家畜組織胚胎學(xué)1緒論ppt課件

1、家畜組織胚胎學(xué)第一章 緒論第一節(jié) 家畜組織胚胎學(xué)的研討內(nèi)容和意義組織胚胎學(xué)包括組織學(xué)和胚胎學(xué)兩部分。組織學(xué)histology是研討動(dòng)物體微細(xì)構(gòu)造及功能的科學(xué)。動(dòng)物體是由各種器官系統(tǒng)構(gòu)成的，每個(gè)器官都包括幾種不同的組織，而每一種組織又是由細(xì)胞和細(xì)胞間質(zhì)構(gòu)成的。因此，組織學(xué)的研討內(nèi)容包括細(xì)胞、根本組織和器官組織三個(gè)部分。胚胎學(xué)embryology是研討動(dòng)物個(gè)體胚胎發(fā)育的科學(xué)。胚胎學(xué)的研討內(nèi)容包括配子發(fā)生、受精、卵裂、原腸胚和神經(jīng)胚構(gòu)成、胎膜和胎盤以及器官發(fā)生等。組織胚胎學(xué)屬于動(dòng)物科學(xué)和醫(yī)學(xué)專業(yè)的專業(yè)根底課。只需掌握了動(dòng)物的正常形狀構(gòu)造和胚胎發(fā)育規(guī)律，才干進(jìn)一步了解動(dòng)物的生理活動(dòng)規(guī)律，并利用這些規(guī)律

2、去合理地豢養(yǎng)、繁衍和改良動(dòng)物以及防治各種疾病。因此，學(xué)好組織學(xué)與胚胎學(xué)是學(xué)好生理學(xué)、繁衍學(xué)、豢養(yǎng)學(xué)、動(dòng)物消費(fèi)學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)等課程所必不可少的根底。第二節(jié) 組織胚胎學(xué)研討方法及根本原理一切的組織胚胎學(xué)研討方法均需將有機(jī)體的器官和組織經(jīng)過特殊處置，再運(yùn)用各種顯微鏡進(jìn)展察看研討后得出科學(xué)的結(jié)果。1.組織學(xué)制片技術(shù)普通是先把組織制成薄片，最常用的是石蠟切片，其制備方法是：取材與固定：把新穎組織放到甲醛溶液等固定液中，使蛋白質(zhì)等成分迅速凝固，盡能夠堅(jiān)持其活體時(shí)的構(gòu)造形狀。脫水與透明：為使石蠟浸入組織內(nèi)，把固定好的資料用乙醇逐級(jí)70%-100%脫水。用二甲苯或乙醚等石蠟溶劑使組織浸透，便于浸

3、蠟。一、固定組織研討法浸蠟與包埋：把組織放入融化58-60的石蠟中，進(jìn)展浸透和包埋成蠟塊，目的是使石蠟進(jìn)入細(xì)胞間隙和細(xì)胞內(nèi)，以添加組織的硬度，便于切片。切片與貼片：將蠟塊用切片機(jī)切成5-10m厚的組織切片，并鋪展粘到載玻片上。染色與封固：把粘好的切片脫蠟后，用適當(dāng)?shù)娜玖线M(jìn)展染色。染色后，再經(jīng)脫水和透明，最后把組織用樹膠和蓋片封片。除了石蠟切片外，血液可以制成血涂片，疏松結(jié)締組織和腸系膜等薄層組織可制成鋪片，骨組織可制成磨片,然后固定和染色。 最常用的染色方法是蘇木精hematoxylin和伊紅eosin染色的染色方法，簡(jiǎn)稱H.E.染色。 蘇木精是堿性染液，可以使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)和細(xì)胞質(zhì)中的核糖

4、體等成分染成藍(lán)紫色，故這些成分被說成是嗜堿性著色的。伊紅是酸性染料，可使多數(shù)細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)染成粉紅色，這些細(xì)胞質(zhì)被稱為嗜酸性的。對(duì)堿性和酸性染料親和力都不強(qiáng)的構(gòu)造，稱為嗜中性的。染色方法染色方法HE染色蘇木精伊 紅嗜堿性構(gòu)造：細(xì)胞核粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)游離核糖體等嗜酸性構(gòu)造：細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)溶酶體、線粒體等細(xì)胞器膠原纖維等染色方法HE染色法以外的一切染色法，通常是為了顯示某些用HE染色法顯示不出的細(xì)胞和構(gòu)造。如：蘇丹法顯示脂肪鍍銀法顯示神經(jīng)細(xì)胞、嗜銀顆粒鐵蘇木素法顯示心肌閏盤馬氏三色法顯示胰島細(xì)胞甲苯胺藍(lán)法顯示糖胺多糖 特殊染色鍍銀染色，顯示大腦皮質(zhì)神經(jīng)元氯化金染色，顯示運(yùn)動(dòng)終板Hemalum染色，顯示心肌纖維

