LC1200現(xiàn)場培訓(xùn)教材1講課講稿

1、Good is good, but better carries it.精益求精，善益求善。LC1200現(xiàn)場培訓(xùn)教材1-Agilent1200LC現(xiàn)場培訓(xùn)教材安捷倫科技有限公司化學(xué)分析儀器部1培訓(xùn)目的:基本了解1100LC硬件操作掌握化學(xué)工作站的開機關(guān)機參數(shù)設(shè)定,學(xué)會數(shù)據(jù)采集,數(shù)據(jù)分析的基本操作二培訓(xùn)準(zhǔn)備1儀器設(shè)備Agilent1100LCG1310A:(單元泵)G1312A(二元泵)G1311A(四元泵)G1313A自動進樣器G1316A柱溫箱G1314AVWD檢測器G1362A示差檢測器G1315A/B(DAD檢測器)G1321A(FLD檢測器)色譜柱:ZorbaxeclipseXDBC8

2、,150mm4.6mmi.d2溶劑準(zhǔn)備色譜級純或優(yōu)級純乙腈ACN或甲醇二次蒸餾水基本操作步驟:(一)開機1、打開計算機,進入WindowsNT或Windows2000畫面,并運行BootpServer程序2、打開1200LC各模塊電源3、待各模塊自檢完成后雙擊Instrument1Online圖標(biāo)化學(xué)工作站自動與1200LC通訊進入的工作站畫面如下所示:4、從“視圖”菜單中選擇“方法和運行控制”畫面,單擊“視圖”菜單中的ShowTopToolbarShowstatustoolbarSystemdiagram,”Samplingdiagram”使其命令前有標(biāo)志來調(diào)用所需的界面5、把流動相放入溶劑

3、瓶中6、打開Purge閥7、單擊“泵”圖標(biāo)出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定菜單單擊“設(shè)定泵”選項進入泵編輯畫面。8、設(shè)“流量”3ml/min單擊“確定”。9、單擊“泵”圖標(biāo)出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定菜單單擊Pumpcontrol選項選中On單擊OK則系統(tǒng)開始Purge直到管線內(nèi)由溶劑瓶到泵入口無氣泡為止,切換通道繼續(xù)Purge直到所有要用通道無氣泡為止。10、單擊Pump圖標(biāo)出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定菜單單擊PumpControl選項選中Off單擊Ok關(guān)泵關(guān)閉Purgevalve11、單擊Pump圖標(biāo)出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定菜單單擊Setuppump選項進入Pump編輯畫面設(shè)Flow1.0ml/min12、單擊泵下面的瓶圖標(biāo)如圖所示以四元泵為例輸入溶劑

4、的實際體積和瓶體積也可輸入停泵的體積單擊Ok二、數(shù)據(jù)采集方法編輯1、開始編輯完整方法:從”方法”菜單中選擇“編輯完整方法”項.如上圖所示選中除Dataanalysis外的三項單擊Ok進入下一畫面2、方法信息:在MethodComments中加入方法的信息如方法的用途等單擊“確定”進入下一畫面:3、泵參數(shù)設(shè)定以四元泵為例:在“流速”處輸入流量,如1ml/min在“容劑”處輸入70.0,(A=100-B),也可“插入”一行“時間表”編輯梯度,在“壓力限”處輸入柱子的最大耐高壓以保護柱子,單擊“確定”進入下一畫面4、自動進樣器參數(shù)設(shè)定:選擇合適的進樣方式,如圖所示進樣體積1.0ul,洗瓶位置為6號,

5、“標(biāo)準(zhǔn)進針”-只能輸入進樣體積此方式無洗針功能“”洗針進樣”-可以輸入進樣體積和洗瓶位置此方式針從樣品瓶抽完樣品后會在洗瓶中洗針.“使用進樣器程序”-可以點擊“編輯”鍵進行進樣程序編輯.點擊“確定”進入下一畫面:5、柱溫箱參數(shù)編輯:在“溫度”下面的方框內(nèi)輸入所需溫度,并選中它,點擊“更多信息”鍵,如圖所示:選中“與左側(cè)相同”-使柱溫箱的溫度左右一致,點擊“確定”進入下一畫面6、VWD檢測器參數(shù)設(shè)定:在“波長”下方的空白處輸入所需的檢測波長,如254nm,在“峰寬(響應(yīng)時間)”下方點擊下拉式三角框,選擇合適的響應(yīng)時間,如0.1min(2s)在“時間表”中可以“插入”一行輸入隨時間切換的波長如1m

