng)人對(duì)腫瘤標(biāo)志物類定量檢測(cè)試劑 注冊(cè)申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時(shí)也為技術(shù)審評(píng)部門對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料 的技術(shù)審評(píng)提供參考。本指導(dǎo)原則是對(duì)腫瘤標(biāo)志物類定量檢測(cè)試劑的一般要求，申請(qǐng) 人應(yīng)依據(jù)具體產(chǎn)品的特性對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化，并 依據(jù)產(chǎn)品特性確定其中的具體內(nèi)容是否適用。本指導(dǎo)原則是對(duì)申請(qǐng)人和審查人員的指導(dǎo)性文件，但不包括注冊(cè) 審批所涉及的行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如果有能夠滿足相 關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但需要提供詳細(xì)的研究

2、資料和 驗(yàn)證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定 的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo) 原則相關(guān)內(nèi)容也將進(jìn)行適時(shí)調(diào)整。二、適用范圍腫瘤標(biāo)志物類定量檢測(cè)試劑是指利用各種方法學(xué)對(duì)人血清、血漿 或其他體液中的腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行體外定量分析的試劑。本指導(dǎo)原則適 用于進(jìn)行首次注冊(cè)申報(bào)和相關(guān)許可事項(xiàng)變更的產(chǎn)品。從方法學(xué)考慮，本文主要指利用基于抗原抗體反應(yīng)原理的免疫學(xué) 方法對(duì)腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行定量檢測(cè)的體外診斷試劑，如酶免疫法、化學(xué) 發(fā)光法或微粒子酶免法等（不限于上述方法學(xué)），而不包括組織受體 檢測(cè)、生物化學(xué)方法、免疫組化染色法

3、、分子生物學(xué)方法類檢測(cè)試劑，特征或企業(yè)的研究習(xí)慣進(jìn)行，前提是必須保證研究的科學(xué)合理性。具 體實(shí)驗(yàn)方法可以參考相關(guān)的CLSI-EP文件或國(guó)內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品 性能評(píng)估的文件進(jìn)行。217218219220221222223224225226227228229230231232233234235236237238239240.線性范圍建立試劑線性范圍所用的樣本基質(zhì)應(yīng)盡可能與臨床實(shí)際檢測(cè)的 樣本相似，理想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測(cè)定上限的混合人血 清，且應(yīng)充分考慮多倍稀釋對(duì)樣本基質(zhì)的影響。建立一種定量測(cè)定方 法的線性范圍時(shí)，需在預(yù)期測(cè)定范圍內(nèi)選擇7-11個(gè)濃度水平。例如, 將預(yù)期測(cè)定范圍加寬至130

4、%,在此范圍內(nèi)選擇更多的濃度水平，然 后依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果逐漸減少數(shù)據(jù)點(diǎn)直至表現(xiàn)出線性關(guān)系，可發(fā)現(xiàn)最寬的 線性范圍。.最低檢測(cè)限（分析靈敏度）最低檢測(cè)限的確定常使用同批號(hào)試劑對(duì)零濃度校準(zhǔn)品（或樣品稀 釋液）進(jìn)行至少20次重復(fù)檢測(cè)，平均值加（或減）2倍SD （295% 置信區(qū)間）即試劑的最低檢測(cè)限。.特異性（1）溶血（血紅蛋白）、高脂、高膽紅素等干擾因素對(duì)檢測(cè)結(jié) 果的影響及相關(guān)干擾因子的高限值。（2）自身抗體影響，如RF、ANA等。（3）樣本中存在的某些與待測(cè)抗原有相似化學(xué)結(jié)構(gòu)或抗原表位 的分子，可能與試劑中的單克隆抗體發(fā)生交叉反應(yīng)而影響檢測(cè)結(jié)果， 如易共存的其他腫瘤標(biāo)志物抗原、某些激素、近期使用的抗

5、腫瘤藥物、 人抗鼠抗體（HAMA）等。.高濃度Hook效應(yīng)及樣本稀釋241242243244245246247248249250251252253254255256257258259260261262263264Hook效應(yīng)通常指在雙抗體夾心實(shí)驗(yàn)中，由于標(biāo)本中受檢抗原的 含量過(guò)高，過(guò)量抗原分別與固相抗體和酶標(biāo)抗體結(jié)合，而不再形成“夾 心復(fù)合物”，從而影響檢測(cè)結(jié)果，將高濃度錯(cuò)誤報(bào)告為低濃度，出現(xiàn) 高濃度后帶現(xiàn)象，又稱“鉤狀效應(yīng)”，在一步法操作更常見。企業(yè)應(yīng)對(duì)一些極高值樣本進(jìn)行相關(guān)研究，以驗(yàn)證產(chǎn)生Hook效應(yīng) 的高限值。過(guò)度稀釋可能產(chǎn)生明顯的基質(zhì)效應(yīng)，企業(yè)應(yīng)對(duì)樣本稀釋液、 合理的稀釋比例做相關(guān)研究

