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1、篇一:微生物的革蘭氏染色實驗報告】=txt二、實驗?zāi)康模?、學(xué)習(xí)并初步掌握革蘭氏染色法;2、了解革蘭氏染色的原理;3、鞏固顯微鏡的使用。三、實驗原理:革蘭氏染色是1884年丹麥病理學(xué)家christaingram氏創(chuàng)立的,是細(xì)菌學(xué)中最重要的鑒別染色法。染色步驟分為四個部分:1、初染:加入堿性染料結(jié)晶紫固定細(xì)菌圖片;2、媒染:加入碘液,碘與結(jié)晶紫形成一種不溶于水的復(fù)合物;3、脫色:利用有機(jī)溶劑乙醇或丙酮進(jìn)行脫色;g-和g+細(xì)胞壁的比較:1、陽性(g+)菌細(xì)胞壁特點:細(xì)胞壁厚,只有一層,主要由肽聚糖構(gòu)成,肽聚糖含量高,結(jié)構(gòu)緊密,脂類含量低。當(dāng)乙醇脫色時,細(xì)胞壁肽聚糖層孔徑變小,通透性降低,結(jié)晶紫和碘
2、的復(fù)合物被保2陰性-)菌細(xì)胞壁特點:細(xì)胞壁薄,由兩層構(gòu)成,內(nèi)壁層和外壁層,細(xì)胞壁中脂類中脂類物質(zhì)含量較高,肽聚糖含量較低,網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)交聯(lián)程度低,乙醇脫色時溶解了脂類物質(zhì),通透性增強(qiáng),結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物易被乙醇抽提出來,因此,革蘭氏陰性菌細(xì)胞被脫色,當(dāng)復(fù)染時,脫掉紫色的細(xì)胞的細(xì)胞壁又著上紅色(例如大腸桿菌)。四、實驗器材:1、菌種:大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌。2、溶液和試劑:革蘭氏染液、草酸銨結(jié)晶紫染液、碘液、95%乙醇、番紅復(fù)染液、水。3、儀器及其他用品:酒精燈、載玻片、顯微鏡、接種環(huán)、試管架、濾紙、滴管。五、實驗步驟:1、取一個載玻片,將其洗凈并沿一個方向擦拭干凈,直至液體不再其上
3、收縮為止;將接種環(huán)整平,用灼燒過的接種環(huán)在混勻的菌種中取菌,按常規(guī)方法圖片,應(yīng)涂大,不宜過厚。2、打開酒精燈,用火焰固定,不宜烤得太狠,否則菌種呈假陽性。3、輕旋結(jié)晶紫染液滴管,將其旋出,滴加1滴草酸銨結(jié)晶紫染液覆蓋涂菌部位(輕晃使其完全覆蓋),染色40s。4、染色完成后傾去染液,水洗至流出水為無色。5、將玻片上殘留水用濾紙吸去,待其干燥。&在涂菌部位滴加碘液,覆蓋1mino7、媒染完成后,傾去碘液,水洗至流出水無色。&將玻片上殘留水用濾紙吸去,待其干燥。9、將載玻片放在白色筆記本上,用滴管滴加95%乙醇脫色,脫色3040s,不宜脫色太狠,否則菌種呈假陰性。以脫色完成后立即用水洗去乙醇。11、
4、將玻片上殘留水用濾紙吸去,待其干燥。12、滴加番紅復(fù)染液,染色4min13、染色完成后,水洗至流出水無色。14、吸去殘留水并晾干。15、用顯微鏡觀察并繪圖。用以上步驟完成:大腸桿菌和枯草芽孢桿菌的混合圖片染色、大腸桿菌單獨菌種染色、金黃色葡萄球菌單獨菌種染色。六、注意事項:1、選用活躍生長期菌種染色,老齡的革蘭氏陽性細(xì)菌會被染成紅色而造成假陰性。Z圖片不宜過厚,以免脫色不完全造成假陽性。3、脫色是革蘭氏染色是否成功的關(guān)鍵,脫色不夠造成假陽性,脫色過度造成假陰性。七、實驗結(jié)果與討論:1、結(jié)果:繪出高倍鏡下觀察的菌體圖像2、思考題:(1)寫出常見的革蘭氏陽性菌與陰性菌,包括致病菌。2)革蘭氏染色的
