原核細(xì)胞基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制-PPT課件

1、Several steps in the gene expression process may be modulated, including the transcription step and translation step and the post-translational modification of a protein. Gene regulation gives the cell control over structure and function, and is the basis for cellular differentiation, morphogenesis

2、and the versatility and adaptability of any organism. Gene regulation may also serve as a substrate for evolutionary change, since control of the timing, location, and amount of gene expression can have a profound effect on the functions (actions) of the gene in the organism.原核細(xì)胞基因表達(dá)調(diào)控Regulation of

3、Prokaryotic Gene Expression一、基因表達(dá)調(diào)控概述Basic Conceptions and Principle（一）基因表達(dá)的概念*基因*基因組(genome)一個(gè)細(xì)胞或病毒所攜帶的全部遺傳信息或整套基因?；蚪?jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄、翻譯，產(chǎn)生具有特異生物學(xué)功能的蛋白質(zhì)分子的過(guò)程。* 基因表達(dá)(gene expression)基因表達(dá)是受調(diào)控的（二）基因表達(dá)的時(shí)間性及空間性1、時(shí)間特異性按功能需要，某一特定基因的表達(dá)嚴(yán)格按特定的時(shí)間順序發(fā)生，稱(chēng)之為基因表達(dá)的時(shí)間特異性(temporal specificity)。 多細(xì)胞生物基因表達(dá)的時(shí)間特異性又稱(chēng)階段特異性(stage speci

4、ficity)。2、空間特異性基因表達(dá)伴隨時(shí)間順序所表現(xiàn)出的這種分布差異，實(shí)際上是由細(xì)胞在器官的分布決定的，所以空間特異性又稱(chēng)細(xì)胞或組織特異性(cell or tissue specificity)。在個(gè)體生長(zhǎng)全過(guò)程，某種基因產(chǎn)物在個(gè)體按不同組織空間順序出現(xiàn)，稱(chēng)之為基因表達(dá)的空間特異性(spatial specificity)。（三）基因表達(dá)的方式按對(duì)刺激的反應(yīng)性，基因表達(dá)的方式分為：1、組成性表達(dá)某些基因在一個(gè)個(gè)體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)，通常被稱(chēng)為管家基因(housekeeping gene)。無(wú)論表達(dá)水平高低，管家基因較少受環(huán)境因素影響，而是在個(gè)體各個(gè)生長(zhǎng)階段的大多數(shù)或幾乎全部組織中持續(xù)

5、表達(dá)，或變化很小。區(qū)別于其他基因，這類(lèi)基因表達(dá)被視為組成性基因表達(dá)(constitutive gene expression)。2、誘導(dǎo)和阻遏表達(dá)在特定環(huán)境信號(hào)刺激下，相應(yīng)的基因被激活，基因表達(dá)產(chǎn)物增加，這種基因稱(chēng)為可誘導(dǎo)基因?？烧T導(dǎo)基因在特定環(huán)境中表達(dá)增強(qiáng)的過(guò)程，稱(chēng)為誘導(dǎo)(induction)。 如果基因?qū)Νh(huán)境信號(hào)應(yīng)答是被抑制，這種基因是可阻遏基因?？勺瓒艋虮磉_(dá)產(chǎn)物水平降低的過(guò)程稱(chēng)為阻遏(repression)?；虮磉_(dá)增強(qiáng)表達(dá)減弱誘導(dǎo)阻遏環(huán)境因素在一定機(jī)制控制下，功能上相關(guān)的一組基因，無(wú)論其為何種表達(dá)方式，均需協(xié)調(diào)一致、共同表達(dá)，即為協(xié)調(diào)表達(dá)(coordinate expression)

6、，這種調(diào)節(jié)稱(chēng)為協(xié)調(diào)調(diào)節(jié)(coordinate regulation)。（四）基因表達(dá)調(diào)控的生物學(xué)意義1、適應(yīng)環(huán)境、維持生長(zhǎng)和增殖2、維持個(gè)體發(fā)育與分化二、基因表達(dá)調(diào)控的基本原理Basic Principle of Gene Expression Regulation a （一）基因表達(dá)的多級(jí)調(diào)控基因激活轉(zhuǎn)錄起始 轉(zhuǎn)錄后加工mRNA降解蛋白質(zhì)降解等蛋白質(zhì)翻譯翻譯后加工修飾轉(zhuǎn)錄起始（二） 基因轉(zhuǎn)錄激活調(diào)節(jié)基本要素特異DNA序列和調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)調(diào)節(jié)蛋白DNA-蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用RNA聚合酶原核生物 蛋白質(zhì)因子 操縱子(operon) 機(jī)制特異DNA序列編碼序列 啟動(dòng)序列 操縱序列 其他調(diào)節(jié)序