6、以確認(rèn)最佳稀釋條件。.其他需注意問(wèn)題對(duì)于適用多個(gè)機(jī)型的產(chǎn)品，應(yīng)提供如產(chǎn)品說(shuō)明書【適用機(jī)型】項(xiàng) 中所列的所有型號(hào)儀器的性能評(píng)估資料。試劑盒的樣本類型如包括血清和血漿樣本，則應(yīng)對(duì)二者進(jìn)行相關(guān) 性研究以確認(rèn)二者檢測(cè)結(jié)果是否完全一致或存在某種相關(guān)性（如系數(shù) 關(guān)系）。對(duì)于血漿樣本，企業(yè)應(yīng)對(duì)不同的抗凝劑進(jìn)行研究以確認(rèn)最適 的抗凝條件以及是否會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果。（八）參考值（范圍）確定資料參考值（范圍）確定所采用的樣本來(lái)源、確定方法及詳細(xì)的試驗(yàn) 資料。建議采用受試者工作特征（R0C）曲線方法確定擬申報(bào)腫瘤標(biāo) 志物的參考值（范圍）。（九）穩(wěn)定性研究資料穩(wěn)定性研究主要包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性、高溫加速破壞穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn) 定性

7、、上機(jī)穩(wěn)定性及開瓶（復(fù)溶）穩(wěn)定性等，企業(yè)可根據(jù)實(shí)際需要選 擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依 據(jù)、具體方法及過(guò)程。對(duì)于實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少3批樣品在 實(shí)際儲(chǔ)存條件下保存至成品有效期后的研究資料。265266267268269270271272273274275276277278279280281282283284285286287288（十）臨床試驗(yàn)研究.研究方法（1）已有同類產(chǎn)品上市的臨床研究選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市、臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為參 比試劑，采用擬申報(bào)產(chǎn)品（以下稱考核試劑）與之進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)研究, 證明本品與已上市產(chǎn)品等效或優(yōu)于已上市產(chǎn)品。建議企

8、業(yè)盡量選擇方 法學(xué)相同、線性范圍及精密度等性能接近的同類試劑作為參比試劑。（2）新腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)試劑的臨床研究對(duì)于無(wú)法選擇參比試劑的新腫瘤標(biāo)記物而言，其臨床研究應(yīng)選擇 多個(gè)相關(guān)的良惡性疾病組及部分正常人群，驗(yàn)證新標(biāo)記物的臨床靈敏 度和特異性，并利用R0C曲線確定合適的參考值（范圍）。另外，還 應(yīng)對(duì)至少100例特定的惡性腫瘤患者進(jìn)行治療前后的隨訪監(jiān)測(cè)研究， 以驗(yàn)證新腫瘤標(biāo)記物濃度變化與患者病情變化的相關(guān)性。臨床隨訪監(jiān) 測(cè)研究應(yīng)結(jié)合臨床治療措施的選擇（公認(rèn)有效的治療手段）、患者治 療后恢復(fù)狀況、腫瘤標(biāo)志物代謝周期（半衰期）等因素綜合考慮?；?者采樣的時(shí)間點(diǎn)視臨床需要而定，申請(qǐng)人不得隨意干涉。.臨床

9、研究單位的選擇建議在國(guó)內(nèi)不同城市選擇臨床單位，盡量使各單位的臨床樣本有 一定地域代表性；臨床研究單位應(yīng)具有腫瘤疾病診療的優(yōu)勢(shì)，實(shí)驗(yàn)操 作人員應(yīng)有足夠的時(shí)間熟悉檢測(cè)系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)（儀器、試劑、質(zhì)控及 操作程序等），熟悉評(píng)價(jià)方案。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中，考核試劑和參比試劑 都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，定期對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，最大限度保證試 驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。.臨床試驗(yàn)方案289290291292293294295296297298299300301302303304305306307308309310311312臨床試驗(yàn)實(shí)施前，研究人員應(yīng)從流行病學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)等多方面考慮，設(shè)計(jì)科學(xué)合理的臨

