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文檔簡(jiǎn)介
1、目標(biāo)導(dǎo)航預(yù)習(xí)導(dǎo)引1.能說出被子植物花粉發(fā)育的過程及花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑。2.說出影響花藥培養(yǎng)的因素。3.學(xué)會(huì)花藥培養(yǎng)的基本技術(shù)。4.能用月季或其他植物的花藥進(jìn)行培養(yǎng)。目標(biāo)導(dǎo)航預(yù)習(xí)導(dǎo)引一二三四一、被子植物的花粉發(fā)育1.被子植物的花粉是在花藥中由花粉母細(xì)胞經(jīng)過減數(shù)分裂而形成的,花粉是單倍體的生殖細(xì)胞。2.被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)歷小孢子四分體時(shí)期、單核期和雙核期等階段。目標(biāo)導(dǎo)航預(yù)習(xí)導(dǎo)引一二三四二、產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑 兩種途徑之間沒有絕對(duì)的界限,主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比。目標(biāo)導(dǎo)航預(yù)習(xí)導(dǎo)引一二三四三、影響花藥培養(yǎng)的因素1.誘導(dǎo)花粉植株能否成功及誘導(dǎo)成功率高低的主要影響因素是
2、材料的選擇與培養(yǎng)基的組成。2.材料的選擇與不同植物、同種植物親本的生理狀況,以及花粉發(fā)育時(shí)期有關(guān)。從花藥來看,應(yīng)當(dāng)選擇花期早期的花藥;從花粉來看,應(yīng)當(dāng)選擇單核期的花粉;從花蕾來看,應(yīng)當(dāng)選擇完全未開放的花蕾。此時(shí)期的營養(yǎng)狀態(tài)及生理狀態(tài)比較好,對(duì)離體刺激敏感。為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給材料的消毒帶來困難?提示:花瓣松動(dòng)后,微生物就可能侵入花藥。3.親本植株的生長條件、材料的低溫預(yù)處理以及接種密度等對(duì)誘導(dǎo)成功率都有一定影響。目標(biāo)導(dǎo)航預(yù)習(xí)導(dǎo)引一二三四四、實(shí)驗(yàn)操作1.材料的選取選擇花藥時(shí),一般要通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育時(shí)期, 常用的方法有醋酸洋紅法和焙花青鉻礬法,它們分別可以將細(xì)胞核染成紅色和
3、藍(lán)黑色。2.材料的消毒花蕾用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精浸泡大約30 s在無菌水中清洗用無菌吸水紙吸干花蕾表面的水分放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的氯化汞溶液中24 min用無菌水沖洗35次目標(biāo)導(dǎo)航預(yù)習(xí)導(dǎo)引一二三四3.接種和培養(yǎng)(1)剝離花藥:消毒后的花蕾,要在無菌條件下除去萼片和花瓣。剝離花藥時(shí),一是要注意盡量不損傷花藥(否則接種后容易從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織);二是要徹底去除花絲,否則不利于愈傷組織或胚狀體的形成。(2)接種花藥:剝離的花藥要立刻接種到培養(yǎng)基上。通常每瓶接種710個(gè)花藥。(3)培養(yǎng):利用的培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基,pH為5.8,溫度為25 左右,幼小植株形成后才需要光照。培養(yǎng)2030 d后,花藥開裂
4、,長出愈傷組織或形成胚狀體。前者還要轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上,以便進(jìn)一步分化出再生植株;后者要盡快將幼小植株分開并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上。(4)通過愈傷組織形成的花粉植株,染色體組的數(shù)目常常會(huì)發(fā)生變化,因而需要作進(jìn)一步的鑒定和篩選。知識(shí)梳理典例透析一二三一、花粉發(fā)育過程中的“四分體時(shí)期”和減數(shù)分裂過程中的“四分體”的辨析被子植物花粉發(fā)育過程中的“四分體”是指由一個(gè)花粉母細(xì)胞經(jīng)過減數(shù)分裂產(chǎn)生的連在一起的4個(gè)單倍體細(xì)胞(4個(gè)小孢子);而減數(shù)分裂過程中的“四分體”是指在聯(lián)會(huì)狀態(tài)下的一對(duì)同源染色體,因?yàn)楹兴臈l染色單體,所以叫做“四分體”。知識(shí)梳理典例透析一二三二、培養(yǎng)植株的鑒定和篩選在花藥培養(yǎng)中,通過愈傷組織
5、形成的花粉植株,染色體組的數(shù)目常常會(huì)發(fā)生變化。有些植株是由花藥發(fā)育形成的單倍體花粉植株;有些植株是由花藥壁細(xì)胞發(fā)育形成的二倍體花藥壁植株;還有的植株是營養(yǎng)核和生殖核融合后發(fā)育成的。因此需對(duì)培養(yǎng)出來的植株作進(jìn)一步的鑒定和篩選。知識(shí)梳理典例透析一二三三、花藥培養(yǎng)與單倍體育種1.花藥培養(yǎng)(1)過程材料的選取:選單核期花粉,常用醋酸洋紅法和焙花青鉻礬法鏡檢。材料的消毒:用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液消毒。接種和培養(yǎng):形成幼苗前不需要光照,形成幼苗后需要光照。知識(shí)梳理典例透析一二三(2)流程解讀進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)要配備三種培養(yǎng)基,期間進(jìn)行兩次轉(zhuǎn)接。a.脫分化培養(yǎng)基:生長素與細(xì)胞分裂
