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文檔簡介
1、專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題1果酒和果醋的制作.果酒制作的原理(1)人類利用微生物發(fā)酵制作果酒,該過程用到的微生物 是,它的代謝類型是,與異化作用有關(guān)的方程式有 O生活狀態(tài):進行發(fā)酵,產(chǎn)生大量 。(2)果酒制作條件傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所使用的酵母菌的來源是 O酵母菌生長的最適溫度是; PH呈;(3)紅色葡萄酒呈現(xiàn)顏色的原因是:酒精發(fā)酵過程中,隨著 的提高,紅色葡萄皮的 進入發(fā)酵液,使葡萄酒呈 色。(4)在、的發(fā)酵液中,酵母菌可以生長 繁殖,而絕大多數(shù)其它微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。.果醋的制作原理(1)果醋發(fā)酵菌種是 ,新陳代謝類型 。(2)當(dāng)氧氣和糖源充足時醋酸菌將糖分解成 ,當(dāng)糖源不足時
2、醋酸菌將 變?yōu)?再變成醋酸,其反應(yīng)式。.操作過程應(yīng)注意的問題(1)為防止發(fā)酵液被污染,發(fā)酵瓶要用 消毒。(2)葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時,要留出大約 的空間。(3)制作葡萄酒時將溫度嚴(yán)格控制在 ,時間控制在d左右,可通過 對發(fā)酵的情況進行及時的監(jiān)測。(4)制葡萄醋的過程中,將溫度嚴(yán)格控制在 ,時間控制在 d,并注意適時在 充氣。.酒精的檢驗(1)檢驗試劑:。(2)反應(yīng)條件及現(xiàn)象:在 條件下,反應(yīng)呈現(xiàn)。.制作果酒、果醋的實驗流程挑選葡萄_果酒 果醋P4旁欄思考題.你認(rèn)為應(yīng)該先洗葡萄還是先除去枝梗,為什么應(yīng)該先沖洗葡萄,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗時引起葡萄破損, 增加被雜菌污染的機會。.你認(rèn)為應(yīng)該從哪
3、些方面防止發(fā)酵液被污染需要從發(fā)酵制作的過程進行全面的考慮,因為操作的每一步都可能混入 雜菌。例如:榨汁機、發(fā)酵裝置要清洗干凈;每次排氣時只需擰松瓶蓋、不 要完全揭開瓶蓋等。.制作葡萄酒時,為什么要將溫度控制在18250C制作葡萄醋時,為什么要將溫度控制在30350C溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。200C左右最適合酵母菌繁殖,因 此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌,最適生長溫度 為3035C,因此要將溫度控制在 3035C。.制葡萄醋時,為什么要適時通過充氣口充氣醋酸菌是好氧菌,再將酒精變成醋酸時需要養(yǎng)的參與,因此要適時向發(fā)酵 液中充氣。P4:A同學(xué):每次排氣時只需擰松瓶蓋
4、,不要完全揭開瓶蓋;制醋時,再將瓶蓋 打開,蓋上一層紗布,進行葡萄醋的發(fā)酵。來防止發(fā)酵液被污染,因為操作的每一步都可能混入雜菌B同學(xué):分析果酒和果醋的發(fā)酵裝置中充氣口、排氣口和出料口分別有哪些 作用。為什么排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接充氣口 :是在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進行充氣用的;排氣口 :是在酒精發(fā)酵時用來排出二氧化碳的;出料口:是用來取樣的。排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接,具目的是防止空氣中微 生物的污染。使用該裝置制酒時,應(yīng)該關(guān)閉充氣口;制醋時,應(yīng)將充氣口連 接氣泵,輸入氧氣。課題2腐乳的制作.制作原理.經(jīng)過微生物的發(fā)酵,豆腐中的蛋白質(zhì)被分解成小分子的 和,脂肪被分
5、解成 和,因而更利于消化吸收。.腐乳的發(fā)酵有多種微生物參與,如、等,其中起主要作用的 是。它是一種絲狀,常見、 上。.現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的 條件下,將優(yōu)良 菌種直接接種在豆腐上,這樣可以避免其他菌種的 ,保證產(chǎn)品的質(zhì) 量。.腐乳制作的實驗流程:讓豆腐長出 一 一-密封腌制。.實驗注意事項(1)在豆腐上長出毛霉時,溫度控制在 ,自然條件下毛霉 的菌種來自空氣中的。(2)將長滿毛霉的豆腐塊分層加鹽,加鹽量要隨著擺放層數(shù)的加高 而,近瓶口的表層要 。加鹽的目的是使豆腐塊失水, 利于,同時也能 的生長。鹽的濃度過低,;鹽的濃度過局,。(3)鹵湯中酒精的含量應(yīng)控制在 左右,它能 微生物的生長,同時也
6、與豆腐乳獨特的 形成有關(guān)。酒精含量過高,;酒精含量過低,。 香辛料可以調(diào)制腐乳的風(fēng)味,同時也有 作用。(4)瓶口密封時,最好將瓶口,防止瓶口污染。P6旁欄思考題.你能利用所學(xué)的生物學(xué)知識,解釋豆腐長白毛是怎么一回事豆腐上生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說是直立菌絲,在豆腐中 還有匍匐菌絲。.王致和為什么要撒許多鹽,將長毛的豆腐腌起來鹽能防止雜菌污染,避免豆腐腐敗。.你能總結(jié)出王致和做腐乳的方法嗎讓豆腐長出毛霉一加鹽腌制-密封腌制。P7旁欄思考題.我們平常吃的豆腐,哪種適合用來做腐乳含水量為70溢右的豆腐適于作腐乳。用含水量過高的豆腐制腐乳,不 易成形。.吃腐乳時,你會發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的
7、“皮”。這層“皮”是怎 樣形成的呢它對人體有害嗎它的作用是什么“皮”是前期發(fā)酵時在豆腐表面上生長的菌絲(匍匐菌絲),它能形成P8練習(xí).腌制腐乳時,為什么要隨豆腐層的加高而增加鹽的含量為什么在接近 瓶口的表面要將鹽厚鋪一些越接近瓶口,雜菌污染的可能性越大,因此要隨著豆腐層的加高增加鹽 的用量,在接近瓶口的表面,鹽要鋪厚一些,以有效防止雜菌污染。.怎樣用同樣的原料制作出不同風(fēng)味的腐乳(可以不看)在酒和料上作變動紅腐乳:又稱紅方,指在后期發(fā)酵的湯料中,配以著色劑紅曲,釀制而 成的腐乳。白腐乳:又稱白方,指在后期發(fā)酵過程中,不添加任何著色劑,湯料以 黃酒、白酒、香料為主釀制而成的腐乳,在釀制過程中因添
8、加不同的調(diào)味輔 料,使其呈現(xiàn)不同的風(fēng)味特色,目前大致包括糟方、油方、霉香、醉方、辣 方等品種。青腐乳:又稱青方,俗稱“臭豆腐”,指在后期發(fā)酵過程中,以低度鹽 水為湯料釀制而成的腐乳,具有特有的氣味,表面呈青色。醬腐乳:又稱醬方,指在后期發(fā)酵過程中,以醬曲(大豆醬曲、蠶豆醬 曲、面醬曲等)為主要輔料釀制而成的腐乳。課題3制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量.乳酸菌代謝類型為 ,在 情況狂下,將葡萄糖分解為乳酸。在自然界中分布廣泛,腐乳的“體”,使腐乳成形“皮”對人體無害在、內(nèi)都有分布。常見的乳 酸菌有 和 兩種,其中 常用于生產(chǎn)酸奶。.亞硝酸鹽為,易溶于,在食品生產(chǎn)中用作。一般不會危害人體健康,但當(dāng)人體攝