6、in波長=300nm點擊“確定”進入下一畫面.7、DAD檢測器參數(shù)設(shè)定:色譜條件:流動相:75%ACN,25%水進樣量:5ul;檢測波長:254nm,BW=30nm參比波長=350nm,BW=100nm;柱溫:30;流量:1ml/min;停止時間:出峰完畢樣品波長-一般選擇最大吸收處的波長樣品帶寬BW一般選擇最大吸收值一半處的整個寬度BWNoise參比波長一般選擇在靠近樣品信號的無吸收或低吸收區(qū)域參比帶寬BW至少要與樣品信號的帶寬相等許多情況下用100nm作為缺省值Peak,widthResponsetime其值盡可能接近要測的窄峰峰寬Slit狹縫窄光譜分辨率高寬時噪音低同時可以輸入采集光譜方

7、式步長范圍閾值選中所用的燈點擊Ok進入下一畫面8、RID檢測器參數(shù)設(shè)定:色譜條件:進樣體積:20ul光學(xué)單元溫度:Off極性:正峰寬(響應(yīng)時間):4s如圖所示:“光學(xué)部件溫度”-若環(huán)境溫度控制在2度,設(shè)定為Off,若環(huán)境溫度不穩(wěn)定,則設(shè)定光學(xué)單元溫度為高于環(huán)境溫度5度,以防樣品在池中沉淀“峰寬”-大多數(shù)分析設(shè)為4S只有在高速分析下設(shè)為更短“分析后自動循環(huán)”-在不進行分析時可以讓流動相循環(huán)節(jié)省流動相檢測器連續(xù)運行可隨時投入使用*點擊RID圖標(biāo)選擇RIDControlHeater設(shè)為On若要循環(huán)流動相必須將RecyclingValve設(shè)為ON手動purge參比池將其設(shè)為On并輸入Purge時間點擊

8、Ok,進入下一FLD畫面9、FLD檢測器參數(shù)設(shè)定:色譜條件樣品P/N01018-68704用甲醇稀釋為1:10進樣體積5ul柱溫箱:30EX=246nm,EM=317nm,PMT=10響應(yīng)時間=4s.停止時間出峰完畢ExcitationA:激發(fā)波長:200-700nm,步長為1nm,或ZeroOrderEmission:發(fā)射波長:280-900nm,步長為1nm,或ZeroOrderPMT:大多數(shù)應(yīng)用適當(dāng)?shù)脑O(shè)定值為10,若高濃度樣品峰被切平頭,則減少PMT值Peakwidth大多數(shù)應(yīng)用設(shè)為4s只有快速分析采用小的設(shè)定值MultiEx多波長及光譜激發(fā)MultiEm多波長及光譜發(fā)射同時可以輸入范圍Range步長step采集光譜10、在“運行時選項表”中選中“數(shù)據(jù)采集”單擊“確定”.11、單擊“方法”菜單選中“方法另存為”輸入一方法名如test單擊“確定”.12、從菜單“視圖”中選中“在線信號”,選中“窗口1”,然后單擊“改變”鈕,將所要繪圖的信號移到右邊的框中,點擊“確定”.(如同時檢測二個信號,則重復(fù)12,選中“窗口2”)13、從“運行控制”菜單中選擇“樣品信息”選項如圖所示:輸入“操作者名稱”“數(shù)據(jù)文件”中選擇“手動”或“前綴/計數(shù)器”區(qū)別:“手動”-每次做樣之前必須給出新名字,否則儀器會將上次的數(shù)據(jù)覆蓋掉.“前綴/計數(shù)器”在“前綴”框中輸入前綴,在“計數(shù)器”框中輸入