13現(xiàn)代生物科技專題——2021年高考生物真題模擬試題

1、（13）現(xiàn)代生物科技專題2021年高考生物真題模擬試題專項匯編【2021年山東卷，4】1.我國考古學(xué)家利用現(xiàn)代人的DNA序列設(shè)計并合成了一種類似磁鐵的“引子”，成功將極其微量的古人類DNA提取自土壤沉積物中的多種生物的DNA中識別并分離出來，用于研究人類起源及進(jìn)化。下列說法正確的是（）A. “引子”的徹底水解產(chǎn)物有兩種B.設(shè)計“引子”的 DNA序列信息只能來自核 DNAC.設(shè)計“引子”前不需要知道古人類的DNA列D. 土壤沉積物中的古人類雙鏈DNA可直接與“引子”結(jié)合從而被識別【2021年山東卷，5】2.利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，將含有基因修飾系統(tǒng)的 T-DNA插入到水稻細(xì)胞 M的某 條染色體上，在該

2、修飾系統(tǒng)的作用下，一個DNA分子單鏈上的一個 C脫去氨基變?yōu)閁,脫氨基過程在細(xì)胞M中只發(fā)生一次。將細(xì)胞 M培育成植株No下列說法錯誤的是（）A.N的每一個細(xì)胞中都含有 T-DNAB.N自交，子一代中含 T-DNA的植株占3/4C.M經(jīng)n （n1）次有絲分裂后，脫氨基位點為A-U的細(xì)胞占1/2nD.M經(jīng)3次有絲分裂后，含 T-DNA且脫氨基位點為 A-T的細(xì)胞占1/2【2021年山東卷，15】3.一個抗原往往有多個不同的抗原決定簇，一個抗決定簇只能刺激機體產(chǎn)生一種抗體，由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白 p72注入小鼠體內(nèi)，可利用該小鼠的免疫細(xì)胞制備抗 p72的單抗，

3、也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗。下列說法正確的是（）A.注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對單抗純度的影響比對多抗純度的影響大B.單抗制備過程中通常將分離出的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合C.利用該小鼠只能制備出一種抗p72的單抗D.p72部分結(jié)構(gòu)改變后會出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有效的情況【2021年6月浙江卷，20】4.采用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)可將增強型綠色熒光蛋白（ EGFP基因定點插入受精卵的 Y染色體上，獲得轉(zhuǎn)基因雄性小鼠。該轉(zhuǎn)基因小鼠與野生型雌性小鼠交配，通過觀察熒光可確定早期胚胎的性別。下列操作錯誤的是（）A.基因編輯處理的受精卵在體外培養(yǎng)時，不同發(fā)育階段的胚胎需用不同成分的培養(yǎng)液B

4、.基因編輯處理的受精卵經(jīng)體外培養(yǎng)至2細(xì)胞期，須將其植入同期發(fā)情小鼠的子宮，才可獲得表達(dá)EGFP勺小鼠C.分離能表達(dá)EGFP勺胚胎干細(xì)胞，通過核移植等技術(shù)可獲得大量的轉(zhuǎn)基因小鼠D.通過觀察早期胚胎白熒光，能表達(dá)EGFP的即為雄性小鼠胚胎【2021年1月浙江卷，18】5.下圖為動物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是（）切取組織制備細(xì)胞懸浮海原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)A.步驟 的操作不需要在無菌環(huán)境中進(jìn)行B.步驟中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離C.步驟到生物分瓶操作前常用胰蛋白酶處理D.步驟培養(yǎng)過程中不會發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化【2021年天津河北區(qū)模擬，1216.CD47是一種跨膜糖蛋白。它可與巨噬細(xì)胞表面的

