CLIACAP 二代測序臨床檢測標準操作指南

1、最新CLIACAP 二代測序臨床檢測標準操作指南CLIA/CAP 二代測序臨床檢測標準操作指南2022-04-23自由度精準醫(yī)療本臨床二代測序操作指南來自于Clinical Laboratory Improvement Amendments (CLIA) of 1988/College of American Pathologists (CAP) laboratory。釋義：Clinical Laboratory Improvement Amendments (CLIA) of 1988：美國臨床實驗室改良修正法規(guī)88 。這個法規(guī)里面有關于醫(yī)學檢驗工程的一些質量標準，中國的臨床行業(yè)很多工程的指

2、標都參考過 CLIA88 中的內容。College of American Pathologists (CAP) laboratory：美國病理學家協會。相較于Sanger測序，二代測序技術新一代測序技術，NGS擁有高通量和低單堿基本錢的特點，這使其在臨床檢測領域擁有得天獨厚的優(yōu)勢。過去的數年間，相當數量的NGS效勞商迅速成長，而美國病理學家協會卻沒有及時依照美國臨床實驗室改良修正法規(guī)CLIA編制指南來標準這個檢測?；贜GS平臺的臨床檢測是一種新的檢測方式，相較于原有檢測方法，其復雜程度大大提高，因此迫切需要一個標準標準來指導各實驗室進行檢測。CAP于2022年成立了NGS工作部門，商討NG

3、S臨床檢測實驗檢查表的內容。本次CAP列出共計18條實驗室要求的檢查表，包含檢測的二代測序實驗過程和生物信息學分析過程。二代測序技術NGS包含兩個局部：實驗操作局部wet bench和生物信息分析局部dry bench。實驗操作局部包括以下局部或所有的流程：病例樣本的采集處理、核酸提取、片段化、生物分子標簽barcode、目標區(qū)段/基因捕獲富集、連接、擴增、文庫構建、上機測序、數據產出。生物信息分析局部主要依賴于高性能的計算機和不同的生物信息分析方法，主要流程包括：參考序列比對、組裝、變異檢測、注釋、臨床解釋依賴于是否運用診斷工具。CAP依據NGS實驗操作局部和生物信息分析局部分別建立了獨立執(zhí)

4、行標準和檢測事項：實驗操作局部檢測條目包括標準操作流程文件的建立、流程驗證、質量管理體系、數據可靠性驗證、異常情況記錄及維護更新；生物信息分析局部檢測條目包括：變異結果描述、附帶結果的報道、數據儲存、版本可追溯性及數據傳輸平安性。實驗操作局部實驗操作標準操作流程文件NGS實驗室需要建立一個標準操作流程文件用來指導產生NGS實驗數據對于臨床實驗室來說，一個詳細的NGS實驗標準操作流程文件是實驗室質量評估的一個重要指標。標準操作流程文件中需要包括DNA/RNA樣本準備、片段化、建庫、樣本分子標簽barcode、樣品混合、上機測序相關的所有標準操作流程指導。在此根底上，所有獨立的實驗步驟和后續(xù)的操作

5、才能夠一一被追溯。標準操作流程文件需要包括NGS實驗過程中所有相關的方法、試劑、儀器、軟件、軟件版本等，此外，還應對質控標準進行詳細描述，包括詳細的質控參數、接受域和否認域。例如目標區(qū)段捕獲測序實驗，需要描述捕獲區(qū)段的基因組信息包括目標區(qū)域基因組位置、所包括的基因等、捕獲富集的具體方法及流程、包含不同類型臨床樣本血液、FFPE處理方法的SOP等。NGS實驗操作流程驗證實驗室必須對實驗操作流程進行驗證，并且當流程有修訂的時候，必須要對整個實驗操作過程進行重新確認，以檢驗修訂后的流程是否能夠符合要求。重新驗證的程度和范圍視修訂的程度和范圍而定。所有實驗室自己研發(fā)的分子診斷或臨床檢測工程，在進行臨床

