名詞解釋(基因工程)

1、名詞解釋1細胞工程：指以生物細胞或組織為研究對象，按照人們的意愿進行工程學操作，從而改變 生物性狀，以獲得生物產品，為人類生產和生活服務的科學。2去分化（脫分化）：在某些特定條件下，分化細胞的表型不穩(wěn)定，基因活動模式發(fā)生可逆 的變化，細胞脫離原狀態(tài)回復到分生狀態(tài)3再分化：脫分化細胞失去分化特征，但在某些特定條件誘導下，可再次開始新的分化發(fā)育 進程，最終形成各種組織、器官或胚狀體等。4污染：在組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基和培養(yǎng)材料滋生雜菌，導致培養(yǎng)失敗的現(xiàn)象。5褐變：是指組織培養(yǎng)中，由于材料被切割而使多酚氧化酶活化將組織中的酚類物質氧化形 成棕褐色的醍類物質，并向培養(yǎng)基中擴散，抑制培養(yǎng)物生長甚至導致其

2、死亡的現(xiàn)象。6玻璃化：也稱超水化作用，是離體培養(yǎng)過程中試管苗發(fā)生形態(tài)、生理和代謝異常的現(xiàn)象。7植物細胞培養(yǎng)：在離體條件下對植物單個細胞或小的細胞團進行培養(yǎng)并使其增殖的技術。8看護培養(yǎng)：在培養(yǎng)中用一塊活躍生長的愈傷組織來哺育單細胞，從而使其正常分裂、增殖 的方法。9植物原生質體：是指除去細胞壁后裸露的具有生命活力的原生質團。10條件培養(yǎng)法：在進行花粉培養(yǎng)時，利用預先培養(yǎng)過花藥的液體培養(yǎng)基，或加入失活的花 藥提取物的合成培養(yǎng)基進行花粉培養(yǎng)的方法。11植物胚胎培養(yǎng)：是指在無菌條件下，對植物的胚及胚器官如子房、胚珠和胚乳進行離體 培養(yǎng)的技術。12種質：指親代通過生殖細胞或體細胞直接傳遞給子代并決定固有

3、生物性狀的遺傳物質。13種質保存：指利用天然或人工創(chuàng)造的適宜環(huán)境，借以保存種質資源，使個體中所含有的 遺傳物質保持其遺傳完整性，并且有強的生活力，能通過繁殖將其遺傳特性傳遞下去。14種質資源的離體保存：指對離體小植株、器官、組織、細胞或原生質體等材料，采用限 制、延緩或停止其生長的處理措施使之保存，在需要時可重新恢復其生長，并再生植株的方 法。15同核體：由同一個生物個體的親本細胞融合形成的含有同型細胞核的融合細胞。16異核體：由不同種屬或同一種屬的不同個體的親本細胞發(fā)生融合所形成的含有不同細胞 核的融合細胞。17胚胎移植：對優(yōu)秀雌性動物進行超數(shù)排卵處理，在其發(fā)情配種后一定時間內從其生殖道 取

4、出早期胚胎，移植到同期發(fā)情的普通雌性動物生殖道的相應部位，讓其生產后代的技術。18胚胎工程：指以動物胚胎為研究對象而產生的一系列技術操作，如胚胎移植、胚胎冷凍 技術、胚胎分割、體外胚胎生產、動物克隆、性別控制機基因導入等。19超數(shù)排卵：在動物發(fā)情周期的適當時期，用促性腺激素進行處理，誘發(fā)其卵巢上有大量 卵泡同時發(fā)育并排卵，稱為超數(shù)排卵，簡稱超排。20胚胎回收：也稱采卵，把胚胎從供體的生殖道中沖洗出來，提供移植或其他胚胎工程研 究應用。21體外受精：指把成熟卵母細胞或未成熟卵母細胞經體外成熟培養(yǎng)后，與體內或體外獲能 的精子在體外條件下完成受精的過程。22試管動物：體外受精胚胎移植到母體后獲得的動