5、信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6-5 倍，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱。為證明抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細(xì)胞的抑制作用，科學(xué)家按照如下流程進(jìn)行了實驗。C7管小1%尉典嗎泮然雜娜炯fci -川酒訥用|加力女飄n：巨噬小腫幽那葬體系例巨峭黜的事海指教下列敘述不正確的是（）A.經(jīng)篩選可得到既能產(chǎn)生抗 CD47抗體又能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞B.對照組應(yīng)在巨噬細(xì)胞+正常細(xì)胞共培養(yǎng)體系中加入單克隆抗體C.多次進(jìn)行步驟的目的是獲得更多分泌抗CD47抗體的漿細(xì)胞D.步驟中可以利用聚乙二醇或滅活的病毒誘導(dǎo)完成細(xì)胞

6、融合【2021年全國乙卷，38】7.【生物一選修3現(xiàn)代生物科技專題】用DNA1組技術(shù)可以賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人類需要的生物產(chǎn)品。在此過程中需要使用多種工具酶，其中 4種限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點如圖所示。GAATTCCTTAAGCCCGGGGGGCCCCTGCAGGACGTCGATATCCTATAG限制簿：EcoR 1Sma IPst 1EctR V回答下列問題:(1)常用的DNA連接酶有E-coli DNA連接酶和T4DNA連接酶。上圖中酶切割后的DNA片段可以用E - coli DNA連接酶連接，上圖中酶切割后的DNA段可以用T4 DNA連接酶連接。DNA1接酶催化目的基因

7、片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是DNA分子上有復(fù)制原點，可以保證質(zhì)DNA重組技術(shù)中所用的質(zhì)粒載體具有一些特征。如質(zhì)粒粒在受體細(xì)胞中能;質(zhì)粒DNA分子上有,便于外源DNA入;質(zhì)粒DNA分子上有標(biāo)記基因(如某種抗生素抗性基因)，利用抗生素可篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細(xì) 胞，方法是(4)表達(dá)載體含有啟動子，啟動子是指【2021年湖南卷，2218.M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)?，F(xiàn)設(shè)計實驗，將外源DNA段F插入M基因的特定位置,再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動物 A,流程如圖所示，回答下列問題:M基因質(zhì)粒卵母綢胞成纖維細(xì)胞去核卵母細(xì)胞(1)在構(gòu)建含有片

8、段 F的重組質(zhì)粒過程中，切割質(zhì)粒DNA勺工具酶是,這類酶能將特定部位的兩個核甘酸之間的斷開。(2)在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時，需要定期更換培養(yǎng)早期胚胎曬胎移植代孕母親 克隆動物A 液，目的是。（3）與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率更低，原因是 。 從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細(xì)胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為 （答出兩點即可），功能上 具有。（4）鑒定轉(zhuǎn)基因動物：以免疫小鼠的 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合， 篩選融合雜種細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體。 簡要寫出利用此抗體確定克隆動物 A中M基因是否失活的實驗思 路：?！?021年廣東卷，22】9.非細(xì)胞合

9、成技術(shù)是一種運用合成生物學(xué)方法，在細(xì)胞外構(gòu)建多酶催化體系，獲得目標(biāo)產(chǎn)物的新技術(shù)，其核心是各種酶基因的挖掘、表達(dá)等。中國科學(xué)家設(shè)計了4步酶促反應(yīng)非細(xì)胞合成路線（如圖），可直接用淀粉生產(chǎn)肌醇（重要的醫(yī)藥食品原料），以期解決高溫強酸水解方法造成的嚴(yán)重污染問題，并可以提高產(chǎn)率。仃-葡聚糖硝酸葡荷I-磷酸機西聲子.聾酸麗聲迪.碘酸.葡鶯糖 忙吧罐酸盤磷腰肌薛師閑+生.第T 酸二肌醇-回答下列問題：（1）研究人員采用 PCR技術(shù)從土壤微生物基因組中擴增得到目標(biāo)酶基因。此外，獲得酶基因的方 法還有。（答出兩種即可）（2）高質(zhì)量的DNA莫板是成功擴增出目的基因的前提條件之一。在制備高質(zhì)量DNA模板時必須除去蛋

