夏盛葡萄糖氧化酶介紹課件

1、飼用葡萄糖氧化酶作用機理及功效葡萄糖氧化酶介紹葡萄糖氧化酶應(yīng)用研究內(nèi)容提綱總結(jié)夏盛葡萄糖氧化酶使用案例1葡萄糖氧化酶簡介葡萄糖氧化酶是一種氧化還原酶，在分子氧的存在下，專一地氧化-D-葡萄糖生成D-葡萄糖酸內(nèi)酯，同時消耗氧，生成過氧化氫；過氧化氫在過氧化氫酶作用下，分解生成水和1/2氧，而后水又與葡萄糖酸內(nèi)酯結(jié)合產(chǎn)生葡萄糖酸。 在此過程中，葡萄糖氧化酶的特點是能夠消耗氧氣，催化葡萄糖氧化，最終產(chǎn)物是葡萄糖酸。GOD催化-D-葡萄糖的速度是催化-D-葡萄糖的150倍.反應(yīng)方程式：2葡萄糖氧化酶的來源 1904年發(fā)現(xiàn)于黑曲霉菌絲； 1928年確定它是一種氧化還原酶，也是成功應(yīng)用于工業(yè)的少數(shù)幾種非水

2、解酶之一； 1960 年Kusai等、1964 年P(guān)azur和Swobodda分別從青霉和黑曲霉中提純葡萄糖氧化酶。 1995 年 , Petruccioli等用青霉的突變株生產(chǎn)出葡萄糖氧化酶。 1999年農(nóng)業(yè)部將其定為12種允許使用的飼用酶制劑之一； 目前生產(chǎn)上一般采用的霉菌是黑曲霉和青霉屬菌株。 允許使用的飼料添加劑目錄青霉黑曲霉4不同菌種來源對比 菌種特異青霉黑曲霉分子量150kD152kD碳氫化合物11%16%氨基酸（賴氨酸、苯丙氨酸）較多（組氨酸、精氨酸、酪氨酸）較多Km(米氏常數(shù))1130Vmax 值925458Km表示酶和底物之間的親和能力，Km值越大，親和能力越弱，反之亦然。在

3、同等底物濃度的條件下，Km值越大，其所需的酶濃度越大，即所需添加量也越大。（引自 Biotechnology Advance 27(2009): 489-501）反應(yīng)時間pH值剩余葡萄糖值（%）特異青霉黑曲霉特異青霉黑曲霉0h8.018.21h6.336.817.117.73h6.216.5615.516.36h6.146.3714.415.48h5.716.057.99.1目的：比較特異青霉和黑曲霉的產(chǎn)物生成量及底物消耗量步驟：配制18%葡萄糖溶液，測定初始葡萄糖含量，加入一定量碳酸鈣，調(diào)試pH值，分別加入同等活力不同來源葡萄糖氧化酶，以及過量過氧化氫酶，磁力攪拌器，用鼓風(fēng)機通入一個大氣壓的

4、空氣，保持氧氣充足。6葡萄糖氧化酶酶學(xué)特性在pH為4.08.0之間具有很好的穩(wěn)定性，最適 pH 值為6.08葡萄糖氧化酶酶學(xué)特性枯草桿菌蛋白酶(pH6.0)、胰蛋白酶(pH6.8)和胃蛋白酶(pH4.5)不能分解葡萄糖氧化酶酶學(xué)特性作用溫度為2060, 最適溫度35耐溫性能良好，經(jīng)85處理1min,酶活保持在80%以上耐溫性能15%濕度條件下，混合葡萄糖氧化酶和飼料后制粒結(jié)果存儲穩(wěn)定性良好，避光、干燥處保存12個月活力不低于90%。11在畜禽機體內(nèi)的作用機理及功效清除過量自由基保持腸道上皮完整減少病原入侵耗氧，抗氧化有機弱酸、提供酸性環(huán)境過氧化氫、強氧化性-D葡萄糖H2O2葡萄糖酸O2H2OG

5、OD過氧化氫酶消除腸道病原菌生存環(huán)境，保持腸道菌群生態(tài)平衡提高消化酶活，改善飼料品質(zhì)，提高飼料消化率緩解霉菌毒素中毒保護腸道健康維護腸道健康、提高免疫功能，促進消化吸收、替代抗生素、預(yù)防霉菌毒素中毒1/2O2（一）保持腸道上皮細胞的完整，抑制球蟲和病原菌的入侵1994年趙文等在氧自由基與腸道損傷中表明：機體內(nèi)產(chǎn)生的氧自由基會破壞腸道上皮細胞的完整性造成腸道損傷。在葡萄糖氧化酶催化的反應(yīng)過程中，可以清除氧自由基，保護腸道健康，從而抑制病原菌入侵。GOD的還原過程13GOD組015日齡0.20%GOD拌料；1660日齡用0.12%0.16%GOD拌料，如有球蟲則飲水添地克珠利 13d。對照組15日