10、床研究方案。各臨床研究 機(jī)構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)基本一致，且保證在整個(gè)臨床試驗(yàn)過(guò)程中遵循預(yù)定 的方案實(shí)施，不可隨意改動(dòng)。整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程應(yīng)在臨床研究機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn) 室內(nèi)并由本實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員操作完成，申報(bào)單位的技術(shù)人員除進(jìn)行 必要的技術(shù)指導(dǎo)外，不得隨意干涉實(shí)驗(yàn)進(jìn)程，尤其是數(shù)據(jù)收集過(guò)程。試驗(yàn)方案中應(yīng)確定嚴(yán)格的病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入選的 病例再被排除出臨床研究都應(yīng)記錄在案并明確說(shuō)明原因。在試驗(yàn)操作 過(guò)程中和判定試驗(yàn)結(jié)果時(shí)應(yīng)采用盲法以保證試驗(yàn)結(jié)果的客觀性。對(duì)于 新試劑的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)研究，應(yīng)在方案中明確前后兩次濃度變化有臨床意 義的標(biāo)準(zhǔn)。臨床試驗(yàn)中所涉及的樣本類型應(yīng)與產(chǎn)品說(shuō)明書一致，且每 種樣本類型例數(shù)的選擇應(yīng)符

11、合基本的統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。各研究單位選用的 參比試劑及所用機(jī)型應(yīng)完全一致，以便進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。.臨床病例選擇如上文所述，絕大多數(shù)腫瘤標(biāo)志物對(duì)于惡性腫瘤診斷的靈敏度和 特異性較低，器官定位及對(duì)疾病良惡性的區(qū)分能力都較差。因此，在 進(jìn)行臨床研究時(shí)，除選擇目的器官/組織惡性疾病的病例外，還應(yīng)選 擇其他器官/組織的惡性病患者、相關(guān)的良性病例等。另外，孕婦或 處于生理周期女性亦可見某些激素或胚胎蛋白類腫瘤標(biāo)志物的水平 升高，對(duì)于此類腫瘤標(biāo)志物，臨床研究中應(yīng)選擇部分相關(guān)樣本作為受 試對(duì)象。臨床研究應(yīng)包括對(duì)部分來(lái)自正常健康人群的樣本作為正常對(duì)照。 比較正常組和疾病組結(jié)果，以便對(duì)申報(bào)產(chǎn)品的臨床性能做出全面分

12、析。建議對(duì)健康人群例數(shù)的選擇以不超過(guò)150例為宜。對(duì)于新的腫瘤標(biāo)志物或臨床意義有待進(jìn)一步明確的項(xiàng)目，應(yīng)提供足夠臨床證據(jù)證明 其臨床預(yù)期用途。不管是健康人群或不同病種的患者，每一組受試者 的最小入選人數(shù)均須滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)分析的基本要求。313314315316317318319320321322323324325326327328329330331332333334335336另外，建議在臨床試驗(yàn)中選擇部分含干擾物質(zhì)的標(biāo)本進(jìn)行對(duì)比研 究，包括高脂、溶血、黃疸的樣本，RF、ANA陽(yáng)性樣本，易共存的其 他腫瘤標(biāo)志物抗原同時(shí)升高的患者標(biāo)本，以從臨床角度驗(yàn)證試劑的特 異性。.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析對(duì)臨床試驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)應(yīng)

13、選擇合適的統(tǒng)計(jì)方法，如相關(guān)分析、線 性回歸、受試者工作特征(R0C)曲線分析、陰/陽(yáng)性符合率等。對(duì)于 對(duì)比實(shí)驗(yàn)的等效性研究，最常用是對(duì)考核試劑和參比試劑兩組檢測(cè)結(jié) 果的相關(guān)及線性回歸分析，應(yīng)重點(diǎn)觀察相關(guān)系數(shù)(r值)或判定系數(shù) (R2)、回歸擬合方程(斜率和y軸截距)等指標(biāo)。結(jié)合臨床試驗(yàn)數(shù) 據(jù)的正/偏態(tài)分布情況，建議統(tǒng)計(jì)學(xué)負(fù)責(zé)人選擇合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn) 行分析，統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)可以證明兩種方法的檢測(cè)結(jié)果無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差 異。在臨床研究方案中應(yīng)明確統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)假設(shè)，即評(píng)價(jià)考核試劑與參比 試劑是否等效的標(biāo)準(zhǔn)。.結(jié)果差異樣本的驗(yàn)證在數(shù)據(jù)收集過(guò)程中，對(duì)于兩種試劑的檢測(cè)結(jié)果有明顯差異的樣 本，應(yīng)采用臨床上普遍認(rèn)為質(zhì)量較