10、白，方法有。（答出兩種即可）（3）研究人員使用大腸桿菌 BL21作為受體細(xì)胞，pET20b為表達(dá)載體分別進(jìn)行 4種酶的表達(dá)。表 達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時，首先應(yīng)制備 細(xì)胞。為了檢測目的基因是否成功表達(dá)出酶蛋白，需要 采用的方法有。（4）依圖所示流程，在一定的溫度、 pH等條件下，將4種酶與可溶性淀粉溶液混合組成一個反應(yīng) 體系。若這些酶最適反應(yīng)條件不同，可能導(dǎo)致的結(jié)果是 。在分子水平上， 可以通過改變 ,從而改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，實現(xiàn)對酶特性的改造和優(yōu)化?！?021年河北卷，24】10.采礦污染和不當(dāng)使用化肥導(dǎo)致重金屬鎘（Cd）在土壤中過量積累。利用植物修復(fù)技術(shù)將土壤中的 Cd富集到植物體內(nèi)，進(jìn)行后續(xù)處

11、理（例如，收集植物組織器官異地妥善 儲存），可降低土壤中Cd的含量。為提高植物對 Cd污染土壤的修復(fù)能力，研究者將酵母液泡Cd轉(zhuǎn)運蛋白（YCFD基因?qū)胧茉囍参?，并檢測了相關(guān)指標(biāo)?；卮鹣铝袉栴}:（1）為獲取YCF1基因，將酵母細(xì)胞的全部 DN砒取、切割后與載體連接，導(dǎo)入受體菌的群體中儲存，這個群體稱為。（2）將DNA列才1入Ti質(zhì)粒構(gòu)建重組載體時，所需要的兩種酶是 。構(gòu)建的重組基因表達(dá) 載體中必須含有標(biāo)記基因，其作用是 。（3）進(jìn)行前期研究時，將含有YCF1基因的重組載體導(dǎo)入受試雙子葉植物印度芥菜，采用最多的方法是。研究者進(jìn)一步獲得了轉(zhuǎn) YCF1基因的不育楊樹株系，采用不育株系作為實驗材料的

12、目的是。（4）將長勢一致的野生型和轉(zhuǎn)基因楊樹苗移栽到Cd污染的土壤中，半年后測定植株干重（圖 1）及不同器官中Cd含量（圖2）。據(jù)圖1可知，與野生型比，轉(zhuǎn)基因植株對 Cd具有更強的 （填“耐性”或“富集能力”）；據(jù)圖2可知，對轉(zhuǎn)基因植株的 進(jìn)行后續(xù)處理對于緩解土壤Cd污染最為方便有效。（5）已知YCF1特異定位于轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞的液泡膜上。據(jù)此分析，轉(zhuǎn)基因楊樹比野生型能更好地適應(yīng)高Cd環(huán)境的原因是 。相較于草本植物，采用楊樹這種喬木作為Cd污染土壤修復(fù)植物的優(yōu)勢在于 （寫出兩點即可）?！?021年全國甲卷，38】11.PCR技術(shù)可用于臨床的病原菌檢測。為檢測病人是否感染了某種病原菌，醫(yī)生進(jìn)行了相

13、關(guān)操作：分析PCR擴增結(jié)果；從病人組織樣本中提取DNA;利用PCR擴增DNA片段；采集病人組織樣本?；卮鹣铝袉栴}：（1）若要得到正確的檢測結(jié)果，正確的操作順序應(yīng)該是 （用數(shù)字序號表示）。（2）操作中使用的酶是 。 PCR反應(yīng)中的每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性、 三步，其中復(fù)性的結(jié)果是 。（3）為了做出正確的診斷，PCR反應(yīng)所用的引物應(yīng)該能與 特異性結(jié)合。PCR（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)是指 。該技術(shù)目前被廣泛地應(yīng)用于疾病診斷等方面?！?021年6月浙江卷，29 （二）12.回答下列（一）（二）小題:（一）回答與甘蔗醋制作有關(guān)的問題：(1)為了獲得釀造甘蔗醋的高產(chǎn)菌株，以自然發(fā)酵的甘蔗渣為材料進(jìn)行篩選。首