5、原理是什么?印象因素有哪些?3)如何驗證你的染色結(jié)果是否正確?篇二:微生物實驗報告一】s=txt學(xué)生實驗報告院(部)生物科學(xué)與工程學(xué)院姓名學(xué)號專業(yè)生物工程班級同組人員課程名稱微生物學(xué)類實驗實驗名稱產(chǎn)酶微生物的分離、純化與選育實驗日期2013.11批閱日期成績教師簽字北方民族大學(xué)教務(wù)處制產(chǎn)酶微生物的分離、純化與選育實驗意義:酶是生物體內(nèi)進(jìn)行生物化學(xué)反應(yīng)的催化劑,在生物體中已發(fā)現(xiàn)的酶有2500多種。由于酶促反應(yīng)的特異性強(qiáng),反應(yīng)溫和,安全無毒,環(huán)境污染少,在洗滌劑、皮革、紡織、診斷、制藥等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用價值。能由工業(yè)生產(chǎn)的50多種酶制劑蛋白酶、淀粉酶等,大部分是由霉菌、細(xì)菌、鏈霉菌和酵母菌生產(chǎn)的
6、。通過本實驗,學(xué)會從自然界中分離產(chǎn)酶微生物的方法,軍中的純化技術(shù)及其高產(chǎn)菌的選育技術(shù)。1.蛋白酶產(chǎn)生菌的分離與純化1.1實驗?zāi)康模簩W(xué)習(xí)從自然界中分離蛋白酶產(chǎn)生菌并純化。1.2實驗原理許多細(xì)菌和霉菌產(chǎn)生蛋白酶,細(xì)菌中的芽孢桿菌是常見的蛋白酶產(chǎn)生菌。本實驗將土壤樣品(或其他樣品)懸液加熱處理,殺死非芽孢細(xì)菌及其他微生物后進(jìn)行劃線分離得到芽孢桿菌,將其接種到酪蛋白平板進(jìn)行培養(yǎng),根據(jù)酪蛋白平板的水解圈作初篩。也可直接將細(xì)菌或霉菌接種到酪蛋白平板進(jìn)行培養(yǎng),分離篩選其他蛋白酶產(chǎn)生菌。1.3實驗儀器與材料土壤樣品或其他富含蛋白質(zhì)的樣品、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板、酪蛋白平板、無菌水(帶玻璃珠)、芽孢染色液;顯微
7、鏡、恒溫水浴鍋、酒精燈、接種針、游標(biāo)卡尺、無菌移液管、無菌試管、量筒等。1.4實驗方法與步驟14配制酪素培養(yǎng)基:牛肉膏03g、nacl0.5g酪素1.0g瓊脂20g,蒸餾水100ml左右,調(diào)節(jié)ph76-8Q142配制土壤樣品:1)采集土壤樣品,用無菌水制備1:10土壤懸液。2)取1:1Q土壤懸液5ml,然后將懸液按10、10、10、1Q梯度稀注入試管中。-1-2-3-43)將這些試管放入75-80C水浴中熱處理10min,以殺死非芽孢細(xì)菌。143滅菌與接種:1)將培養(yǎng)基滅菌處理。1.4.4蛋.白酶產(chǎn)生菌的純化:E3I31)根據(jù)酪蛋白平板的水解圈作初篩,挑選出單菌落的蛋白酶產(chǎn)生菌。2)將挑選出的
8、單菌落用平板劃線法接種到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上,然后將平板倒置放于培養(yǎng)箱中2448h。1.4.5芽孢桿菌的染色判斷1)挑去菌落涂片固定。2)滴加12滴孔雀綠染液于已固定的涂片上。3)用木夾夾住載玻片在火焰上加熱,使染液冒蒸汽但勿沸騰,切忌使染液蒸干,必要時可添加少許染液4)傾去染液,待玻片冷卻后水洗至孔雀綠不再褪色為止。5)用番紅水溶液復(fù)染1分鐘,水洗至水為無色。6)待干燥后,置油鏡觀察,芽孢呈綠色,菌體呈紅色。1.4.6蛋白酶產(chǎn)生菌的保存培養(yǎng):1)用斜面劃線法,取純化鑒定后的菌種接種于斜面上,放于培養(yǎng)箱中2448h。2)將培養(yǎng)后的菌種置于冰箱中保存。1.5實驗結(jié)果:在含酪蛋白的平板上,產(chǎn)蛋白酶