5、物。23胚胎分割：采用顯微操作系統(tǒng)將步哺乳動物附植前的胚胎分成若干個具有繼續(xù)發(fā)育潛力 部分的生物技術。24胚胎融合：通過顯微操作使2枚或2枚以上的受精卵或胚胎發(fā)育成為一枚胚胎的技術，由此發(fā)育而成的個體稱為嵌合體。25動物性別控制：通過對動物的正常生殖過程進行人為干預，使成年雌性動物產出人們期 望性別后代的一門生物技術。26克?。涸谏飳W中，是由一個細胞或個體以無性繁殖方式產生遺傳物質完全相同的一群 細胞或一群個體；在動物繁殖學中，不通過精子和卵子的受精過程產生遺傳物質完全相同新 個體的一門胚胎生物技術。27干細胞：是指具有無限或較長期的自我更新能力，并能產生至少一種高度分化子代細胞 的細胞。2

6、8轉基因動物：是指通過轉基因技術將目的基因導入生殖細胞、早期胚胎干細胞、早期胚 胎，使之整合到受體細胞的基因組中，經發(fā)育而產生的個體。29轉基因動物的常用技術：原核期胚胎顯微注射技術、反轉錄病毒技術、慢病毒載體技術、 精子載體技術、體細胞核移植轉基因技術、胚胎干細胞介導技術。30染色體工程：指人們按照一定的設計，有計劃地合成、添加、替換、削減或易位單條染 色體或染色體片段，對生物染色體組或染色體結構進行改造，以定向改變物種遺傳特性的新 技術。填空1動物細胞工程實驗室的組成：無菌操作室、培養(yǎng)室、細胞學鑒定室、制備室、儲藏室、清 洗滅菌室2植物細胞工程實驗室的組成：培養(yǎng)室、溫室3常用的高壓蒸汽滅菌

7、鍋有：立式、臥式、手提式4常用的濾器有：不銹鋼濾器、玻璃漏斗式濾器和微孔濾膜濾器。5CO2培養(yǎng)箱可以提供CO2的濃度是：5%作用是：保持培養(yǎng)液的pH穩(wěn)定6細胞冷凍最常用的方法是：液氮冷凍保存法7玻璃器皿的清洗順序：浸泡、刷洗、酸洗、沖洗8愈傷組織的形成大致可分為：誘導期、分裂期、分化期9根據組織學外觀特征及再生方式，將愈傷組織分成兩類：胚型愈傷組織和非胚型愈傷組 織10離體無性繁殖類型：腋生枝型、不定芽型、體細胞胚型和原球莖型。11離體培養(yǎng)中三大技術難題：污染、褐變、玻璃化12病毒在植株體內的擴散方式有：胞間連絲：植物細胞間短距離移動維管束輸導組織 系統(tǒng)：長距離轉移。13病毒在植株個體間的傳播

8、分為：介體傳播：是借助生物體的活動進行的傳播非介體 傳播包括自然接觸、汁液傳播、嫁接傳播、花粉傳播等。14脫除植物病毒的方法：物理方法、化學方法和生物學方法物理法脫除病毒中常用：熱處理生物學法脫除病毒常采用：莖尖分生組織培養(yǎng)15指示植物檢測病毒時可采用：汁液感染法、嫁接法16病毒檢測：方法有指示植物法、血清學法、電鏡檢測法和分子生物學檢測法。17無病毒苗的保存：離體保存和隔離保存繁殖方法：實驗室離體快繁和田間隔離繁殖。18用于植物細胞大規(guī)模培養(yǎng)的主要有：懸浮培養(yǎng)和固定化培養(yǎng)。植物細胞懸浮培養(yǎng)技術有：成批培養(yǎng)、連續(xù)培養(yǎng)和半連續(xù)培養(yǎng)。19細胞懸浮培養(yǎng)時，可采用物理或化學方法實現(xiàn)同步化物理方法包括：

9、分選法和冷處理法 化學方法包括：饑餓法和抑制法。20植物細胞常用的固定方法有：包埋法和吸附法。21原生質體分離：機械分離和酶解分離，現(xiàn)在主要用酶解分離方法。22原生質體的純化方法：過濾離心法、漂浮法和界面法。23原生質體融合過程：原生質體接觸、質膜融合、細胞質融合和核融合。24誘導原生質體融合時，除了形成雜種細胞外，還出現(xiàn)異核體、同核體、非對稱雜種和細 胞質雜種等不同的融合產物。25花藥培養(yǎng)時，選取處于單核期的花藥培養(yǎng)效果較好。26花藥預處理方法有：溫度預處理、化學預處理和物理預處理27為了得到可育的純合二倍體植株，需要把單倍體植株的染色體組加倍，常采用秋水仙素 處理。28花粉培養(yǎng)是以單個花粉

