臨床微生物檢驗(yàn)自動(dòng)化進(jìn)展課件

1、臨床微生物檢驗(yàn)自動(dòng)化進(jìn)展安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院王中新8/8/20221第1頁(yè)，共42頁(yè)。 主要內(nèi)容 臨床微生物檢驗(yàn)自動(dòng)化現(xiàn)狀全自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)；全自動(dòng)微生物鑒定/藥敏分析系統(tǒng)；其他全自動(dòng)微生物系統(tǒng)。8/8/20222第2頁(yè)，共42頁(yè)。一、臨床微生物檢驗(yàn)自動(dòng)化現(xiàn)狀微生物檢驗(yàn)自動(dòng)化與生化、免疫檢測(cè)的自動(dòng)化程度相去尚遠(yuǎn)。手工操作多：樣本處理、涂片染色、接種培養(yǎng)、挑選致病菌、配置菌液、血清學(xué)實(shí)驗(yàn)。主觀判斷多：儀器自動(dòng)化程度低、鑒定參數(shù)少，需結(jié)合細(xì)菌形態(tài)和染色性、菌落形態(tài)特征、以及多個(gè)機(jī)外補(bǔ)充試驗(yàn)結(jié)果。8/8/20223第3頁(yè)，共42頁(yè)。一、臨床微生物檢驗(yàn)自動(dòng)化現(xiàn)狀目前國(guó)內(nèi)外常用的系統(tǒng)： 鑒定/藥敏分析

2、系統(tǒng)：MicroScan 、 Vitek系列、Phoenix、Sensititre 等； 全自動(dòng)血培系統(tǒng)：Bactec FX 及9000系列、 Bact/Alert 3D等國(guó)產(chǎn)儀器：8/8/20224第4頁(yè)，共42頁(yè)。臨床微生物自動(dòng)化發(fā)展的機(jī)遇國(guó)家對(duì)抗生素合理使用相關(guān)政策法規(guī) “抗菌藥物品種的選用原則上應(yīng)根據(jù)病原菌種類(lèi)及病原菌對(duì)抗菌藥物敏感或耐藥，即細(xì)菌藥物敏感試驗(yàn) (以下簡(jiǎn)稱(chēng)藥敏)的結(jié)果而定。” 抗菌藥物臨床應(yīng)用指導(dǎo)原則衛(wèi)醫(yī)發(fā)285號(hào)8/8/20225第5頁(yè)，共42頁(yè)。臨床微生物自動(dòng)化系統(tǒng)將在臨床耐藥菌的檢測(cè)和抗菌藥物的合理使用中發(fā)揮越來(lái)越大的作用！2011年 抗菌藥物臨床應(yīng)用管理辦法責(zé)任涉

3、及面廣：實(shí)行院長(zhǎng)責(zé)任制，掛鉤臨床醫(yī)生的績(jī)效，涉及醫(yī)務(wù)、藥學(xué)、感染性疾病、臨床微生物、護(hù)理、醫(yī)院感染管理及臨床各個(gè)科室接受抗菌藥物治療的患者中，微生物檢驗(yàn)樣本送檢率不得低于30。每季度向醫(yī)院發(fā)布一次細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)結(jié)果8/8/20226第6頁(yè)，共42頁(yè)。衛(wèi)生部在醫(yī)院分級(jí)管理實(shí)施細(xì)則中規(guī)定二級(jí)以上的醫(yī)院檢驗(yàn)科必須開(kāi)展細(xì)菌培養(yǎng)和抗生素藥敏測(cè)定（基本設(shè)備如下） 顯微鏡（包括暗視野）熒光顯微鏡*CO2培養(yǎng)箱*普通培養(yǎng)箱（37）普通培養(yǎng)箱（30）普通培養(yǎng)箱（42）烤箱*PH計(jì)厭氧缸全自動(dòng)細(xì)菌分離培養(yǎng)系統(tǒng)*厭氧操作箱*普通冰箱低溫冰箱*分析天平*慮菌裝置高壓滅菌器細(xì)菌鑒定/藥敏分析儀血液自動(dòng)細(xì)菌檢測(cè)儀*低速離心