9、的芽孢桿菌可形成蛋白質(zhì)水解圈。自然界中分離的微生物各菌株間產(chǎn)蛋白酶活力有很大差異,有些芽孢桿菌酶活力超過4000u/ml。1)描述你所分離的蛋白酶產(chǎn)生菌的菌落特征和個體形態(tài)特征;答:第一組:a:原液培養(yǎng)基表面出現(xiàn)大面積菌落,難以挑出所需單一菌落;b:10培養(yǎng)基表面菌落較多,但未發(fā)現(xiàn)與所需菌落相關(guān)特征;c:10培養(yǎng)基表面基本未出現(xiàn)菌落:d:1Q10均發(fā)現(xiàn)與所需菌落特征相符的菌落,繼續(xù)培養(yǎng)待進(jìn)一步純化。第二組:a:原液培養(yǎng)基表面出現(xiàn)大面積菌落,難以區(qū)分-2-3-4-1b:10培養(yǎng)基表面基本未出現(xiàn)菌落c:10培養(yǎng)基表面基本未出現(xiàn)菌落:d:1Q10培養(yǎng)基表面均發(fā)現(xiàn)與所需菌落特征相符的菌落,繼續(xù)培養(yǎng)待進(jìn)
10、一步純化2)報告你所分離的蛋白酶產(chǎn)生菌的初篩(水解圈與菌苔直徑的比值)結(jié)果。答:求的平均he值=1.7-1-2-4-31.6注意事項1)土壤懸液加熱處理的溫度和時間應(yīng)準(zhǔn)確控制;2)點接含酪蛋白的平板時,接種量及接種面積要基本相同1.7分析與討論在酪蛋白平板上水解圈與菌落直徑比值大的菌落,其蛋白酶活力不一定大,因此,對初篩選出的水解圈與菌落直徑比值大的菌落要進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),進(jìn)一步對發(fā)酵液進(jìn)行酶活力測定。1.8思考題1)對所篩選的菌株如何進(jìn)一步提高酶活力?請寫出設(shè)想和方案;答:選用蛋白酶產(chǎn)量較高的原始菌種,擴(kuò)大培養(yǎng)后,采用低濃度的菌懸液,進(jìn)行紫外線時間梯度照射,選取一個突變率較高,成活率也較高的時間
11、,大批量的進(jìn)行紫外照射誘變,然后在明膠固體培養(yǎng)基平板上篩選水解圈較大的菌株接種,培養(yǎng)后測定水解酶活性,進(jìn)步篩選出高產(chǎn)菌株。2)蛋白酶有哪些方面的應(yīng)用。答:蛋白酶廣泛存在于動物內(nèi)臟、植物莖葉、果實和微生物中。微生物蛋白酶,主要由霉菌、細(xì)菌,其次由酵母、放線菌生產(chǎn)。產(chǎn)酶微生物菌種的選育生物的遺傳信息的改變是通過基因突變、基因重組和基因轉(zhuǎn)移來進(jìn)行的?;蛲蛔儯址Q點突變(pointmutation),包括自發(fā)突變和誘發(fā)突變,前者是未經(jīng)人為施加誘變劑處理而發(fā)生的突變,后者是經(jīng)人為施加誘變劑處理而獲得的突變。兩種突變都是由于一個或幾個堿基的增加、缺失或置換而引起的,因此本質(zhì)相同,不同的只是誘發(fā)突變的頻率
12、比自發(fā)突變的頻率要高得多。這一部分的實驗是以紫外線為例介紹了物理因素對微生物的誘變作用。本實驗中,學(xué)生將篩選出的蛋白酶的產(chǎn)生菌株作為出發(fā)菌株通過紫外線即物理因素對微生物的誘變作用,對以上菌株進(jìn)行選育工作。特以蛋白酶產(chǎn)生菌株作為出發(fā)菌株,經(jīng)過紫外線的誘變作用,根據(jù)透明圈直徑與菌落直徑的比值,可初步確定蛋白酶的高產(chǎn)菌株為例來介紹本實驗內(nèi)容。2.1實驗?zāi)康耐ㄟ^實驗觀察紫外線和亞硝基胍等理化因素對微生物的誘變效應(yīng),并掌握基本方法。2.2實驗原理基因突變可分為自發(fā)突變和誘發(fā)突變。許多物理因素、化學(xué)因素和生物因素對微生物都有誘變作用,這些能使突變率提高到自發(fā)突變水平以上的因素稱為誘變劑。紫外線(uv)是一
