不同土壤濕度條件下綠色木霉對尖孢鐮刀菌數(shù)量的影響

1、不同土壤濕度條件下綠色木霉對尖孢鐮刀菌數(shù)量的影響香蕉枯萎病是由尖孢鐮刀菌 ( Fusarium oxysporum Schl. )引起的一種毀滅性的土傳病害， 已嚴(yán)重危害到香蕉的生產(chǎn)及香蕉產(chǎn)業(yè)。目前單純采用化學(xué)藥劑防治香蕉枯萎病的效果并不理想，并且隨著大量使用化學(xué)農(nóng)藥產(chǎn)生了環(huán)境污染、 農(nóng)藥殘留及土壤微生物群落結(jié)構(gòu)失衡等令人擔(dān)憂的問題； 因此很多學(xué)者把注意力轉(zhuǎn)移到生物防治上。木霉( Trichoderma spp. )作為一種重要的植病生防菌一直受到普遍關(guān)注。 綠色木霉 ( T. viride) 廣泛分布于自然界，可在多種營養(yǎng)基質(zhì)上快速生長， 對多種植物病原菌有重寄生作用， 能有效地競爭營養(yǎng)和生

2、存空間， 還可以產(chǎn)生抗生素和攻擊多種病原所需要的酶， 所以被認(rèn)為是一種很有開發(fā)潛力的生防菌。近年來， 國內(nèi)外學(xué)者對木霉防治香蕉枯萎病進(jìn)行了大量的研究，包括拮抗菌株的分離篩選、室內(nèi)盆栽試驗(yàn)及小區(qū)試驗(yàn)等，但是很少研究關(guān)注土壤理化性質(zhì)對木霉防治香蕉枯萎病的影響。 各種研究表明， 土壤的理化性質(zhì)(包括土壤的含水量、土壤顆粒的大小、土壤的溫度、土壤中金屬離子的含量等) 及其微生態(tài)特性對土壤中的鐮刀菌都具有較大的影響。 本試驗(yàn)初步研究了木霉在不同土壤濕度條件下自身數(shù)量變化及對尖孢鐮刀菌數(shù)量的影響，為木霉田間防控香蕉枯萎病提供理論依據(jù)。材料與方法試驗(yàn)材料供試尖抱鐮刀菌為香蕉枯萎病病原菌（FOC4B2）以及綠

3、色木霉（H06 ）菌株均為中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)研究所微生物資源研究與利用課題組分離篩選保存菌株。 供試土壤為從健康香蕉園中挖取的耕層土壤，土壤性狀： pH 6.2 ，有機(jī)質(zhì)含量為 16.5 g/kg ， 全氮 （N） 784.6 mg/kg ， 全磷（P） 315.1 mg/kg ，全鉀（K） 19 637.9 mg/kg ， 121 滅菌 30 min 。試驗(yàn)方法病原菌從培養(yǎng) 7 d 的 FOC4B2 菌株平板上挑一塊菌餅接種于 PDB（土豆葡萄糖培養(yǎng)液）培養(yǎng)液中，置于 180 r/min 轉(zhuǎn)速的搖床中28 C振蕩培養(yǎng)4 d,過濾收集抱子懸浮液，加到試驗(yàn)土壤中，攪 拌均勻，土壤中

4、最終的 FOC4B2抱子含量為1.95 X10W/g。木霉將分離純化的綠色木霉菌種接種于 PDA 培養(yǎng)基平板，放入28 C培養(yǎng)箱，培養(yǎng)45 d,待菌絲長滿平板并產(chǎn)抱時(shí)，配制抱子懸浮液，在病原菌加到土壤的第 3 天，加到土壤中，土壤中的木霉含量約為107個(gè)/g土壤濕度設(shè)置供試土壤均設(shè)定3 個(gè)土壤濕度，即：30%、 50%和 70%的土壤絕對含水量，每個(gè)土壤濕度設(shè)1 個(gè)處理（同時(shí)接種病原菌 B2 和綠色木霉H06）、1個(gè)對照1 （只接種病原菌 B2）和1個(gè)對照2（只接種綠色木霉H06 ） ，每個(gè)處理3 個(gè)重復(fù)（每個(gè)重復(fù)的土樣400 g裝盆，直徑X高=7.8 cm X 10 cm）。溫室大棚室溫自然