14、先配制醋酸菌選擇培養(yǎng)基：將適量的葡萄糖、KHPO、MgSO解并定容，調(diào)節(jié)pH,再高壓蒸7滅菌，經(jīng) 后加入3%本積的無水乙酉然后將 10 g自然發(fā)酵的甘蔗渣加入選擇培養(yǎng)基，震蕩培養(yǎng)24 h。用將少量上述培養(yǎng)液涂布到含CaCO的分離培養(yǎng)基上，在 30 c培養(yǎng)48 h。再挑取分離培養(yǎng)基上具有 的單菌落若干，分別接種到與分離培養(yǎng)基成分相同的 培養(yǎng)基上培 養(yǎng)24 h后，置于4 C冰箱中保存。(2)優(yōu)良產(chǎn)酸菌種篩選。將冰箱保存的菌種分別接入選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)一段時間后，取合適接種量的菌液在30 C、150 r/min 條件下震蕩培養(yǎng)。持續(xù)培養(yǎng)至培養(yǎng)液中醋酸濃度不再上升，或者培養(yǎng)液中 含量達(dá)到最低時，發(fā)酵結(jié)束

15、。篩選得到的優(yōu)良菌種除了產(chǎn)酸量高外，還應(yīng)有 (答出2點即可)等特點。(3)制醋過程中，可將甘蔗渣制作成固定化介質(zhì)，經(jīng) 后用于發(fā)酵。其固定化方法為(二)斑馬魚是一種模式動物，體外受精發(fā)育，胚胎透明、便于觀察，可用于水質(zhì)監(jiān)測、基因功能 分析以及藥物毒性與安全性評價等。(1)由于人類活動產(chǎn)生的生活污水日益增多，大量未經(jīng)處理的污水直接排入河流、湖泊會引起水體,導(dǎo)致藻類大量繁殖形成水華。取水樣喂養(yǎng)斑馬魚， 可用斑馬魚每周的體重和死亡率等指標(biāo)監(jiān)測水體污染程度。(2)為了研究某基因在斑馬魚血管發(fā)育過程中的分子調(diào)控機制，用DNA連接酶將該基因連接到質(zhì)粒載體形成 ,導(dǎo)入大腸桿菌菌株 DH&中。為了能夠連接上該目

16、的基因、并有利于獲得 含該目的基因的 DH&陽性細(xì)胞克隆，質(zhì)粒載體應(yīng)含有 (答出2點即可)。 提取質(zhì)粒后，采用 法，將該基因?qū)氚唏R魚受精卵細(xì)胞中，培養(yǎng)并觀察轉(zhuǎn)基因斑馬魚胚 胎血管的發(fā)育情況。(3)為了獲取大量斑馬魚胚胎細(xì)胞用于藥物篩選，可用 分散斑馬魚囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)， 取分散細(xì)胞作為初始材料進(jìn)行 培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加成纖維細(xì)胞作為 ,以提高 斑馬魚胚胎細(xì)胞克隆的形成率?！?021年1月浙江卷，29 (二)13.回答下列(一)、(二)小題：(一)某環(huán)保公司從淤泥中分離到一種高效降解富營養(yǎng)化污水污染物的細(xì)菌菌株，制備了固定化菌 株。(1)從淤泥中分離細(xì)菌時常用劃線分離法或 法，兩種方法均能在固體培

17、養(yǎng)基上形成。對分離的菌株進(jìn)行誘變、和鑒定，從而獲得能高效降解富營養(yǎng)化污水污染物的 菌株。該菌株只能在添加了特定成分X的培養(yǎng)基上繁殖。用蒸儲水去除(2)固定化菌株的制備流程如下；將菌株與該公司研制的特定介質(zhì)結(jié)合；;檢驗固定化菌株的 。菌株與特定介質(zhì)的結(jié)合不宜直接采用交聯(lián)法和共價偶聯(lián)法，可以采用的2種方法是。對外，只提供固定化菌株有利于保護(hù)該公司的知識產(chǎn)權(quán)，推測其原因是 。(二)三葉青為蔓生的藤本植物，以根入藥。由于野生三葉青對生長環(huán)境要求非?？量蹋约吧鷳B(tài)環(huán)境的破壞和過度的采挖，目前我國野生三葉青已十分珍稀。(1)為保護(hù)三葉青的 多樣性和保證藥材的品質(zhì)，科技工作者依據(jù)生態(tài)工程原理，利用 技術(shù)，實