6、齡起飲水添加地克珠利至 60日齡出舍，發(fā)生球蟲病則飲三維治球粉 3d。(引自湖北畜牧獸醫(yī),2004(1):31-33)備注：GOD酶活15u/g14(引自河北農(nóng)業(yè)大學(xué)，1997,1(4)空白對照：不攻毒攻毒對照和試驗組：進行雞白痢沙門氏菌攻毒，其中試驗組，攻毒后進行治療。備注：GOD酶活15u/g15（二）改善胃腸道酸性環(huán)境，促進營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收 催化葡萄糖生成葡萄糖酸，在腸道內(nèi)發(fā)揮酸化劑的作用，創(chuàng)造酸性環(huán)境；降低胃中的pH值，激活胃蛋白酶，促進營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收；（引自河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2009:34（4）對照組添加0.15%GOD添加0.3%GOD添加0.4%GOD添加0.5%GOD備注：

7、GOD酶活15u/g16（三）促進腸道益生菌的定殖，清除有害菌的繁殖。生成的葡萄糖酸可降低胃腸內(nèi)PH值，為乳酸菌生長制造酸性環(huán)境；葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖去除腸道內(nèi)氧氣，為厭氧有益菌雙歧桿菌的增殖制造厭氧環(huán)境；（引自畜牧與獸醫(yī)雜志，2011:43（6）對照組添加0.1%GOD添加0.2%GOD添加0.3%GOD備注：GOD酶活15u/g17（四）生成的過氧化氫通過破壞霉菌毒素的結(jié)構(gòu)解除毒性。葡萄糖氧化酶可抑制黃曲霉、黑根霉、青霉等多種霉菌，對黃曲霉毒素B中毒癥有很好的預(yù)防效果；葡萄糖氧化酶作用生成一定量的過氧化氫，使如黃曲霉毒素這種具備氧雜萘鄰?fù)鶊F的霉菌毒素被氧化脫氫，分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，解除

8、毒性?；蛲ㄟ^氧化作用破壞呋喃環(huán)結(jié)構(gòu)，使環(huán)打開，毒性消失，從而達到脫毒的作用；(引自：馮定遠,左建軍 著飼料酶制劑的應(yīng)用技術(shù)體系,31-25)18（引自生物學(xué)雜志，2014 ，31 (2)） 表2. 添加葡萄糖氧化酶對解除霉菌毒素小雞存活率的比較（引自動物營養(yǎng)學(xué)報 ，2014 ，26 (11)） 表1. 葡萄糖氧化酶對飼喂霉變玉米小鼠體重的影響75000u/t備注：GOD酶活15u/g19葡萄糖氧化酶使用案例夏盛（一）提高動物生產(chǎn)性能（二）降低抗生素使用20葡萄糖氧化酶使用案例夏盛（一）提高動物生產(chǎn)性能（二）降低抗生素使用21（一）提高動物生產(chǎn)性能 安徽雨潤集團滁州沃得養(yǎng)豬場應(yīng)用實例斷奶仔豬試驗

9、方案試驗?zāi)康钠咸烟茄趸笇嗄套胸i生長的影響試驗時間2015/09/12-2015/10/13試驗地點安徽滁州（雨潤集團-滁州沃得利養(yǎng)殖場）試驗對象24日齡斷奶仔豬，試驗組和對照組各103頭試驗過程實驗組仔豬飼喂過程中按照333g/t添加葡萄糖氧化酶(GOD200),對照組飼喂相同的飼料但不添加葡萄糖氧化酶。飼喂30天后比較兩組豬的料肉比、腹瀉率和日增重。222310.6%24試驗方案試驗?zāi)康牟煌砑恿科咸烟茄趸福?00u/g)對蛋種雞性能的影響試驗時間2013年9月22日至10月27日試驗地點鄭州滎陽蛋種雞養(yǎng)殖場，試驗期35d試驗對象25-28周齡的羅曼褐蛋種雞試驗過程選取A、B、C、D