7、列(promoter)(operator)1. 特異DNA序列和調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)是RNA聚合酶結(jié)合并啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的特異DNA序列。1) 啟動(dòng)序列RNA轉(zhuǎn)錄起始-35區(qū)-10區(qū)TTGACATTAACTTTTACATATGATTTTACATATGTTTTGATATATAATCTGACGTACTGTN17N16N17N16N16N7N7N6N7N6AAAAAtrp tRNATyrlacrecAAra BAD TTGACA TATAAT共有序列Pribnow box共有序列(consensus sequence) 決定啟動(dòng)序列的轉(zhuǎn)錄活性大小。某些特異因子（蛋白質(zhì)）決定RNA聚合酶對(duì)一個(gè)或一套啟動(dòng)序列的特異性識(shí)別

8、和結(jié)合能力。2 操縱序列 阻遏蛋白(repressor)的結(jié)合位點(diǎn)當(dāng)操縱序列結(jié)合有阻遏蛋白時(shí)，會(huì)阻礙RNA聚合酶與啟動(dòng)序列的結(jié)合，或是RNA聚合酶不能沿DNA向前移動(dòng) ，阻礙轉(zhuǎn)錄。啟動(dòng)序列編碼序列操縱序列pol阻遏蛋白3) 其他調(diào)節(jié)序列、調(diào)節(jié)蛋白例如激活蛋白(activator)可結(jié)合啟動(dòng)序列鄰近的DNA序列，促進(jìn)RNA聚合酶與啟動(dòng)序列的結(jié)合，增強(qiáng)RNA聚合酶活性。有些基因在沒(méi)有激活蛋白存在時(shí)，RNA聚合酶很少或完全不能結(jié)合啟動(dòng)序列。真核生物順式作用元件(cis-acting element)可影響自身基因表達(dá)活性的DNA序列BADNA編碼序列轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)不同真核生物的順式作用元件中也會(huì)發(fā)現(xiàn)一些

9、共有序列 ，如TATA盒、CAAT盒等，這些共有序列是RNA聚合酶或特異轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合位點(diǎn)。 2 、真核基因的調(diào)節(jié)蛋白還有蛋白質(zhì)因子可特異識(shí)別、結(jié)合自身基因的調(diào)節(jié)序列，調(diào)節(jié)自身基因的表達(dá)，稱(chēng)順式作用。由某一基因表達(dá)產(chǎn)生的蛋白質(zhì)因子，通過(guò)與另一基因的特異的順式作用元件相互作用，調(diào)節(jié)其表達(dá)。 反式作用因子(trans-acting factor) 這種調(diào)節(jié)作用稱(chēng)為反式作用。 cDNAaDNA反式調(diào)節(jié)C順式調(diào)節(jié) mRNA C蛋白質(zhì)CBA mRNA蛋白質(zhì)AA指的是反式作用因子與順式作用元件之間的特異識(shí)別及結(jié)合。通常是非共價(jià)結(jié)合，被識(shí)別的DNA結(jié)合位點(diǎn)通常呈對(duì)稱(chēng)、或不完全對(duì)稱(chēng)結(jié)構(gòu)。絕大多數(shù)調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)結(jié)合

10、DNA前，需通過(guò)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用，形成二聚體(dimer)或多聚體(polymer)。3. DNA - 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)的相互作用4. RNA聚合酶 原核啟動(dòng)序列/真核啟動(dòng)子與RNA聚合酶活性 RNA聚合酶與其的親和力，影響轉(zhuǎn)錄。 調(diào)節(jié)蛋白與RNA聚合酶活性一些特異調(diào)節(jié)蛋白在適當(dāng)環(huán)境信號(hào)刺激下表達(dá)，然后通過(guò)DNA-蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用影響RNA聚合酶活性。三、原核基因表達(dá)調(diào)控Regulation of Prokaryotic Gene Expression調(diào)節(jié)的主要環(huán)節(jié)在轉(zhuǎn)錄起始（一）原核基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特點(diǎn)1、因子決定RNA聚合酶識(shí)別特異性2、操縱子模型的普遍性3、阻遏蛋白與

