GB 31655-2021 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 哺乳動(dòng)物體內(nèi)堿性彗星試驗(yàn)

標(biāo)準(zhǔn)解讀

GB 31655-2021食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《哺乳動(dòng)物體內(nèi)堿性彗星試驗(yàn)》為評(píng)估食品及其成分在哺乳動(dòng)物體內(nèi)引起的DNA損傷提供了一套標(biāo)準(zhǔn)化方法。該標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了試驗(yàn)原理、試驗(yàn)材料、試驗(yàn)步驟、結(jié)果判定及數(shù)據(jù)處理等方面的要求，旨在確保測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確性和可比性，進(jìn)而評(píng)價(jià)食品的安全性。

試驗(yàn)原理：

堿性彗星試驗(yàn)是一種靈敏的生物檢測(cè)技術(shù)，用于檢測(cè)單個(gè)細(xì)胞水平上的DNA斷裂情況。通過(guò)將細(xì)胞暴露于電場(chǎng)中，受損的DNA形成彗星狀尾巴，其長(zhǎng)度和形狀反映了DNA損傷的程度。本標(biāo)準(zhǔn)采用哺乳動(dòng)物（如大鼠、小鼠）作為試驗(yàn)?zāi)Ｐ?，評(píng)估食品或食品成分潛在的遺傳毒性。

試驗(yàn)材料：

• 試驗(yàn)動(dòng)物：需符合特定的健康與年齡條件。
• 細(xì)胞樣本：通常取自肝臟、腎臟等靶器官。
• 試驗(yàn)樣品：待檢測(cè)的食品或食品成分需按一定濃度準(zhǔn)備。

試驗(yàn)步驟：

1. 樣品處理：將試驗(yàn)動(dòng)物暴露于待測(cè)樣品，確定合適的劑量和暴露時(shí)間。
2. 組織采集：收集指定器官的細(xì)胞樣本。
3. 細(xì)胞鋪片：將細(xì)胞均勻鋪展于載玻片上。
4. 細(xì)胞裂解與堿性處理：去除蛋白質(zhì)，使DNA暴露。
5. 電泳：在電場(chǎng)作用下，受損DNA向陽(yáng)極遷移形成彗星。
6. 染色與分析：對(duì)形成的彗星進(jìn)行染色，通過(guò)顯微鏡觀察并拍照記錄。
7. 圖像分析：利用專業(yè)軟件測(cè)量彗星尾部長(zhǎng)度等參數(shù)，評(píng)估DNA損傷程度。

結(jié)果判定與數(shù)據(jù)處理：

• 根據(jù)彗星尾部的長(zhǎng)度和/或其他形態(tài)學(xué)參數(shù)，量化DNA損傷水平。
• 設(shè)定陰性對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組，用以校驗(yàn)試驗(yàn)的有效性和可靠性。
• 應(yīng)對(duì)多組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，判斷樣品是否引起顯著的DNA損傷。

該標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)調(diào)了實(shí)驗(yàn)操作的規(guī)范性和數(shù)據(jù)分析的嚴(yán)謹(jǐn)性，為食品安全評(píng)估提供了科學(xué)依據(jù)，有助于監(jiān)管機(jī)構(gòu)、科研單位及生產(chǎn)廠商評(píng)估食品的遺傳毒性風(fēng)險(xiǎn)，保障公眾健康。

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