6、應用前必須對NGS每個操作流程的性能表現進行一個內部的驗證。NGS實驗是一個復雜的工作流程，它由很多獨立步驟組合而成。每步流程都需要分別優(yōu)化到一個最正確經驗值，以此來綜合決定最正確的實驗操作條件及各參數的設置。在內部驗證中需要考慮的必要因素包括：實驗的敏感性和特異性、準確性、精確性以及檢測能力的上限和下限動態(tài)范圍。對于任何一個分子實驗，對于不同的樣本類型血液、唾液、組織等都需要獨立的進行一個驗證?？紤]到NGS技術并不能夠完全的檢測到所有理論上的變異情況，因此我們需要結合“其它檢測方法Sanger、芯片和“特定分析物positive controls的手段來驗證NGS實驗的檢驗性能。必須要考慮的

7、一些性能參數：1、分析靈敏度：可參考一個金標準的方法來觀測NGS技術能檢測出的最多的變異位點的數目。需要注意的是，在驗證分析靈敏度“基準線的時候，要盡可能的考慮全基因組上不同的區(qū)域。此外，也需要對基因組上不同的變異類型分別進行獨立的檢測SNP、CNV、SV、homopolymers。驗證過程中，陽參也是必需的。可以選擇一些包括相關變異例如p.F508del in CFTR的病例樣本作為陽參進行驗證。2、注意一個統(tǒng)計方法所涉及的假陽性和假陰性問題。考慮到不同方法對特殊樣本腫瘤樣本，ctDNA，嵌合體檢測局限性，有時sanger測序并不是所有變異檢測的金標準。所以在這種情況下，可通過稀釋樣本混合實

8、驗dilution of samples with known allele frequencies來測試NGS技術檢驗變異能力的動態(tài)范圍。另外，數據的精確性可通過生物學重復至少三個樣本和技術重復相同樣本不同barcode來評估。3、注意同源序列的干擾，如果實驗對象有這樣的情況存在，需提前進行同源序列比對分析。實驗室必須提供一個方法來確認檢測出的變異已排除了假基因同源序列的干擾，并且呈現此方法準確合理的證明文件。4、如果樣本通過標簽barcode進行混樣，必須證明每個樣本在實驗操作過程中保持樣本各自的特異性。NGS實驗操作流程質量管理體系實驗室必須遵循質量管理體系來進行NGS實驗操作CAP認證

9、的實驗室必須建立一個質量管理體系，實驗室規(guī)模、臨床市場、專業(yè)知識以及實驗室主管在質量保證程序中的決策權共同決定了質量管理體系的內容。質量管理體系必須是文字記錄的，且與設計文件內容相符一致。對于一個進行NGS實驗的實驗室來說，一個高質量的質量管理體系應包含以下屬性：1、 質量管理體系有明確的技術路線工作流程，包括有評估實驗前期的操作步驟、測序過程、實驗后期分析工作的報告。2、NGS質量管理體系需要納入到所在機構總的質量體系中。如果實驗室只是醫(yī)院或醫(yī)療中心的一局部，其NGS質量管理體系必須適從整個機構的質量保證程序內容。3、管理體系中應當標注在實驗過程中存在的常見問題。標明這些問題對結果的影響或對

10、臨床應用的影響以及是否違背實驗室的一些政策和相關程序。體系文件中需要包含每次矯正的記錄、效果以及操作準那么和流程的修訂內容。4、質量管理體系的宗旨是保證所進行的檢測是臨床目的相關的。尤其對于NGS，在沒有其它檢測能力相當的檢驗方法存在的情況下，這個宗旨尤為重要。檢驗分析的合理適當性必須以醫(yī)學科學為基準。5、管理體系應當鼓勵實驗人員對整個檢測程序內容提出意見與建議，員工的意見與建議調查必須包括在質量保證系統(tǒng)里。NGS結果驗證實驗室需要一個相關政策方案用來進行NGS檢測變異結果的驗證考慮NGS技術的不斷開展，人們也意識到基于NGS實驗所涉及的假陽性和假陰性的問題。CAP根據不同實驗室的性能評價靈活

11、的決定該實驗室什么時候進行結果驗證實驗、實驗怎樣進行以及是否推薦利用NGS以外的技術在其它家系成員中進行結果驗證。每個進行NGS實驗的實驗室必須有個政策，明確指示驗證實驗需要進行，或者有個證明文件說明相關的驗證為何不需要。CAP給予實驗室足夠的靈活性去選擇適當的結果驗證的方法并不完全依賴于Sanger，可以是堿基特異性的聚合酶鏈反響，溶解曲線分析。實驗記錄在實驗過程記錄中，處理樣本的方法、儀器、試劑必須是可識別且可追溯的在臨床NGS實驗過程中，一個全面完整的實驗記錄是必需的，包括整個實驗過程中的實驗條件、步驟、計算軟件等。相應的，完整的存檔記錄必須明確說明整個實驗過程中每個臨床樣本的試劑、引物