11、阻遏機(jī)制的普遍性（二）乳糖操縱子調(diào)節(jié)機(jī)制1、乳糖操縱子(lac operon)的結(jié)構(gòu) 調(diào)控區(qū)CAP結(jié)合位點(diǎn)啟動(dòng)序列操縱序列 結(jié)構(gòu)基因Z： -半乳糖苷酶Y： 透酶A：乙酰基轉(zhuǎn)移酶ZYAOPDNALac operonmRNA阻遏蛋白IDNAZYAOPpol沒(méi)有乳糖存在時(shí)2、阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)阻遏基因mRNA阻遏蛋白有乳糖存在時(shí)IDNAZYAOPpol啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄mRNA乳糖半乳糖-半乳糖苷酶Lac operon+ + + + 轉(zhuǎn)錄無(wú)葡萄糖，cAMP濃度高時(shí)有葡萄糖，cAMP濃度低時(shí)3、CAP的正性調(diào)節(jié)ZYAOPDNACAPCAPCAPCAPCAPCAP4、協(xié)調(diào)調(diào)節(jié)當(dāng)阻遏蛋白封閉轉(zhuǎn)錄時(shí)，CAP對(duì)該系統(tǒng)不

12、能發(fā)揮作用；如無(wú)CAP存在，即使沒(méi)有阻遏蛋白與操縱序列結(jié)合，操縱子仍無(wú)轉(zhuǎn)錄活性。單純?nèi)樘谴嬖跁r(shí)，細(xì)菌利用乳糖作碳源；若有葡萄糖或葡萄糖/乳糖共同存在時(shí)，細(xì)菌首先利用葡萄糖。葡萄糖對(duì) lac 操縱子的阻遏作用稱(chēng)分解代謝阻遏(catabolic repression)。 mRNA低半乳糖時(shí)高半乳糖時(shí) 葡萄糖低 cAMP濃度高 葡萄糖高cAMP濃度低RNA-polOOOOThe regulation of lac operon by CAP,repressor,CAMP and inducerTrp Trp 高時(shí) Trp 低時(shí) mRNA OPtrpR調(diào)節(jié)區(qū) 結(jié)構(gòu)基因 RNA聚合酶 RNA聚合酶 ?（

13、三）色氨酸操縱子調(diào)節(jié)機(jī)制轉(zhuǎn)錄衰減色氨酸操縱子Trp operon衰減子（A）是Trp operon的第二控制系統(tǒng)。 第二控制系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)證據(jù)提示：Trp operon酶本底只有1/70，Lac operon為1/1000，說(shuō)明Trp operon的阻遏要比Lac operon低得多，但仍可以滿足細(xì)菌適應(yīng)生存的需要，說(shuō)明Trp存在第二控制系統(tǒng)。衰減子前導(dǎo)肽（aL）及其空間結(jié)構(gòu)特點(diǎn)aL離E基因上游約3060bp有4個(gè)GC特征的片段，其后是8個(gè)U，是不依賴(lài)因子的終止子，終止作用有賴(lài)于前面片段發(fā)夾結(jié)構(gòu)形成情況。當(dāng)Trp，片段3,4形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)，轉(zhuǎn)錄終止。有2個(gè)串聯(lián)UGG（Trp密碼子）全長(zhǎng)多順?lè)醋?700

14、bp?？?間 結(jié) 構(gòu)特 點(diǎn)DNARPO aL EBCDA aLmRNAL肽UGGUGG1234位于第60位核苷酸-Trp-Trp-UUUUUUUU調(diào)節(jié)區(qū) 結(jié)構(gòu)基因 trpROP前導(dǎo)序列 衰減子區(qū)域 UUUU前導(dǎo)mRNA1234衰減子結(jié)構(gòu) 第10、11密碼子為trp密碼子 終止密碼子 14aa前導(dǎo)肽編碼區(qū): 包含序列1 形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)能力強(qiáng)弱： 序列1/2序列2/3序列3/4 trp 密碼子 UUUUUUUU34UUUU 334核糖體 前導(dǎo)肽 前導(dǎo)mRNA1.當(dāng)色氨酸濃度高時(shí) 轉(zhuǎn)錄衰減機(jī)制 125 trp 密碼子 衰減子結(jié)構(gòu)就是終止子可使轉(zhuǎn)錄前導(dǎo)DNA UUUU 3 RNA聚合酶 終止UUUU34