4、機(jī)可調(diào)移液器 注： * 條件不夠者可以不具備 * 可以和其它檢驗(yàn)室合用 * 條件不夠者可以用燭缸代替，但至少備2只 8/8/20227第7頁(yè)，共42頁(yè)。WHO對(duì)臨床微生物實(shí)驗(yàn)室提出的指導(dǎo)性方針 1、臨床微生物實(shí)驗(yàn)室盡可能把目標(biāo)集中在快速診斷方面。2、顯微鏡檢查對(duì)建立快速的初步診斷具有很大價(jià)值。3、實(shí)驗(yàn)室人員必須主動(dòng)與臨床結(jié)合，將實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為臨床有用的信息。 8/8/20228第8頁(yè)，共42頁(yè)。臨床微生物自動(dòng)化儀器要求結(jié)果準(zhǔn)確！檢測(cè)快速！使用簡(jiǎn)便！性能穩(wěn)定！8/8/20229第9頁(yè)，共42頁(yè)。二 、全自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)美國(guó)BD公司： BACTEC FX BACTEC 9000 9050/ 912

5、0/9240法國(guó)生物梅里埃： BacT/Alert 3D 60/120/2408/8/202210第10頁(yè)，共42頁(yè)。1 美國(guó)BD公司9000系列BACTEC9240240瓶位BACTEC905050瓶位BACTEC9120120瓶位8/8/202211第11頁(yè)，共42頁(yè)。BACTEC FX8/8/202212第12頁(yè)，共42頁(yè)。獨(dú)有熒光增強(qiáng)檢測(cè)技術(shù)LEDPhotodiodeMicroprocessorPositively Algorithms檢測(cè)靈敏度增加8/8/202213第13頁(yè)，共42頁(yè)。檢測(cè)動(dòng)態(tài)細(xì)菌生長(zhǎng)狀況Plot Utility生長(zhǎng)曲線Start Protocal:17/MAR/1

6、993 Time To Detection: 6.26 Hours*生長(zhǎng)曲線8/8/202214第14頁(yè)，共42頁(yè)。獨(dú)有的熒光增強(qiáng)檢測(cè)技術(shù)提高檢測(cè)速度及檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性每10分鐘檢測(cè)一次，24小時(shí)連續(xù)監(jiān)測(cè)90%陽(yáng)性標(biāo)本可在12小時(shí)內(nèi)被檢測(cè)，36小時(shí)內(nèi)可檢測(cè)出99%的陽(yáng)性標(biāo)本8/8/202215第15頁(yè)，共42頁(yè)。多種培養(yǎng)瓶選擇標(biāo)準(zhǔn)需氧/厭氧培養(yǎng)瓶樹(shù)脂需氧/厭氧培養(yǎng)瓶樹(shù)脂兒童培養(yǎng)瓶專(zhuān)利技術(shù)，培養(yǎng)瓶含能吸附抗生素的樹(shù)脂采血量只需1-3mL,最適合兒童細(xì)菌培養(yǎng)含溶血素厭氧菌培養(yǎng)的特殊培養(yǎng)瓶專(zhuān)利技術(shù)含溶血素分枝桿菌/真菌培養(yǎng)瓶8/8/202216第16頁(yè)，共42頁(yè)。專(zhuān)利樹(shù)脂技術(shù)吸附抗菌素進(jìn)入樹(shù)脂內(nèi)部吸附