14、好的第三種同類試劑進(jìn)行驗(yàn)證試 驗(yàn)，同時(shí)結(jié)合患者的臨床病情對(duì)差異原因及可能結(jié)果進(jìn)行分析。.臨床試驗(yàn)總結(jié)報(bào)告撰寫根據(jù)體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則的要求，臨床試驗(yàn) 報(bào)告應(yīng)該對(duì)試驗(yàn)的整體設(shè)計(jì)及各個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)給予清晰、完整的闡述，應(yīng)該對(duì)整個(gè)臨床試驗(yàn)實(shí)施過(guò)程、結(jié)果分析、結(jié)論等進(jìn)行條理分明的描述, 并應(yīng)包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計(jì)分析方法。建議在臨床總結(jié)報(bào)告中對(duì) 以下內(nèi)容進(jìn)行詳述。337338339340341342343344345346347348349350351352353354355356357358359360(1)臨床試驗(yàn)總體設(shè)計(jì)及方案描述臨床試驗(yàn)的整體管理情況、臨床研究單位選擇、臨床主要研 究人

15、員簡(jiǎn)介等基本情況介紹；病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)、不同病種的預(yù)期選擇例數(shù)及健康人群的 選擇標(biāo)準(zhǔn)； 樣本類型，樣本的收集、處理及保存等；統(tǒng)計(jì)學(xué)方法、統(tǒng)計(jì)軟件、評(píng)價(jià)統(tǒng)計(jì)結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)。(2)具體的臨床試驗(yàn)情況考核試劑和參比試劑的名稱、批號(hào)、有效期及所用機(jī)型等信 息；對(duì)各研究單位的病例數(shù)、病種分布情況進(jìn)行總合，建議以列 表或圖示方式給出具體例數(shù)及百分比；質(zhì)量控制，試驗(yàn)人員培訓(xùn)、儀器日常維護(hù)、儀器校準(zhǔn)、質(zhì)控 品運(yùn)行情況，對(duì)檢測(cè)精密度、質(zhì)控品回收(或測(cè)量值)、抽查結(jié)果評(píng) 估；具體試驗(yàn)過(guò)程，樣本檢測(cè)、數(shù)據(jù)收集、樣本長(zhǎng)期保存、結(jié)果 不一致樣本的校驗(yàn)等。(3)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 數(shù)據(jù)預(yù)處理、差異數(shù)據(jù)的重新檢測(cè)或第三方驗(yàn)證以及是否

16、納 入最終數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)、對(duì)異常值或缺失值的處理、研究過(guò)程中是否涉及對(duì) 方案的修改。361362363364365366367368369370371372373374375376377378379380381382383384定性結(jié)果的一致性分析陽(yáng)性符合率、陰性符合率、總體符合率及其95% （或99%）的置 信區(qū)間。以交叉表的形式總結(jié)兩種試劑的定性檢測(cè)結(jié)果，對(duì)定性結(jié)果 進(jìn)行四格表卡方或kappa檢驗(yàn)以驗(yàn)證兩種試劑定性結(jié)果的一致性。定量值相關(guān)性和一致性分析用回歸分析驗(yàn)證兩種試劑結(jié)果的相關(guān)性，以y=a+bx和R?的形式 給出回歸分析的擬合方程，其中：y是考核試劑結(jié)果，x是參比試劑 結(jié)果，b是方程斜率，

17、a是y軸截距，R2是判定系數(shù)，同時(shí)應(yīng)給出b 的95% （或99%）置信區(qū)間，定量值結(jié)果應(yīng)無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。另外考慮到在不同的樣本濃度區(qū)間試劑的性能可能存在一定差 異，因此，建議對(duì)總體濃度范圍進(jìn)行區(qū)間分層統(tǒng)計(jì)，對(duì)不同濃度區(qū)間 內(nèi)的結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析以更好的驗(yàn)證兩種試劑的相關(guān)性。對(duì)新腫瘤標(biāo)志物系列監(jiān)測(cè)研究，建議按照患者治療后病情狀況進(jìn) 行逐級(jí)分組，并確定分組的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)各組數(shù)據(jù)分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì) 學(xué)處理，判斷被觀察腫瘤標(biāo)志物的濃度隨疾病狀況的變化情況。（4）討論和結(jié)論對(duì)總體結(jié)果進(jìn)行總結(jié)性描述并簡(jiǎn)要分析試驗(yàn)結(jié)果，對(duì)本次臨床研 究有無(wú)特別說(shuō)明，最后得出臨床試驗(yàn)結(jié)論。四、名詞解釋.腫瘤標(biāo)志物（Tumor

