免疫診斷講稿

1、關于免疫診斷第一張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 抗原或抗體的檢測一、原理： 物質基礎： 抗原的表位與抗體的高變區(qū)分子間結構互補性與親和性。 反應的階段性： 特異性結合階段 可見反應階段第二張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月特異性： 比例性：可逆性：抗原抗體非共價建前帶后帶等價帶二、抗原抗體反應的特點：第三張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月1.凝集反應： 顆粒性抗原(細菌、紅細胞等)與相應抗體結合，在有電解質存在時，比例適當，形成肉眼可見的凝集團塊。凝集沉淀標記技術(二)抗原或抗體的檢測方法：第四張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月（1）直接凝集： 玻片法

2、：定性檢測未知抗原 如ABO血型鑒定、細菌鑒定 試管法：定量檢測未知抗體 如肥達氏反應直接凝集反應第五張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月（2）間接凝集：載體顆粒（RBC、乳膠等）間接凝集：包被已知抗原，如Coombs test反向間接凝集：包被已知抗體已知第六張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月間接凝集抑制反應：妊娠乳膠試驗(HCG)標本第七張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月2.沉淀反應： 可溶性抗原（血清蛋白、細胞裂解液等）與相應抗體結合后，在有電解質存在時，比例適當，出現(xiàn)肉眼可見的沉淀物。 半固體瓊脂凝膠為介質。第八張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月原理:檢測

3、抗原單向免疫擴散：Ab+瓊脂制板打孔AgNSAgAg加樣觀察（含量）第九張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月沉淀環(huán)Ag擴散Ab固定于瓊脂單向免疫擴散第十張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月（2）雙向免疫擴散：瓊脂AbNS第十一張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月(3)對流免疫電泳：方法和原理：雙擴電泳NSAgAb第十二張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月（4）免疫電泳原理：電泳后雙擴應用：血清蛋白種類分析第十三張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月3.免疫標記技術： 標記物：熒光素、酶、放射性核素等 特點：敏感性高，定性、定位、定量第十四張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于

4、2022年6月（1）免疫熒光法： FITC、PE應用：檢測CD分子；傳染病和自身免疫病診斷。第十五張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月FITC標記第十六張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月（2）酶免疫測定：HRP、AP *酶免疫組化法： 測定組織中或細胞表面抗原 *酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）： 測定可溶性抗原或抗體第十七張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月ELISA原理： 將已知抗原或抗體吸附于固相載體（聚苯乙烯微量反應板）表面，使抗原抗體反應在固相表面進行，用洗滌液將游離成分洗去。第十八張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月方法：*雙抗體夾心法： 檢測抗原Ag底物包

5、被標本洗滌酶標抗體第十九張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月*間接法： 檢測抗體洗滌洗滌洗滌標本觀察結果第二十張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月*生物素-親和素系統(tǒng)（BAS）ELISA： 生物素標記抗體，酶標記親和素*抗原競爭抑制法：標本第二十一張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月（3）放射免疫測定法（RIA）： 131I、125I標記，微量物質測定或放射自顯影第二十二張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月（4）免疫印跡Western Blot覆蓋轉印硝酸纖維素膜（去垢劑）將分子大小不同的蛋白質分開41 24120第二十三張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月稀釋的

6、抗凝血淋巴細胞分離液淋巴細胞分離液第二節(jié) 淋巴細胞的測定外周血單個核細胞（PBMC）分離： 密度梯度分離法血漿血小板PBMC紅細胞粒細胞單核細胞淋巴細胞90%第二十四張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月淋巴細胞亞群的分離與鑒定：尼龍毛分離法：E花結實驗：CD2/LFA-2第二十五張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月利用表面標志分離淋巴細胞亞群免疫熒光第二十六張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月流式細胞術： 樣品進入孔待分離單細胞懸液熒光標記抗體產(chǎn)生散射光光電倍增管發(fā)射熒光根據(jù)細胞表面電荷第二十七張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月Lc功能測定：1.淋巴細胞增殖/轉化試驗：原理： 有絲分裂原等非特異刺激T、B細胞向淋巴母細胞轉化、增殖。方法： MTT法：線粒體琥珀脫氫酶MTT（噻唑鹽）甲臜顆粒（紫藍色）第二十八張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月氚標記的胸腺嘧啶核苷放射能絲裂原淋巴細胞增殖實驗3H-TdR摻入法MTT用酶標儀測定細胞培養(yǎng)OD值第二十九張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月2. T細胞介導的細胞毒試驗：CTL待檢殺傷靶細胞標記第三十張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月3. B