人教版生物選修一練習(xí)：專(zhuān)題5課題3血紅蛋白的提取和分離

1、人教版高中生物選修一 人教版高中生物選修一 課題3血紅蛋白的提取和分離課堂對(duì)點(diǎn)訓(xùn)練-IKE TANG DUI DIAN XUN LLAN題型一血紅蛋白的提取與分離的原理1.利用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理是()A.蛋白質(zhì)分子與凝膠的親和力的大小B.蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小C.蛋白質(zhì)所帶電荷的多少D.蛋白質(zhì)溶解度的大小答案B解析凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小來(lái)分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長(zhǎng)，移動(dòng)的速度慢，相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動(dòng)的速度快，因此相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離。2.凝膠色譜分離法分離蛋白質(zhì)時(shí)，凝膠的種

2、類(lèi)較多，但其作用的共同點(diǎn)是()A.改變蛋白質(zhì)分子通過(guò)凝膠時(shí)的路徑B.吸附一部分蛋白質(zhì)，從而影響蛋白質(zhì)分子的移動(dòng)速度C.將酶或細(xì)胞固定在凝膠中D.與蛋白質(zhì)分子進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，從而影響其移動(dòng)速度答案A解析凝膠的種類(lèi)較多，但每一種凝膠內(nèi)部都有孔隙。相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長(zhǎng)，移動(dòng)速度較慢；相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)只能在凝膠外部移動(dòng)，路程較短，移動(dòng)速度較快，相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離，A正確。3.如圖能正確表示相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)在凝膠中的行進(jìn)過(guò)程的是解析相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長(zhǎng)，移動(dòng) 的速度

3、慢；相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動(dòng)的速度快，B正確。.下列有關(guān)電泳的敘述，不正確的是（）A.電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程B.待測(cè)樣品中各種分子的形狀、大小及帶電性質(zhì)的差異等會(huì)影響其在電泳 中的遷移速度C.進(jìn)行電泳時(shí)，帶電粒子會(huì)向著與其所帶電荷相同的電極移動(dòng)D.常用的電泳方法是瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳答案C解析電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程，在電場(chǎng)的作用下，帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)， A正確，C錯(cuò)誤；由于待分 離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、 形狀的不同，會(huì)使帶電 分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而

4、實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離， B正確；瓊脂糖凝 膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳是兩種常見(jiàn)的電泳方法， D正確。. SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法中加入的 SDS的作用是（）A .增大蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量.將蛋白質(zhì)分解成單個(gè)氨基酸C.掩蓋不同蛋白質(zhì)分子間的電荷差別D.增加不同蛋白質(zhì)分子間的電荷差別答案C人教版高中生物選修一 人教版高中生物選修一 解析SDS聚丙烯酰胺凝月及電泳法中加入 SDS的目的是使蛋白質(zhì)完全變性，解聚成單條肽鏈；同時(shí)SDS 所帶負(fù)電荷的量大大超過(guò)了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量，因而掩蓋了不同蛋白質(zhì)間的電荷差別， C 正確。6下列有關(guān)透析的敘述，錯(cuò)誤的是( )A 用于透析的薄膜要具有選擇透過(guò)性

5、B.透析膜一般是用硝酸纖維素制成的C.透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而將大分子保留在袋內(nèi)D.透析可用于更換樣品的緩沖液答案A解析透析袋一般是用硝酸纖維素(又稱(chēng)玻璃紙)制成的，它沒(méi)有生物活性，故不具有選擇透過(guò)性(活的生物膜才具有選擇透過(guò)性)， B 正確， A 錯(cuò)誤；透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而將大分子保留在袋內(nèi)， C 正確；透析可以去除樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，或用于更換樣品的緩沖液， D 正確。題型二 血紅蛋白的提取與分離的實(shí)驗(yàn)過(guò)程7下列關(guān)于血紅蛋白提取和分離實(shí)驗(yàn)的描述，正確的是( )A.紅細(xì)胞的洗滌：加入蒸儲(chǔ)水，緩慢攪拌，低速短時(shí)間離心B.血紅蛋白的釋放：加入生理鹽水和甲苯，置于磁力攪拌器上