18、 Marker）：是指在惡性腫瘤發(fā)生和增殖過(guò) 程中，由腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生或機(jī)體反應(yīng)而異常產(chǎn)生和/或升高的，反映腫瘤 細(xì)胞特性的一類物質(zhì)。.準(zhǔn)確度（accuracy）： 一個(gè)測(cè)量值與可接受的參考值間的一致程度。385386387388389390391392393394395396397398399400401402403404405406407408.最低檢測(cè)限/分析靈敏度(Lower detection limit)：樣品中 以一定概率可被聲明與零有差異的被測(cè)量的最低值。本指導(dǎo)原則中的 最低檢測(cè)限為區(qū)別于零的不低于95%可信區(qū)間的最低濃度。.分析特異性(analytical Specificity

19、)：測(cè)量程序只測(cè)量被 測(cè)量物的能力。分析特異性用于描述檢測(cè)程序在樣本中有其他物質(zhì)存 在時(shí)只測(cè)量被測(cè)量物的能力。通常以一個(gè)被評(píng)估的潛在干擾物清單來(lái) 描述，并給出在特定醫(yī)學(xué)相關(guān)濃度值水平的分析干擾程度。(潛在干 擾物包括干擾物和交叉反應(yīng)物).線性(linearity)：在給定測(cè)量范圍內(nèi)，給出的測(cè)量結(jié)果與樣 品中實(shí)際存在的被測(cè)量物的值成比例的能力。線性是描述一個(gè)測(cè)量系 統(tǒng)的測(cè)量示值或測(cè)量結(jié)果相關(guān)于樣本的賦值符合直線的屬性。.精密度(precision)：在規(guī)定條件下，相互獨(dú)立的測(cè)試結(jié)果之 間的一致程度。精密度的程度是用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法得到的測(cè)量不精密度的 數(shù)字形式表示，如標(biāo)準(zhǔn)差(SD)和變異系數(shù)(CV)o

20、五、參考文獻(xiàn)：.體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法(試行)(國(guó)食藥監(jiān)械20071229 號(hào)).體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則(國(guó)食藥監(jiān)械 20071240 號(hào)).體外診斷試劑說(shuō)明書編寫指導(dǎo)原則(國(guó)食藥監(jiān)械2007240 號(hào)). Guidance Document for the Submission of Tumor Associated Antigen Premarket Notifications, 510(k), to FDA, FDA, USASetember 19, 1996.409. Practice Guidelines and Recommendations for Use of Tu

21、mor410411412413414410411412413414Markers in the Clinic , the National Academy of Clinical Biochemistry, European Group on Tumor Marker, Volume 15, 2002.馮仁豐，臨床檢驗(yàn)質(zhì)量管理技術(shù)基礎(chǔ)（第二版），上?？茖W(xué) 技術(shù)文獻(xiàn)出版社.中國(guó)生物制品規(guī)程（2000年版），化學(xué)工業(yè)出版社252627282930313233343536373839404142434445464748有利之處可參考執(zhí)行。三、基本要求（一）綜述資料綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描

22、述、有關(guān)生物安全性的 說(shuō)明、研究結(jié)果的總結(jié)評(píng)價(jià)以及同類產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容，應(yīng)符 合體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法（試行）（以下簡(jiǎn)稱辦法）和體 外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料基本要求（國(guó)食藥監(jiān)械2007609號(hào)） 的相關(guān)要求，下面著重介紹與腫瘤標(biāo)志物類定量檢測(cè)試劑預(yù)期用途有 關(guān)的臨床背景情況。理想的腫瘤標(biāo)志物應(yīng)具有以下特性：靈敏度高，便于腫瘤的早期 發(fā)現(xiàn)；特異性好，便于良、惡性腫瘤的鑒別；良好的器官特異性；與 病情嚴(yán)重程度、腫瘤大小或分期有直接關(guān)系；監(jiān)測(cè)治療效果，腫瘤 標(biāo)志物濃度增高或降低與治療效果相關(guān)；預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)，疾病復(fù)發(fā)時(shí)腫瘤 標(biāo)志物水平明顯異常。但至今尚沒(méi)有一種腫瘤標(biāo)志物能完全滿足上述 要求。目前，臨

