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文檔簡介
1、細(xì)胞工程細(xì)胞工程應(yīng)用的原理和方法研究的水平研究的目的細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)細(xì)胞水平按照人們的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品概念分類植物細(xì)胞工程動物細(xì)胞工程主要技術(shù)植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞融合單克隆抗體技術(shù)胚胎移植核移植植物細(xì)胞工程技術(shù)動物細(xì)胞工程技術(shù)細(xì)胞分化原因?所有細(xì)胞含全套基因但表達(dá)的基因不同-分化的根本原因使轉(zhuǎn)錄的mRNA不同翻譯成的蛋白質(zhì)不同-分化的直接原因?qū)е录?xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能不同細(xì)胞的全能性定義:生物體的細(xì)胞,具有使后代細(xì)胞發(fā) 育成完整個(gè)體的潛能。原因:生物的每一個(gè)細(xì)胞都含有該物種所 特有的全套遺傳物質(zhì)。全能性大?。菏芫焉臣?xì)胞體細(xì)胞 具有全能
2、性一定能表現(xiàn)出全能性嗎?下列有關(guān)細(xì)胞全能性的含義,正確的是:A、每個(gè)生物體內(nèi)的所有細(xì)胞都具有相同的功能 B、生物體內(nèi)的任何一個(gè)細(xì)胞可以完成該個(gè)體的全部功能 C、生物體的每一個(gè)活細(xì)胞都具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能 D、 生物體的每個(gè)細(xì)胞都經(jīng)過產(chǎn)生、分裂、分化、生長、衰老、死亡的全過程 植物細(xì)胞工程1.植物組織培養(yǎng)技術(shù)1.植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是什么?2.在植物組培過程中,為什么要進(jìn)行一系列的消毒、滅菌,并且要求無菌操作?思考細(xì)胞離體(外植體)一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件外植體、脫分化、再分化、愈傷組織植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基定義:含一定營養(yǎng)成分,供組織培養(yǎng)植物生長的基質(zhì)無機(jī)營養(yǎng)成分:N,P
3、,K等大量元素及部分微量元素Fe,Mn,B等有機(jī)營養(yǎng)成分 含N物質(zhì):包括維生素和氨基酸 碳源:2%4%的蔗糖,并調(diào)節(jié)滲透壓 瓊脂:起支持作用 生長調(diào)節(jié)物質(zhì):生長素,細(xì)胞分裂素和赤霉素植物組織培養(yǎng)的過程重點(diǎn)外植體愈傷組織幼苗/胚狀體CTK/IAA比例適合 脫分化 再分化CTK/IAA比例適合組培應(yīng)用生產(chǎn)植物的次級代謝產(chǎn)物p42 培養(yǎng)終點(diǎn)?快速繁殖無病毒植株p37 培養(yǎng)終點(diǎn)?生產(chǎn)人工種子p42 培養(yǎng)終點(diǎn)?胚 狀 體人工種皮人工胚乳花藥的離體培養(yǎng)人工種子自然種子胚 狀 體人工種皮人工胚乳胚種皮胚乳 紫草紫草素 愈傷組織去壁去壁纖維素酶果膠酶原生質(zhì)體植物細(xì)胞融合的原生質(zhì)體離心、振動、電刺激聚乙二醇再生
4、細(xì)胞壁雜種細(xì)胞脫分化愈傷組織雜種植株激素篩選激素再分化2,植物體細(xì)胞雜交過程示意圖植物體細(xì)胞雜交原理: 細(xì)胞膜流動性植物組織培養(yǎng)原理: 植物細(xì)胞全能性你認(rèn)為兩個(gè)來自不同植物的體細(xì)胞完成融合,遇到的第一個(gè)障礙是什么?(1)分離原生質(zhì)體-酶解法(2)原生質(zhì)體融合-物、化法(3)新細(xì)胞壁形成-雜交細(xì)胞形成標(biāo)志(4)植物組織培養(yǎng)-植物體細(xì)胞雜交的 技術(shù)環(huán)節(jié)之一意義:克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙、培育新品種白菜甘藍(lán)白菜甘藍(lán)植物體細(xì)胞雜交意義?與有性雜交的異同點(diǎn)植物體細(xì)胞雜交應(yīng)用:動物細(xì)胞工程1.動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)基模擬體內(nèi)什么環(huán)境?動物細(xì)胞的培養(yǎng)過程動物胚胎或幼齡動物 的組織、器官細(xì)胞懸浮液胰蛋白