9、入硝酸鹽總量達 g時,會引起中毒;當(dāng)攝入總量達到g 時,會引起死亡。在特定的條件下,如、和 的作用下,會轉(zhuǎn)變成致癌物質(zhì)一一亞硝胺,亞硝胺對動物有致畸和致突變作用。.泡菜制作大致流程:原料處理-裝壇-成品(1)配制鹽水:清水和鹽的比例為 ,鹽水 后備用。(2)裝壇:蔬菜裝至 時加入香辛料,裝至 時加鹽水,鹽水要 ,蓋好壇蓋。壇蓋邊沿水梢中 , 保證壇內(nèi) 環(huán)境。(3)腌制過程種要注意控制腌制的 、和。溫度過高、食鹽用量不足 10% 過短,容易 造成, 。4.測亞硝酸鹽含量的原理將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的 進行比較,可以大 致 出泡菜中亞硝酸鹽的含量。測定步驟:配定溶液- 一 制備樣品處理液7
10、-P9旁欄思考題:為什么含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶酸奶的制作依靠的是乳酸菌的發(fā)酵作用??股啬軌驓⑺阑蛞种迫樗峋?生長,因此含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶。P10旁欄思考題:.為什么日常生活中要多吃新鮮蔬菜,不宜多吃腌制蔬菜有些蔬菜,入小白菜和蘿卜等,含有豐富的硝酸鹽。當(dāng)這些蔬菜放置過久 發(fā)生變質(zhì)(發(fā)黃、腐爛)或者煮熟后存放太久時,蔬菜中的硝酸鹽會被微生 物還原成亞硝酸鹽,危害人體健康。.為什么泡菜壇內(nèi)有時會長一層白膜你認(rèn)為這層白膜是怎么形成的形成白膜是由于產(chǎn)膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厭氧微生物,泡菜發(fā)酵 液營養(yǎng)豐富,其表面氧氣含量也很豐富,適合酵母菌繁殖。P12練習(xí):2.你能總結(jié)果酒、
11、果醋、腐乳、泡菜這幾種發(fā)酵食品在利用微生物的種類和 制作原理方面的不同嗎你能總結(jié)出傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的共同特點嗎果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精發(fā)酵,果醋的制作利用的是醋酸菌將酒精轉(zhuǎn)變成醋酸的代謝,腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶類,泡菜的制作利用的是乳酸菌的乳酸發(fā)酵。傳統(tǒng)的發(fā)酵技術(shù)都巧妙的利用了天然菌種,都為特定的菌種提供了良好的 生存條件,最終的發(fā)酵產(chǎn)物不是單一的組分,而是成分復(fù)雜的混合物。專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1微生物的實驗室培養(yǎng).根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)可將培養(yǎng)基可以分為 和。.培養(yǎng)基一般都含有 、 四類營養(yǎng)物質(zhì),另外還需要滿足微生物生長對 、以 及 的要求。.獲得純凈培養(yǎng)物的
12、關(guān)鍵是 。.消毒是指滅菌是指.日常生活中常用的消毒方法是 ,止匕外,人們也常使用化學(xué) 藥劑進行消毒,如用、等。常用的滅菌方法 有、,此外,實驗室里還用 或進行消毒。.制備牛肉膏蛋白月東固體培養(yǎng)基的方法步驟是 , ,。.微生物接種的方法中最常用的是 和。平板劃線是指。稀釋涂布平板法指。.菌種的保藏:(1)臨時保藏:將菌種接種到試管的 ,在合適的溫度下 培養(yǎng),長成后,放入 冰箱中保藏,以后每36個月,轉(zhuǎn)移一 次新的培養(yǎng)基。缺點是:保存時間,菌種容易被 或產(chǎn)生變異。(2)長期保存方法: 法,放在 冷凍箱中保存P15旁欄思考題:無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外,還有 什么目的無
13、菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。P16旁欄思考題:請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要,請選擇合適的方 法。培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿(2)玻棒、試管、燒瓶和吸管(3)實驗操作者的雙手(1)、(2)需要滅菌;(3)需要消毒。P17倒平板操作的討論.培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到 50 C左右時,才能用來倒平板。你用什 么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙 手時,就可以進行倒平板了。.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。.平板冷凝后,為什么要將平板倒置平板冷凝后,皿蓋上會凝結(jié)水珠,凝固后的培
14、養(yǎng)基表面的濕度也比較高, 將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā),又可以防止皿蓋上的 水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。.在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位, 這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎為什么空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要 用這個平板培養(yǎng)微生物。P18平板劃線操作的討論.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)在劃線操作 結(jié)束時,仍然需要灼燒接種環(huán)嗎為什么操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培 養(yǎng)物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的 菌種,使下一次劃線時,接種環(huán)上的菌種直接