23、床常用腫瘤標(biāo)志物在用于惡性腫瘤的臨床診治時(shí)，靈 敏度和特異性都不高，絕大多數(shù)腫瘤標(biāo)志物的濃度高低與腫瘤的大 小、生長(zhǎng)、惡性程度以及分級(jí)/分期有一定關(guān)聯(lián)但尚不能作為早期診 斷或確診的依據(jù)。腫瘤標(biāo)志物主要用于惡性腫瘤患者病情的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，不能作為早 期診斷或確診依據(jù)，尚無(wú)足夠證據(jù)證明其可用于普通人群的腫瘤篩 查。其濃度逐漸升高常意味著疾病處于不斷進(jìn)展期或療效不佳，濃度 降低則意味著對(duì)治療有反應(yīng)或療效較好，而穩(wěn)定的抗原水平則常常暗 示疾病處于穩(wěn)定期。動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)的另一目的是判斷殘留病灶、預(yù)測(cè)復(fù)發(fā), 腫瘤標(biāo)志物濃度持續(xù)低水平地高于正常意味著可能有殘留病灶的存在，而短期內(nèi)迅速升高則往往是疾病復(fù)發(fā)的前兆。由于目

24、前應(yīng)用的腫 瘤標(biāo)志物不能完全區(qū)分良惡性疾病，即使?jié)舛鹊陀谡⒖贾狄膊⒉?能排除惡性疾病的可能性，而在許多良性疾病卻可見這些標(biāo)記物濃度 水平的升高，故在對(duì)惡性腫瘤患者的臨床診治中，應(yīng)結(jié)合患者的癥狀 /體征、其他實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)以及治療情況等綜合考慮。495051525354555657585960616263646566676869707172（二）產(chǎn)品說(shuō)明書說(shuō)明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、試驗(yàn)方法、檢測(cè)結(jié)果解釋以及注意 事項(xiàng)等重要信息，是指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對(duì)檢 驗(yàn)結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)。因此，產(chǎn)品說(shuō)明書是體外診斷 試劑注冊(cè)申報(bào)最重要的文件之一。產(chǎn)品說(shuō)明書的格式應(yīng)符合體外診 斷

25、試劑說(shuō)明書編寫指導(dǎo)原則的要求，境外試劑的中文說(shuō)明書除格式 要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原文說(shuō)明書的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且 符合中文表達(dá)習(xí)慣。結(jié)合體外診斷試劑說(shuō)明書編寫指導(dǎo)原則的要求，下面對(duì)腫瘤 標(biāo)志物類定量檢測(cè)試劑說(shuō)明書的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明，以指導(dǎo)注冊(cè) 申報(bào)人員更合理地完成說(shuō)明書編制。.【預(yù)期用途】 應(yīng)至少包括以下幾部分內(nèi)容：（1）說(shuō)明試劑盒用于定量檢測(cè)血清、血漿和/或其他體液中的某 腫瘤標(biāo)志物濃度；（2）簡(jiǎn)單介紹該腫瘤標(biāo)志物的特征，如分子結(jié)構(gòu)、分子量、產(chǎn) 生和代謝主要途徑、半衰期等；（3）腫瘤標(biāo)志物水平升高常見于哪些良惡性疾病，組織/器官 特異性如何，其升高或降低可能有哪些醫(yī)學(xué)解釋；（4）強(qiáng)

26、調(diào)：主要用于對(duì)惡性腫瘤患者進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)以輔助判斷疾病進(jìn)程或治療效果，不能作為惡性腫瘤早期診斷或確診的依據(jù)，不 宜用于普通人群的腫瘤篩查。737475767778798081828384858687888990919293949596.【主要組成成分】(1)說(shuō)明試劑盒包含組分的名稱、數(shù)量、比例或濃度等信息， 如果對(duì)于正確的操作很重要，應(yīng)提供其生物學(xué)來(lái)源、活性及其他特性; 明確說(shuō)明不同批號(hào)試劑盒中各組分是否可以互換。(2)試劑盒內(nèi)如包含校準(zhǔn)品和/或質(zhì)控品，應(yīng)說(shuō)明其主要組成成 分及其生物學(xué)來(lái)源，校準(zhǔn)品應(yīng)注明其定值及溯源性，質(zhì)控品應(yīng)有合適 的靶值范圍。(3)試劑盒中不包含但對(duì)該項(xiàng)檢測(cè)必須的組分，企業(yè)應(yīng)