15、2423UUUU核糖體 前導(dǎo)肽 前導(dǎo)mRNA 15 trp 密碼子 結(jié)構(gòu)基因前導(dǎo)DNA RNA聚合酶 2.當(dāng)色氨酸濃度低時(shí) Trp合成酶系相關(guān)結(jié)構(gòu)基因被轉(zhuǎn)錄 序列3、4不能形成衰減子結(jié)構(gòu) （四）基因重組沙門(mén)菌鞭毛素基因的調(diào)節(jié) H2鞭毛素 阻遏蛋白 Hin重組酶轉(zhuǎn)位片段hinH2IH1 H1鞭毛素hinH2IDNA啟動(dòng)序列H1啟動(dòng)序列（五）SOS反應(yīng) SOS基因紫外線激活Rec ALex A阻遏蛋白 與DNA 損傷修復(fù)有關(guān)的酶和蛋白質(zhì)基因表達(dá)Lex A阻遏蛋白操縱序列DNA（五） SOS反應(yīng)(六）原核生物翻譯水平的調(diào)控Gene Expression of Translational Level

16、Regulation in Prokaryote 翻譯水平的調(diào)控 轉(zhuǎn)錄是原（真）核基因調(diào)控的重要水平，由于原核生物沒(méi)有核膜，轉(zhuǎn)錄翻譯同時(shí)進(jìn)行，所以轉(zhuǎn)錄后調(diào)控余地不大。翻譯是原核生物基因表達(dá)調(diào)控的另一個(gè)重要層次。1、SD序列對(duì)翻譯的影響 A. SD序列（SD Sequence,SDs）概念 原核生物mRNA起始密碼子AuG上游3-10bp處有1個(gè)RbS稱(chēng)為SD序列。 （1）種類(lèi)不同基因有不同的SDs，其一致序列為AGGAGG，從而控制單位時(shí)間起始復(fù)合物形成的數(shù)目，最后控制翻譯產(chǎn)物的數(shù)量。 （2）位置mRNA起始密碼子AuG上游4-13bp處，與AuG間隔4-13bp。 1、SD序列對(duì)翻譯的影響

17、（3）堿基特點(diǎn)富含A，與核糖體小亞基16SRNA端富含U序列互補(bǔ)，被其識(shí)別與結(jié)合，mRNA轉(zhuǎn)錄不久，即被之結(jié)合、翻譯。 （4）多順?lè)醋泳幋a多個(gè)蛋白質(zhì)，每1個(gè)編碼區(qū)前都有1個(gè)AuG和SD序列，多個(gè)核糖體與SDs結(jié)合將蛋白質(zhì)分別譯出來(lái)。B. SD序列對(duì)翻譯水平的影響 （1）SDs與AuG距離長(zhǎng)短的影響 據(jù)認(rèn)為此距離是影響翻譯效率主要因素。例，重組IL-2，Plac的SDs距AuG 7個(gè)核苷酸，IL-2表達(dá)最高，距8個(gè)核苷酸，IL-2表達(dá)降低500倍。 B. SD序列對(duì)翻譯水平的影響（2）SDs組成與一致序列差異的影響 Plac3種酶翻譯合成比例為1:0.5:0.2，這種現(xiàn)象反映 SDs與一致序列差

18、異導(dǎo)致核糖體結(jié)合速率有快有慢 密碼子對(duì)應(yīng)tRNA太少，等待運(yùn)輸周轉(zhuǎn)。C. mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)隱蔽SD序列的作用 SDs存在mRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)夾（莖環(huán)）中，受到了隱蔽核糖體無(wú)法靠近與之結(jié)合，只有打開(kāi)二級(jí)結(jié)構(gòu)，暴露位點(diǎn)、方可結(jié)合。 例:紅霉素抗性菌有1個(gè)質(zhì)粒omrc 該質(zhì)?？梢跃幋a使23srRNA甲基化酶(紅霉素甲基化酶(erythromycin methylase)使23srRNA2057-2060位GAAG的A甲基化，阻止紅霉素結(jié)合。（紅霉素通過(guò)該位點(diǎn)結(jié)合于核糖體）,抑制蛋白質(zhì)合成。紅霉素甲基化酶可使核糖體對(duì)紅霉素產(chǎn)生抗性。C.mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)隱蔽SD序列的作用（1）amrc翻譯起始區(qū)有一個(gè)反