15、來源于上次劃線的末端,從而 通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。 劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細菌污染環(huán) 境和感染操作者。.在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進行劃線以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。.在作第二次以及其后的劃線操作時,為什么總是從上一次劃線的末端 開始劃線劃線后,線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的 末端開始,能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由 單個細菌繁殖而來的菌落。P19涂布平板操作的討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求,想一想,第2步
16、應(yīng)如何進行無菌操作應(yīng)從操作的各個細節(jié)保證“無菌”。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合 適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍;等等。P20六、課題成果評價.培養(yǎng)基的制作是否合格如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫 12 d后無菌落生長,說明培養(yǎng)基 的制備是成功的,否則需要重新制備。.接種操作是否符合無菌要求如果培養(yǎng)基上生長的菌落的顏色、形狀、大小基本一致,并符合大腸桿 菌菌落的特點,則說明接種操作是符合要求的;如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌 落,則說明接種過程中,無菌操作還未達到要求,需要分析原因,再次練習(xí)。3,是否進行了及時細致的觀察與記錄培養(yǎng)12 h與24 h后的大腸桿菌菌落的大小會有明
17、顯不同,及時觀察記 錄的同學(xué)會發(fā)現(xiàn)這一點,并能觀察到其他一些細微的變化。這一步的要求主 要是培養(yǎng)學(xué)生良好的科學(xué)態(tài)度與習(xí)慣。P20練習(xí).提示:可以從微生物生長需要哪些條件的角度來思考。例如,微生物 的生長需要水、空氣、適宜的溫度,食品保存可以通過保持干燥、真空的條 件,以及冷藏等方法來阻止微生物的生長。.提示:可以從這三種培養(yǎng)技術(shù)的原理、操作步驟等方面分別進行總結(jié) 歸納。例如,這三種培養(yǎng)技術(shù)都需要為培養(yǎng)物提供充足的營養(yǎng),但無土栽培技術(shù)的操作并不需要保證無菌的條件,而其他兩種技術(shù)都要求嚴(yán)格的無菌條 件。.提示:這是一道開放性的問題,答案并不惟一,重點在于鼓勵學(xué)生積 極參與,從不同的角度思考問題。例
18、如,正是由于證明了微生物不是自發(fā)產(chǎn) 生的,微生物學(xué)才可能發(fā)展成為一門獨立的學(xué)科;巴斯德實驗中用到的加熱 滅菌的方法導(dǎo)致了有效的滅菌方法的出現(xiàn),而這一滅菌原理也適用于食品的 保存等。課題2 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù).尿素只有被 分解成 之后,才能被植物吸收利用。選擇分解尿素細菌的培養(yǎng)基特點: 惟一氮源,按物理性質(zhì)歸 類為 培養(yǎng)基。. . PCR ( )是一種在體外 將。此項技術(shù)的自動化,要求使用耐高溫的 DN膘 合酶。實驗室中微生物的篩選應(yīng)用的原理是: 人為提供有利于 生 長的條件(包括 等),同時抑制或阻止其他微生物生長。. 選 擇 培 養(yǎng) 基 是指。.常用來統(tǒng)計樣品中活菌數(shù)目的方法是
19、 。即當(dāng)樣品 的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中 的。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含有多少活 菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)在 的平板進行計數(shù),計數(shù)公式是 。利用稀釋涂布平板 法成功統(tǒng)計菌落數(shù)目的關(guān)鍵是 。另外,也是測 定微生物數(shù)量的常用方法。. 一般來說,統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目 。這是因為。因此,統(tǒng)計結(jié)果一般用 而不是活 菌數(shù)來表示。.設(shè)置對照實驗的主要目的是,提 高 實 驗結(jié)果 的 可信度。 對照實驗 是。滿足該條件的稱 為,未滿足該條件的稱為 。. 實驗設(shè)計包括的內(nèi)容有:、 和,具體的實驗步驟以及時間安排等的綜合考慮和安排。.不
20、同種類的微生物,往往需要不同的培養(yǎng) 和培 養(yǎng)。在實驗過程中,一般每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目,選 取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果,這樣可 以。. 土壤有“之稱,同其他生物 環(huán)境相比,土壤中微生物、。. 土壤中的微生物約 是細菌,細菌適宜在酸堿度接近 潮濕土壤中生長。土壤中微生物的數(shù)量不同,分離不同微生物采用的 的稀釋度不同。. 一般來說,在一定的培養(yǎng)條件下,同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特 征。這些特征包括菌落的 、和 等方面。.在進行多組實驗過程中,應(yīng)注意做好標(biāo)記,其目的.對所需的微生物進行初步篩選,只是分離純化菌種的第一步,要對分離的菌種進行一步的鑒定,還需要借助 的方法。.在細菌分解尿素的化
21、學(xué)反應(yīng)中,細菌合成的 將尿素分解成 了。氨會使培養(yǎng)基的堿性 , PH。因此,我們可以通過檢 測培養(yǎng)基 變化來判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。 在以 為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入 指示劑。培養(yǎng)某種細菌后,如果PH升高,指示劑將 變,說明該細菌能夠。P22旁欄思考題.想一想,如何從平板上的菌落數(shù)推測出每克樣品中的菌落數(shù)答:統(tǒng)計某一稀釋度下平板上的菌落數(shù),最好能統(tǒng)計3個平板,計算出平板菌落數(shù)的平均值,然后按課本旁欄的公式進行計算。P22兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù),在對應(yīng)稀釋倍數(shù) 106的培養(yǎng)集中,得到以下兩種統(tǒng)計結(jié)果:1.第一位同學(xué)在該濃度下涂布了一 個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)為230; 2.