6、素比例適中,促進(jìn)愈傷組織的形成。b.生芽培養(yǎng)基:生長素與細(xì)胞分裂素比值較低,促進(jìn)芽的分化,抑制根的形成。c.生根培養(yǎng)基:生長素與細(xì)胞分裂素比值較高,促進(jìn)根的分化,抑制芽的形成。若培養(yǎng)的外植體含有葉綠體,則培養(yǎng)過程中要提供充足光照,使其進(jìn)行光合作用;若培養(yǎng)的組織或細(xì)胞不含葉綠體,則培養(yǎng)過程中不進(jìn)行光照,以免光線對(duì)其造成損傷。知識(shí)梳理典例透析一二三2.單倍體育種的過程(1)在花藥培養(yǎng)的基礎(chǔ)上,用秋水仙素處理單倍體幼苗。(2)染色體加倍,重新恢復(fù)為二倍體。因?yàn)榇硕扼w是由單倍體染色體加倍后發(fā)育而來的,所以是純合子,不會(huì)發(fā)生性狀分離。知識(shí)梳理典例透析一二三3.比較花藥培養(yǎng)與單倍體育種示意圖:盡管花藥離
7、體培養(yǎng)是單倍體育種的首要環(huán)節(jié),但二者的步驟和結(jié)果是不同的。應(yīng)注意看清楚是培養(yǎng)過程還是育種過程,花藥離體培養(yǎng)只涉及上圖中的,而單倍體育種則包括。知識(shí)梳理典例透析題型一題型二題型三題型一 花粉的發(fā)育【例題1】 關(guān)于被子植物花粉的形成,下列說法正確的是 ()A.花粉是花粉母細(xì)胞經(jīng)有絲分裂形成的B.花粉的發(fā)育要經(jīng)歷小孢子四分體時(shí)期、單核期和雙核期C.花粉發(fā)育經(jīng)歷雙核期時(shí),兩個(gè)細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)并不完全相同D.花粉母細(xì)胞形成花粉粒中精子的過程是一系列減數(shù)分裂的過程解析:花粉是由花粉母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成的;其發(fā)育經(jīng)歷了小孢子四分體時(shí)期、單核期和雙核期等階段。雙核期后形成的兩個(gè)細(xì)胞是由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)有絲分裂產(chǎn)生
8、的,兩個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核具有完全相同的遺傳物質(zhì)。花粉粒內(nèi)的生殖細(xì)胞再經(jīng)有絲分裂得到2個(gè)精子。答案:B知識(shí)梳理典例透析題型一題型二題型三題型二 花粉的選擇【例題2】 選擇合適的花粉發(fā)育時(shí)期是提高誘導(dǎo)成功率的重要因素之一,下列說法正確的是()A.任何時(shí)期的花粉都可經(jīng)過培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織或胚狀體B.對(duì)所有植物來說,在單核期,即細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期,花藥培養(yǎng)成功率最高C.對(duì)一般植物而言,單核期時(shí)花藥培養(yǎng)成功率最高D.為挑選到單核期的花藥,通常選擇部分開放的花朵解析:花粉的發(fā)育時(shí)期對(duì)花藥培養(yǎng)的成功率有重要影響,一般來說,在單核期,即細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期,花藥培養(yǎng)成功率最高,但并不是所有的植
9、物都是如此。為挑選到單核期的花藥,通常選用完全未開放的花蕾。答案:C知識(shí)梳理典例透析題型一題型二題型三反思領(lǐng)悟月季花藥培養(yǎng)的難點(diǎn)之一是材料的選擇,材料選擇應(yīng)遵從以下幾點(diǎn):從花藥來看,應(yīng)當(dāng)選擇初花期的;從花粉來看,應(yīng)當(dāng)選擇單核期的;從花蕾來看,應(yīng)當(dāng)選擇完全未開放的。檢測(cè)花粉發(fā)育時(shí)期的實(shí)驗(yàn)方法:用顯微鏡觀察已染色的花粉樣品臨時(shí)裝片,觀察細(xì)胞核的位置,以確定花粉發(fā)育的時(shí)期。知識(shí)梳理典例透析題型一題型二題型三題型三 花藥培養(yǎng)的過程【例題3】 下列有關(guān)花藥離體培養(yǎng)的說法,錯(cuò)誤的是()A.對(duì)材料的選擇最常用的方法是焙花青鉻礬法,這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色B.材料消毒時(shí),用氯化汞溶液或次氯酸鈣溶液浸泡后,需要用無菌水沖洗C.接種花藥后一段時(shí)間內(nèi)不需要光照,但幼小植株形成后需要光照D.接種的花藥長出愈傷組織或胚狀體后,要適時(shí)轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基,以便進(jìn)一步分化成再生植株解析:對(duì)材料的選擇最常用的方法是醋酸洋紅法。答案:A知識(shí)梳理典例透析題型一題型二題型三反思領(lǐng)悟確定花粉發(fā)育時(shí)期的兩種方法
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