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文檔簡介
1、菊花的組織培育 植物的組織培育又叫離體培育,指植物的組織、器官或細(xì)胞等在離體條件下,經(jīng)過無菌操作,在人工控制條件下一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素、溫度等其他外界條件進(jìn)展培育以獲得再生的完好植株的技術(shù)。 一、植物組織培育的概念概念:緣由:回想植物組織培育原理:植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性是指已分化的細(xì)胞具有發(fā)育成完好個(gè)體的潛能。生物體的每一個(gè)細(xì)胞都是由同一個(gè)受精卵有絲分裂而來,都含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)高度特化的動物細(xì)胞,從整個(gè)細(xì)胞來說,全能性遭到限制。但它的細(xì)胞核依然堅(jiān)持著全能性,這是由于細(xì)胞核內(nèi)含有該物種遺傳性所需求的遺傳物質(zhì).已分化的植物細(xì)胞,仍具有全能性.實(shí)例受精卵生殖細(xì)胞體細(xì)胞全能性的比較
2、:什么叫分化?其本質(zhì)是什么?什么是愈傷組織?愈傷組織的細(xì)胞有什么特點(diǎn)?什么叫脫去分化、再分化?如何控制細(xì)胞的脫分化與去分化? 閱讀32-33頁處理以下問題二、植物組織培育的根本過程基因的選擇性表達(dá) 愈傷組織人參的愈傷組織菠蘿的愈傷組織二、植物組織培育的根本過程或胚狀體三、影響植物組織培育的要素:1、資料外植體的選取1不同植物的組織培育難度不同 什么樣的植物容易進(jìn)展組織培育? 2同一種植物的不同組織培育難度不同 什么樣的組織容易進(jìn)展組織培育?容易進(jìn)展無性生殖的植物,如煙草、胡蘿卜幼齡、保管時(shí)間短的組織菊花的組織培育普通選用何種資料?未開花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝2、營養(yǎng)成分培育基1植物組織培育常
3、用的培育基? MS培育基大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有機(jī)物:甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等 2MS培育基的主要成分?培育基中的各種成分的作用是什么?大量元素和微量元素提供植物細(xì)胞需求的各種無機(jī)鹽;蔗糖提供碳源的同時(shí)維持細(xì)胞浸透壓;甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是滿足離體植物細(xì)胞的特殊營養(yǎng)物質(zhì)需求課本33頁旁欄思索:微生物培育基以有機(jī)營養(yǎng)為主,MS培育基那么需提供大量無機(jī)營養(yǎng)3、植物激素1關(guān)鍵激素是什么?2兩種激素的運(yùn)用順序不同,結(jié)果不同3兩種激素的用量比不同,植物發(fā)育方向不同4、pH、溫度、光照等 菊花組織培育的PH?溫
4、度?光照?植物組織培育過程:離體組織或細(xì)胞植物體脫分化細(xì)胞分裂素生長素愈傷組織芽根細(xì)胞分裂素生長素細(xì)胞分裂素生長素再分化植物細(xì)胞培育不需求光?需求光植物組織培育的過程離體的植物組織或細(xì)胞愈傷組織根和芽完好的植物體脫分化再分化制備MS固體培育基外植體消毒 接種 培 養(yǎng)栽 培四、實(shí)驗(yàn)操作 移 栽流水沖洗無菌紙吸干70%酒精無菌水沖洗無菌紙吸干0.1%氯化汞無菌水沖洗至少三次之上流水是為消毒嗎?能消毒的是什么?無菌水沖洗是為了干啥?哪6步?1、配制各種母液大量元素、微量元素各濃縮多少倍?用量較小的有機(jī)物呢?2、配制培育基菊花組培能否添加植物激素?3、滅菌哪種滅菌方法?留意接種時(shí)的各種無菌操作。將菊花
5、莖段插入培育基時(shí)特別應(yīng)留意什么?最好在哪兒培育?溫度?光照?定期消毒?直接移栽到土壤中嗎?MS固體培育基成分及比例(一)制備MS固體培育基四培育1、愈傷組織的培育從接種外植體到出現(xiàn)愈傷組織需經(jīng)過2周時(shí)間。2周之內(nèi)可以看到外植體上逐漸長出乳白色或黃色的瘤狀愈傷組織。初次培育愈傷組織時(shí),恒溫箱的門應(yīng)該封鎖不用見光,由于在無光條件下愈傷組織長的更快。2周后,培育基成分接近耗盡,必需改換培育基,進(jìn)展繼代培育.繼代培育所用的培育基與培育愈傷組織的一樣,在嚴(yán)厲的無菌條件下,將愈傷組織連同原來的外植體一同移到新培育基上。愈傷組織的繼代培育一代為20d。假設(shè)延伸時(shí)間,培育基中營養(yǎng)物質(zhì)減少,外植領(lǐng)會分泌有毒物質(zhì)
6、,呵斥本身中毒。假設(shè)愈傷組織長到直徑為11.5cm時(shí),就可以進(jìn)展試管苗培育.2、愈傷組織的繼代培育在愈傷組織繼代培育期間,將恒溫箱的門翻開,讓愈傷組織見光,愈傷組織見光后顏色可以轉(zhuǎn)為綠色.3、試管苗的培育當(dāng)愈傷組織長到一定大小后,可以改換培育基,進(jìn)展試管苗的見光培育.五移栽移栽生根的菊花試管苗之前,應(yīng)先翻開培育瓶的封口膜,讓試管苗在培育間生長幾日.1、翻開封口膜2、清洗轉(zhuǎn)移用流水清洗根部的培育基,將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下生活一段時(shí)間.蛭石珍珠巖六栽培3、移栽珍珠巖:固體基質(zhì)型,含水量高、蓄水性強(qiáng)、透性好,適宜栽培.幼苗長壯后,移栽到土壤中.幼苗移栽后,每天察看并記錄幼苗的生長情
7、況,適時(shí)澆水、施肥,直至開花.1、培育基的滅菌高壓蒸汽滅菌2、外植體的消毒酒精、氯化汞3、接種的無菌操作酒精、酒精燈灼燒4、無菌箱中的培育;5、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間在整個(gè)操作過程中,是如何來實(shí)現(xiàn)無菌環(huán)境的?35頁旁欄思索:至少做一組以上的反復(fù)。對照實(shí)驗(yàn)用一個(gè)不接種的空白培育基與接種的培育基一同培育,用以闡明培育基制造合格,沒有被雜菌污染。四、課外延伸人工種子課題延伸略練習(xí)1.答:植物組織培育所利用的植物資料體積小、抗性差,對培育條件的要求較高。用于植物組織培育的培育基同樣適宜于某些微生物的生長,如一些細(xì)菌、真菌等的生長。而培育物一旦遭到微生物的污染,就會導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)前功盡棄,因此要進(jìn)展嚴(yán)厲的無菌操作。2.答:外植體的生理形狀是勝利進(jìn)展組織培育的重要條件之
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