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1、DNA是主要的遺傳物質(zhì)噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)學(xué)校:會(huì)澤一中教師:計(jì)全瑋二肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)(1944年,艾弗里)體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)(1928年,格里菲思) 無毒R型活細(xì)菌 活小鼠 有毒S型活細(xì)菌 死小鼠 有毒S型死細(xì)菌 活小鼠 活R + 加熱殺死的S 死小鼠S型蛋白質(zhì)分別與R型活細(xì)菌混合培養(yǎng)R多糖DNARS結(jié)論2:“轉(zhuǎn)化因子”是DNA,DNA才是使R型細(xì)菌產(chǎn)生穩(wěn)定遺傳變化的物質(zhì)。內(nèi)容回顧結(jié)論1:S型細(xì)菌中有一種“轉(zhuǎn)化因子”能使R型活細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型活細(xì)菌。艾弗里的實(shí)驗(yàn)引起了人們的注意,但是,由于艾弗里實(shí)驗(yàn)中提取出的DNA,純度最高時(shí)也還有0.02%的蛋白質(zhì),因此,仍有人對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)論表示懷疑。1

2、952年,赫爾希和蔡斯以T2噬菌體(病毒)為實(shí)驗(yàn)材料,利用放射性同位素標(biāo)記的新技術(shù),完成了另一個(gè)更具有說服力的實(shí)驗(yàn).思維碰撞有沒有比細(xì)菌更為簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)材料可以使DNA和蛋白質(zhì)徹底分離開來研究?(1)噬菌體的結(jié)構(gòu)模式圖 噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)(1)結(jié)構(gòu):頭部和尾部的外殼是由 構(gòu)成,頭部?jī)?nèi)含有 。蛋白質(zhì)DNA(2)與大腸桿菌的關(guān)系:寄生 T2噬菌體(3)增殖特點(diǎn):在 的作用下,利用 來合成自身的組成成分,進(jìn)行大量增殖。自身遺傳物質(zhì)大腸桿菌體內(nèi)的物質(zhì) 噬菌體侵染細(xì)菌的動(dòng)態(tài)過程:復(fù)制(合成)組裝釋放吸附注入復(fù)制(合成)組裝釋放吸附注入1、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路:2、實(shí)驗(yàn)方法:把蛋白質(zhì)和DNA完全區(qū)分開,直接地、單

3、獨(dú)地觀察DNA和蛋白質(zhì)的作用放射性同位素標(biāo)記法如何標(biāo)記可以將蛋白質(zhì)和DNA區(qū)分開?思考:蛋白質(zhì)的組成元素:D N A 的組成元素:(標(biāo)記32p)(標(biāo)記35s )C、H、O、N、SC、H、O、N 、P 32P35S 標(biāo)記 DNA 標(biāo)記 蛋白質(zhì) 3. 實(shí)驗(yàn)過程: 思考: 如何標(biāo)記T2噬菌體的DNA和蛋白質(zhì)?提示問題:1、能不能單獨(dú)培養(yǎng)噬菌體?2、在培養(yǎng)噬菌體之前先培養(yǎng)什么?怎么培養(yǎng)?第一步:獲得被標(biāo)記的T2噬菌體細(xì)菌含35S的培養(yǎng)基 含35S的細(xì)菌細(xì)菌含32P的培養(yǎng)基 含32P的細(xì)菌2:分別標(biāo)記噬菌體噬菌體含35S的細(xì)菌 含35S的噬菌體噬菌體含32P 的細(xì)菌 含32P的噬菌體1:分別標(biāo)記細(xì)菌被3

4、5S標(biāo)記的噬菌體被32P標(biāo)記的噬菌體被35S標(biāo)記的噬菌體與細(xì)菌混合被32P標(biāo)記的噬菌體與細(xì)菌混合攪拌離心放射性很高放射性很低放射性很低放射性很高第I組:上清液放射性很高, 說明上清液主要成分是什么?第II組:沉淀物中的32P含量很高,說明什么?DNA進(jìn)入大腸細(xì)菌中,而蛋白質(zhì)外殼留在了外面.蛋白質(zhì)第I組:沉淀物放射性很低,直接說明了?大腸桿菌內(nèi)幾乎沒有被35S標(biāo)記的蛋白質(zhì);在大腸桿菌內(nèi)有被標(biāo)記的32PDNA,分析: 噬菌體在侵染細(xì)菌時(shí), 親代噬菌體同位素的去向子代噬菌體實(shí)驗(yàn)結(jié)論32P標(biāo)記DNA35S標(biāo)記蛋白質(zhì)32P標(biāo)記DNA進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)DNA有32P標(biāo)記35 S標(biāo)記蛋白質(zhì)在上清液中外殼蛋白質(zhì)無3

5、5 S標(biāo)記DNA分子在親代和子代之間具有連續(xù)性,是遺傳物質(zhì)對(duì)子代噬菌體進(jìn)行檢測(cè), 實(shí)驗(yàn)結(jié)果如何,說明了什么?本節(jié)小結(jié)赫爾希和蔡斯噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)思路:把蛋白質(zhì)和DNA完全區(qū)分開,直接地、單獨(dú)地觀察DNA和蛋白質(zhì)的作用實(shí)驗(yàn)方法:放射性同位素標(biāo)記法(DNA用P32標(biāo)記,蛋白質(zhì)用S35標(biāo)記)實(shí)驗(yàn)過程:標(biāo)記大腸桿菌含35S的大腸桿菌含32P的大腸桿菌標(biāo)記T2噬菌體含35S的T2噬菌體含32P的T2噬菌體T2噬菌體侵染大腸桿菌(短時(shí)間保溫)攪拌,離心,放射性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)論:DNA是遺傳物質(zhì)噬菌體在增殖過程中利用的原料是A細(xì)菌的核苷酸和自己的氨基酸 B自己的核苷酸和細(xì)菌的氨基酸C細(xì)菌的脫氧核苷酸和氨基酸 D自己的氨基酸和細(xì)菌的核苷酸課堂練習(xí) 噬菌體侵染細(xì)菌的正確順序是 : A、注入-吸附-釋放-組裝

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