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1、飼料中總磷含量的測(cè)定原理 將試樣中的有機(jī)物破壞，使磷溶解出來(lái)，在酸性溶液中，磷與釩鉬酸銨生成黃色絡(luò)合物，在400nm波長(zhǎng)下比色測(cè)定。此法測(cè)得為總磷，包括植酸磷。操作步驟 1. 試樣分解 2.標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 .試樣測(cè)定操作步驟 1. 試樣分解 有干法，濕法。 與測(cè)鈣基本相同（其中鹽酸濃度1+1） 操作步驟 2.標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制： 制備含磷50ug/ml的磷標(biāo)準(zhǔn)溶液，各吸取0，1，2，5，10，15ml（即分別含磷，ug），各加入ml顯色劑，加水至ml，顯色10min以上以ml為參比，用mm比色池，在 0nm波長(zhǎng)下比色，以含磷量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。操作步驟 2.標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制： 亦可

2、根據(jù)最小二乘法，計(jì)算出斜率b值，以方便算出含磷量曲線方程中，Y = a + b X 吸光度 截距 斜率 含磷量當(dāng)曲線為經(jīng)原點(diǎn)的斜線，則a=0,所以吸光度 Y = b X根據(jù)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)各點(diǎn)的吸光度Y和含磷量X，可統(tǒng)計(jì)得 斜率b = n*XYX*Y n*X2(X)2 測(cè)樣品時(shí)，測(cè)得吸光度，可算出溶液含磷量 X = Y / b操作步驟.試樣測(cè)定： 吸取試樣分解液適量，以同樣方法顯色和比色，根據(jù)所測(cè)得的吸光度，查標(biāo)準(zhǔn)曲線的溶液含磷量，再計(jì)算樣品含磷量。計(jì)算： P(%)= X 106 100% M *(V / V)重復(fù)性要求： 含磷0.5% 允許相對(duì)偏差% 0.5% 10%注意：顯色劑應(yīng)避光保存，不允許出現(xiàn)沉淀須有足夠的顯色時(shí)間，天氣冷須延長(zhǎng)避免使用渾濁的樣品分解液 為何用于比色的溶液的容量（50ml）不在計(jì)算公式中出現(xiàn)？ 因?yàn)闇y(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)與測(cè)定試樣時(shí)均定容50ml，含磷量X為這50ml供比色的溶液中磷的總量，而非濃度，所以這50ml前后抵消，不在計(jì)算公式中出現(xiàn)。實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意的問(wèn)題： 1.顯色時(shí)間不充分

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