13、種最常用的物理誘變因素。它的主要作用是使dna雙鏈之間或同一條鏈上兩個相鄰的胸腺嘧啶間形成二聚體,阻礙雙鏈的分開、復(fù)制和堿基的正常配對,從而引起突變。紫外線照射引起的dna損傷,可由光復(fù)活酶的作用進(jìn)行修復(fù),使胸腺嘧啶二聚體解開恢復(fù)原狀。因此,為了避免光復(fù)活,用紫外線照射處理以及處理后的操作應(yīng)在紅光下進(jìn)行,并且照射處理后的微生物放在暗處培養(yǎng)。本實驗分別以紫外線作為單因子誘變劑處理產(chǎn)生蛋白酶的菌株,根應(yīng)。一般來說,透明圈越大,蛋白酶活性越強(qiáng)。據(jù)試驗菌誘變后在蛋白酶培養(yǎng)基上透明直徑的大小來指示誘變效2.3實驗儀器與材料篩選出的蛋白酶的產(chǎn)生菌株、酪素培養(yǎng)基、無菌生理鹽水、無菌水試管等;1ml無菌吸管、
14、玻璃涂棒、血細(xì)胞計數(shù)板、顯微鏡、紫外線等(15w)、磁力攪拌器、臺式離心機(jī)、震蕩混合器等。2.4實驗方法與步驟1)菌懸液的制備:取培養(yǎng)48小時生長旺盛的出發(fā)菌株斜面4-5支,用10ml無菌生理鹽水將菌苔洗下,倒入盛有玻璃珠的小三角燒瓶中,振蕩30分鐘,以打碎菌塊。用顯微鏡直接計數(shù)法計數(shù),調(diào)整細(xì)胞濃度為每毫升10個。2)平板制作:將酪素培養(yǎng)基溶化后,冷至55匕左右時倒平板18套,凝固后待用。8篇三:微生物生理生化反應(yīng)實驗報告】txt)姓名系年級2011級生科2班組別四科目微生物學(xué)實驗題目微生物的生理生化反應(yīng)微生物的生理生化反應(yīng)一、【實驗?zāi)康摹?.證明不同微生物對各種有機(jī)大分子物質(zhì)的水解能力不同,
15、從而說明不同微生物有著不同的酶系統(tǒng)。2.掌握進(jìn)行微生物大分子物質(zhì)水解試驗的原理和方法。3.了解糖發(fā)酵的原理和在腸細(xì)菌堅定中的重要作用。4.掌握通過糖發(fā)酵鑒別不同微生物的方法。5.了解吲哚和甲基紅試驗的原理以及其在腸道細(xì)菌鑒定中的意義和方法。二、【實驗儀器與試劑】菌種:枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、普通變形桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌培養(yǎng)基:培養(yǎng)基:固體淀粉培養(yǎng)基、固體油脂培養(yǎng)基(大分子水解試驗);葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基、乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基(內(nèi)裝有倒置的德漢氏小管)(糖發(fā)酵試驗);蛋白胨水培養(yǎng)基(吲哚試驗);葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基;試劑:盧戈氏碘液、乙醚、吲哚試劑、甲基紅試劑、蒸餾水、儀器:酒精
16、燈、接種針、培養(yǎng)皿、試管、試管架、燒杯、量筒、德漢氏小管三、【實驗原理】1.在所有生活細(xì)胞中存在的全部生物化學(xué)反應(yīng)稱之為代謝,代謝過程主要是酶促反應(yīng)過程,由于各種微生物具有不同的酶系統(tǒng),所以他們能利用的底物不同,或雖利用相同的底物但產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物卻不同,因此可以利用各種生理生化反應(yīng)來鑒別不同的細(xì)菌,尤其是在腸桿菌科細(xì)菌的鑒定中,生理生化試驗占有重要的地位。2.淀粉的水解:由于微生物對淀粉這種大分子物質(zhì)不能直接利用,必須靠產(chǎn)生的胞外酶將大分子物質(zhì)分解才能被微生物吸收利用.胞外酶主要為水解酶,通過加水裂解大的物質(zhì)為較小的化合物,使其能被運(yùn)輸至細(xì)胞內(nèi).如淀粉酶水解淀粉為小分子的糊精,雙糖和單糖;而淀