22、第二位同學(xué)在該濃度下涂布了三個平板第一位同學(xué)只涂布了一個平板,沒有設(shè)置重復(fù)組,因此結(jié)果不具有說服 力。第二位同學(xué)考慮到設(shè)置重復(fù)組的問題,涂布了3個平板,但是,其中1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差太遠,說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤, 因此,不能簡單地將3個平板的計數(shù)值用來求平均值。P22設(shè)置對照A同學(xué)的結(jié)果與其他同學(xué)不同,可能的解釋有兩種。一是由于土樣不同, 二是由于培養(yǎng)基污染或操作失誤。究竟是哪個原因,可以通過實驗來證明。 實驗方案有兩種。一種方案是可以由其他同學(xué)用與A同學(xué)一樣的土樣進行實驗,如果結(jié)果與A同學(xué)一致,則證明A無誤;如果結(jié)果不同,則證明 A同學(xué) 存在操作失誤或培養(yǎng)基的配制有問題。另
23、一種方案是將A同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進行培養(yǎng),作為空白對照,以證明培養(yǎng)基是否受到污染。 通過這個事例可以看出,實驗結(jié)果要有說服力,對照的設(shè)置是必不可少的。P24旁欄思考題為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度測定土壤中細菌的總量和 測定土壤中能分解尿素的細菌的數(shù)量,選用的稀釋范圍相同嗎這是因為土壤中各類微生物的數(shù)量(單位:株/kg)是不同的,例如在干 旱土壤中的上層樣本中:好氧及兼性厭氧細菌數(shù)約為2 185萬,放線菌數(shù)約為477萬,霉菌數(shù)約為萬。因此,為獲得不同類型的微生物,就需要按不同 的稀釋度進行分離,同時還應(yīng)當(dāng)有針對性地提供選擇培養(yǎng)的條件。P25結(jié)果分析與評價.培養(yǎng)物中是否
24、有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落對照的培養(yǎng)皿在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長,說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染。 牛肉膏培養(yǎng)基的菌落數(shù)目明顯大于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目,說明選擇培養(yǎng)基已篩 選出一些菌落。.樣品的稀釋操作是否成功如果得到了 2個或2個以上菌落數(shù)目在30300的平板,則說明稀釋操 作比較成功,并能夠進行菌落的計數(shù)。.重復(fù)組的結(jié)果是否一致如果學(xué)生選取的是同一種土樣,統(tǒng)計的結(jié)果應(yīng)該接近。如果結(jié)果相差太 遠,教師需要引導(dǎo)學(xué)生一起分析產(chǎn)生差異的原因。P26練習(xí)2.提示:反芻動物的瘤胃中含有大量的微生物,其中也包括分解尿素的 微生物。由于瘤胃中的微生物多為厭氧菌,接觸空氣后會死亡,因此分離其中能分解尿素的微
25、生物除了需要準(zhǔn)備選擇培養(yǎng)基外,還應(yīng)參照厭氧菌的培養(yǎng) 方法進行實驗設(shè)計。課題3分解纖維素的微生物的分離.纖維素是 類物質(zhì),是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物,止匕外,木材、作物秸稈等也富含纖維素。.纖維素酶是一種 酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分, 即、和,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖, 第三種酶將纖維二糖分解成 。正是在這三種酶的協(xié)同作用下,纖 維素最終被水解成葡萄糖,為微生物的生長提供營養(yǎng),同樣,也可以為人類 所利用。.篩選纖維素分解菌可以用 法,這種方法能夠通過 直接對微生物進行篩選。 可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形 成,但并不和水解后的 和 發(fā)生這種反應(yīng)。纖維素分解菌 能產(chǎn)生 分解纖維素
26、,從而使菌落周圍形成。.分離分解纖維素的微生物的實驗流程圖如下: - 一梯度稀釋7。.為確定得到的菌是否是纖維素分解菌,還學(xué)進行 的實驗。纖維素酶的發(fā)酵方法有 發(fā)酵和 發(fā)酵。測定方法一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的 進行 定量測定。P28旁欄思考題.本實驗的流程與課題2中的實驗流程有哪些異同本實驗流程與課題2的流程的區(qū)別如下。課題2是將土樣制成的菌懸液 直接涂布在以尿素為惟一氮源的選擇性培養(yǎng)基上,直接分離得到菌落。本課 題通過選擇培養(yǎng),使纖維素分解菌得到增殖后,再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基 上。其他步驟基本一致。.為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系,
27、在富含纖維素的環(huán)境中,纖維素分解 菌的含量相對提高,因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán) 境。.將濾紙埋在土壤中有什么作用你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進土壤多深將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對聚集,實際上是人工設(shè)置纖維 素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約 10 cm左右腐殖土壤中。P29旁欄思考題.想一想,這兩種方法各有哪些優(yōu)點與不足你打算選用哪一種方法(兩種剛果紅染色法的比較)方法一是傳統(tǒng)的方法,缺點是操作繁瑣,加入剛果紅溶液會使菌落之間 發(fā)生混雜;具優(yōu)點是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。方法二的優(yōu)點是操作簡便,不存在菌落混雜問題,缺點是由于纖維素和 瓊脂、土豆汁
28、中都含有淀粉類物質(zhì),可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假 陽性反應(yīng)。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透明圈較為模糊,因為培養(yǎng) 基中纖維素占主要地位,因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相區(qū)分。方法二 的另一缺點是:有些微生物具有降解色素的能力,它們在長時間培養(yǎng)過程中 會降解剛果紅形成明顯的透明圈,與纖維素分解菌不易區(qū)分。.為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物得到 迅速繁殖,而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮”的作用。P29六、課題成果評價.培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落:對照的培養(yǎng) 基在培養(yǎng)過程