10、粒作為外植體進行離體培養(yǎng)，需將其從花藥中分離出來，一般采 用機械擠壓法、自然散落法和機械游離法來分離花粉細胞。29植物胚胎培養(yǎng)：是指在無菌條件下，對植物的胚及胚器官如子房、胚珠和胚乳進行離體 培養(yǎng)的技術。它包括胚培養(yǎng)，胚珠培養(yǎng)，子房培養(yǎng).廣義還包括胚乳培養(yǎng)，離體授粉。30依據剝離胚的發(fā)育時期不同，可將胚培養(yǎng)分為成熟胚培養(yǎng)和幼胚培養(yǎng)。31幼胚培養(yǎng)的關鍵技術是：幼胚剝離。幼胚培養(yǎng)中，常見的生長方式為：胚性發(fā)育、早熟萌發(fā)和愈傷組織32胚乳培養(yǎng)取材的最佳時期是：旺盛生長期?；ㄋ幣囵B(yǎng)時，選取處于單核期的花藥培養(yǎng)效 果較好。33植物種質資源保存的方式：原生境保存和非原生境保存。34種質離體保存包括常溫限制

11、生長保存、低溫保存、超低溫保存三種方法。35根據體外培養(yǎng)動物細胞在培養(yǎng)器皿中是否能貼附于支持物生長的特性，可分為貼附型生 長細胞和懸浮型生長細兩大類，其中貼附型細胞大致又可分為成纖維細胞型、上皮細胞型、 游走細胞型和多形細胞型四類。36動物細胞在體外培養(yǎng)時，在細胞生存全過程中，經歷原代培養(yǎng)期、傳代期、衰退期三個 階段。37常用的動物細胞原代培養(yǎng)方法：組織塊培養(yǎng)法和分離細胞培養(yǎng)法。38采用消化分散法分離動物細胞時，常用的消化液為：胰蛋白酶，使用濃度通常為：0.25%。39動物細胞凍存和復蘇的基本原則是：慢凍快融。40細胞冷凍最常用的方法是：液氮冷凍保存法41常用的誘導動物細胞融合的副黏液病毒科病

12、毒為：仙臺病毒。42人工誘導動物細胞融合的方法有：病毒誘導融合、化學誘導融合和電融合。43雜交瘤技術的基本原理是將（骨髓瘤細胞）與（淋巴細胞）融合，獲得雜交瘤細胞。44動物性別控制途徑：XY精子分離技術、胚胎性別鑒定法45胚胎移植的基本程序：供體與受體的選擇、供體超數(shù)排卵、受體同期發(fā)情、胚胎回收、 胚胎檢測及質量鑒定、胚胎移植46根據細胞分化潛能大小，可將干細胞分為（全能干細胞）、（三胚層多能干細胞）、（單胚 層多能干細胞）和（單能干細胞）。47根據細胞來源不同，可將干細胞分為（胚胎性干細胞）和（成體干細胞）兩類。48轉基因動物新發(fā)展方向：動物乳腺生物反應器、血液生物反應器、膀胱生物反應器。4

13、9動物染色體工程主要包括：單倍體育種、多倍體育種、染色體的顯微操做技術、人工染 色體技術。50人工染色體主要有酵母人工染色體、細菌人工染色體、哺乳動物人工染色體。51 染色體加倍是一種動物多倍體育種技術，可通過物理方法、化學方法和生物學的方法來 實現(xiàn)。物理方法包括溫度休克法和水靜壓法；化學方法是利用秋水仙素和細胞松弛素B等化學物質通過抑制細胞分裂而獲得同源多倍 體，生物學方法是主要通過動物雜交獲得異源多倍體，多倍體動物具有生存能力強、生長速度 快等特點，而且還具有較好的經濟性狀和潛在的理論研究價值。簡答題1.以升汞消毒為例簡述從外植體消毒到接種的過程超凈工作臺：紫外燈照射20-30 min，關