17、粉遇碘液會產(chǎn)生藍(lán)色,因此能分泌胞外淀粉酶的微生物,則能利用其周圍的淀粉,在淀粉培養(yǎng)基上培養(yǎng)用碘處理其菌落周圍不呈藍(lán)色,而是無色透明圈,據(jù)此可分辨微生物能否產(chǎn)生淀粉酶。油脂的水解:在油脂培養(yǎng)基上接種細(xì)菌,培養(yǎng)一段時間后觀察菌苔的顏色,若出現(xiàn)紅色斑點,則說明此中菌可產(chǎn)生分解油脂的酶。糖發(fā)酵試驗:糖發(fā)酵試驗是常用的鑒別微生物的生化反應(yīng),在腸道細(xì)菌的鑒定上尤為重要.絕大多數(shù)細(xì)菌都能利用糖類作為碳源和能源,但是它們在分解糖類物質(zhì)的能力上有很大的差異.有些細(xì)菌能分解某種糖產(chǎn)生有機(jī)酸(如乳酸,醋酸,丙酸等)和氣體(如氫氣,甲烷,二氧化碳等);有些細(xì)菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣.例如大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣。產(chǎn)
18、酸后再加入溴甲酚指示劑后會使溶液呈黃色,且德漢氏小管中會收集到一部分氣體。若細(xì)菌不能使糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,則最后溶液為指示劑的紫色,且德漢氏小管中無氣體。5imvc實驗主要用于快(1)吲哚試驗:是用來檢測吲哚的產(chǎn)生,在蛋白胨培養(yǎng)基中,若細(xì)菌能產(chǎn)生色氨酸酶,則可將蛋白胨中的色氨酸分解為丙酮酸和吲哚,吲哚與對二甲基苯甲醛反應(yīng)生成玫瑰色的玫瑰吲哚。但并非所有的微生物都具有分解色氨酸產(chǎn)生吲哚的能力,所以吲哚實驗可以作為一個生物化學(xué)檢測的指標(biāo)。大腸桿菌吲哚反應(yīng)陽性,產(chǎn)氣腸桿菌為陰性。甲基紅試驗(mr):某些細(xì)菌在糖代謝過程中分解葡萄糖生成丙酮酸,后者進(jìn)而被分解產(chǎn)生甲酸,乙酸和乳酸等多種有機(jī)酸,培養(yǎng)基就會變酸,使
19、加入培養(yǎng)基中的甲基紅指示劑由橙黃色轉(zhuǎn)變?yōu)榧t色,即甲基紅反應(yīng)。大腸桿菌為陽性,產(chǎn)氣腸桿菌為陰性。四、【實驗步驟】1.淀粉水解實驗1)倒平板:按照淀粉培養(yǎng)基配方配制固體淀粉培養(yǎng)基,滅菌,待培養(yǎng)基冷卻至50匕左右,在酒精燈火焰旁倒平板,每組兩個平板。(2)用記號筆在平板底部劃成四部分。接種:在無菌操作臺上,將枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌分別在不同的部分點種,如圖一所示,注意僅用接種針接觸極少面積的培養(yǎng)基,在平板的反面對應(yīng)部分貼上標(biāo)簽,標(biāo)簽上分別寫上菌名,以免混淆。(4)培養(yǎng):將平板倒置,在28C溫箱中培養(yǎng)兩天。(5)觀察:取出培養(yǎng)基,觀察各種細(xì)菌的生長情況,打開平板蓋子滴入少
20、量盧戈氏碘液于平板中,輕輕旋轉(zhuǎn)平板,使碘液均勻鋪滿整個平板,觀察培養(yǎng)皿中菌落周圍是否有無色透明圈,若有無色透明圈出現(xiàn),說明淀粉已經(jīng)被水解,為陽性,反之則為陰性。記錄實驗結(jié)果。圖一:淀粉水解試驗接種示意圖圖二:油脂水解試驗接種示意圖2.油脂水解試驗1)倒平板:按照油脂培養(yǎng)基配方配制固體油脂培養(yǎng)基,滅菌,待培養(yǎng)基冷卻至50匕左右,充分振蕩,使油脂均勻分布,在酒精燈火焰下倒平板,每組兩個平板。(2)用記號筆在在平板底部劃成四部分。接種:在無菌操作臺上將枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌分別劃十字線接種于平板相對應(yīng)部分的中心如圖二所示,并貼好標(biāo)簽,標(biāo)簽上注明菌種的名稱。(4)培養(yǎng):將