12、、測序化學反響、平臺都是可追蹤的。此外，記錄中還應包括對檢測的目標區(qū)段的描述基因組、外顯子、特定基因、特定panel、轉錄本或甲基化區(qū)段，分析中引用的細節(jié)文獻，網站。建議實驗室最好建立一個文檔記錄系統(tǒng)，詳細的記錄上述細節(jié)，并可隨時調檔查閱。特殊案例記錄實驗室需要建立一個特殊案例記錄文檔，用來記錄偏離NGS標準實驗操作流程的特殊病例樣本情況當檢測對象及操作過程偏離實驗SOP時，實驗室需要對此案例進行記錄，并做詳細的解釋說明。偏離的情況比方收到一例非常規(guī)樣本后改變實驗操作流程、文庫構建及上機測序步驟。當接受一個樣本時，就需要對樣本是否滿足實驗要求作出判斷。如果存在猶豫及疑問，需要在工作記錄中標注出

13、，并及時與導師或實驗室主任進行交流討論。同時，需要與樣本收集人溝通此問題，并將交流討論的內容記錄在工作文檔中或做電子文檔記錄。特殊案例記錄需要包括跟問題樣本相關的所有方面，包括發(fā)現的問題、解決方案、相關的交流涉及的人員，通知人與被通知人，時間。相關記錄必須列入每月質量控制報告中。有時，實驗室的SOP也需要進行更改，促使實驗操作步驟更加細致明確，并剔除一些偏差誤差。這種情況下，所提議的修改的內容需要實驗室導師或其它與實驗技術直接相關的技術人員在內的2位以上成員同意，并且修改的內容必須是經過實驗室主任簽字認可的。更新維護實驗室必須具有相關政策用來對NGS實驗過程中相關儀器、化學溶劑、試劑的升級更新

14、進行監(jiān)測、更新實施和記錄為防止實驗使用過時的、被淘汰的方法，實驗室需要及時升級更新。因此，NGS實驗室必須出具相關政策方案，用來定期檢測和更新在實驗過程中的儀器、化學溶劑、試劑。NGS實驗中所用到的最新的文庫構建、擴增、測序的方法是被實驗室所驗證過的，能夠有效的提升數據質量的重復性和實驗的準確性的。此外，方案中還需注明檢測升級更新的方法，更新的實施時間每次更新的間隔時間以及在臨床實際應用前的進一步驗證方案。生物信息分析局部NGS數據相關生物信息分析可分成三個主要步驟：首先是產生記錄堿基序列信息、堿基質量的FASTQ格式文件。FASTQ文件中，每4行顯示一條read信息，包括堿基類型、標識符及堿

15、基質量信息，FASTQ類型文件也是目前NGS領域中應用最廣泛的信息儲存類型；第二步是將檢測獲得的序列與參考基因組進行序列比對，以此檢測病人序列與參考基因組序列之間的差異，之后將這些差異與基因、蛋白功能關聯，進行注釋；最后一步是將檢測出的變異與病例表型信息相關聯，篩選結果標注與疾病相關的稀有變異；基于家系做篩選并形成臨床報告。結合NGS的臨床診斷需要依賴于各種生物信息計算方法及軟件，臨床實驗室在針對不同診斷應用時需要能夠合理有效的選擇相應的數據計算方法及生物信息分析軟件。同時，對于這些算法和軟件，實驗室需要利用大量的樣本來驗證所用算法、軟件在分析不同變異類型時的靈敏度、特異度以及重復性，以此來確

16、認所用的生物信息學分析工具及參數是否符合標準，符合實驗室要求及臨床報告標準。一旦方法工具確認后，實驗室也需要對運用于臨床診斷的生物信息分析各步驟進行記錄描述，并對這些步驟實施一個質量管理方案。NGS生物信息分析標準操作流程文件實驗室需要準備一份標準操作流程文件用來標準NGS生物信息分析中的數據分析、描述、及結果報告流程。實驗室必須詳細記錄描述分析過程、結果報告中涉及到的所有算法、軟件、數據庫信息。分析流程中的這些軟件、算法、數據庫的版本必須是可查詢且可追溯的。實驗室必須明確詳細的記錄與默認參數不一致的自定義參數設置。在序列比對中，所用到的參考基因組序列版本號及組裝的細節(jié)也需要詳細記錄在文件中。