6、充分?jǐn)嚢鐲.分離血紅蛋白：將攪拌好的混合液離心、過(guò)濾后，用分液漏斗分離D.透析：將血紅蛋白溶液裝入透析袋，然后置于pH為4.0的磷酸緩沖液中透析 12 h答案 C解析 紅細(xì)胞洗滌過(guò)程中應(yīng)該用生理鹽水，不能用蒸餾水，A 錯(cuò)誤；血紅蛋白的釋放應(yīng)該加入蒸餾水和甲苯，使紅細(xì)胞吸水漲破，釋放其中的血紅蛋白，B 錯(cuò)誤； 將攪拌好的混合液通過(guò)離心、 過(guò)濾后， 用分液漏斗分離出血紅蛋白溶液，C 正確；透析所用的磷酸緩沖液的 pH 為 7.0， D 錯(cuò)誤。8在血紅蛋白的整個(gè)提取過(guò)程中，不斷用磷酸緩沖液處理的目的是( )A.磷酸緩沖液會(huì)加速血紅蛋白的提取過(guò)程B.血紅蛋白是一種兩性物質(zhì)，需要酸進(jìn)行中和C.防止血紅蛋

7、白被氧氣氧化D,讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pH范圍內(nèi)，以維持其結(jié)構(gòu)和功能答案D解析在一定范圍內(nèi)，緩沖溶液能夠抵制外界的酸和堿對(duì)溶液 pH的影響，維持pH基本不變，防止血紅蛋白的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，從而有利于血紅蛋白的分離。.凝膠色譜柱制作的程序一般是（）橡皮塞打孔挖凹穴裝玻璃管蓋尼龍網(wǎng)蓋尼龍紗將橡皮塞插入玻璃管接尼龍管、裝螺旋夾柱頂插入安裝了玻璃管的橡皮塞A.-B.-C.-D.-答案B解析凝膠柱制作的一般流程是：選擇玻璃管-選擇合適的橡皮塞-打孔挖凹穴裝玻璃管蓋尼龍網(wǎng)-蓋尼龍紗-將橡皮塞插入玻璃管 -接尼龍管裝螺旋夾f柱頂插入安裝了玻璃管的橡皮塞。.下列關(guān)于凝膠色譜柱的操作，不正確的是 （）A.在色譜柱中

8、裝填凝膠的時(shí)候要盡量緊密B.凝膠用酒精充分溶脹后，配成凝膠懸浮液C .加樣前，打開(kāi)色譜柱下端的流出口D.在凝膠色譜制作過(guò)程中，不能發(fā)生洗脫液流干，露出凝膠顆粒的現(xiàn)象答案B解析凝膠應(yīng)用蒸儲(chǔ)水充分溶脹后，配成凝膠懸浮液，B錯(cuò)誤。.將處理破裂后的紅細(xì)胞混合液以 2000 r/min的速度離心10 min后，離 心管中的溶液分為四層，從上到下的順序依次是 （）A.血紅蛋白、甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、細(xì)胞破碎物沉淀層B.甲苯層、細(xì)胞破碎物沉淀層、血紅蛋白、脂質(zhì)物質(zhì)層C.脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、甲苯層、細(xì)胞破碎物沉淀層D.甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、細(xì)胞破碎物沉淀層答案 D解析 將處理破裂后的紅細(xì)胞混合液以 2

9、000 r/min 的速度離心10 min 后，離心管中的溶液分為四層， 從上到下的順序依次是甲苯層、 脂質(zhì)物質(zhì)層、 血紅蛋 白、細(xì)胞破碎物沉淀層。12在裝填凝膠柱時(shí)，不得有氣泡存在的原因是( )A.氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果B.氣泡阻礙蛋白質(zhì)的運(yùn)動(dòng)C.氣泡能與蛋白質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)D.氣泡會(huì)在裝填凝膠的時(shí)候，使凝膠不緊密答案 A解析 在裝填凝膠柱時(shí)，不得有氣泡存在的原因是氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果， A 正確。 紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白， 紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成的， 血 紅蛋白的主要功能是攜帶O2或CO2,我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物