14、閉后，打開風機10 min，開始操作。接種人員：洗凈雙手，在緩沖室換好消毒的工作服，戴口罩，換拖鞋。操作前：用酒精棉球擦拭雙手、工作臺、裝有培養(yǎng)基的培養(yǎng)器皿及放外植體的燒杯。接種工具：用酒精擦拭接種工具，然后在酒精燈火焰上進行灼燒滅菌。外植體：75%乙醇浸泡30 s，再用0.1%的升汞中浸泡5-10 min，必要時可進行攪動， 使植物材料與消毒劑有良好的接觸，然后用無菌水沖洗3-5次。接種：培養(yǎng)瓶瓶口在酒精燈火焰附近，并在接種前后灼燒瓶口。(夾取外植體時用力要 適當，用力過大外植體易受到傷害；用力過小外植體易脫落。)接種外植體時，不能碰到培 養(yǎng)瓶瓶口。將消毒后的培養(yǎng)材料迅速放入培養(yǎng)瓶，包好瓶口

15、。操作期間應經常用70%乙醇 擦拭工作臺和雙手，接種工具要反復滅菌，防止交叉污染。結束：清理和關閉超凈工作臺。2 .常用的植物激素有哪些？作用是什么？生長素類：促進細胞伸長生長和分裂的作用，用于誘導愈傷組織形成和根的分化。常 用的生長素有：(2,4-D)、(IAA)、(IBA)、(NAA)細胞分裂素類：促進細胞分裂、誘導愈傷組織或器官分化、促進側芽增殖，抑制根的 分化。常用的細胞分裂素有：6-BA、KT、ZT、2ip赤霉素：主要添加GA3,促進幼苗莖的伸長生長，促進胚狀體發(fā)育成小植株。在植物組織培養(yǎng)中，器官發(fā)生的方式有先分化產生芽，芽伸長后在幼莖的基部長根，形成完整植株。先分化產生根，再從根的

16、基部長出不定芽，形成完整植株。愈傷組織的不同部位分別形成根和芽，然后二者的維管組織再相連，形成完整植株。體細胞胚胎來源直接從外植體上產生體細胞胚胎；由愈傷組織產生(內部、表面)；懸浮培養(yǎng)中由胚 性細胞復合體表面產生；由懸浮培養(yǎng)中游離的單細胞產生；由單倍體細胞產生；人工種子的結構如何？具有良好發(fā)育的體細胞胚，并能發(fā)育成正常完整植株：廣義的體細胞胚由組織培養(yǎng) 中獲得的體細胞胚即胚狀體、愈傷組織、原球莖、不定芽、頂芽、腋芽或小鱗莖等繁殖體組 成。人工胚乳，一般由含有供應胚狀體養(yǎng)分的膠囊組成，養(yǎng)分包括礦質元素、維生素、 碳源及激素等。膠囊之外的包膜稱之為人工種皮，有防止機械損傷及水分干燥等保護作用。人

17、工種子的制備胚狀體的誘導及同步化；人工胚乳的制備；人工種皮的制備；人工種子的包埋； 人工種子的貯存與萌發(fā)離體無性繁殖一般分為哪幾個階段？簡述其操作的一般程序。答：離體無性繁殖一般可分為5個階段。供體植株的準備：供體植株應生長旺盛、健壯、無病蟲害，并盡可能生長在干凈的環(huán)境中。無菌培養(yǎng)物的建立：獲得無菌材料并誘導外植體生長和發(fā)育。包括從供體植株上采取外 植體進行消毒、接種及啟動外植體生長等程序。培養(yǎng)物增殖：通過反復培養(yǎng)使獲得的數(shù)量有限的嫩枝、芽苗、胚狀體、原球莖等培養(yǎng)物的 總量增加。生根培養(yǎng)：將增殖階段形成的無根芽苗轉移到生根培養(yǎng)基上誘導產生不定根，獲得健壯 的具有根、芽、莖的完整小植株。試管苗的