18、現(xiàn)了三葉青的林下種植。(2)依據(jù)基因工程原理，利用發(fā)根農(nóng)桿菌侵染三葉青帶傷口的葉片，葉片產(chǎn)生酚類化合物，誘導(dǎo)發(fā)根農(nóng)桿菌質(zhì)粒上vir系列基因表達(dá)形成 和限制性核酸內(nèi)切酶等，進(jìn)而從質(zhì)粒上復(fù)制并切割出一段可轉(zhuǎn)移的 DNA片段(T-DNA)。T-DNA進(jìn)入葉片細(xì)胞并整合到染色體上，T-DNA上rol系列基因表達(dá)，產(chǎn)生相應(yīng)的植物激素，促使葉片細(xì)胞持續(xù)不斷地分裂形成 ,再分化形成毛狀根。(3)剪取毛狀根，轉(zhuǎn)入含頭抱類抗生素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行多次 培養(yǎng)，培養(yǎng)基中添加抗生素的主要目的是 。最后取毛狀根轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基、置于搖床上進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，通過控制搖床的 和溫度，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基成分中的 ,獲得大量毛狀根，用于提取

19、藥用成分?！?021年西藏拉薩模擬，12】14.利用乳腺生物反應(yīng)器獲取藥用蛋白具有產(chǎn)量高、成本低等優(yōu)點。如圖為培育轉(zhuǎn)基因奶牛獲得人血清白蛋白的流程。牛則其他蚩白請回答：(1) PCR擴增人血清白蛋白基因使用的酶是 。要使人血清白蛋白基因在轉(zhuǎn)基因奶牛的 乳腺細(xì)胞中表達(dá)，應(yīng)將其與 基因的啟動子等調(diào)控組件重組。(2)基因工程的核心步驟是 ，將目的基因?qū)肱Ｊ芫阉玫姆椒ㄊ?。(3)體外受精前精子要進(jìn)行 處理，過程包括 技術(shù)和胚胎移植技術(shù)；可用 技術(shù)獲得多只與該轉(zhuǎn)基因奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢。(4)若要檢測牛奶中是否含有人血清白蛋白，可采用 技術(shù)。【2021年天津河?xùn)|區(qū)模擬，12】15.多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

20、(PCR可自動化重復(fù)進(jìn)行圖1所示的步驟，每完成一次步驟稱為完成一個循環(huán)。(1)完成PCR程所用的Taq酶作用于 鍵，完成該過程的三次循環(huán)后產(chǎn)生的DNA分子中含有引物B的比例為。(2)某研究小組擬用 PCR技術(shù)和引物 (填引物的序號)從圖 2所示DNA分子中擴增出編碼蛋白質(zhì)H的基因，并開展后續(xù)研究。(3)通過上述PC或應(yīng)獲得編碼蛋白質(zhì) H的基因片段后，擬將其插入質(zhì)粒pZHY1中構(gòu)建重組DNA分子pZHY2已知在pZHY1上存在EcoRI、BamH、Kpnl、Xbal 4 種限制酶的識別序列(如表)， 則應(yīng)選用的限制酶組合是 。EcoRIBamHKpnlXbalGJ AATTCCTTAN GGJ