5、及閏盤2、組織化學(xué)技術(shù)組織化學(xué) ( histochemistry ) ： 經(jīng)過化學(xué)或物理反響原理顯示組織或細(xì)胞內(nèi)化學(xué)成分，通常是使其構(gòu)成有色終末產(chǎn)物，以便在鏡下察看，可進(jìn)展定位和定量。1普通組織化學(xué)術(shù) 是利用化學(xué)試劑與組織內(nèi)的某些物質(zhì)進(jìn)展化學(xué)反響，在部分構(gòu)成可以在顯微鏡下察看到的沉淀物。例如，過碘酸雪夫氏反響periodic acid chiffs reaction, PAS反響的根本原理是經(jīng)過過碘酸的氧化作用，使多糖生成醛基，后者與雪夫氏試劑中的無色堿性品紅反響，在反響部位構(gòu)成紫紅色沉淀，從而證明細(xì)胞內(nèi)含有糖原或粘多糖成分。 HIO4 Shiff試劑多糖 醛 紫紅色沉淀物 氧化 堿性品紅組織

6、化學(xué)術(shù)PAS反響，顯示小腸上皮杯狀細(xì)胞的粘原顆粒組織化學(xué)術(shù) 免疫組織化學(xué)術(shù)immunocytochemistry) 利用組織化學(xué)技術(shù)的原理，再結(jié)合免疫學(xué)方法，那么為免疫細(xì)胞化學(xué)術(shù)。主要的檢測(cè)對(duì)象為肽和蛋白質(zhì)。組織化學(xué)術(shù)免疫組織化學(xué)，顯示胰島B細(xì)胞組織化學(xué)術(shù) 原位雜交術(shù)in situ hybridization) 為核酸DNA和RNA組織化學(xué)術(shù)。 用帶有標(biāo)志物的知堿基順序的核酸探針，與細(xì)胞內(nèi)待測(cè)的核酸結(jié)合雜交，從而在原位顯示該核酸。原位雜交，顯示臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的心房鈉尿肽陽性組織化學(xué)術(shù)活體組織研討法二、其它研討方法自學(xué)細(xì)胞培育術(shù)細(xì)胞交融組織工程術(shù)細(xì)胞電泳新的研討方法 放射自顯影術(shù) 圖像分析術(shù) 流

7、式細(xì)胞術(shù)光學(xué)顯微鏡light microscope LM電子顯微鏡 electron microscope EM三、顯微鏡一光學(xué)顯微鏡光鏡普通光學(xué)顯微鏡light microscope的分辨率為0.2m，可放大1000倍左右，能察看組織和細(xì)胞的普通構(gòu)造。分辨率是指可以分辨兩顆粒之間的最小間隔。顯微鏡下常用的長(zhǎng)度單位在光鏡下所見的組織和細(xì)胞的構(gòu)造叫做普通微細(xì)構(gòu)造，而在電鏡下所見的構(gòu)造那么稱之為超微構(gòu)造。在光鏡和電鏡下進(jìn)展察看時(shí)，常用的計(jì)量單位有：1m微米，micrometer= 1/1000mm毫米，millimeter1nm納米，nanometer= 1/1000m1pm皮米 1/1000nm

8、光鏡光學(xué)顯微鏡的分類1、生物顯微鏡2、熒光顯微鏡3、相差顯微鏡4、暗視野顯微鏡5、偏光顯微鏡6、激光共聚焦顯微鏡光鏡光鏡光鏡大鼠附睪上皮細(xì)胞微絲肌動(dòng)蛋白及細(xì)胞核光鏡二 電子顯微鏡技術(shù)常用的電鏡有透射電鏡和掃描電鏡兩種。與光鏡比較，電鏡的根本原理是以電子束替代光線，以電磁透鏡替代光學(xué)透鏡。電鏡透射電鏡TEM的分辨率已到達(dá)0.2nm左右，可放大幾萬到幾十萬倍。其任務(wù)原理是，電子束透過樣品后，投射到熒光屏上，構(gòu)成物像。由于電子易散射和被物體吸收，所以必需制備超薄切片90-100nm。電鏡樣品的制備過程：取小資料塊1mm3以內(nèi)用戊二醛和鋨酸雙重固定環(huán)氧樹脂包埋超薄切片機(jī)切片鉛鈾重金屬電子染色電鏡察看。被金屬鹽所染的部位，因透過的電子束少而在熒光屏上顯得暗，稱為電子密度高，反之那么稱為電子密度低。透 射 電 鏡電鏡電鏡掃描電鏡SEM是用極細(xì)的電子束在樣品外表進(jìn)展掃描并用特定的探測(cè)器搜集所發(fā)生的二次電子，構(gòu)成電信號(hào)傳送到顯像管，在熒光屏上顯現(xiàn)出物體外表的立體圖象。掃描電鏡的樣品制備方法：將較大的組織塊用戊二醛和鋨酸雙重固定，經(jīng)脫水和枯燥后，再于樣品外表上噴涂一薄層金，以添加二次電子數(shù)。電鏡電鏡電鏡電鏡技術(shù)細(xì)胞側(cè)面的嚴(yán)密銜接電鏡技術(shù) 脾紅髓第三節(jié) 家畜組織胚胎學(xué)的研討方法學(xué)習(xí)組胚的思想方式1.實(shí)際聯(lián)絡(luò)實(shí)踐2.形狀聯(lián)絡(luò)