17、SOP文件中需要詳細的描述NGS數據的整個生物信息分析流程，包括輸入文件、輸出文件及每步分析內容，并且描述每步過程中的質控條件及參數每條read的質控、堿基質量、測序深度、覆蓋度。在后期數據篩選的流程及依據也需要表達在SOP文件中。NGS生物信息分析流程驗證實驗室必須對數據分析流程進行驗證，并且當流程有修訂的時候，必須要對整個分析過程進行重新驗證，以檢驗修訂后的流程其性能是否能夠符合要求。重新驗證的程度和范圍依賴于修訂的程度及范圍。與NGS實驗操作流程一致，實驗室也需要利用一些包含變異的序列樣本來驗證整個數據分析流程的精確性、特異性、重復性。驗證的樣本數量依據不同平臺決定，驗證樣本的選擇可參考

18、一些權威的樣本數據，比方HapMap樣本、遺傳變異的細胞系或是之前分析過的臨床診斷樣本。注意一些高同源性序列的分析問題，如果需要分析這種類型的樣本數據，實驗室需要重新開發(fā)一個獨立的測試方法。雖然NGS并不嚴格的要求確定變異分析中的假陽性率和假陰性率，但實驗室需要針對不同變異類型，選取一些經典的樣本數據來評估分析中假陽性和假陰性概率。假陽性可以通過利用不同種分析方法評估出來，而假陰性的評估那么會更加的復雜一些，假陰性可能由很多不同的因素產生，包括目標區(qū)段reads覆蓋度不夠、堿基檢出的閾值設置太嚴苛、鏈特異性造成reads分布不均勻而未到達質控條件等。分析中參加一些目標區(qū)域外的對照區(qū)域，可能是一

19、個很好的對照措施。在NGS實驗建庫過程中參加樣本標簽barcode是目前比擬常做的事。但實驗室需要確認標簽序列在混池中的特異性，并且確認在分析的過程中，能夠準確的識別區(qū)分出標簽序列。在分析混池樣本測序數據時，設置一個保存或過濾標簽序列的標準是必需的。例如在分析過程中，只保存標簽序列與建庫時所添加的標簽序列完全一致的reads。因此，可以通過檢測標簽序列是否完整來判斷在混池過程中樣本之間是否污染。整個分析流程也需要對腫瘤樣本體細胞變異的檢測靈敏度動態(tài)范圍進行評估。這可通過對目標變異進行等濃度稀釋的手段來進行評估。當整個分析流程有改動時，對流程的再次驗證也是必需的。一個實用的再次驗證方法那么是利用

20、前期已驗證過的數據，在設置新參數后，重新分析來檢測分析的性能。NGS數據分析流程的驗證及再驗證的有效性依賴于完整的驗證及再驗證記錄及臨床應用的批準文件。NGS生物信息分析流程質量管理體系實驗室必須遵循質量管理體系來進行NGS生物信息分析臨床實驗室必需依據對應的質控標準來監(jiān)測NGS數據常規(guī)分析工作，在分析過程中，任何與質控標準有偏離的地方都需要進行檢查并制定對應的解決方案。偏差的情況如符合質控要求的reads數目太少；檢測出的變異數目明顯偏離預期；樣本標簽barcode序列被污染，導致檢出的reads數顯著增多。這些偏差都指示著實驗過程中的誤差或分析中的失誤。因此，一個適宜的質量管理體系必須包括

21、一個清晰的流程用以調查記錄這些偏差，尋找原因，并建立適宜的修正策略，以及調查原因的方法步驟和實施的修正方案。生物信息分析流程更新實驗室需要有相關政策用以監(jiān)測、記錄及實施整個生物信息分析流程中相關軟件算法的補丁修補、更新工作NGS生物信息分析中通常會運用多種有附加腳本和數據庫的開放源代碼軟件包?？紤]到這個領域不斷的在更新進步，實驗室必須有相關政策方案用以監(jiān)測、記錄及實施整個生物信息分析流程中相關軟件包、數據庫的補丁修補、更新工作，方案中還應該表達更新頻率更新頻率即表達更新的間隔時間，并進行詳細記錄。數據存儲實驗室需要在生物信息分析過程中對原始數據、中間數據及最后的結果數據的存儲工作準備相應的方案