7、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在樹(shù)脂表面，促進(jìn)微生物的生長(zhǎng) 撞破紅細(xì)胞從而使其內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)釋放出來(lái)供微生物利用 撞破白細(xì)胞,使其釋放被吞噬的微生物,提高檢出率 擴(kuò)大表面積利于微生物的生長(zhǎng) 8/8/202217第17頁(yè)，共42頁(yè)。2 法國(guó)生物梅里埃8/8/202218第18頁(yè)，共42頁(yè)。產(chǎn)色檢測(cè)技術(shù)細(xì)菌生化代謝 細(xì)菌生長(zhǎng)產(chǎn)生 CO2CO2 降低 pH 值顏色感應(yīng)器轉(zhuǎn)為黃色培養(yǎng)瓶底的顏色感應(yīng)器 含有溶解染料的硅膠 不可逆顏色改變黃色 陽(yáng)性培養(yǎng)8/8/202219第19頁(yè)，共42頁(yè)。二 、全自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)血培養(yǎng)系統(tǒng)的發(fā)展應(yīng)用展望理想的血培養(yǎng)系統(tǒng)應(yīng)符合檢出的范圍更廣，陽(yáng)性率更高；靈敏度更高，污染率、假陽(yáng)性率和假陰性率應(yīng)降至最

8、低；自動(dòng)化程度更強(qiáng)；體積更小，血液標(biāo)本用量少；檢驗(yàn)周期更短，時(shí)間更快； 成本更低。8/8/202220第20頁(yè)，共42頁(yè)。三、全自動(dòng)微生物鑒定藥敏系統(tǒng)美國(guó)BD公司： Phoenix-100法國(guó)生物梅里埃： VITEK- 2 Compact西門(mén)子公司： WorkAway-968/8/202221第21頁(yè)，共42頁(yè)。1、BD Phoenix -100最大的標(biāo)本容量：對(duì)100個(gè)標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行鑒定與藥敏測(cè)試！適合對(duì)大樣本量的同時(shí)檢測(cè)！18/8/202222第22頁(yè)，共42頁(yè)。配套齊全的試劑獨(dú)立的鑒定板GNGPPMIC/ID鑒定藥敏復(fù)合板NMIC/IDSMIC/ID獨(dú)立的藥敏板多種板型多種抗菌藥物組合8/

9、8/202223第23頁(yè)，共42頁(yè)。簡(jiǎn)便的設(shè)計(jì)，全面的菌庫(kù)2種板條（GN/GP）快速鑒定近400種細(xì)菌革蘭氏陽(yáng)性球菌及桿菌革蘭氏陰性發(fā)酵菌及非發(fā)酵菌新推出真菌鑒定板免費(fèi)升級(jí)細(xì)菌庫(kù)！不斷擴(kuò)大鑒定范圍最簡(jiǎn)單的選板操作：僅需革蘭染色8/8/202224第24頁(yè)，共42頁(yè)?？焖俣煽康蔫b定檢測(cè)原理鑒定部分：LOC SUB-CODE LOC SUB-CODE LOC SUB-CODEA1 BGEN B1 MTT C1 DTAGA2DSUCB2NGUC2MAL唯一同時(shí)雙重鑒定方法：比色熒光檢測(cè)無(wú)需附加實(shí)驗(yàn)與試劑51孔鑒定實(shí)驗(yàn)，45種反A3A4A5A6A7A8A9A10A11A12A13DGUA3MGADF

10、RUIMNCLSTPXBKGADMNTMAATHYPAGLUB3B4B5B6B7B8B9B10B11B12B13DTREBDCELLALTBDGLULPROBLPYRFLR_CTLLPHETLTRYPHOSMETAC3C4C5C6C7C8C9C10C11C12C13DEXARARRGLPRBBDGLCLLEUHNAGFLR_CTLLARGHPHOTLHISTLISO應(yīng)底物A14A15PHOLVAALAB14B15ADGLUALALHC14C15BDGALUREA16LPROTB16ESCC16NCFA17B17C17熒光檢測(cè)靈敏度更高！鑒定速度更快！雙重方法，結(jié)果更準(zhǔn)確！8/8/202225第

