實(shí)驗(yàn)十三維生素AD膠丸中維生素A的含量測定

1、實(shí)驗(yàn)十三 維生素AD膠丸中維生素A的含量測定1簡介 維生素A的結(jié)構(gòu)為具有一個共軛多烯醇側(cè)鏈的環(huán)己烷，由于其中有多個不飽和鍵，性質(zhì)不穩(wěn)定，易被空氣中氧或氧化劑氧化，易被紫外光裂解，并且其對酸不穩(wěn)定。其醋酸酯比維生素A穩(wěn)定，臨床使用一般將本品或棕櫚酸酯溶于植物油中應(yīng)用。因此，維生素A及其制劑除需密封在涼暗處保存外，還需充氮或加入合適的抗氧劑。維生素A與氯仿、乙醚、環(huán)己烷或石油醚能任意混合，在乙醇中微溶，在水中不溶。2一 目的要求 掌握UV三點(diǎn)校正法的原理和維生素A含量測定的方法。3二 基本原理1.雜質(zhì)的無光吸收在310nm340nm的波長范圍內(nèi)幾乎呈一條直線，且隨波長的增長吸收度下降。2.物質(zhì)對光

2、吸收呈加和性的原理。即在某一樣品的吸收曲線上，各波長處的吸收度是維生素A與雜質(zhì)吸收度的代數(shù)和，因而吸收曲線也是二者的疊加。 4三 實(shí)驗(yàn)儀器與器材1.溶液和試劑：維生素A膠丸（規(guī)格2.5萬單位/粒）、環(huán)己烷、乙醚。2.儀器和其他用具：紫外可見分光光度儀（具掃描功能）、分析天平、石英比色皿、25mL容量瓶若干、移液管、注射器、刀片、燒杯若干個。5四 操作步驟1.膠丸內(nèi)容物平均重量的測定 取膠丸20粒，精密稱定，（2.4641g），用注射器將內(nèi)容物抽出，再用刀片切開丸殼，用乙醚逐個洗滌丸殼三次，置50mL燒杯中，再用乙醚浸洗1-2次，置通風(fēng)處，使乙醚揮散，精密稱定，得總殼重（0.7213g），算出每

3、丸內(nèi)容物的平均重量。6四 操作步驟2.供試品溶液的制備與測定 第一種方法 方法：精密稱取一粒維生素AD膠丸內(nèi)容物（0.0048g），用環(huán)己烷溶解并定量稀釋成25mL。取0.8mL再用環(huán)己烷稀釋至25mL，即制成每mL中含915單位的溶液。按照分光光度法，測定其吸收峰的波長，并分別在300nm,316nm,328nm,340nm,360nm五個波長下測定吸收度。7四 操作步驟 計算： （1）求E1%1cm ：由 A= E1%1cm CL求得 E1%1cm =A/（CL） （2）求效價（IU/g）：效價系指每克供試品中所含維生素A的國際單位數(shù)（IU/g）。 即IU/g= E1%1cm 19008四

4、 操作步驟（3）求維生素A占標(biāo)示量的百分含量： 標(biāo)示（% ）= （E1%1cm1900W）/標(biāo)示量 100%=（AD1900W）/（W100L標(biāo)示量）100%9四 操作步驟（4） A值的選擇 首先計算吸收度比值（即Ai/A328） 如果最大吸收波長在326nm329nm之間，并分別計算5個波長下的差值，均不得超過0.02時，則不用校正公式計算吸收度，而直接用328nm處測得的吸收度A328求得E1%1cm。 10四 操作步驟如果最大吸收波長在326nm329nm之間， 并分別計算5個波長下的差值，如有一個或幾個超過0.02，這時應(yīng)按以下方法判斷： 第一法校正公式：A328(校正)=3.52(2

5、A328-A316-A340) 再按下式計算校正吸收度與實(shí)測吸收度的差值對實(shí)測吸收度的百分率（d）： d =（A328(校正) A328(測)）/ A328(測) 100%如果最大吸收波長不在326nm329nm之間，也不能用本法測定，而應(yīng)用第二法（皂化法）測定含量。11四 操作步驟第二種方法 方法：精密稱取供試品適量（約相當(dāng)于維生素A總量500單位以上，重量不多于2g），置皂化瓶中，加乙醇30mL與50（g/g）氫氧化鉀溶液3mL，依法皂化后用不含過氧化物的乙醚提取并定量稀釋成每1mL中含維生素A為915單位的溶液，在300、310、325、334nm波長處測定吸光度，并確定最大吸收波長（應(yīng)為325nm）。計算：計算同第一法，換算因子為1830。 第二種方法校正公式： A325（校正）=6.815A3252.5553104.260A33412四 操作步驟維生素A吸收度差值13五 結(jié)果與討論（1）計算各波長處吸收度與