21、GATCCCCTAG GGGTACCCT CATGGT J CTAGAAGATCTA.BamH 和 EcoRIB.EcoRI 和 XbalC.EcoRI 和 KpnlD.BamH和 Kpnl(4)將重組DNA分子pZHY2導(dǎo)入大腸桿菌后，就可通過大規(guī)模培養(yǎng)大腸桿菌，然后制備純化的蛋白質(zhì)H若要制備抗蛋白質(zhì) H的單克隆抗體，相關(guān)說法中錯誤的有 。(多選)A.可以用上述步驟所得純化的蛋白質(zhì)H作為抗原B.從動物的脾臟收集 B淋巴細(xì)胞，并使之與雜交瘤細(xì)胞融合C.單克隆抗體是經(jīng)選擇性培養(yǎng)基的篩選所得到的B淋巴細(xì)胞，進(jìn)行培養(yǎng)而產(chǎn)生的抗體D.電刺激可用于制備單克隆抗體和植物體細(xì)胞雜交，也可用于動物體細(xì)胞核移植

22、答案以及解析.答案：C.答案：D.答案：D.答案：B解析：本題考查基因工程的相關(guān)知識。早期胚胎發(fā)育的不同過程需要的營養(yǎng)物質(zhì)不同，A項正確；受精卵發(fā)育至桑棋胚或囊胚，才能進(jìn)行胚胎移植，B項錯誤；核移植技術(shù)可用于克隆動物，C項正確；由題意可知，將 EGF現(xiàn)因才f入Y染色體，故能表達(dá)該基因的是雄性，D項正確。.答案：C解析：A動物細(xì)胞培養(yǎng)過程需要在無菌操作，故步驟的操作需要在無菌環(huán)境中進(jìn)行，A錯誤；B動物細(xì)胞培養(yǎng)過程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動物組織，分散成單個細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液， B錯誤；C傳代培養(yǎng)時需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的細(xì)胞，使之分散成單個細(xì)胞，再分瓶培養(yǎng)， C正確；D步驟為傳代培養(yǎng)過

23、程，該過程中部分細(xì)胞可能發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化，核型改變，D錯誤。.答案：B.答案：(1) EcoR I、Pst I ; EcoR I、Sma I、Pst I、EcoR V(2)磷酸二酯鍵(3)自我復(fù)制；限制酶切割位點；將待篩選的宿主細(xì)胞接種到含該抗生素的培養(yǎng)基中，能夠生長 的是含有質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞(4) RN咪合酶識別、結(jié)合并啟動轉(zhuǎn)錄的DNA段解析：本題考查基因工程的相關(guān)知識。(1)題圖中EcoR I和Pst I切割后得到的 DNA片段屬于黏性末端，Sma I和 EcoR V切割后得 到的DNA段屬于平末端，E - coli DNA 連接酶只能連接兩個黏性末端， T4 DNA連接酶可以連接兩 個黏性

24、末端或平末端。(2) DNA1接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間連接，形成磷酸二酯鍵。(3)質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點，可以保證質(zhì)粒在受體細(xì)胞中能自我復(fù)制；質(zhì)粒DNA分子上有一個或多個限制酶切割位點，便于外源DNA段插入；質(zhì)粒DNA子上的抗生素抗性基因可使導(dǎo)入的 宿主細(xì)胞抗某種抗生素，故用含該抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細(xì)胞，能夠存活的即為含有質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞。(4)啟動子是指位于基因首端的一段特殊DNA列，是RNA聚合酶識別及結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄出mRNA最終獲得所需要的蛋白質(zhì)。.答案：(1)限制性核酸內(nèi)切酶(或限制酶)；磷酸二酯鍵(2)清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造

25、成危害(3)動物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對容易，動物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難；細(xì)胞體積小，細(xì)胞核較大，核仁明顯；發(fā)育的全能性B;取動物A和克隆動物A的肝細(xì)胞，分別提取蛋白質(zhì)進(jìn)行抗原一抗體雜交解析：本題考查基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的有關(guān)知識。(1)切割DNA的工具是限制性核酸內(nèi)切酶(或限制酶)，它能夠識別DNA分子的某種特定核甘酸序列，并且使每一條鏈中的特定部位的兩個核甘酸之間的磷酸二酯鍵斷開。(2)動物細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身 造成危害。(3)動物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對容易，而動物體細(xì)胞分化程度高，恢