5、酶10代細(xì)胞原代培養(yǎng)50代細(xì)胞細(xì)胞株無限傳代細(xì)胞系遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)改變,無限增殖傳代培養(yǎng)原代細(xì)胞動物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用作為研究動物細(xì)胞的材料-Hela細(xì)胞(1952)生產(chǎn)各類蛋白質(zhì)制品:干擾素、單抗、病毒疫苗細(xì)胞、組織移植(燒傷病人植皮)等植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較項(xiàng)目原理培養(yǎng)基結(jié)果培養(yǎng)目的植 物 動 物細(xì)胞全能性細(xì)胞增殖固體蔗糖植物激素液體葡萄糖動物血清培養(yǎng)成植株培養(yǎng)成細(xì)胞株細(xì)胞系快速繁殖培養(yǎng)無病毒植株獲得細(xì)胞產(chǎn)品、細(xì)胞動物細(xì)胞能否表現(xiàn)出全能性世界上第一只克隆動物“多利”問世,證明高度分化的動物體細(xì)胞的核仍保持全能性。1996年7月5日,世界上第一只克隆羊“多利”在英國蘇格蘭盧斯林研
6、究所的試驗(yàn)基地誕生。Dolly with her first born lamb 2.克隆技術(shù)是指從一個(gè)共同的祖先,通過無性繁殖的方法產(chǎn)生出來的一群遺傳特性相同的DNA分子、細(xì)胞或個(gè)體,是一種人工誘導(dǎo)的無性繁殖方式分子水平克?。篜CR技術(shù)細(xì)胞水平克?。簞游锛?xì)胞培養(yǎng)(單克隆抗體)個(gè)體水平克?。嚎寺⊙蚨嗬麨槭裁纯寺⊙虻某晒ψ尶茖W(xué)家們?nèi)绱伺d奮呢? 干細(xì)胞簡介*干細(xì)胞 :有樹干、莖干的起源之意,一般認(rèn)為:理論上具有無限自我更新能力和多方向分化潛能的一類細(xì)胞。干細(xì)胞按照生存階段分為:胚胎干細(xì)胞:取自囊胚的內(nèi)細(xì)胞層成體干細(xì)胞:取自成體細(xì)胞,如造血干細(xì)胞胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞) 來源:囊胚的內(nèi)細(xì)胞層特點(diǎn):胚胎
7、干細(xì)胞是全能的,具有分化為幾乎全部組織和器官的能力。可以用干細(xì)胞治療的健康問題截肢術(shù)神經(jīng)系統(tǒng)疾病脊髓損傷心臟疾病燒傷糖尿病造血干細(xì)胞的分化骨造血干細(xì)胞粒細(xì)胞單核巨噬細(xì)胞血小板骨髓脂肪細(xì)胞成骨細(xì)胞肝細(xì)胞干細(xì)胞骨骼肌肉干細(xì)胞骨細(xì)胞自然殺傷細(xì)胞淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞紅細(xì)胞造血干細(xì)胞*骨髓移植捐獻(xiàn)實(shí)際上就是移植捐獻(xiàn)造血干細(xì)胞20世紀(jì)五十年代,臨床上開始用骨髓移植法來治療血液系統(tǒng)疾病供者要進(jìn)行全麻,或者在他的骨上鑿幾個(gè)洞八十年代末,自體外周血干細(xì)胞移植技術(shù)逐漸推廣,能提高治療有效率和縮短療程,效果令人滿意再次在臍帶中直接采集胎兒的造血干細(xì)胞,與前兩者相比,臍血干細(xì)胞移植對HLA配型要求不高,不易受病毒或腫瘤的
