甾體激素類藥物的分析課件1

1、第十五章甾體激素類藥物的分析第1頁，共44頁。基本結(jié)構(gòu)：環(huán)戊烷并多氫菲ABCD12345678910111213141516171819一、基本結(jié)構(gòu)及分類第2頁，共44頁。分類：甾體激素腎上腺皮質(zhì)激素性激素雄性激素及蛋白同化激素孕激素雌激素第3頁，共44頁。二、結(jié)構(gòu)與性質(zhì) 1. 腎上腺皮質(zhì)激素主要活性基團(tuán)性 質(zhì)4 3 酮UV、與羰基試劑反應(yīng)C17 醇酮基還 原 性第4頁，共44頁。2. 雄性激素及蛋白同化激素主要活性基團(tuán)性 質(zhì)4 3 酮UV、與羰基試劑反應(yīng) C17 羥基可成酯第5頁，共44頁。3. 孕激素主要活性基團(tuán)性 質(zhì)4 3 酮UV、與羰基試劑反應(yīng)C17 甲酮基與亞硝基鐵氰化納反應(yīng)C17

2、乙酰氧基C17 乙炔基水解鑒定乙酸與硝酸銀沉淀第6頁，共44頁。4. 雌激素主要活性基團(tuán)性 質(zhì)A環(huán)為3OH 苯環(huán)UV、與重氮苯磺酸鹽反應(yīng)C17 乙炔基與AgNO3反應(yīng)C17 羥基可成酯第7頁，共44頁。二、鑒別試驗(yàn)（一）與強(qiáng)酸的呈色反應(yīng)甾體激素類藥物呈色H2SO4 H3PO4 HClO4 HCl（母核）第8頁，共44頁。與硫酸顯色反應(yīng) 顯 色 熒光 加水稀潑尼松龍 深紅 絮狀灰潑尼松 橙 黃藍(lán)綠炔雌醚 橙紅 黃綠 紅色 炔雌醇 橙紅 黃綠 絮狀玫紅醋酸可的松 黃或微 褪色并澄 帶橙 清第9頁，共44頁。(二) 官能團(tuán)的反應(yīng)腎上腺皮質(zhì)激素藥物呈色四氮唑鹽費(fèi)林試液多倫試液OH1 C17 醇酮基還原

3、性A. 呈色反應(yīng)第10頁，共44頁。腎上腺皮質(zhì)激素藥物Cu2O橙紅色堿性酒石酸銅B. 沉淀反應(yīng)Ag黑色氨制硝酸銀第11頁，共44頁。甾體類激素藥物黃色的腙羰基試劑2. C3酮基和C20酮基常用的羰基試劑：2,4-二硝基苯肼、異煙肼、硫酸苯肼第12頁，共44頁。黃體酮藍(lán)紫色亞硝基鐵 氰化納其他甾體淡橙色不顯色3. 甲酮基呈色反應(yīng)第13頁，共44頁。雌激素類藥物紅色偶 氮染料重氮苯磺酸4. 酚羥基第14頁，共44頁。含炔基的甾體激素白色銀鹽沉淀硝酸銀5. 乙炔基第15頁，共44頁。有機(jī)氟F有機(jī)破壞有機(jī)氯Cl6. 有機(jī)鹵素茜素氟藍(lán) 硝酸亞鈰硝酸硝酸銀AgCl 藍(lán)色配合物 第16頁，共44頁。-3-酮

4、 240nm苯環(huán) 280nm（三） UV法第17頁，共44頁。（四） IR法第18頁，共44頁。（五） TLC法 主要用于甾體激素類藥物制劑的鑒別第19頁，共44頁。（六） HPLC法 主要用于甾體激素類藥物制劑的鑒別（如：醋酸曲安奈德軟膏、醋酸氟輕松軟膏）第20頁，共44頁。三、 雜質(zhì)檢查（一）有關(guān)物質(zhì)檢查定義 與標(biāo)示藥物結(jié)構(gòu)不同的甾體化合物都稱為“有關(guān)物質(zhì)”第21頁，共44頁。（1）TLC法（高低濃度對比法） 判定方法： 規(guī)定雜質(zhì)斑點(diǎn)數(shù)目 規(guī)定雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色第22頁，共44頁。（2）HPLC法（高低濃度對比法） 判定方法： 規(guī)定雜質(zhì)峰數(shù)目 規(guī)定雜質(zhì)峰面積第23頁，共44頁。（二）游離磷酸的檢