22、NGS數據整個分析中會產生大量的數據文件，包括原始的芯片掃描文件，序列信息堿基質量的FASTQ文件，分析流程中產生的中間數據文件及進行變異檢出的VCF文件。本檢查表并不要求所有的文件都要長期存儲保存，實驗室有決定權來決定在最后結果報告出來后什么類型的數據文件需要儲存，以及儲存的時間。NGS Work Group建議存儲FASTQ文件或者是整理過的BAM/SAM文件，以便后期需要時對數據進行重新分析。需要注意的是，實驗室在制定數據存儲的方案時，需要符合當地政府對數據存儲的政策要求。版本可追溯性每份病例數據分析報告中，生物信息數據分析流程所涉及軟件、算法、數據庫的版本都是可追溯的NGS生物信息分析

23、流程中通常會涉及多種開放源代碼軟件包、腳本及數據庫。每個軟件或腳本的性能會直接顯著的影響整個生物信息分析的效果。因此，對于每一份病例報告，實驗室需要能夠準確追溯其數據分析流程。對于自己開發(fā)的軟件或腳本，如果有任何修改，實驗室需要對其修改做好記錄，但此記錄不必表達在病例結果報告中。非常推薦實驗室為每一套分析流程編制一個特定的、唯一的版本名稱如：NGS數據分析流程v1.0.1。如果整套分析流程中有軟件包、腳本或數據庫發(fā)生變動，或者是軟件的配置參數發(fā)生變化，相應的版本號就需要重新編輯設定，并且整個流程需要平臺重新驗證。異常記錄實驗室需要建立一個異常記錄文檔，用來記錄偏離NGS生物信息分析標準分析流程

24、的具體情況整個分析流程中，如果有任何偏離數據標準分析流程的地方都需要被詳細的記錄下來，包括軟件程序包、腳本、版本號、數據庫、命令行或參數的任何變動。分析流程中出現的一些漏洞或紕漏也需要詳細的記錄在異常記錄文檔中，包括問題的描述、問題發(fā)生原因的調查、修正措施、相關的交流及直接負責人的批示。異常記錄文檔需要與相關的病例分析報告對應起來，而實驗室主管也需要將這些與臨床NGS數據分析SOP差異的地方與對應的臨床醫(yī)師進行交流。相關記錄列入每月質量控制報告中。當分析一些特殊病例或基因組區(qū)間的時候，相對于SOP而言，整個分析流程中所涉及到的任何修改變動，對應的解釋說明都需要表達在最終的結果報告中。NGS數據

25、傳輸保密性政策實驗室需要制定相關的規(guī)章制度用以確認病人測序數據在內部及外部存儲及傳遞過程中的平安性和機密性臨床NGS實驗中，除了會產生大量的特定基因/區(qū)域的序列數據外，還會包括很多病人的個人信息性別、出生年月、醫(yī)療記錄、健康狀態(tài)等，實驗室必須建立一個嚴格的規(guī)章流程來確保這些個人信息的平安及隱秘，包括這些信息在不同實驗室與第三方公司之間傳遞的平安性。政策中需要表達的內容比方：數據的加密、數據傳輸的平安性、對訪問用戶進行權限設置、訪問記錄及內容統(tǒng)計。實驗室需要遵循Health Insurance Portability and Accountability 法規(guī)健康保險可移植性及責任與義務法規(guī)，例

26、如與外部的供給商簽訂商業(yè)合同，說明其充分的權責用以確保臨床樣本基因組數據在傳遞和接受時的機密性。序列變異結果解釋及報告實驗平臺對測序分析變異結果的描述及報告需要遵循專業(yè)組織的建議與指導基于NGS技術，實驗室可以進行各項不同的檢測，小到單個基因檢測，大到基因panel、外顯子組或整個基因組。通過NGS技術，我們通常會檢測到大量的之前未報道過的新變異位點或致病位點。目前，大多實驗室在進行變異結果報道描述時會遵循人類基因組變異協會命名指南( ; accessed January 6, 2022)和美國醫(yī)學遺傳學學院ACMG的遺傳疾病變異分類指導。推薦在參考這些指導時，利用他們在網站發(fā)