29、中沒有菌落生長則說明培養(yǎng)基制作合格。如果觀察到產(chǎn)生透明 圈的菌落,則說明可能獲得了分解纖維素的微生物。.分離的結(jié)果是否一致:由于在土壤中細菌的數(shù)量遠遠高于真菌和放線 菌的數(shù)量,因此最容易分離得到的是細菌。但由于所取土樣的環(huán)境不同,學(xué) 生也可能得到真菌和放線菌等不同的分離結(jié)果。P30練習(xí).答:流程圖表示如下。土壤取樣一選擇培養(yǎng)(此步是否需要,應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多 少來確定)一梯度稀釋一將菌懸液涂布到有特定選擇作用的培養(yǎng)基上一挑選 單菌落一發(fā)酵培養(yǎng)專題三植物的組織培養(yǎng)技術(shù)課題1菊花的組織培養(yǎng).有某種生物全套 的任何一個活細胞,都具有發(fā)育成 的能力,即每個生物細胞都具有。但在生物體的生長發(fā)育
30、過程中并不 表現(xiàn)出來,這是因為在 條件下,通過基因的,構(gòu)成不同組織和器官。.植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用有:實現(xiàn)優(yōu)良品種的 ;培育 作物;制作 種子;培育作物 以及細胞產(chǎn)物的等。.細胞分化:個體發(fā)育中細胞在 上出現(xiàn)差異的過程。.愈傷組織是通過 形成的,其細胞排列,高度呈 狀態(tài)的 細胞。.植物組織培養(yǎng)的過程可簡單表示為: 愈傷組! 新個.材料:植物的種類、材料的 和 等都會影響實驗結(jié)果。菊花組織培養(yǎng)一般選擇 作材料。.營養(yǎng):常用的培養(yǎng)基是 培養(yǎng)基,其中含有的大量元素是,微量元素是,有機物有甘氨酸、 煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。.激素:在培養(yǎng)基中需要添加 和 等植物激素,其、等都影響結(jié)果。.環(huán)境條件:P
31、H 、等環(huán)境條件。菊花組培所需 PH為, 溫度為,光照條件為。.配制各種母液:將各種成分按配方比例配制成的濃縮液。使用時根據(jù)母液的,計算用量,并加 稀釋。.配制培養(yǎng)基:應(yīng)加入的物質(zhì)有瓊脂、 、大量元素、微量元素、有 機物和植物激素的母液,并用 定容到 毫升。在菊花組織培養(yǎng)中,可以不添加 ,原因是菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易。.滅菌:采取的滅菌方法是 .發(fā)酵操作前期準(zhǔn)備:用 消毒工作臺,點燃酒精燈。注意所有接種工作都必須在酒精燈旁進行,器械使用前后都要用火焰灼燒 。接種操作:接種過程中插入外植體時 朝上,每個錐形瓶接種個外植體。外植體接種與細菌接種相似之處培養(yǎng)過程應(yīng)該放在 中進行,并定期進行消毒,保
32、持適宜的 和。移栽前應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的 ,讓其在培養(yǎng)間生長幾日,然后用流水清洗根部培養(yǎng)基。然后將幼苗移植到 等環(huán)境中生活一段時間,進行壯苗。最后進行露天栽培。課題成果評價(一)對接種操作中污染情況的分析接種34 d后,在接種操作中被雜菌污染的培養(yǎng)物會表現(xiàn)出被污染的現(xiàn) 象。請學(xué)生適時統(tǒng)計污染率,分析接種操作是否符合無菌要求。(二)是否完成了對植物組織的脫分化和再分化觀察實驗結(jié)果,看看是否培養(yǎng)出了愈傷組織,記錄多長時間長出愈傷組 織。統(tǒng)計更換培養(yǎng)基后愈傷組織進一步分化成根和芽的比例和時間。(三)是否進行了統(tǒng)計、對照與記錄做好統(tǒng)計和對照,填好結(jié)果記錄表,培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度。從實驗的第 一步開始就要求學(xué)
33、生做好實驗記錄,可以讓學(xué)生分組配制不同培養(yǎng)基,如誘導(dǎo)愈傷或直接分化叢芽的培養(yǎng)基,然后做不同配方的比較。(四)生根苗的移栽是否合格生根苗移栽技術(shù)的關(guān)鍵是既要充分清洗根系表面的培養(yǎng)基,又不能傷及 根系。一般使用無土栽培的辦法。培養(yǎng)基質(zhì)要提前消毒,可以向培養(yǎng)基質(zhì)噴 灑質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%勺高鎰酸鉀,并用塑料薄膜覆蓋12 ho掀開塑料薄膜后24 h 才能移栽。新移栽的組培苗要在溫室過渡幾天,等壯苗后再定植大田或進行 盆栽。學(xué)生可以在課后統(tǒng)計自己移栽的成活率,看看移栽是否合格。答案和提示(一)旁欄思考題.你能說出各種營養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎同專題 2中微生物培養(yǎng)基的配方相 比,MSW養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同答:微量
34、元素和大量元素提供植物細胞生活所必需的無機鹽;蔗糖提供 碳源,同時能夠維持細胞的滲透壓;甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足 離體植物細胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求。微生 物培養(yǎng)基以有機營養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同,MSW養(yǎng)基則需提供大量無機營養(yǎng),無機鹽混合物包括植物生長必須的大量元素和微量元素兩大類。2,你打算做幾組重復(fù)你打算設(shè)置對照實驗嗎答:教師可以安排學(xué)生分組,做不同的材料或配方,最后分別匯報成果。 但每種材料或配方至少要做一組以上的重復(fù)。設(shè)置對照實驗可以取用一個經(jīng) 過滅菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng),用以說明 培養(yǎng)基制作合格,沒有被雜菌污染。(