10、4組雞作為實驗對象，其中A組（對照）僅僅飼喂基礎(chǔ)日糧，B組（300g/t GOD ）、C組（500g/t GOD）、D組（700g/t GOD）在基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上添加了不同劑量的葡萄糖氧化酶。通過連續(xù)35日的持續(xù)跟蹤試驗 ，對比產(chǎn)蛋率、受精率和健雛率。（一）提高動物生產(chǎn)性能 鄭州滎陽某蛋種雞場應(yīng)用實例羅曼褐蛋種雞25文章日糧中添加葡萄糖氧化酶對羅曼褐蛋種雞產(chǎn)蛋性能的影響中國飼料添加劑2014（2）26試驗方案試驗?zāi)康腉OD200的使用對蛋雞產(chǎn)蛋率和蛋殼品質(zhì)的影響試驗時間2015/10/30-2015/12/02試驗地點湖北馬鞍山（鑫欣禽業(yè)有限公司）試驗對象48周齡海蘭褐商品代蛋雞，實驗組（34

11、55只)、對照組（3463只）。試驗過程選取335日齡的產(chǎn)蛋雞，其中實驗組按照250g/t的比例在飲水中添加葡萄糖氧化酶，對照組飲水中不添加葡萄糖氧化酶，每日統(tǒng)計實驗組和對照組的產(chǎn)蛋率及蛋殼品質(zhì)。海蘭褐蛋雞（一）提高動物生產(chǎn)性能 安徽馬鞍山鑫欣禽業(yè)商品蛋雞應(yīng)用實例272.3%月平均2855.6% 29每日產(chǎn)蛋率對比30試驗方案試驗?zāi)康钠咸烟茄趸缚箲?yīng)激作用試驗時間2015/09/03-2015/09/30 試驗地點安徽郎溪（郎溪立大養(yǎng)殖場）試驗對象42周齡櫻桃谷種鴨，試驗組（306）、對照組（402）、對照組（500）、對照組（506），每組2000只，共計8000只。試驗過程實驗組飼料按照3

12、00g/t的量添加GOD200(不溶)，3個對照組飼喂同一基礎(chǔ)日糧不添加GOD。飼喂4周，每日統(tǒng)計產(chǎn)蛋率進行比較。（一）提高動物生產(chǎn)性能 安徽郎溪立大肉種鴨場應(yīng)用實例 櫻桃谷種鴨312.786.346.5419.63延緩后期產(chǎn)蛋率的降低32葡萄糖氧化酶使用案例夏盛（一）提高動物生產(chǎn)性能（二）降低抗生素使用33試驗方案試驗?zāi)康钠咸烟茄趸柑娲股卦囼炘囼灂r間2015年12月-2016年2月，試驗期為61天 試驗地點溫氏肉雞場試驗對象1日齡黃羽肉雞試驗過程選取三群雞作為試驗對象，其中A組作為對照組正常按照飼養(yǎng)程序添加抗生素，B組、C組作為試驗組，其中B組添加200g/t的GOD200，C組添加3

13、00g/t的GOD200。整個養(yǎng)殖期結(jié)束后對比A、B、C三組肉雞的日增重、料肉比和死淘率。（二）降低抗生素的使用 廣東溫氏青年雞34不同濃度葡萄糖氧化酶對肉雞161天齡生長性能的影響35試驗方案試驗?zāi)康牟煌腉OD200添加量對青年雞性能的影響。試驗時間2015年6月27日-2015年8月27日，試驗期為60天 試驗地點南陽市華東禽業(yè)青年雞場試驗對象1日齡青年雞，每組10000羽。試驗過程雛雞從1日齡開始試驗，其中對照組僅僅飼喂基礎(chǔ)日糧，3個試驗組分別在基礎(chǔ)日糧中添加不同濃度的GOD，A組（250g/t)、B組（200g/t)、C組（150g/t)。試驗結(jié)束后（青年雞60日齡),對比分析4組雞

14、群的體重、死淘率和用藥費用。（二）降低抗生素的使用 南陽市華東禽業(yè)青年雞應(yīng)用實例青年雞36文章葡萄糖氧化酶在青年雞中應(yīng)用效果分析中獸醫(yī)學(xué)雜志2015（10）37試驗方案試驗?zāi)康腉OD200對肉雞生長的促進作用試驗時間2015/09/16-2015/10/24試驗地點安徽蕪湖（明瑋生態(tài)科技園有限公司）試驗對象3日齡817商品肉雞，實驗組和對照組各12000只。試驗過程3日齡開始實驗組全群飲用葡萄糖氧化酶，全程除開口藥外不添加任何藥物（全程成本550元）；對照組從3日齡開始按照原用藥程序飲用（全程成本7200元），不添加葡萄糖氧化酶。出欄時比較兩組雞的出欄體重、料肉比和死淘率。817商品肉雞（二）

