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1、Product Data SheetBrefeldin ACat. No.: HY-16592CAS No.: 20350-15-6分式: CHO分量: 280.36作靶點(diǎn): Autophagy; CRISPR/Cas9; Mitophagy; HSV作通路: Autophagy; Cell Cycle/DNA Damage; Anti-infection儲(chǔ)存式: Powder -20C 3 years4C 2 yearsIn solvent -80C 6 months-20C 1 month溶解性數(shù)據(jù)體外實(shí)驗(yàn) DMSO : 20.83 mg/mL (74.30 mM; Need ultras
2、onic)SolventMass1 mg 5 mg 10 mgConcentration制備儲(chǔ)備液1 mM 3.5668 mL 17.8342 mL 35.6684 mL5 mM 0.7134 mL 3.5668 mL 7.1337 mL10 mM 0.3567 mL 1.7834 mL 3.5668 mL請(qǐng)根據(jù)產(chǎn)品在不同溶劑中的溶解度選擇合適的溶劑配制儲(chǔ)備液;旦配成溶液,請(qǐng)分裝保存,避免反復(fù)凍融造成的產(chǎn)品失效。儲(chǔ)備液的保存式和期限:-80C, 6 months; -20C, 1 month。-80C 儲(chǔ)存時(shí),請(qǐng)?jiān)?6 個(gè)內(nèi)使,-20C 儲(chǔ)存時(shí),請(qǐng)?jiān)?1 個(gè)內(nèi)使。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)請(qǐng)根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和給
3、藥式選擇適當(dāng)?shù)娜芙獍浮R韵氯芙獍付颊?qǐng)先按照 In Vitro 式配制澄清的儲(chǔ)備液,再依次添加助溶劑:為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性,澄 的儲(chǔ)備液可以根據(jù)儲(chǔ)存條件,適當(dāng)保存;體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的作液,建議您現(xiàn)現(xiàn)配,當(dāng)天使; 以下溶劑前顯的百分 指該溶劑在您配制終溶液中的體積占;如在配制過(guò)程中出現(xiàn)沉淀、析出現(xiàn)象,可以通過(guò)加熱和/或超聲的式助溶1. 請(qǐng)依序添加每種溶劑: 10% DMSO 40% PEG300 5% Tween-80 45% salineSolubility: 2.08 mg/mL (7.42 mM); Clear solution此案可獲得 2.08 mg/mL (7.42 mM,飽和度未知) 的澄
4、清溶液。以 1 mL 作液為例,取 100 L 20.8 mg/mL 的澄 DMSO 儲(chǔ)備液加到 400 L PEG300 中,混合均勻;向上述體系中加50 L Tween-80,混合均勻;然后繼續(xù)加 450 L 理鹽定容 1 mL。2. 請(qǐng)依序添加每種溶劑: 10% DMSO 90% (20% SBE-CD in saline)Solubility: 2.08 mg/mL (7.42 mM); Clear solution此案可獲得 2.08 mg/mL (7.42 mM,飽和度未知) 的澄清溶液。Page 1 of 2 www.MedChemE以 1 mL 作液為例,取 100 L 20.