35、二)練習(xí)1.答:植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差,對培養(yǎng)條件的 要求較高。用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的生長,如一 些細菌、真菌等的生長。而培養(yǎng)物一旦受到微生物的污染,就會導(dǎo)致實驗前6.材料的選擇:功盡棄,因此要進行嚴(yán)格的無菌操作2,答:外植體的生理狀態(tài)是成功進行組織培養(yǎng)的重要條件之一。生長旺 盛的嫩枝生理狀況好,容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。課題2月季的花藥培養(yǎng)1.育被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)歷 、和 等階段?;ǚ凼怯苫ǚ勰讣毎?jīng)過 而形成的,因此花粉.在正常情況下,一個小抱子母細胞可以產(chǎn)生 個精子;在一枚花藥中 可以產(chǎn)生 個花粉。.產(chǎn)生花粉植物的兩種途徑從花藥來看,應(yīng)當(dāng)選擇
36、(初花期、盛花期、晚花期)的花藥;從花粉來看,應(yīng)當(dāng)選擇(四分體期、單核期、雙核期、萌發(fā)期)的花粉;從花蕾來看,應(yīng)當(dāng)選擇(完全未開放、略微開放、完全盛開)的花蕾。.選擇花藥時一般通過 確定花粉發(fā)育時期,此時需要對花粉細胞核進 行染色,最常用的染色劑是 和,它們分別可 以將細胞核染成 色和 色。.在使用焙花青銘鈕溶液時,需要首先將花藥用 處理20min。 該試劑的配制方法是將 按體積比為 的比例混合均勻。.消毒后的花蕾,要在 條件下除去花萼、花瓣。剝?nèi)』ㄋ帟r,一是 注意不要損傷花藥,原因是;二是要徹底 除去花絲,原因是。.剝?nèi)〉幕ㄋ幰⒖探臃N到 上。每個培養(yǎng)瓶接種 個花藥。 花藥培養(yǎng)利用的培養(yǎng)基是
37、 培養(yǎng)基,pH為,溫度為 C,幼苗形成之前(需要、不需要)光照。在花藥培養(yǎng)基中,用量最高的激素 是;在誘導(dǎo)叢芽或胚狀體培養(yǎng)基中,用量最高的激素 是;在誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中,用量最高的激素是 。.培養(yǎng)20 30d后,花藥開裂,長出 或釋放出胚狀體。前者還要轉(zhuǎn)移到 上進行分化培養(yǎng)成再生植株;后者要盡快 并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上。通過愈傷組織形成的植株,常常會出現(xiàn) 的變化,因而需要鑒定和篩選。5.誘導(dǎo)花粉植株能否成功及誘導(dǎo)成功率的高低,受多種因素影響,其中影主 要因素是:和 等。課題成果評價(一)選材是否恰當(dāng)植物組織培菊花的組織培月季的花藥培植物組織培養(yǎng)的基本,I影響植物組織培養(yǎng)的IAr花粉母細胞一減數(shù)分
38、裂一小抱子母細胞一產(chǎn)生花粉植株的兩種、選材是否成功是花藥培養(yǎng)成功的關(guān)鍵。學(xué)生應(yīng)學(xué)會通過顯微鏡觀察處于 適宜發(fā)育期的花粉。(二)無菌技術(shù)是否過關(guān)如果出現(xiàn)了污染現(xiàn)象,說明某些操作步驟,如培養(yǎng)基滅菌、花蕾消毒或 接種等有問題。(三)接種是否成功如果接種的花藥長出愈傷組織或釋放出胚狀體,花藥培養(yǎng)的第一步就成 功了。要適時轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基,以便愈傷組織或胚狀體進一步分化成再生植株。答案和提示(一)旁欄思考題為什么花瓣松動會給材料的消毒帶來困難答:花瓣松動后,微生物就可能侵入到花藥,給材料的消毒帶來困難。(二)練習(xí).答:F2代紫色甜玉米的基因型組成可能為 Aasusu或AAsusih如果運 用常規(guī)育種方法,將F
39、2代中的紫色甜玉米與白色甜玉米(aasusu)進行測交, 可以選擇出基因型為 AAsusu純種紫色甜玉米。但這種方法比較繁瑣,耗時也 較長,需要至少三年的選種和育種時間。如果利用花藥培養(yǎng)的技術(shù),在 F1 代產(chǎn)生的花粉中就可能有 Asu的組合,再將花粉植株進行染色體加倍,就可 以直接得到紫色甜玉米的純合體(AAsusu)。這種方法可以大大縮短育種周期。.答:植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的相同之處是:培養(yǎng)基配制方 法、無菌技術(shù)及接種操作等基本相同。兩者的不同之處在于:花藥培養(yǎng)的選 材非常重要,需事先摸索時期適宜的花蕾;花藥裂開后釋放出的愈傷組織或 胚狀體也要及時更換培養(yǎng)基;花藥培養(yǎng)對培養(yǎng)基配方的
40、要求更為嚴(yán)格。這些 都使花藥培養(yǎng)的難度大為增加。影響因素:親本植株的生長條件、專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)(一)DNN勺粗提取與鑒定 1.實驗原理提取生物大分子的基本思路是。對于 DNN勺粗提取而言,就是要利用 與、等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異,提取 DNA去除 其他成分。DN用勺溶解性DN序口蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的 溶液中溶解度不同,利用這一特點,選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使 充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達到分離目的。DNM溶于 溶液,但是細胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理,可以將DNAW蛋白質(zhì)進一步的分離。DNN寸酶、高溫和洗滌劑的耐受性蛋白酶能水解,但是對 沒有影響。大多數(shù)
41、蛋白質(zhì)不能忍受6080C的高溫,而DN儺 才會變性。洗滌劑能夠瓦解,但對DN酸有影響。DN用勺鑒定在 條件下,DN磁 會被染成色,因此二苯胺可以作為鑒 定DNN勺試齊I2.實驗設(shè)計(1)實驗材料的選取凡是含有 的生物材料都可以考慮,但是使用的生物組織,成功的可能性更大。(2)破碎細胞,獲取含DN用勺濾液破碎動物細胞:如在雞血細胞液中加入一定量的,同時用攪拌,過濾后收集濾液即可。破碎植物細胞(如洋蔥),需在切碎的洋蔥 中加入一定的 和,進行充分的攪拌和研磨,過濾后收集研磨液。加入蒸儲水作用:蒸儲水對于雞血細胞來說是一種 液體,使血細胞,再加上攪拌的機械作用,加速了雞血細胞的破裂(細胞膜和核 膜的
42、破裂),從而釋放出DNA加入洗滌劑的作用是:洗滌劑是一些離子去污劑,能溶解,有 利于 的釋放;加入食鹽的作用是:溶解。如果研磨不充分,會使細胞核內(nèi)的 釋放不完全,提取的 DN/S變,影響實驗結(jié)果,導(dǎo)致看不到、用二苯 胺鑒定不顯示 等。(3)去除濾液中的雜質(zhì)方案一:利用DN儺不同濃度NaCI溶液中 不同,通過控制去除雜質(zhì)。方案二:根據(jù)酶的專一性,利用木瓜蛋白酶分解,而不分解* )方案三:利用DN解口蛋白質(zhì)對高溫耐受性的不同,從而使 變性,與 分離。DNA勺析出與鑒定DNA勺析出:將處理后的溶液過濾,加入與濾液體積相等、冷卻的 ,靜置23min,溶液中會出現(xiàn),這就是粗提取的DNADNA勺鑒定:將白