21、平板倒置,在28C溫箱中培養(yǎng)兩天。(5)觀察:取出平板,觀察菌苔顏色,如果出現(xiàn)紅斑點,說明脂肪水解,為陽性反應(yīng)。記錄實驗結(jié)果。3.葡萄糖發(fā)酵實驗(1)培養(yǎng)基的配制:按照糖發(fā)酵培養(yǎng)基配置葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基,分裝至試管中,用膠頭滴管往德漢氏小管中注滿培養(yǎng)基,再把德漢氏小管倒置放入試管中,注意不要讓德漢氏小管中進(jìn)入空氣,每組五只試管,滅菌。(2)接種:待培養(yǎng)基冷卻至常溫時,在無菌操作臺上,取葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管2支接入大腸桿菌,再取兩只接入普通變形桿菌,接種后輕搖試管,使其均勻,防止倒置的小管進(jìn)入氣泡,第五支不接種,作為對照。在各試管外壁上貼上標(biāo)簽,標(biāo)簽上分別標(biāo)明發(fā)酵培養(yǎng)基的名稱和所接種的細(xì)菌菌名。(
22、3)培養(yǎng):把接種后的試管放在試管架上,把試管連同試管架放入培養(yǎng)箱中于28C下培養(yǎng)兩天。(4)觀察:觀察各試管顏色變化及德漢氏小管中有無氣泡,并記錄實驗結(jié)果。4.乳糖發(fā)酵實驗1)培養(yǎng)基的配制:按照糖發(fā)酵培養(yǎng)基配置乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基,分裝至試管中,用膠頭滴管往德漢氏小管中注滿培養(yǎng)基,再把德漢氏小管倒置放入試管中,注意不要讓德漢氏小管中進(jìn)入空氣,每組五只試管,滅菌。(2)接種:待培養(yǎng)基冷卻至常溫時,在無菌操作臺上,取乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管2支接入大腸桿菌,再取兩只接入普通變形桿菌,接種后輕搖試管,使其均勻,防止倒置的小管進(jìn)入氣泡第五支不接種,作為對照。在各試管外壁上貼上標(biāo)培養(yǎng):把接種后的試管放在試管架上,把
23、試管連同試管架放入培養(yǎng)簽,標(biāo)簽上分別標(biāo)明發(fā)酵培養(yǎng)基的名稱和所接種的細(xì)菌菌名。3)箱中于28匕下培養(yǎng)兩天。(4)觀察:觀察各試管顏色變化及德漢氏小管中有無氣泡,并記錄實驗結(jié)果。5.吲哚試驗(1)培養(yǎng)基的配制:按照蛋白胨水培養(yǎng)基配方配制培養(yǎng)基,分裝至試管中,每組五只試管,在高壓蒸氣鍋內(nèi)滅菌。2)接種:待培養(yǎng)基冷卻后,在無菌操作臺上將大腸桿菌接入2支蛋白胨水培養(yǎng)基,產(chǎn)氣腸桿菌接入2支蛋白胨水培養(yǎng)基,剩余一只試管不接種,作為空白對照,貼好標(biāo)簽。(3)培養(yǎng):把接種后的試管放在試管架上,把試管連同試管架放入培養(yǎng)箱中于28匕下培養(yǎng)兩天。(4)觀察:往培養(yǎng)后的蛋白胨水培養(yǎng)基內(nèi)加入34滴乙醚,搖動數(shù)次,靜置1min,待乙醚上升后,沿試管避徐徐加入2滴吲哚試劑。在乙醚和培養(yǎng)物之間產(chǎn)生紅色環(huán)狀物為陽性反應(yīng)。觀察加入試劑后試管內(nèi)的顏色反應(yīng)并記錄實驗結(jié)果。6甲基紅
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