8、污染 3.動物細(xì)胞融合技術(shù)如人鼠融合細(xì)胞:主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用 途物理、化學(xué)方法(同左)滅活的病毒物理(離心、振蕩、電刺激)化學(xué)(聚乙二醇)誘導(dǎo)方法細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合去細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞融合的方法膜的流動性膜的流動性、細(xì)胞全能性細(xì)胞融合的原理動物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目動植物細(xì)胞融合的比較-動物細(xì)胞融合技術(shù)最重要的用途4.單克隆抗體技術(shù)正常淋巴細(xì)胞(如小鼠脾細(xì)胞),具有分泌抗體的能力,但不能長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞(如骨髓瘤)可以在體外長期培養(yǎng), 但不分泌抗體1975年英國人Kohler和Milstein 將兩種細(xì)胞雜交 而創(chuàng)立了單克隆抗體技術(shù),獲1984年諾
9、貝爾獎(jiǎng)單:一個(gè)雜交瘤細(xì)胞克?。涸摷?xì)胞增殖分化為相同的細(xì)胞群抗體:該細(xì)胞群產(chǎn)生的抗體。特點(diǎn):特異性強(qiáng) 靈敏度高單克隆抗體制備應(yīng)用了哪些技術(shù)手段5.其它細(xì)胞工程技術(shù)為了幫助不孕夫婦,1978年誕生了世界上第一例試管嬰兒;為了證明高度分化的動物體細(xì)胞的核仍保持全能性,1997年第一只克隆動物多利問世。前兩者的生殖方式有何不同?各利用了什么細(xì)胞技術(shù)?受精卵卵裂 早期胚胎胚胎分割技術(shù)代孕母牛植入植入分割還應(yīng)用了哪些技術(shù)手段?組織培養(yǎng)體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞工程單克隆抗體細(xì)胞融合細(xì)胞培養(yǎng)胚胎移植核 移 植植物細(xì)胞工程相互聯(lián)系(2005上海)將胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時(shí),下列條件中不需要的是A、具有完整細(xì)胞核的
10、細(xì)胞 B、一定的營養(yǎng)物質(zhì)和植物激素C、離體狀態(tài) D、導(dǎo)入指定基因高考回顧人體神經(jīng)細(xì)胞與肝細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能不同,其根本原因是這兩種細(xì)胞的A、DNA堿基排列順序不同 B、核糖體不同C、轉(zhuǎn)運(yùn)RNA不同 D、信使RNA不同下列有關(guān)細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的敘述,正確的是A、人的腎小管上皮細(xì)胞中沒有胰島素基因B、人體內(nèi)不再分裂的體細(xì)胞中共有46個(gè)DNA分子C、性激素的合成與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有關(guān) D、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與細(xì)胞膜相連,不與核膜相連下列人體細(xì)胞中分化程度最低的是A胚胎干細(xì)胞 B造血干細(xì)胞 C胰腺細(xì)胞 D肌肉細(xì)胞甘薯品種是雜合體。塊根、種子、葉片和莖均可用于繁殖,但為保持某甘薯品種的特性,下列不能用于繁殖的器官是 A. 種子 B塊根 C葉片 D莖關(guān)于單克隆抗體,下列敘述不正確的是A、可以制成診斷盒用于疾病的診斷 B、可以與藥物結(jié)合,用于病變細(xì)胞的定向 治療C、可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn) D、可以在生物體內(nèi)生產(chǎn),不能體外生產(chǎn)人體中具有生長激素基因和血紅蛋白基因,兩者A. 分別存在于不同組織的細(xì)胞中B均在細(xì)胞分裂前期按照堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制C. 均在細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)錄和翻譯D轉(zhuǎn)錄的信使RNA上相同的密碼子翻譯成相同的氨基酸下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述中,錯(cuò)誤的是A植物細(xì)胞融合必須先制備原生質(zhì)體B試管嬰兒技術(shù)包括人工受精和胚胎移植兩方面C經(jīng)細(xì)胞核移植培育出的
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