10、的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來(lái)提取和分離血紅蛋白，請(qǐng)完成下列有關(guān)問(wèn)題： TOC o 1-5 h z (1)血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步： 、 、和。(2)實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來(lái)，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是。_ 以 上 所 述 的 過(guò) 程 即 是 樣 品 處 理 ， 它 包 括 、分離血紅蛋白溶液。(3)收集的血紅蛋白溶液在透析袋中透析，這就是樣品的粗分離。透析的目的是。_人教版高中生物選修一 人教版高中生物選修一 透析的原理是。_(4)然后通過(guò)凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化，最后經(jīng) SDS-聚丙烯酰胺凝膠 電泳進(jìn)行純度鑒定。樣品純化的目

11、的是。_血紅蛋白有什么特點(diǎn)？ 。_這一特點(diǎn)對(duì)進(jìn)行蛋白質(zhì)的分離有什么意義？ 。答案 (1)樣品處理粗分離 純化 純度鑒定(2)防止血液凝固紅細(xì)胞的洗滌血紅蛋白的釋放(3)去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而大分子則保留在袋內(nèi)(4)通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去血紅蛋白呈現(xiàn)紅色 在凝膠色譜分離時(shí)可以通過(guò)觀察顏色來(lái)判斷什么時(shí)候應(yīng)該收集洗脫液； 這 使血紅蛋白的分離過(guò)程非常直觀，大大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作程序解析 (1)血紅蛋白的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。(2)采取血液時(shí)要在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉以防止血液凝固。 樣品處理包括紅細(xì)胞洗滌、血紅

12、蛋白釋放、分離血紅蛋白溶液。(3)透析即是血紅蛋白的粗分離，透析的目的是除去分子量較小的雜蛋白。 透析的原理是透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而大分子則保留在袋內(nèi)。(4)樣品的純化是通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去。 血紅蛋白呈紅色，在凝膠色譜分離時(shí)可以通過(guò)觀察顏色來(lái)判斷什么時(shí)候應(yīng)該收集洗脫液，使血紅蛋白的分離過(guò)程非常直觀，大大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作程序。14.下面是凝膠色譜法分離血紅蛋白時(shí)樣品的加入(圖I )和洗脫(圖n )示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：數(shù)沖液(1)在加樣示意圖中,正確的加樣順序是 。(2)用吸管加樣時(shí)，應(yīng)注意正確操作，分別是 貼著管壁加樣、(3)等樣品時(shí)，才加入緩沖液，待 接近

13、色譜柱底端時(shí)，用試管收集流出液，每 mL收集一管，連續(xù)收集。答案(1)一一一(2)不要破壞凝膠面使吸管管口沿管壁環(huán)繞移動(dòng)(3)完全進(jìn)入凝膠層 紅色的蛋白質(zhì) 5解析加樣品時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按要求進(jìn)行操作，吸管應(yīng)貼著管壁，管口沿著管壁環(huán)繞移動(dòng)，還應(yīng)注意不要破壞凝膠面。等樣品完全進(jìn)入到凝膠層時(shí)，才加入緩沖液進(jìn)行洗脫。待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時(shí)，用試管收集流出液，每 5 mL 收集一管，連續(xù)收集。課后提能訓(xùn)練.KE HOU Ti NENG XUN LIAN.分離不同種類(lèi)的蛋白質(zhì)依據(jù)的原理不包括 ()A.分子的形狀和大小.所帶電荷的性質(zhì)和多少、吸附性質(zhì)C.對(duì)其他分子的親和力D.蛋白質(zhì)分子的組成元素答案 D解析

14、 分離不同種類(lèi)的蛋白質(zhì)依據(jù)的原理包括分子的形狀和大小、所帶電荷的性質(zhì)和多少、 吸附性質(zhì)、 對(duì)其他分子的親和力和蛋白質(zhì)分子的溶解度等。 蛋白質(zhì)分子的組成元素不是分離不同蛋白質(zhì)的依據(jù)。2下面說(shuō)法不正確的是( )A 在一定范圍內(nèi)，緩沖溶液能夠抵制外界的酸和堿對(duì)溶液pH 的影響，維持 pH 基本不變B.緩沖溶液通常由12種緩沖劑溶解于水中配制而成C.血紅蛋白由4條肽鏈組成D.透析袋能使大分子自由進(jìn)出，而將小分子保留在袋內(nèi)答案 D解析 透析袋一般是用硝酸纖維素(又叫玻璃紙)制成的。透析袋能使小分子自由進(jìn)出， 而將大分子保留在袋內(nèi)。 透析可以除去樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，或用于更換樣品的緩沖液。3關(guān)于