26、復(fù)其全能 性十分困難，因此動物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。從早期胚胎中分離出的胚胎干細(xì)胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小、細(xì)胞核較大、核仁明顯；在功能上具有發(fā)育的全能性，即可以分 化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。(4)以免疫小鼠的 B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，篩選融合雜種細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體。若要用此抗體確定克隆動物 A中M基因是否失活，則可從動物A和克隆動物A肝細(xì)胞中提取 蛋白質(zhì)，分別與此抗體進(jìn)行抗原一抗體雜交， 若動物A有蛋白質(zhì)表達(dá)，而克隆動物A無相應(yīng)蛋白質(zhì) 表達(dá)，則M基因失活。.答案：(1)從基因文庫中獲取、人工合成(或化學(xué)合成或鳥槍法或逆轉(zhuǎn)錄法)(2)酶解法、鹽析法(

27、或高溫或加熱)(3)感受態(tài)；抗原一抗體雜交、測定酶活性(4)酶活性下降，肌醇合成量少(或酶失活，肌醇完全不能合成)；酶的基因序列(或基因)解析：本題考查目的基因的獲取、 DNAf蛋白質(zhì)的分離、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、目的基因的檢測、 蛋白質(zhì)工程的相關(guān)知識。(1)目的基因的獲取方法包括從基因文庫中獲取、PCFT增和人工合成等。DNA與蛋白質(zhì)的分離方法有利用DNA和蛋白質(zhì)在鹽溶液和酒精中的溶解度不同進(jìn)行分離(鹽析法)；利用DN用口蛋白質(zhì)對蛋白酶的耐受力不同進(jìn)行分離(酶解法)；在不超過80 c的高溫下加熱，使蛋白質(zhì)變性失活，達(dá)到分離的目的等。(3)將目的基因?qū)爰?xì)菌時，需要用Cs2+處理細(xì)菌，使其處于感

28、受態(tài)。檢測目的基因表達(dá)與否，需要對其表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行檢測，本題的表達(dá)產(chǎn)物為酶蛋白，故可以測定酶活性，也可以檢測蛋白質(zhì)， 方法為抗原一抗體雜交。(4)淀粉在四種酶依次催化下形成肌醇，但是四種酶的最適條件不同，在一定條件下進(jìn)行反應(yīng),有些酶的活性不高或失活，因此，產(chǎn)生的肌醇量少或完全不合成。在分子水平上可以通過改變酶的基因序列進(jìn)而改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。10.答案：(1)基因組文庫(2)限制酶和DNA連接酶；便于目的基因的檢測和篩選(3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；防止外源基因傳給其他植物，造成基因污染(4)耐性；葉(5)能特異性的將 Cd轉(zhuǎn)運至液泡中；楊樹的根系發(fā)達(dá)，有利于吸收土壤中的Cd;楊樹屬于多年生木本植物，可多次

29、收集葉片對Cd進(jìn)行處理解析：本題考查基因工程的相關(guān)知識。(1)將酵母細(xì)胞的全部 DNA提取、切割后與載體連接，導(dǎo)入受體菌的群體中儲存，這個群體含有 酵母菌的全部基因，因此稱為基因組文庫。(2)構(gòu)建重組載體時，需要用限制酶切割供體DN府口質(zhì)粒以產(chǎn)生相應(yīng)的黏性末端，然后用DNA生接酶進(jìn)行連接。構(gòu)建的重組基因表達(dá)載體中的標(biāo)記基因，可用于檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞， 從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。(3)將重組載體導(dǎo)入雙子葉植物，采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。采用不育株系作為實驗材料 可防止外源基因傳給其他植物，造成基因污染。(4)由題圖1可知，與野生型相比，轉(zhuǎn)基因植株地上部分、地下部分和植株干重