43、色絲狀物用 的 NaCl溶液再溶解,加入4ml的,混合均勻后,在 條件下,溶液被染成 色。3.注意事項(1)以血液為實驗材料時,需要加入檸檬酸鈉防止(2)要提取洋蔥等的DNA寸,加入洗滌劑后,動作要, 否 則容易產(chǎn)生大量的泡沫,不利于后續(xù)步驟地操作。(3)加入酒精和用玻璃棒攪拌時, 動作要,以免 ,導(dǎo)致DN粉子不能形成絮狀沉淀。(4)二苯胺試劑要,否則會影響鑒定的效果。(5)當(dāng)NaCl溶液濃度低于L時,隨濃度的升高,DNA勺溶解度;當(dāng)NaCl溶液濃度高于L時,隨濃度升高,DNA勺溶解度O專題六 植物有效成分的提取課題1植物芳香油的提取【導(dǎo)學(xué)誘思】.植物芳香油的來源天然香料的主要來源是 和。動物
44、香料主要來源于麝、靈貓、海貍和抹香鯨等,植物香料的來源更為廣泛。植物芳香油可以從大約 50 多個科的植物中提取。例如,工業(yè)生產(chǎn)中,玫瑰花用于提取 ,樟樹樹 干用于提取 。提取出的植物芳香油具有很強的 ,其組成 也,主要包括 及其思考:你能說出一些用于提取某些植物芳香油的器官嗎并分別可提取哪種芳香油.植物芳香油的提取方法植物芳香油的提取方法有 、和 等。具體 采用那種方法要根據(jù)植物原料的特點來決定。 是植物芳香油提取 的 常 用 方 法, 它 的 原 理根據(jù)蒸儲過程中 的位置,可以將水蒸氣蒸儲法劃分為 、 和。其中,水中蒸儲的方法對于有些原料不適用,如柑橘和檸檬。這 是因為等問題。因此,柑橘、檸
45、檬芳香油的制備通常使用 法。植物芳香油不僅,而且易溶于,如石油醍、酒精、乙醍 和戊烷等。不適于用水蒸氣蒸儲的原料,可以考慮使用 法。萃取法是 將的方法。芳香油溶解于有 機溶劑后,只需蒸發(fā)出有機溶劑,就可以獲得純凈的 了。但是, 用于萃取的有機溶劑必須 , ,否則會影響芳香油的質(zhì)量。3、玫瑰精油的提取玫瑰精油是制作 的主要成分,能使人產(chǎn)生愉悅感。由于玫瑰精油化學(xué)性質(zhì) ,難溶壬_,易溶于,能隨 一同蒸儲,通常采用 法中的 法。 提取玫瑰精油的實驗流 程、.思考:在提取過程中,如何對乳濁液的處理和玫瑰液的回收4、橘皮精油的提取從橘皮中提取的 ,主要成分為,具有很高的經(jīng)濟價值。橘 皮精油主要儲藏在 部
46、分,由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸儲時 會發(fā)生部分水解,使用水中蒸儲法又會產(chǎn)生原料焦糊的問題,所以一般采用 法。具體的流程J1L、實驗案例案例一玫瑰精油的提取5月上、中旬是玫瑰的盛開期,最好是選用當(dāng)天采摘的鮮玫瑰花。將花 瓣用清水沖洗,去掉上面的灰塵等雜質(zhì),瀝干水分。由于玫瑰精油化學(xué)性質(zhì) 穩(wěn)定,從玫瑰花中提取玫瑰精油可采取水中蒸儲法。本實驗的具體操作步驟 如下。1.稱取50 g玫瑰花瓣,放入500 mL的圓底燒瓶中,加入200 mL蒸儲水 按教科書圖6-2所示安裝蒸儲裝置。蒸儲裝置包括:鐵架臺兩個、酒精燈、 石棉網(wǎng)、蒸儲瓶、橡膠塞、蒸儲頭、溫度計、直型冷凝管、接液管、錐形瓶, 以及連接進水
47、口和出水口的橡皮管。所有儀器必須事先干燥,保證無水。整套蒸儲裝置可分為左、中、右三部分,其中左邊的部分通過加熱進行蒸儲, 中部將蒸儲物冷凝,右邊的部分用來接收。安裝儀器一般都按照自下而上、 從左到右的順序。拆卸儀器的順序與安裝時相反。具體安裝順序和方法如下。(1)固定熱源酒精燈。(2)固定蒸儲瓶,使其離熱源的距離如教科書中圖6-2所示,并且保持 蒸儲瓶軸心與鐵架臺的水平面垂直。(3)安裝蒸儲頭,使蒸儲頭的橫截面與鐵架臺平行。(4)連接冷凝管。保證上端出水口向上,通過橡皮管與水池相連;下端 進水口向下,通過橡皮管與水龍頭相連。(5)連接接液管(或稱尾接管)。(6)將接收瓶瓶口對準(zhǔn)尾接管的出口。
48、常壓蒸儲一般用錐形瓶而不用燒 杯作接受器,接收瓶應(yīng)在實驗前稱重,并做好記錄。(7)將溫度計固定在蒸儲頭上,使溫度計水銀球的上限與蒸儲頭側(cè)管的 下限處在同一水平線上。.蒸儲裝置安裝完畢后,可以在蒸儲瓶中加幾粒沸石,防止液體過度沸 騰。打開水龍頭,緩緩?fù)ㄈ肜渌缓箝_始加熱。加熱時可以觀察到,蒸儲 瓶中的液體逐漸沸騰,蒸氣逐漸上升,溫度計讀數(shù)也略有上升。當(dāng)蒸氣的頂 端達到溫度計水銀球部位時,溫度計讀數(shù)急劇上升。在整個蒸儲過程中,應(yīng) 保證溫度計的水銀球上常有因冷凝作用而形成的液滴??刂普魞Φ臅r間和速 度,通常以每秒12滴為宜。蒸儲完畢,應(yīng)先撤出熱源,然后停止通水,最 后拆卸蒸儲裝置,拆卸的順序與安裝
49、時相反。.收集錐形瓶中的乳白色的乳濁液,向錐形瓶中加入質(zhì)量濃度為g/mL的氯化鈉溶液,使乳化液分層。然后將其倒入分液漏斗中,用分液漏斗將油 層和水層完全分開。打開頂塞,再將活塞緩緩旋開,放出下層的玫瑰精油, 用接收瓶收集。向接收瓶中加入無水硫酸鈉,吸去油層中含有的水分,放置過夜。為了更好地將油、水兩層液體分離,操作時應(yīng)注意正確使用分液漏斗。 分液漏斗的使用方法如下。(1)首先把活塞擦干,為活塞均勻涂上一層潤滑脂,注意切勿將潤滑脂 涂得太厚或使?jié)櫥M入活塞孔中,以免污染萃取液。(2)塞好活塞后,把活塞旋轉(zhuǎn)幾圈,使?jié)櫥植季鶆颉2⒂盟畽z查分 液漏斗的頂塞與活塞處是否滲漏,確認(rèn)不漏水后再使用。(
50、3)將分液漏斗放置在大小合適的、 并已固定在鐵架臺上的鐵圈中,關(guān) 好活塞。將待分離的液體從上部開口處倒入漏斗中,塞緊頂塞,注意頂塞不 能涂潤滑脂。(4)取下分液漏斗,用右手手掌頂住漏斗頂塞并握住漏斗頸, 左手握住 漏斗活塞處,大拇指壓緊活塞,將分液漏斗略傾斜,前后振蕩(開始振蕩時 要慢)。(5)振蕩后,使漏斗口仍保持原傾斜狀態(tài),左手仍握在漏斗活塞處,下 部管口指向無人處,用拇指和食指旋開活塞,使其釋放出漏斗內(nèi)的蒸氣或產(chǎn) 生的氣體,以使內(nèi)外壓力平衡,這一步操作也稱做“放氣”。(6)重復(fù)上述操作,直至分液漏斗中只放出很少的氣體時為止。 再將分 液漏斗劇烈振蕩23 min,然后將漏斗放回鐵圈中,待液
51、體靜置分層。案例二 橘皮精油的提取課前準(zhǔn)備在實驗前一天,教師需要準(zhǔn)備新鮮的、沒有霉?fàn)€的橘皮,用量可根據(jù)實 驗人數(shù)來決定。用清水沖洗橘皮,去掉灰塵等雜質(zhì),瀝干水分后,將橘皮攤 放在干燥通風(fēng)處。將晾干的橘皮浸泡在 pH大于12、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7。a8%勺石 灰水中,時間為1624 h,中間翻動23次。浸泡好的橘皮呈黃色、無白 芯、稍硬、脆而不斷、具有彈性。這樣的橘皮在壓榨時不易打滑,橘油的噴射力強;壓榨后的殘渣呈顆粒狀,殘渣中的含水量低,黏稠度不太高,過濾 時比較順利,不易堵塞篩孔。提取橘皮精油的具體步驟如下。.將浸泡后的橘皮,用流動的水漂洗,洗凈后撈起、瀝干。切記一定要 將橘皮徹底沖洗干凈。然后將橘