5、8 mg/mL 的澄均勻。DMSO 儲(chǔ)備液加到 900 L 20% 的 SBE-CD 理鹽溶液中,混合3. 請(qǐng)依序添加每種溶劑: 10% DMSO 90% corn oilSolubility: 2.08 mg/mL (7.42 mM); Clear solution此案可獲得 2.08 mg/mL (7.42 mM,飽和度未知) 的澄 溶液,此案不適于實(shí)驗(yàn)周 期在半個(gè)以上的實(shí)驗(yàn)。以 1 mL 作液為例,取 100 L 20.8 mg/mL 的澄 DMSO 儲(chǔ)備液加到 900 L 油中,混合均勻。BIOLOGICAL ACTIVITY物活性 Brefeldin A (BFA) 種內(nèi)酯抗素, 蛋
6、質(zhì)運(yùn)輸?shù)奶囟ㄒ种苿refeldin A 阻斷分泌蛋和膜蛋從內(nèi)質(zhì)向爾 體的轉(zhuǎn)運(yùn)。Brefeldin A 也 種噬 (autophagy) 和 mitophagy 抑制劑。Brefeldin A 還 種 CRISPR/Cas9 激動(dòng) 劑,可抑制 HSV-1病毒,并具有抗癌活性。IC & Target CRISPR/Cas9體外研究 Brefeldin A (BFA) treatment for 15 h or 40 h, causes dramatic swelling of the Endoplasmic Reticulum (ER) and shifts itslocalization t
7、o the periphery of normal rat kidney (NRK) cells. Prolonged Brefeldin A treatment results in markeddisruption of the MT and actin cytoskeleton1. ADP-ribosylation of BARS is mediated by formation of a conjugatebetween Brefeldin A and ADPR. BARS shows BAC binding when incubated with the medium from th
8、e BFA-treatedCD38+ HeLa cells3. Brefeldin A induces anchorage-independent cell death in MDA-MB-231 breast cancer cells,inhibits the formation of MDA-MB-231 colonies in 3D and 2D cultures and inhibits the migration and MMP 9 (MatrixMetallopeptidase 9) activity of MDA-MB-2312.PROTOCOLCell Assay 1 Cell
9、s are grown on glass coverslips, fixed in 3 % paraformaldehyde in PBS (10 min at room temperature) and thenwashed in PBS. Cells are permeabilized with 0.01 % Triton X-lOO in PBS at room temperature for 7 min. The coverslipsare washed (3 times in PBS/0.2 % Tween) incubated in PBS/O.4 % fish skin gela
10、tin/0.2 % Tween (5 min) and in PBS/2.5% goat serum/0.2 % Tween (5 min.). After blocking, the cells are incubated with primary antibodies for 45 min at37C, and then washed with PBS/0.2 % Tween (5 times, 5 min each). The secondary antibodies are added for 30 minat 37C and then cells are washed as abov
11、e. Coverslips are mounted on slides in 9: 1 glycerol/PBS with 0.1 % o-phenylenediamine.MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.戶使本產(chǎn)品發(fā)表的科研獻(xiàn) J Autoimmun. 2019 May;99:39-47. Cell Death Dis. 2018 Nov 16;9(12):1143. FASEB J. 2019 Apr;33(4):5520-5534.
12、 J Cell Mol Med. 2019 Apr;23(4):2399-2409. Int J Nanomedicine. 2018 Jan 22;13:479-492.See more customer validations on HYPERLINK www.MedChemE www.MedChemEPage 2 of 3 www.MedChemEREFERENCES1. Alvarez C, et al. Brefeldin A (BFA) disrupts the organization of the microtubule and the actin cytoskeletons.
13、 Eur J Cell Biol. 1999 Jan;78(1):1-14.2. Colanzi A, et al. Molecular mechanism and functional role of brefeldin A-mediated ADP-ribosylation of CtBP1/BARS. Proc Natl Acad Sci U S A. 2013 Jun11;110(24):9794-9.3. Tseng CN, et al. Brefeldin A reduces anchorage-independent survival, cancer stem cell pote
14、ntial and migration of MDA-MB-231 human breast cancercells. Molecules. 2014 Oct 29;19(11):17464-77.4. Wang J, et al. Erythroleukemia cells acquire an alternative mitophagy capability. Sci Rep. 2016 Apr 19;6:24641.5. Yu C, et al. Small molecules enhance CRISPR genome editing in pluripotent stem cells. Cell Stem Cell. 2015 Feb 5;16(2):142-7.6. Nozawa N, et al. Subcellular localization of herpes simplex virus type 1 UL51 protein and role of palmitoylation in Golgi apparatus targeting. J Virol. 2003Mar;77(5):3204-16.M
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