18、移栽及鑒定：將具根試管苗轉移到土壤中，使其從離體培養(yǎng)逐步適應溫室或田 間生長環(huán)境。鑒定主要包括商品性狀、健康狀況、遺傳穩(wěn)定性和農藝性狀的鑒定。簡述通過莖尖分生組織培養(yǎng)獲得無病毒植株的一般程序。供體植株的選擇：選擇生長健康、感病程度輕的植株莖尖分生組織的分離：在解剖鏡下分離出適合大小的莖尖，并進行簡單的消毒處理莖尖分生組織的培養(yǎng)：方法有固體培養(yǎng)和濾紙橋液體培養(yǎng)，常采用無機離子濃度低和銨 鹽、鉀鹽濃度高的培養(yǎng)基，進行恒溫光照培養(yǎng)。病毒檢測：方法有指示植物法、血清學法、電鏡檢測法和分子生物學檢測法。無病毒苗的保存和繁殖：保存的方法有離體保存和隔離保存，繁殖方法有實驗室離體快 繁和田間隔離繁殖。植物單

19、細胞的分離1）由完整的植物器官中分離單細胞：從完整的植物器官中分離單細胞可以采用機械法或 酶解法。葉肉是分離單細胞的最好材料2）由愈傷組織中分離單細胞：從培養(yǎng)的未分化且疏松易碎的愈傷組織中分離單細胞。植物原生質體融合方法有哪些？1）無機鹽誘導融合2）高pH值-高鈣法3）聚乙二醇誘導融合4） PEG-高PH-高鈣5） 電融和花藥培養(yǎng)和花粉培養(yǎng)的區(qū)別是什么？1）花藥培養(yǎng)：指用植物組織培養(yǎng)技術將發(fā)育到一定階段的花藥剝離下來（切去花絲部 分），接種到培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，最終形成完整植株的過程。2）花粉培養(yǎng)：又稱小孢子培養(yǎng)，或游離小孢子培養(yǎng)，指在無菌條件下，將花粉從花藥 中游離出來，使其成為分散或游離態(tài)，

20、發(fā)育成單倍體植株。3）就培養(yǎng)材料而言，花藥培養(yǎng)屬于器官培養(yǎng)，花粉培養(yǎng)屬于細胞培養(yǎng)利用秋水仙素誘導花粉植株染色體加倍的方法有哪些？1）小苗處理法：將花粉植株幼苗整體浸泡于一定濃度的無菌秋水仙素溶液中。2）莖尖 處理法：將秋水仙素均勻涂抹在單倍體植株的頂芽或腋芽上。3）培養(yǎng)基處理法：將秋水仙 素加入培養(yǎng)基中來培養(yǎng)單倍體外植體或細胞。簡述成熟胚的培養(yǎng)過程。將受精后成熟或未成熟種子或果實，用70%-75%酒精表面消毒消毒幾秒到幾十秒用0.1%升汞溶液或飽和漂白粉溶液消毒5-15min，無菌水反復沖洗3次無菌操作臺上，直接或在解剖鏡下剝取胚接種在培養(yǎng)基上，常規(guī)培養(yǎng)簡述幼胚培養(yǎng)的基本程序。1）取材：取子房，一般取球形胚至魚雷形胚，培養(yǎng)成功率較高。2）常規(guī)表面消毒3）幼胚剝離：是幼胚培養(yǎng)的關鍵技術，解剖鏡下，取胚珠、去珠被、取出完整幼胚，注 意剝離時要保濕、無菌、操作迅速4）接種培養(yǎng)：幼胚剝離后立即接種到培養(yǎng)基上培養(yǎng)，一般采用看護培養(yǎng)。簡述動物細胞體外培養(yǎng)的一般過程（1）取材：在無菌環(huán)境下從機體取出某種組織細胞，經過一定的處理后接入培養(yǎng)器皿中；（2）原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)主要采用組織塊培養(yǎng)法和分散細胞培養(yǎng)法；貼壁細胞的傳代大都采用酶消化法來進行；（3）細胞純化：自然純化法和人工純化法（酶消化法、機械刮除法、反復貼壁法、克隆法、 流式細胞儀技術等）；（4）細胞的凍存復蘇及運輸：細胞