52、皮粉碎至 3 mmC小,放入家用榨汁機或手動 壓榨機中粉碎。粉碎時加入與橘皮同質(zhì)量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 。勺小蘇打和質(zhì)量分?jǐn)?shù) 為5。勺硫酸鈉溶液,并調(diào)節(jié)pH為78。.在榨出的油水混合液中加入明磯,使之沉淀并變澄清,然后用布袋過 濾,除去糊狀殘渣。再將得到的混合物,用 6 000 r/min 8 000 r/min的轉(zhuǎn) 速進行高速離心。在正常情況下,離心后獲得的香精油將是澄清透明的。.分離出的香精油往往帶有少量水分和蠟質(zhì)等雜質(zhì),為了進一步除去雜 質(zhì),可以將分離的產(chǎn)品放在 5 C10 C的冰箱中,靜置57 d,讓雜質(zhì)與 水下沉。然后用吸管吸出上層澄清的油層,再通過墊有濾紙或石棉紙的漏斗 進行減壓抽濾,得到
53、黃色油狀的橘皮精油。課題成果評價(一)是否提取出了植物精油觀察學(xué)生提取出的玫瑰精油或橘皮精油,從顏色、氣味等方面來評價所 提取的精油的純度和質(zhì)量。從玫瑰花提取的芳香油是淺黃色至黃色的液體, 并帶有甜韻的玫瑰香;從橘皮提取的橘皮精油無色透明,具有誘人的橘香味。 本課題只是對兩種精油進行了初步的提取,其中仍然含有大量的雜質(zhì)。(二)出油率的計算根據(jù)教科書提供的公式計算出油率。如果出油率高,說明實驗方案設(shè)計 合理;如果出油率低,教師可以幫助學(xué)生從實驗方法的選擇、實驗過程的操 作等各方面分析原因,改進后再作嘗試。答案和提示練習(xí)1.答:植物芳香油一般都是由23種芳香油混合調(diào)配而成的,其中的基 底油常取自植
54、物的種子或果實,比如胡桃油、甜杏油?;子团c其他芳香油 調(diào)配在一起,能夠加強功效。從玫瑰花中提取出的玫瑰油稱為“液體黃金”,是世界香料工業(yè)不可取代 的原料,多用于制造高級香水等化妝品。提取出的玫瑰油不含有任何添加劑 或化學(xué)原料,是純天然的護膚品,具有極好的抗衰老和止癢作用,能夠促進 細胞再生、防止肌膚老化、平撫肌膚細紋,還具有使人放松、愉悅心情的功 效。杏仁油富含礦物質(zhì)和維生素,是一種質(zhì)地輕柔、高滲透性的保濕劑。熏衣草精油取自熏衣草花,具有怡神、助睡眠、舒緩壓力的作用,此外 它還具有降壓、止痛、促進細胞再生的功能,可以用于治療燙傷和蚊蟲叮咬、 預(yù)防和改善脫發(fā)。檸檬精油取自檸檬果皮,具有消除緊張
55、、焦慮、振奮精神的作用,可用 于治療神經(jīng)衰弱、關(guān)節(jié)炎,還具有促進血液循環(huán)、殺菌止痛、平衡油脂分泌、 舒緩肌膚老化、滋養(yǎng)頭發(fā)的功效。茶樹精油具有新鮮、強烈的藥草香味,能改善毛孔阻塞,凈化肌膚,抗 感染,對治療青春痘有奇效。它也能消除疲勞、緩解壓力。天竺葵精油能收斂皮膚,平衡、調(diào)理、潤滑中干性皮膚和敏感性皮膚, 改善橘皮樣表皮,還有助于恢復(fù)精力,平緩心情。茉莉精油能防止肌膚老化,對中干性皮膚和敏感性皮膚具有良好的保濕 和滋潤作用,尤其對女性的妊娠紋和內(nèi)分泌有獨特的改善效果。橙花精油具有清新的水果香味,不但能使人鎮(zhèn)靜,還能防止中干性肌膚 的老化現(xiàn)象發(fā)生,給肌膚賦予青春活力,促進皮膚再生。調(diào)查報告。課
56、題2胡蘿卜素的提取【導(dǎo)學(xué)誘思】1.胡蘿卜素是,化學(xué)性質(zhì)比較,不溶于水,微溶于, 易溶于 等有機溶劑。根據(jù)雙鍵的數(shù)目可以將胡蘿卜素劃分為%、(3、丫三類。是其中最主要的組成成分。與B -胡蘿卜 素化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的胡蘿卜素約有100多種,它們大多存在于蔬菜中。等蔬菜是提取天然B -胡蘿卜素的原料。工業(yè)生產(chǎn)上,提取天然(3-胡蘿卜素的方法主要有三種,一是從中提取,二是從 中獲得,三是利用生產(chǎn)。本課題所提供的方法只能提取胡蘿卜素的 ,若要 獲得B-胡蘿卜素,還需要進一步的。2.提取胡蘿卜素的實驗流程有 、 、O思考:影響萃取的因素有哪些實驗案例提取胡蘿卜素的主要步驟如下。.選取500 g新鮮的胡蘿卜,用
57、清水洗凈,瀝干、切碎,然后在 40 C 的烘箱中烘干,時間約需 2h ,將干燥后的胡蘿卜進一步粉碎過篩。注意胡 蘿卜的粉碎一定要徹底。2.建議:教師可以組織學(xué)生進行一次社會調(diào)查,并要求學(xué)生寫出詳細的.將樣品放入500 mL圓底燒瓶中,加入200 mL石油醍混勻,按教科書 中圖6-7所示安裝萃取回流裝置,萃取 30 min,然后過濾萃取液,除去固體 物質(zhì)。.按教科書中圖6-2所示安裝蒸儲裝置,對萃取的樣品進行濃縮。具體 的操作步驟及注意事項見本專題課題 1的案例1。.收集接受器中的樣品,觀察樣品的顏色和氣味,并通過紙層析進行鑒 定。層析時注意選擇干凈的濾紙,為了防止操作時對濾紙的污染,應(yīng)盡量避
58、免用手直接接觸濾紙,可以帶手套進行操作。點樣時應(yīng)注意點樣斑點不能太 大(直徑應(yīng)小于cm),如果用吹風(fēng)機吹干,溫度不宜過高,否則斑點會變黃。 將點好樣的濾紙卷成筒狀,卷紙時注意濾紙的兩邊不能相互接觸,以免因毛 細管現(xiàn)象導(dǎo)致溶劑沿濾紙兩邊的移動加快,溶劑前沿不齊,影響結(jié)果。課題成果評價(一)確定提取胡蘿卜素的最佳方案在進行本實驗時,教師可以將學(xué)生分組,每組可以采用不同的有機溶劑 和時間進行萃取,比較各組的實驗結(jié)果,確定提取胡蘿卜素的最佳方案。(二)是否出現(xiàn)對應(yīng)的層析帶如果萃取樣品中出現(xiàn)了和標(biāo)準(zhǔn)樣品一樣的層析帶,說明提取胡蘿卜素的 實驗成功。由于提取物中含有雜質(zhì),萃取樣品的顏色可能比標(biāo)準(zhǔn)樣品的顏色
59、淺,我們也可以通過顏色的比較,初步確定提取的胡蘿卜素的量。答案和提示(一)資料一 萃取劑的選擇討論題.乙醇和丙酮能夠用于胡蘿卜素的萃取嗎為什么答:胡蘿卜素可溶于乙醇和丙酮,但它們是水溶性有機溶劑,因萃取中 能與水混溶而影響萃取效果,所以不用它們作萃取劑。.在石油醍、醋酸乙酯、乙醍、苯和四氯化碳這幾種有機溶劑中,哪種 最適宜用來提取胡蘿卜素答:在這五種有機溶劑中,石油醍的沸點最高,在加熱萃取時不易揮發(fā), 所以石油醍最適宜用作萃取劑。(二)練習(xí)答:列表分析如下。提取 方法實驗原埋方法步驟適用范圍1.水蒸氣 蒸儲水蒸 氣蒸 儲利用水蒸氣將 揮發(fā)性較強的2.分離油適用于提取玫瑰油、薄荷油芳香油攜帶出層
60、等揮發(fā)性強的芳香油來3.除水過濾1.石灰水浸壓榨 法通過機械加壓, 壓榨出果皮中 的芳香油泡、漂洗.壓榨、過濾、靜置.再次過濾適用于柑橘、檸檬等易焦糊 原料的提取有機使芳香油溶1.粉碎、適用范圍廣,要求原料的顆溶劑解在有機溶劑干燥粒要盡可能細小,能充分浸萃取中,蒸發(fā)溶劑后 就可認(rèn)得芳香2.萃取、泡在啟機溶液中1油n過濾3.濃縮參考答案專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題1果酒和果醋的制作1. (1)酵母菌 兼性厭氧型 有氧時Gl2Q+6HtO+6Q 6CQ+12H2O+IB 量,無氧時GH2c6 2c2HOH+2CO能量.酒精(2)附著于葡萄品皮上的野生型酵母菌20 C酸性(3)酒精度色素 深紅(4)
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