15、電泳的說(shuō)法不正確的是( )A .瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳是兩種常用的電泳方法B.帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)C.蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少D.用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳，蛋白質(zhì)的電泳遷移率完全取決于分子的大小答案 C解析蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少以及分子的大小等因素， SDS 能與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì) SDS 復(fù)合物， SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過(guò)了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量， 因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差異，使電泳遷移率完全取決于分子的大小。4在血紅蛋白的提取過(guò)程中，下列有關(guān)敘述不正確的是( )A.要使紅細(xì)胞中

16、的血紅蛋白釋放出來(lái)，需蒸儲(chǔ)水和甲苯的共同作用人教版高中生物選修一 人教版高中生物選修一 #B.離心后的血紅蛋白混合液第1層為白色薄層固體C.豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核，提純時(shí)雜蛋白較少D.洗滌紅細(xì)胞時(shí)，使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂答案B解析血紅蛋白的釋放需要蒸餾水和甲苯的共同作用，A 正確；離心后的血紅蛋白混合液第 1 層為無(wú)色透明的甲苯層， B 錯(cuò)誤； 哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核，可獲得較純凈的血紅蛋白，C 正確；洗滌紅細(xì)胞時(shí)，洗滌的目的是去除雜蛋白以利于后續(xù)步驟的分離純化，加入的生理鹽水，可防止細(xì)胞破 裂， D 正確。5取 1 mL 血紅蛋白溶液裝入透析袋中進(jìn)行透析，相關(guān)

17、說(shuō)法不正確的是( )A 透析液為300 mL 20 mmol/L 的磷酸緩沖液B.透析時(shí)間至少為12 h,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)血紅蛋白也會(huì)滲漏出去C.除去了相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，實(shí)現(xiàn)了樣品的粗分離D.透析也可用于更換樣品的緩沖液答案 B解析 透析過(guò)程除去了相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，實(shí)現(xiàn)了樣品的粗分離，透析也可用于更換樣品的緩沖液， C、 D 正確；進(jìn)行血紅蛋白溶液的透析時(shí)燒杯中加入 300 mL 20 mmol/L 的磷酸緩沖液，透析時(shí)間為 12 小時(shí)，充分讓小分子雜質(zhì)與血紅蛋白分離， A 正確， B 錯(cuò)誤。6下列關(guān)于凝膠色譜柱的裝填的說(shuō)法，不正確的是( )A.在裝填凝膠柱時(shí)，不得有氣泡產(chǎn)生B.在操作過(guò)程

18、中，不能讓洗脫液流干C .樣品洗脫結(jié)束后，及時(shí)倒掉色譜柱中的凝膠D.干的凝膠要用蒸儲(chǔ)水充分溶脹后，才能裝填答案 C解析 已裝填好的凝膠柱可重復(fù)多次使用，在使用過(guò)程的間隔，要用蒸餾水保持凝膠濕潤(rùn)。7對(duì)在凝膠柱上加入樣品和洗脫的操作，不正確的是( )A .加樣前要使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液下降到與凝膠面平齊B.讓吸管管口沿管壁環(huán)繞移動(dòng)貼壁加樣至色譜柱頂端，不要破壞凝膠面C .打開(kāi)下端出口，待樣品完全進(jìn)入凝膠層后，直接連接緩沖液洗脫瓶開(kāi)始 洗脫D.待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時(shí)，每 5 mL收集一管，連續(xù)收集流出 液 TOC o 1-5 h z 答案C解析樣品完全進(jìn)入凝膠層后，加入磷酸緩沖液到適當(dāng)高度，

19、再連接緩沖液洗脫瓶開(kāi)始洗脫。8下列各項(xiàng)中，一般不影響在凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)中的分離度的是( )A.層析柱高B.層析柱的直徑C.緩沖溶液D.樣品的分布答案B解析分離度取決于柱高，為分離不同組分， 凝膠柱床必須有適宜的高度，A 不符合題意；樣品的分布也影響分離度， D 不符合題意；緩沖溶液的 pH 影響蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)與功能，因此也影響分離度， C 不符合題意；只有層析柱的直徑一般不影響分離度， B 符合題意。9紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成。我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，提取和分離血紅蛋白。下圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實(shí)驗(yàn)裝置，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