19、向重復(fù)順序，其上游先導(dǎo)肽也有一個(gè)反向重復(fù)序列，類(lèi)似Trp operon的前導(dǎo)肽，能形成轉(zhuǎn)錄衰減子發(fā)夾結(jié)構(gòu)，稱(chēng)為翻譯弱化子。（2）紅霉素甲基化酶基因、mRNA與前導(dǎo)肽對(duì)應(yīng)空間結(jié)構(gòu)前導(dǎo)肽 mRNA1.2,2.3,3.4,4.3片段可以互補(bǔ)形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)SD1前導(dǎo)肽核糖體結(jié)合位點(diǎn)SD2紅霉素甲基化酶核糖體結(jié)合位點(diǎn)DNAamrCLmRNA前導(dǎo)肽SD1123 SD24紅霉素甲基化酶前導(dǎo)肽紅霉素前導(dǎo)肽4個(gè)片形成二級(jí)結(jié)構(gòu)情況甲基化酶生成情況23srRNA甲基化與紅霉素抗性無(wú)前導(dǎo)肽正常翻譯，正常釋出片段1、2，3、4形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)隱匿SD2核糖體元法靠近不能譯出紅霉素甲基化酶無(wú)23srRNA甲基化無(wú)紅霉素抗性有紅

20、霉素結(jié)合核糖體使之滯留于前導(dǎo)肽，片段1.2，2.3、成發(fā)夾，3.4不能成發(fā)夾，暴露SD2核糖體結(jié)合，譯出紅霉素甲基化酶23srRNA甲基化，抗紅霉素 當(dāng)23srRNA全部甲基化后核糖體不再結(jié)合紅霉素順利譯出先導(dǎo)肽隱匿SD2 核糖體無(wú)法靠近不再譯出甲基化酶。甲基化酶可能有本底水平，當(dāng)有紅霉素時(shí)，可使甲基化酶大量表達(dá)。2、mRNA的穩(wěn)定性 A.細(xì)菌基因調(diào)控3要素轉(zhuǎn)錄起始、終止和mRNA的快速轉(zhuǎn)換 mRNA快速轉(zhuǎn)換即舊mRNA快速降解，新mRNA快速合成，這是細(xì)菌快速適應(yīng)環(huán)境在mRNA的具體體現(xiàn)。B.mRNA降解速度的影響因素（一級(jí)結(jié)構(gòu)和空間結(jié)構(gòu)） 不同mRNA降解速度不同，降解作用不是隨機(jī)的， 長(zhǎng)

21、mRNA不一定較短mRNA穩(wěn)定性差。 （1）生理狀況、環(huán)境因素均影響mRNA的降解，但最重要的是： （2）mRNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)和二級(jí)結(jié)構(gòu)降解mRNA的內(nèi)切酶主要是：RNase（識(shí)別特殊發(fā)夾結(jié)構(gòu)），該酶降解片段再被其它核酸酶降解（如3外切核酸酶，RNase）。目前所知，mRNA 終止子（尤是不依賴(lài)因子終止子）或類(lèi)似的發(fā)夾結(jié)構(gòu)都可以不同程度阻礙RNase對(duì)mRNA的降解。 （3）原核mRNA半壽期多為2-3min，降解NTP用于新的mRNA合成。決定mRNA壽命的許多因素都影響到基因表達(dá)。3、翻譯產(chǎn)物對(duì)翻譯的調(diào)控（蛋白質(zhì)合成的自體調(diào)控） 有些mRNA編碼的蛋白質(zhì)，本身就是蛋白質(zhì)翻譯過(guò)程中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用

22、的因子，這些因子對(duì)自身翻譯也起調(diào)控制作用。 A.核糖體蛋白 （1）核糖體是1座合成蛋白質(zhì)流動(dòng)工廠，沿mRNA移動(dòng) 快速合成蛋白質(zhì)。核糖體由rRNA為骨架與核糖體蛋白組成。Ecoli核糖體蛋白質(zhì)有55種，（大亞基34，小亞基21），核糖體是細(xì)菌細(xì)胞重要成份之一。 （2）細(xì)菌中50余種核糖體蛋白質(zhì)，基因分布在不同的操縱子中，合成這些蛋白質(zhì)，速率是與細(xì)胞增殖適應(yīng)的，受生長(zhǎng)條件營(yíng)養(yǎng)環(huán)境影響。 （3）實(shí)驗(yàn)證明，這些操縱子轉(zhuǎn)錄水平是可調(diào)控的，但核糖體蛋白合成的控制主要在翻譯水平。因?yàn)榧尤腩~外操縱子于細(xì)菌，mRNA增加，而核糖體蛋白質(zhì)并不增加。 （4）每1個(gè)operon轉(zhuǎn)錄的mRNA編碼蛋白中的一種（或2種