15、降低抗生素的使用 安徽蕪湖某肉雞養(yǎng)殖場應(yīng)用實例3839試驗方案試驗?zāi)康腉OD100對肉鴨生長性能的影響試驗時間2014年7月14日-2014年8月25日，試驗期為42天 試驗地點高唐六和榮達下屬肉鴨養(yǎng)殖場試驗對象1日齡櫻桃谷鴨，每組6000羽。試驗過程選擇同一批24000羽的1日齡雛鴨分為4組，飼喂同一基礎(chǔ)日糧。3個試驗組在飲水中添加500g/t的葡糖糖氧化酶的同時按照表1對用藥計劃進行修改。試驗結(jié)束后對比4組出欄肉鴨的體重、死淘率、料肉比。表1： 各組用藥情況對照組ABC日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧葡萄糖氧化酶500g/t500g/t500g/t抗球蟲藥正常添加正常添加減半正常添加腸

16、炎藥正常添加正常添加正常添加減半（二）降低抗生素使用 山東高唐榮達某肉鴨養(yǎng)殖場應(yīng)用實例4041（二）降低抗生素使用 西北農(nóng)林科技大學(xué)試驗場應(yīng)用實例AA肉雞試驗方案試驗?zāi)康牟煌N來源GOD200對肉雞性能的影響試驗時間2015年11月-2015年12月，試驗期為42d 試驗地點西北農(nóng)林科技大學(xué)試驗場試驗對象AA肉雞試驗過程選取840只雞分為4個組，其中陰、陽性對照各1組，試驗組2個，按照表1在飼料或飲水中添加不同的產(chǎn)品。每個組設(shè)7個重復(fù)。試驗結(jié)束后對比各組雞群的體重和料肉比。42N組P組A組B組日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧GOD(黑曲霉）00300g/t0GOD（特異青霉）000300

17、g/t抗生素組-+-備注：抗生素組包含硫酸粘桿菌素20g/t，恩拉霉素6g/t，鹽霉素鈉60g/t。 不同菌種來源添加活力一致。表1. 各組藥物使用情況434445總結(jié)葡萄糖氧化酶催化的反應(yīng)通過消耗氧氣制造厭氧環(huán)境、清除氧自由基；通過產(chǎn)生葡萄糖酸制造腸道酸性環(huán)境促進益生菌的占位和營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收；通過產(chǎn)生的過氧化氫消除霉菌毒素的毒性。應(yīng)用過程中添加葡萄糖氧化酶后可以有效的降低仔豬腹瀉；延長蛋雞產(chǎn)蛋高峰、減少軟殼蛋和白殼蛋；減少甚至消除肉雞養(yǎng)殖過程中抗生素的使用。當下食品安全問題日益得到重視，葡萄糖氧化酶必將為健康養(yǎng)殖提供新的突破口。46貴公司葡萄糖氧化酶與其它廠家的區(qū)別：夏盛葡萄糖氧化酶的基因

18、來源為青霉，而其它廠家的產(chǎn)品來源于黑曲霉，青霉源的葡萄糖氧化酶擁有更高的底物結(jié)合能力，反應(yīng)速率更快。菌種特異青霉黑曲霉分子量150kD152kD碳氫化合物11%16%氨基酸（賴氨酸、苯丙氨酸）較多（組氨酸、精氨酸、酪氨酸）較多Km(米氏常數(shù))1130Vmax 值925458（引自 Biotechnology Advance 27(2009): 489-501）酶學(xué)小知識預(yù)混料中含有高濃度的礦物元素（金屬離子），會不會導(dǎo)致酶失活？在酶促反應(yīng)中，酶的活性受到金屬離子的影響。但是，酶促反應(yīng)要在水溶液中才能進行，也就是說只有水分含量達到一定程度后才可以。預(yù)混料雖然含有大量的金屬離子，但是水分含量很低（12%），酶促反應(yīng)難以發(fā)生，所以不會導(dǎo)致酶失活。顆粒型的酶制劑是不是耐高溫性能更好？使用效果是不是更好？酶制劑能否耐高溫并不決定于是否是顆?；蚴欠蹱?，而是受到多種因素的影響（菌種、載體等等），首先是菌種的影響最大，如果是耐高溫的菌種，那么即使是粉狀酶，其耐高溫性能也不錯，如高溫淀粉酶。作為同一種酶，如果經(jīng)過了包被，包被材料合格，其耐溫性有一定的提高，但提高的程度受到包被工藝和包被材料的影響。就使用效果而言，顆粒酶并不一定比粉狀酶好，第一，顆粒酶粒度和比重與飼料不完全一致，導(dǎo)致混合不均勻，或分層，從而導(dǎo)致效果不穩(wěn)定或不明顯。酶的耐高溫性能你們是怎么檢測的？