27、列出相 關(guān)試劑的名稱、貨號(hào)及其他相關(guān)信息。.【樣本要求】 重點(diǎn)明確以下內(nèi)容：樣本類型、處理、保存期 限、保存條件(短期、長(zhǎng)期)、運(yùn)輸條件等。如有血漿樣本，應(yīng)注明 對(duì)抗凝劑的要求。冷藏/冷凍樣本檢測(cè)前是否須恢復(fù)室溫，凍融次數(shù)。 應(yīng)詳細(xì)描述對(duì)特殊體液標(biāo)本的采集條件、保存液、容器等可能影響檢 測(cè)結(jié)果的要求。.【適用機(jī)型】 注明所有適用的儀器型號(hào)，并提供與儀器有關(guān) 的重要信息以指導(dǎo)用戶操作。.【檢驗(yàn)方法】 詳細(xì)說(shuō)明試驗(yàn)操作的各個(gè)步驟，包括：(1)試劑配制方法、注意事項(xiàng)。(2)試驗(yàn)條件；溫度、時(shí)間、儀器波長(zhǎng)等以及試驗(yàn)過(guò)程中的注 意事項(xiàng)。(3)校準(zhǔn)：校準(zhǔn)品的使用方法、注意事項(xiàng)、校準(zhǔn)曲線的繪制。對(duì)需專用儀器

28、的產(chǎn)品，應(yīng)注明推薦的儀器校準(zhǔn)周期。979899100101102103104105106107108109110111112113114115116117118119120(4)質(zhì)量控制：質(zhì)控品的使用方法、對(duì)質(zhì)控結(jié)果的必要解釋以 及推薦的質(zhì)控周期等；建議在本部分注明以下字樣：如果質(zhì)控結(jié)果與 預(yù)期不符，提示檢測(cè)結(jié)果不可靠，不應(yīng)出具檢測(cè)報(bào)告。如質(zhì)控不合格 應(yīng)提供相關(guān)的解決方案。.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】詳述以下性能指標(biāo)：(1)最低檢出限(分析靈敏度)：說(shuō)明試劑的最低檢出濃度或不 高于某濃度水平，簡(jiǎn)單介紹確定方法，對(duì)功能靈敏度如有研究可一并 注明。(2)檢測(cè)范圍：本試劑盒可達(dá)到的線性范圍、檢測(cè)范圍或可報(bào) 告

29、范圍，儀器報(bào)告結(jié)果的高限和低限要求(如有)等。(3)精密度：簡(jiǎn)要說(shuō)明精密度評(píng)價(jià)的方法，建議以列表的方式 列出批內(nèi)/批間、日內(nèi)/日間、運(yùn)行內(nèi)/運(yùn)行間精密度等信息，以標(biāo)準(zhǔn) 差(SD)和變異系數(shù)(CV)的形式表示。(4)特異性：有關(guān)干擾或交叉反應(yīng)的研究。常見的特異性研究 包括：對(duì)溶血、高脂、黃疸等干擾因子研究(結(jié)果應(yīng)量化表示，禁用 輕度、嚴(yán)重等模糊表述)，有關(guān)自身抗體、易共存或結(jié)構(gòu)相似的不同 腫瘤標(biāo)志物間、抗腫瘤藥物特異性(如某些生物制劑)的研究，如未 進(jìn)行相關(guān)研究也應(yīng)提供相關(guān)警示說(shuō)明。Hook (鉤狀)效應(yīng)：說(shuō)明不會(huì)產(chǎn)生Hook效應(yīng)的濃度上限 或相關(guān)研究，如需稀釋，應(yīng)注明對(duì)稀釋液的要求、最佳或最大

30、稀釋比 例。(6)對(duì)比試驗(yàn)研究(如有)：簡(jiǎn)要介紹參比試劑的信息、所采 用的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法等，對(duì)比結(jié)果可以回歸方程、判定系數(shù)的形式表示。(7)建議采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)濃度單位表示腫瘤標(biāo)志物濃度，如涉及121122123124125126127128129130131132133134135136137138139140141142143144不同單位，如U/ml、ng/ml. mg/1等，應(yīng)注明不同單位間的換算關(guān)系。.【參考值(范圍)】應(yīng)注明常用樣本類型的正常參考值(范圍)，簡(jiǎn)單介紹設(shè)定該參 考值(范圍)所選健康人群的區(qū)域特征，建議注明以下字樣“由于地 理、人種、性別及年齡等差異，建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的參考