23、蛋白質(zhì)復(fù)合體）可以結(jié)合到多順?lè)醋由嫌蔚?個(gè)特定部位，阻止核糖體結(jié)合和起始翻譯。B.翻譯終止子RF2合成的自體調(diào)控（1）終止密碼和釋放因子（終止子） 無(wú)論原核、真核都有3種終止碼：UAG、UGA和UAA 沒(méi)有1種tRNA與終止碼作用，而是由特殊的蛋白因子促成終止作用，這類(lèi)蛋白因子稱(chēng)做釋放因子，也有稱(chēng)翻譯終止子。 原核有3種釋放因子 RF1 識(shí)別UAA、UAG RF2 識(shí)別UAA、UGA RF3 能刺激RF、RF2的活性。 真核只有1種，即eRF。（2）RF2 mRNA的移框窗口及其附近結(jié)構(gòu) 閱讀框（reading-frame）也稱(chēng)讀碼。mRNA核苷酸序列中，3個(gè)核苷酸為1組（稱(chēng)為密碼子），由核糖

24、體進(jìn)行翻譯。每個(gè)密碼子代表蛋白質(zhì)合成中單個(gè)氨基酸，閱讀框規(guī)定了3個(gè)核苷酸組成1個(gè)密碼子，這是由起始密碼子AUG決定的。例如AUG CCA AAA UUU CCC可以讀成AUG/GCA/AAA/UUU/CCC，而不會(huì)讀A/UGG/CAA/AAU/UUC/CC。 開(kāi)放閱讀框（open reading-frame）沒(méi)有終止密碼子打斷的閱讀，通常是從DNA（不是RNA）順序推論出開(kāi)放閱讀框的存在。基因密碼閱讀的3個(gè)特點(diǎn)每個(gè)基因都有特定的閱讀框（如組蛋白），閱讀必須從第1個(gè)密碼子開(kāi)始到最后1個(gè)密碼子結(jié)束。閱讀是不停頓的，停頓只能合成肽而不是蛋白質(zhì)。（學(xué)理發(fā)）閱讀（mRNA）方向53，合成肽鏈方向氨基端羧

25、基端，而不能反之。mRNA 5 AUGGGG UAU CUU UGAC UAC GAC 3合成肽鏈方向 NH2 Gly Tyr Leu Asp -Tyr - Asp-COOH 前面25個(gè)氨基酸 后面315個(gè)氨基酸(AA) RF2mRNA移框窗口及其結(jié)構(gòu) 移框窗口（轉(zhuǎn)換區(qū)）至少15個(gè)核苷酸才能發(fā)生移框23 24 25 26 27 28RF2是由340氨基酸組成的蛋白質(zhì)，它的密碼子并不處于同1個(gè)閱讀框中，前25個(gè)AA處于AUG所在閱讀框中，后315AA處于（+1）另1閱讀框中。 RF2整個(gè)閱讀框分成2個(gè)閱讀框，中間多了1個(gè)U，U與第26個(gè)AA（ASP）密碼子的前2個(gè)核苷酸構(gòu)成了RF2識(shí)別的終止碼U

26、GA，而且是前框（25個(gè)AA）同框終止密碼子。移框窗口至少含15個(gè)核苷酸。 RF2合成的自體調(diào)控 細(xì)胞內(nèi)RF2供應(yīng)充足時(shí)當(dāng)核糖體A位到達(dá)第25個(gè)密碼子后面的UGA時(shí)RF2就促成了肽鏈合成終止。 RF2 RF2mRNA譯至第25個(gè)AA 在其后UGA處將不成熟的肽釋放。 胞內(nèi)缺乏RF2核糖體向前滑動(dòng)1個(gè)核苷酸（U） 即移框作用繼續(xù)合成第25個(gè)AA 直到最后的終止碼UAG UAG由另1個(gè)釋放因子RF1識(shí)別并促使RF2肽鏈的釋放。移框作用如此精細(xì)的自體調(diào)控機(jī)制目前仍不清楚，可能與前面25肽的結(jié)構(gòu)有關(guān)。（1）低滲omPR Pr. omPF 。 omPC基因關(guān)閉。（2）高滲變構(gòu)OmPR Pr. Ompc ompc mRNA ompc Pr. micF（3）micF能與ompF mRNA前導(dǎo)序列（L）中的44個(gè)核苷酸（包括SDs） 及編碼區(qū)（包括起始碼AUG）形成雜合雙鏈，從而抑制了ompF mRN