11、25頁(yè)，共42頁(yè)。商業(yè)化系統(tǒng)藥敏結(jié)果的評(píng)價(jià)是否實(shí)測(cè)真實(shí)的MIC值是否報(bào)告準(zhǔn)確的S I R結(jié)果是否實(shí)時(shí)檢測(cè)多種耐藥機(jī)制8/8/202226第26頁(yè)，共42頁(yè)。 Phoenix-100:每種檢測(cè)板所含抗菌藥物的濃度按倍比稀釋通過(guò)比濁+ 氧化還原指示反應(yīng)實(shí)測(cè)MIC值更及時(shí)準(zhǔn)確地檢測(cè)細(xì)菌變異導(dǎo)致的耐藥表型改變。實(shí)測(cè)真實(shí)的MIC值8/8/202227第27頁(yè)，共42頁(yè)。Phoenix-100對(duì)產(chǎn)碳青霉烯酶類(lèi)細(xì)菌檢測(cè)更靈敏！更全面！比較BD PhoenixTM, Vitek 2 以及 MicroScan自動(dòng)系統(tǒng)在檢測(cè)和推斷腸桿菌科細(xì)菌碳青酶烯耐藥機(jī)制中的作用8/8/202228第28頁(yè)，共42頁(yè)。2、Vi

12、tek-2-Compact8/8/202229第29頁(yè)，共42頁(yè)。檢測(cè)卡移液管：預(yù)置的 條碼有效期卡的類(lèi)型批號(hào)唯一編號(hào)光學(xué)的劃線標(biāo)記橫條薄膜密封卡64 孔預(yù)置干燥的底物8/8/202230第30頁(yè)，共42頁(yè)。3、MicroScan 系統(tǒng)組成測(cè)試板WA96SIWA40SI快速菌液接種8/8/202231第31頁(yè)，共42頁(yè)。MicroScan鑒定/藥敏 8/8/202232第32頁(yè)，共42頁(yè)。功能和特點(diǎn)1、細(xì)菌鑒定功能2、抗生素敏感度分析功能 用藥參考；耐藥監(jiān)測(cè)；評(píng)價(jià)新藥；有助鑒定；院感調(diào)查3 檢測(cè)/提示細(xì)菌的耐藥機(jī)制 ESBLs；AmpC酶；-lac;MRS;VRE;HLAR8/8/202233

13、第33頁(yè)，共42頁(yè)。四、其他全自動(dòng) 微生物系統(tǒng)8/8/202234第34頁(yè)，共42頁(yè)。1、全自動(dòng)革蘭染片儀革蘭染色細(xì)胞離心8/8/202235第35頁(yè)，共42頁(yè)。應(yīng)用特點(diǎn)-清潔、快速、經(jīng)濟(jì)全封閉系統(tǒng)（清潔、安全）一機(jī)兩用，革蘭染色細(xì)胞離心快速 5分鐘內(nèi)得到標(biāo)準(zhǔn)化結(jié)果高通量設(shè)計(jì)，每小時(shí)處理120/300張涂片霧化噴嘴，降低試劑用量（滿盤(pán)12通量）8/8/202236第36頁(yè)，共42頁(yè)。傳統(tǒng)手工四區(qū)劃線接種PREVI Isola自動(dòng)化接種8/8/202237第37頁(yè)，共42頁(yè)。3、全自動(dòng)細(xì)菌分離培養(yǎng)系統(tǒng)樣本采集管放入分離培養(yǎng)裝置的采集管位置，分離培養(yǎng)裝置隨機(jī)放入儀器的樣本位，儀器內(nèi)的條碼掃描儀對(duì)放入的樣本類(lèi)型進(jìn)行自動(dòng)辨認(rèn)、識(shí)別。糞便和拭子樣本在采集管中的磁性攪拌器的帶動(dòng)下，按照設(shè)定的時(shí)間被不斷翻動(dòng)，與采集管中的增菌液充分接觸，達(dá)到良好的增菌效果；痰液樣本在采集管中按照設(shè)定的時(shí)間被不斷翻動(dòng)，與其中的均質(zhì)化液充分混合，使痰液樣本充分均質(zhì)化