5、培養(yǎng)，每天噴水稱重，保持土壤含水量，每隔 7 d 取土樣檢測。菌量檢測用平板菌落計(jì)數(shù)法， 木霉 H06 用孟加拉紅培養(yǎng)基檢測， 尖孢鐮刀菌用特異性培養(yǎng)基檢測。統(tǒng)計(jì)分析采用 Microsoft Excel 2003 處理數(shù)據(jù)， SPSS11.5 軟件進(jìn)行差異顯著性分析。結(jié)果與分析不同土壤濕度條件接種木霉對土壤中鐮刀菌的影響在土壤濕度30%條件下，接種木霉后前3 周能顯著降低土壤中鐮刀菌的含量（圖 1a） ；在土壤濕度50%和 70%條件下，接種木霉后前 4 周均能顯著降低鐮刀菌的含量（圖 1b ， c） 。不同土壤濕度對木霉含量的影響在不同土壤濕度條件下，與對照 2 （ CKH06 ）相比，處理

6、（ B2H06 ） 中木霉的含量沒有顯著性變化 （圖 2 ） ， 除了在土壤濕度 30%條件下，第5 周處理（ B2H06 ）中木霉的孢子含量顯著低于對照 （圖2a ） 。 前 3 周， 3 個(gè)濕度條件下， 不管是對照2（ CKH06）還是處理（ B2H06 ） 中木霉數(shù)量沒有明顯變化， 在第 4 、 5 周， 孢子數(shù)量下降。不同處理時(shí)間鐮刀菌和木霉含量與土壤濕度的相關(guān)性由表 1 可知，第 1 、 2 周， 對照 1（ CKB2） 與處理 （ B2H06 ）的鐮刀菌含量與土壤濕度呈顯著正相關(guān)； 在第 5 周， 處理 （ B2H06 ） 的鐮刀菌和木霉含量與土壤濕度呈顯著負(fù)相關(guān)。不同土壤濕度條件

7、鐮刀菌和木霉含量與處理時(shí)間的相關(guān)性由表2可知，在不同土壤濕度條件下，對照 1 （CKB2）與處理（B2H06）的鐮刀菌含量與處理時(shí)間呈極顯著負(fù)相關(guān)。除 30%土壤濕度的對照2 （CKH06）的木霉含量外，其余處理的木霉含 量都與處理時(shí)間呈極顯著負(fù)相關(guān)。討論本研究對綠色木霉在不同土壤濕度條件下對尖孢鐮刀菌的影響進(jìn)行了探討。結(jié)果表明，在不同土壤濕度條件下，木霉對尖孢鐮刀菌的影響是一致的； 即前 4 周， 在試驗(yàn)的 3 種不同土壤濕度條件下， 接種木霉均能有效降低尖孢鐮刀菌的含量， 這與吳石平關(guān)于木霉降低辣椒根際尖孢鐮刀菌數(shù)量的結(jié)果一致， 其機(jī)理在于木霉生命力極強(qiáng)、繁殖速度快， 對生存空間和營養(yǎng)資源

8、競爭能力極高， 可排斥和抑制尖孢鐮刀菌。 第 5 周， 3 種不同土壤濕度條件下， 接種木霉均不能顯著降低尖孢鐮刀菌數(shù)量， 這可能是由于后期木霉自身數(shù)量的下降而導(dǎo)致的。有關(guān)土壤濕度對鐮刀菌及木霉數(shù)量的影響， 幾乎未見研究報(bào)道。 本試驗(yàn)第 1 、 2 周， 處理 （ B2H06） 的鐮刀菌含量隨著土壤濕度的增加而增加， 這可能與早期尖孢鐮刀菌分生孢子萌發(fā)時(shí)濕度越高， 萌發(fā)率越高有關(guān)。 第 3 、 4 周， 土壤濕度對處理（ B2H06 ）的鐮刀菌含量影響不大；第 5 周，處理（B2H06 ）的鐮刀菌含量隨著土壤濕度的增加而降低。 土壤濕度對木霉數(shù)量的影響趨勢為：第14周，土壤濕度對處理（B2H06）的木霉含量影響不大；第5 周，隨著土壤濕度的增加處理（ B2H06 ）的木霉含量降低。在同一濕度條件下， 不同處理時(shí)間， 木霉自身數(shù)量前3 周沒有明顯波動， 后兩周數(shù)量下降。 這和杜嬋娟關(guān)于木霉在土壤中的存活數(shù)量呈先上升后下降的趨勢的結(jié)果部分不一致， 這可能與本研究木霉在土壤里的初始數(shù)量