5、查地塞米松磷酸鈉氫化可的松磷酸鈉倍他米松磷酸鈉氫化潑尼松磷酸鈉對照品法第24頁，共44頁。（三）有機(jī)溶劑殘留量的檢查 甲醇和丙酮甲醇 0.3%丙酮 0.5% GC法第25頁，共44頁。（一）HPLC法USP、BP、JP均采用RPHPLC（大多內(nèi)標(biāo)法）特點(diǎn) 用樣量少，靈敏度高，分離效 果好，測定速度快例：黃體酮的含量測定：ODS柱；甲醇-水（65：35）；254nm內(nèi)標(biāo)：己烯雌酚（甾體激素類藥物常含有結(jié)構(gòu)相似的其他甾體雜質(zhì)，對利用結(jié)構(gòu)特征設(shè)計(jì)的比色法有干擾）四、含量測定第26頁，共44頁。（二）UV法-3-酮 240nm（）腎上腺皮質(zhì)激素雄性激素和蛋白同化激素孕激素 苯環(huán) 280nm（）雌激素第

6、27頁，共44頁。（三）比色法弱、非分光光度活性藥物強(qiáng)分光光度活性藥物化學(xué)反應(yīng)第28頁，共44頁。 腎上腺皮質(zhì)激素類C17 -醇酮基強(qiáng)還原性1. 原理OH -還原四氮唑比色法第29頁，共44頁。 制備對照液 制備供試液加入四氮唑鹽有色產(chǎn)物484nmAX CXAR標(biāo)示量（%）=AXAR V標(biāo)示量100%2、方法：以醋酸地塞米松為例第30頁，共44頁。3. 討論（1） 基團(tuán)對反應(yīng)速度的影響C11= O C11OHC21OH C21-酯第31頁，共44頁。（2） 溶劑、水分的影響含水量5%含水10%A10%含水30%幾無反應(yīng) 無醛無水乙醇醛 A 無水乙醇第32頁，共44頁。（3） O2與光線的影響反

7、應(yīng)過程反應(yīng)產(chǎn)物怕光避光、快速O2影響顏色強(qiáng)度和穩(wěn)定性隔絕空氣、 快速、充N2第33頁，共44頁。（4）堿的種類及加入順序反應(yīng)應(yīng)在強(qiáng)堿性（pH13.75）條件下進(jìn)行以氫氧化四甲基銨的結(jié)果最佳加入順序：第34頁，共44頁。（5） 溫度與時(shí)間t甲瓚分解ChP 25 4045第35頁，共44頁。腎上腺皮質(zhì)激素、 雄性激素和蛋白同化激素、孕激素C3酮基1. 原理HCl（縮合）異煙肼比色法第36頁，共44頁。2.測定方法第37頁，共44頁。3.討論反應(yīng)速度（1）C3= O C17= O 、 C20= O C11= O 不反應(yīng)反應(yīng)專屬性 C3酮基第38頁，共44頁。（2）溶劑的選擇異煙肼鹽酸鹽甲醇、乙醇無水甲醇無水乙醇第39頁，共44頁。 原理max=515雌激素Kober反應(yīng)比色法第40頁，共44頁。1、熟悉本類藥物的分類，掌握其結(jié)構(gòu) 特征與分析方法的關(guān)系2、熟悉某些官能團(tuán)的呈色反應(yīng)，了解其他鑒別方法3、掌握本類藥物中其他甾體的檢查方 法，了解其他特殊雜質(zhì)的檢查第十章 復(fù)習(xí)內(nèi)容第41頁，共44頁。4、掌握四氮唑比色法、異煙肼比色法 的原理、方法及測定條件。了解 UV法、Kober反應(yīng)比色法及HPLC 法在其含量測定中的應(yīng)用第42頁，共44頁。.Kober反應(yīng)是