27、布的最新版本。ACMG的變異分類指導手冊目前正在修訂，新的版本里將會包括變異的解釋指南。在整理遺傳疾病相關變異時，推薦參考ACMG的遺傳疾病變異分類指導。而其它臨床基因組檢測腫瘤、病原體診斷，實驗平臺需要依據自己專業(yè)的判斷來對變異進行分類或當相應的指導文件出現時，遵循其分類原那么。注意變異位點對應的轉錄本ID，一些變異位點會作用于特定的轉錄本，影響該轉錄本的翻譯及功能。因此在進行如此變異位點描述時，需要指明這些位點影響的具體轉錄本ID。為防止結果的混淆，在撰寫臨床結果報告時，需要詳細列出每個變異位點對應的轉錄本登錄號和版本號及對應的蛋白質編號。對于遺傳疾病，常見的變異分類可分為5大類：1致病的

28、；2可能致病的；3臨床意義未明；4可能良性的；5良性。而對于其他腫瘤或病原體診斷中，目前還沒有一個標準的可參考的分類指導文件，以往的結果描述中，所用到的專業(yè)術語也是各式各樣，大致的描述形式為標明序列變化的結果，包括致病的、有毒的、疾病相關的，并加上一些修飾描述，如可能的、臨床意義未明或未確認possible, probably, and likely, or VUS and VOUS。在描述序列變異造成的臨床影響時，實驗平臺需要充分考慮到疾病發(fā)生原因，不同人群發(fā)病率、外顯率及功能學實驗。推薦充分利用一些公共數據庫Exome Variant Server，1000G與自己的數據做一些關聯比擬。對

29、于一些大型的外顯子組或基因組測試來說，評估一個基因對疾病的影響程度，了解不同變異類型對疾病的奉獻度及這些變異的遺傳模式是非常關鍵和重要的。推薦參考的數據庫如下表：額外的遺傳結果報告實驗室需要制定相關政策方案用來報道在檢測過程中出現的與臨床病癥關聯不大的額外的遺傳發(fā)現在分析單個基因、panel、外顯子組或基因組中，會發(fā)現一些與檢測表型無關的具有重要臨床意義的遺傳結果。這種現象同樣也會出現在對某種特定疾病進行特定分析的情況中目標區(qū)域捕獲、特定的生物信息分析。因此，在利用NGS技術進行臨床檢測時，實驗室需要意識到這種額外的具有臨床意義的結果出現，并需要制定相關的方案來決定這些額外的結果是否或什么時候

30、應該被報告。最近發(fā)布的ACMG關于報道醫(yī)學上可行的偶然發(fā)現結果建議書中列出了一個最少量的基因列表，指明如果一個的變異位點被發(fā)現，這個結果就應當被報告。實驗室也需要根據自身的權益制定對額外結果報告的方案政策，如果一個實驗室決定不報道這些發(fā)現或只報道一小局部變異結果，那這些決定政策需要在實驗平臺結果報告中進行聲明。實驗平臺需要基于道德倫理之上去決定是否告之病人某些確定的遺傳信息。透露這些額外結果的風險等級取決于疾病的嚴重程度、臨床可干預性和其它一些風險-利益指標例如二型糖尿病，心血管疾病相對于癌癥、孟德爾遺傳疾病而言，風險等級較低。實施大規(guī)模臨床樣本NGS檢測的實驗室需要意識到一些醫(yī)學和倫理知識學

31、習的重要性，在整理NGS數據報告和制定結果報告方案時要充分考慮這些因素。NGS檢測轉接外包政策實驗室需要制定相關政策用以選擇NGS檢測轉接外包的實驗室或其它效勞商。轉接外包的內容可以包括整個NGS檢測步驟，也可以是單純的實驗操作局部或數據分析局部NGS臨床檢測相對于傳統(tǒng)實驗室檢測模式而言更具復雜性和挑戰(zhàn)性，因此越來越多的實驗室開始將檢測的局部工作外包到一些其他實驗室或效勞商。隨著這種外包趨勢越來越明顯，NGS Work Group在NGS checklist 2022版本中增加了對檢測外包政策的要求。檢查表強調實驗室主任或負責人對外包實驗室或效勞商的選擇具有直接的責任。因此也希望實驗室主任或負責人能夠保證這些承接NGS臨床實驗