BioPhotometerplus操作指南(eppendorf分光光度計使用手冊)

1、BioPhotometerplus操作指南新型面板介紹：示淮品檢空白擔(dān)溺健單波役定儀器琴口EJ-tz口口r示淮品檢空白擔(dān)溺健單波役定儀器琴口EJ-tz口口r奇FpfOtcin1飛_A0.41?Ai60Q.233Ai5i口匚I自孑福檢甜檢測前準(zhǔn)備：1，打開儀器和打印機（如果需要的話）開關(guān)2，準(zhǔn)備好比色皿，空白溶液，標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品。標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的溶液若低于吸光度0.02-0.03A（相當(dāng)于dsDNA1.0-1.5ug/ml的濃度）不可再使用3，打開樣品滑蓋常規(guī)檢測步驟：1，常規(guī)檢測步驟：1，在面板檢測方法中選擇需要的方法，使用前先檢查所選方法的參數(shù)設(shè)置是否正確按下enter鍵，顯示屏如下1，依次放

2、入空白（按blank鍵）、標(biāo)準(zhǔn)品（按standard鍵）和樣品（按sample鍵），再按enter鍵分別進行檢測230，230，2，完成檢測后合上滑蓋，關(guān)閉電源。檢測方法：BioPhotmeterplus在出廠前已預(yù)存以下檢測方法，可以直接調(diào)用。檢測方法檢測方法解釋波長組DNA雙鏈DNA根據(jù)不同的參數(shù)值來計算DNA濃度。檢測波長：260nm單鏈DNA預(yù)設(shè)的參數(shù)值不同，檢測方法也不檢測純度的次波長低聚糖DNA同。280，340nmRNARNA同DNA檢測組類似同DNA檢測組類似低聚糖RNA蛋白BCA加好試劑后計算蛋白的濃度。檢測方550nm微量BCA法通過校準(zhǔn)曲線的評估程序來預(yù)先BRADFORD

3、編程。標(biāo)準(zhǔn)品的代號和目標(biāo)濃度的可595nm微量BRADFORD以修改LOWRY595nm微量LOWRY蛋白280nm根據(jù)參數(shù)值來計算蛋白濃度檢測波長：280nm檢測純度的次波長260，340nmOD600OD600濁度檢測可以測量細菌密度595nmdye550DYE550-雙鏈DNA檢測染料標(biāo)記的生物分子:計算分子DNA/RNA/寡核苷酸：參考DYE550-單鏈DNA（核酸或蛋白）的濃度以及單一測量DNA和RNA的檢測組DYEDYE酸DYE550-RNA步驟中的染料。同時還能檢測生物分蛋白：參考蛋白檢測組中的550-寡核苷子的染料標(biāo)記率。蛋白280nm染料的檢測波長：550nmdye65034

4、0550-蛋白DYE650-雙鏈DNA同“dye550”檢測方法DYE650-DYEDYE酸DYE單鏈DNA650-RNA650-寡核苷DNA/RNA/寡核苷酸：參考DNA和RNA的檢測組蛋白：參考蛋白檢測組中的蛋白280nm染料的檢測波長：650nm檢測ASSAYASSAYASSAY650-340/1340/2340/3蛋白405檢測ASSAYASSAY405/1405/2在340nm處檢測來計算濃度。評估程340nm序可自由設(shè)置。樣品檢測也預(yù)設(shè)了以下的評估程序：340/1：參數(shù)值評估340/2：標(biāo)準(zhǔn)品評估340/3：6個標(biāo)準(zhǔn)品的校準(zhǔn)曲線評估同“340檢測”405nmASSAY405/349

5、0檢測ASSAY490/1ASSAY490/2ASSAY490/3吸光度吸光度同“340檢測”490nm選擇波長后快速單波長檢測230，260，280，340，405，490，550，595，650nm新增檢測方法操作：染料檢測法：dye550和dye650檢測法預(yù)設(shè)的檢測方法包含染料標(biāo)記生物分子的檢測程序。這些檢測程序中不僅能檢測生物分子（核酸或蛋白）還能檢測不同波長的染料分子及其濃度。此外，標(biāo)記率（FOI，染料和生物分子濃度的比值）也可以計算。dye550在550nm檢測染料，核酸在260nm，蛋白在280nm。此項按鍵可有以下四種參數(shù)選擇：TOC o 1-5 h z-CY3ALEXA54

6、6ALEXA555DYE550前三個染料在實驗室使用普遍，最后一個染料（DYE550）是為其它染料準(zhǔn)備的每一種染料均必須在參數(shù)設(shè)置中設(shè)定數(shù)據(jù)。對于Cy和Alexa染料值雖已預(yù)設(shè)進儀器，也可進行修改吸光系數(shù)單位是cm-lM-1。儀器依此計算參數(shù)，根據(jù)相關(guān)的比色皿10mm的光路長度來轉(zhuǎn)換吸光度到濃度，并在打開檢測法后將此信息顯示在開機屏幕上選項：校準(zhǔn)參數(shù)“CIRR：A550”dye650在650nm檢測染料。有三種染料可選：CY5ALEXA647DYE650其中DYE650也類似“DYE550”，是為其它染料準(zhǔn)備的。標(biāo)記率“FOI”FOI種根據(jù)核酸結(jié)合染料的濃度的計算方式，不適用于蛋白檢測法。可以

7、在方法參數(shù)中任選以下兩種單位：“MOLECULEDYE/kb”：染料分子每1000核苷酸“pmole/ugDNA”：pmole染料每ug核酸Y校正因子類似于濁度檢測中的校準(zhǔn)參數(shù)”CORRECTIONA”，染料檢測中當(dāng)檢測核酸或蛋340白的染料標(biāo)記率時同樣也需要進行校準(zhǔn)。加入生物分子的檢測波長的吸光值已知（在260和280nm），那么可在參數(shù)“CORRECTION”下進行校準(zhǔn)。550（或650）Y檢測步驟與結(jié)果顯示調(diào)用檢測方法后，您將看到以下面板顯示（如：“DYE550-ssDNA”）:DYE550-ssDNA10mmDYE550-ssDNA10mm檢測方法與比色皿參數(shù)30ONiSDE3ES?S1C130ONiSDE3ES?S1C137.0ms/mL15000061伽6.667pmoI/pL計算DMA和染料濃度的預(yù)設(shè)值：單鏈DNA的參數(shù)和染料吸光率*提示下一步操作*提示下一步操作340,405和490nm檢測法：三種波長適用于三類檢測，下列樣品評估參數(shù)已預(yù)設(shè)入儀器，任何時候也可人為修改參數(shù)：