31、值(范 圍).【注意事項(xiàng)】應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：(1)本試劑盒的檢測(cè)結(jié)果僅供臨床參考，對(duì)患者的臨床診治應(yīng) 結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考 慮。(2)由于方法學(xué)或抗體特異性等原因，使用不同生產(chǎn)商的試劑 對(duì)同一份樣本進(jìn)行腫瘤標(biāo)記物檢測(cè)可能會(huì)得到不同的檢測(cè)結(jié)果，因 此，在腫瘤監(jiān)測(cè)過(guò)程中，用不同試劑檢測(cè)所得結(jié)果不應(yīng)直接相互比較, 以免造成錯(cuò)誤的醫(yī)學(xué)解釋；建議實(shí)驗(yàn)室在發(fā)給臨床醫(yī)生的檢測(cè)報(bào)告注 明所用試劑特征。系列監(jiān)測(cè)中如果改變?cè)噭╊愋停瑒t應(yīng)進(jìn)行額外的連 續(xù)性檢測(cè)并與原有試劑結(jié)果進(jìn)行平行比較以重新確定基線值。(3)有關(guān)人源組分的警告，如：試劑盒內(nèi)的質(zhì)控品、校準(zhǔn)品或 其他人源組分

32、，雖已經(jīng)通過(guò)了 HBs-Ag、HIVl/2-Ab. HCV-Ab等項(xiàng)目的 檢測(cè)，但截至目前，沒(méi)有任何一項(xiàng)檢測(cè)可以確保絕對(duì)安全，故仍應(yīng)將 這些組分作為潛在傳染源對(duì)待。(4)樣本：采集時(shí)間要求、與用藥的先后順序或用藥后時(shí)間間 隔等；對(duì)所有樣本和反應(yīng)廢棄物都應(yīng)視為傳染源對(duì)待。(5)其他有關(guān)不同腫瘤標(biāo)志物特性的注意事項(xiàng)。(三)擬定產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)及編制說(shuō)明145146147148149150151152153154155156157158159160161162163164165166167168擬定產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)符合辦法和體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料基 本要求的相關(guān)規(guī)定。另外，對(duì)于國(guó)產(chǎn)第三類體外診斷試劑產(chǎn)品，應(yīng) 參

33、考中國(guó)生物制品規(guī)程（2000年版），將擬申報(bào)產(chǎn)品的主要原材 料、生產(chǎn)工藝及半成品檢定等內(nèi)容作為附錄附于標(biāo)準(zhǔn)正文后，并在正 文的“產(chǎn)品分類”項(xiàng)中引出該附錄內(nèi)容。作為定量檢測(cè)試劑，腫瘤標(biāo)志物產(chǎn)品的注冊(cè)檢測(cè)應(yīng)主要包括以下 性能指標(biāo)：準(zhǔn)確度、精密度、最低檢測(cè)限（分析靈敏度）、線性范圍 等。如果擬申報(bào)試劑屬于中國(guó)生物制品規(guī)程（2000年版）收錄的 項(xiàng)目或已有相應(yīng)的國(guó)家/行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布，則企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求不得低于 上述標(biāo)準(zhǔn)要求。（四）注冊(cè)檢測(cè)根據(jù)辦法要求，首次申請(qǐng)注冊(cè)的第三類產(chǎn)品應(yīng)該在國(guó)家食品 藥品監(jiān)督管理局認(rèn)可的、具有相應(yīng)承檢范圍的醫(yī)療器械檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行 連續(xù)三個(gè)生產(chǎn)批次樣品的注冊(cè)檢測(cè)。對(duì)于已經(jīng)有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品的

34、腫瘤標(biāo) 志物項(xiàng)目，在注冊(cè)檢測(cè)時(shí)應(yīng)采用相應(yīng)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行，對(duì)于目前尚 無(wú)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品的項(xiàng)目，生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)建立自己的標(biāo)準(zhǔn)體系并提供相應(yīng)的 標(biāo)準(zhǔn)品。（五）主要原材料研究資料主要原材料（包括抗原、抗體及其他主要原料）的選擇、制備、 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證研究資料；質(zhì)控品、校準(zhǔn)品的原料選擇、制備、 定值過(guò)程及試驗(yàn)資料；校準(zhǔn)品的溯源性文件，包括具體溯源鏈、實(shí)驗(yàn) 方法、數(shù)據(jù)及統(tǒng)計(jì)分析等詳細(xì)資料。（六）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料.主要生產(chǎn)工藝介紹，可以圖表方式表示；169170171172173174175176177178179180181182183184185186187188189190191192.反應(yīng)原理