20、人教版高中生物選修一 人教版高中生物選修一 (1)血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成成分，其在紅細(xì)胞中的 作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有功能。我們通常選用豬、牛、羊等動(dòng)物的血液進(jìn) 行實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)時(shí)加入檸檬酸鈉的目的是 (2)甲裝置中，B是血紅蛋白溶液，則 A是;該操作目的 是去除樣品中 乙裝置中，操作壓一定，保證 C溶液的流速(M “快” “慢”或“一定” )0(3)用乙裝置分離蛋白質(zhì)的方法叫 。(4)最后經(jīng)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行 (5)還有同學(xué)將大腸桿菌破碎并提取得到大腸桿菌蛋白質(zhì)，一同學(xué)利用瓊脂 糖凝膠電泳技術(shù)將得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離， 在電泳過(guò)程中，影響蛋白質(zhì)遷移速度 的因素包括蛋白質(zhì)分

21、子的分子大小、 以及分子的形狀等。而另一位同學(xué) 則利用乙圖分離，待蛋白質(zhì)接近色柱底端時(shí)，用試管連續(xù)收集流出液。先收集到 的蛋白質(zhì)與后收集到的蛋白質(zhì)的區(qū)別是先收集到的蛋白質(zhì) 。答案(1)運(yùn)輸防止血液凝固(2)磷酸緩沖液分子量小的雜質(zhì)一定(3)凝膠色譜法 (4)純度鑒定(5)帶電性質(zhì)分子量大解析(1)血紅蛋白具有運(yùn)輸氧氣的功能；在分離血紅蛋白的實(shí)驗(yàn)中，加入 檸檬酸鈉的目的是防止血液凝固(2)在血紅蛋白的溶液中，加入適宜的磷酸緩沖溶液，可以除掉分子量較小 的雜質(zhì)；在利用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的時(shí)候，洗脫液的速度應(yīng)當(dāng)保持一定(3)裝置乙分離蛋白質(zhì)的方法是凝膠色譜法。(4)最后用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳

22、對(duì)血紅蛋白進(jìn)行純度鑒定。(5)利用瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行蛋白質(zhì)分離時(shí)，蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量、帶電性質(zhì)、 分子形狀等因素都能影響蛋白質(zhì)的移動(dòng)速度； 采用凝膠色譜法進(jìn)行蛋白質(zhì)分離時(shí)，結(jié)果是相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)，運(yùn)動(dòng)路程較短，先被洗脫出來(lái)。10凝膠色譜法可測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量，現(xiàn)有A 、 B 兩種蛋白質(zhì)，請(qǐng)運(yùn)用凝膠色譜法完成下列實(shí)驗(yàn)，確定A 、 B 兩種蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小。(1)凝膠色譜法的原理是。(2)材料用具：玻璃管、橡皮塞、打孔器、移液管、尼龍網(wǎng)、螺旋夾、凝膠、緩沖液。(3)實(shí)驗(yàn)步驟：凝膠色譜柱的制作：注意底塞中插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的 ，否則難以鋪實(shí)，還會(huì)導(dǎo)致液體殘留，蛋白質(zhì)分離不徹底。 TOC o 1-5 h z 凝膠色譜柱的裝填： 裝填時(shí)輕輕敲動(dòng)色譜柱的原因是。樣品的加入和洗脫： 。_(4)預(yù)期結(jié)果及結(jié)論： 。_答案 (1)根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)(3)凹穴底面 尼龍網(wǎng)使凝膠裝填均勻?qū)、B兩種蛋白質(zhì)的混合液加到凝膠色譜柱的上端，用緩沖液進(jìn)行洗脫，檢測(cè)它們洗脫的先后順序(4)若 A 先于 B 洗脫出來(lái)，則 A 的相對(duì)分子質(zhì)量大于 B ；若 B 先洗脫出來(lái)，則 B 的相對(duì)分子質(zhì)量大于 A解析 (1)凝膠