30、均增加，即轉(zhuǎn)基因植株在Cd污染的土壤中生長較好， 說明轉(zhuǎn)基因植株對 Cd具有更強的耐性。由題圖2可知，轉(zhuǎn)基 因植株的葉中Cd含量最高，對其進(jìn)行后續(xù)處理對于緩解土壤Cd污染最為方便有效。(5)由于YCFl特異定位于轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞的液泡膜上，可推測轉(zhuǎn)基因楊樹能特異性的將Cd轉(zhuǎn)運至液泡中，適應(yīng)高 Cd環(huán)境。相較于草本植株，楊樹的根系發(fā)達(dá)，有利于吸收土壤中的Cd,且楊樹屬于多年生木本植物，可多次收集葉片對 Cd進(jìn)行處理。11.答案：(1)(2) DN咪合酶；延伸；引物通過堿基互補配對與單鏈DNA吉合(3)病原菌DNA(4)在生物體外大量快速擴增特定DNA片段的技術(shù)解析：本題考查PC叱術(shù)的相關(guān)知識。(1

31、)若要得到正確的檢測結(jié)果，正確順序是采集病人組織樣本-從病人組織樣本中提取DN2利用PCFT增DNA段-分析PCFT增結(jié)果。(2)操作中使用的酶是熱穩(wěn)定的DNA聚合酶(Taq酶)，PCR反應(yīng)中的每次循環(huán)可分為變性、復(fù)2條單鏈DNA1性、延伸三步，其中復(fù)性就是利用堿基互補配對形成氫鍵，結(jié)果是兩種引物分別與板結(jié)合(3)為了做出正確的診斷，PCR反應(yīng)所用的引物應(yīng)該能與病原菌DNA特異性結(jié)合。(4) PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)是指在生物體外復(fù)制特定DNA段的核酸合成技術(shù)，可短期內(nèi)大量擴增目的基因。12.答案：(一)(1)冷卻；玻璃刮刀；較大透明圈；斜面(2)乙醇；耐酒精度高、耐酸高(3)滅菌；吸附法

32、(二)(1)富營養(yǎng)化(2)重組DNA子；限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列、抗生素抗性基因；顯微注射(3)胰蛋白酶；原代；飼養(yǎng)層細(xì)胞解析：本題考查微生物的培養(yǎng)和篩選、基因工程的相關(guān)知識。(一)(1)高壓蒸汽滅菌后需經(jīng)過冷卻再加入無水乙醇，以免溫度過高使乙醇揮發(fā)；稀釋涂布平板法的步驟：首先將培養(yǎng)的菌液稀釋，然后取一定量的稀釋液放在無菌的固體培養(yǎng)基上，用無菌的玻璃刮刀把稀釋液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面上；醋酸菌產(chǎn)生的醋酸會與培養(yǎng)基中的CaCO反應(yīng)形成透明圈，因此需挑取分離培養(yǎng)基上具有較大透明圈的單菌落若干；菌種的臨時保藏一般是將菌種接種到固體斜面培養(yǎng)基上，在合適的溫度下長成菌落后在4 c冰箱中保存。(2)醋酸

33、菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿幔虼水?dāng)培養(yǎng)液中乙醇含量達(dá)到最低時，發(fā)酵結(jié)束；優(yōu)良菌種應(yīng)具有產(chǎn)酸量高、耐酒精度高、耐酸高等優(yōu)點。(3)將甘蔗渣制作成固定化介質(zhì)需經(jīng)滅菌后才能用于發(fā)酵，以免雜菌的污染影響實驗結(jié)果；因為 甘蔗渣具有很好的吸附性，因此常采用吸附法來進(jìn)行固定化。(二)(1)被人類排放到水體中的污染物包括家庭污水、微生物病原體、化學(xué)肥料、殺蟲劑、其他 礦物質(zhì)和化學(xué)品、放射性物質(zhì)等，常常造成水體富營養(yǎng)化，從而導(dǎo)致藻類大量繁殖，河流、湖泊生 物多樣性銳減。(2)將目的基因(外源 DNA分子)用DNA!接酶在體外連接到適當(dāng)?shù)妮d體上，即DNA子的體外重組，這種重新組合的 DNAW為重組DNA質(zhì)粒載體應(yīng)含有限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列，以便目 的