校內(nèi)課題53項(xiàng)含醫(yī)院總公司藥學(xué)院周長征

1、受理：山東省高校中抗協(xié)同創(chuàng)新中心項(xiàng)目可行性項(xiàng)目名稱：等十味中藥的抗譜研究項(xiàng)目責(zé)任：山東中大學(xué)項(xiàng)目：周長征項(xiàng)目年限：2015 年 01 月至 2016 年 12 月填報(bào)日期：2015 年 01 月 18 日填寫說明為建立、規(guī)范的協(xié)同創(chuàng)新項(xiàng)目信息管理制度，加強(qiáng)項(xiàng)目信息的管理，特設(shè)計(jì)山東省高校中抗協(xié)同創(chuàng)新中心項(xiàng)目可行性（申報(bào)書）格式和填寫要求。一、請嚴(yán)格按照表中要求填寫各項(xiàng)。二、項(xiàng)目可行性可以由一家組織，也可以由多家聯(lián)合組織，牽頭為項(xiàng)目組織實(shí)施的責(zé)任。每個(gè)項(xiàng)目只能有一家責(zé)任和一個(gè)組長。三、項(xiàng)目可行性由項(xiàng)目責(zé)任編寫，并報(bào)中抗協(xié)同創(chuàng)新中心管理匯總；四、項(xiàng)目可行性中第一次出現(xiàn)外文名詞時(shí)，要寫清全稱和縮寫，

2、再出現(xiàn)同一詞時(shí)可以使用縮寫。五、組織機(jī)構(gòu)代碼是指項(xiàng)目責(zé)任組織機(jī)構(gòu)代碼證上的標(biāo)識代碼，它是由組織機(jī)構(gòu)代碼管理中心所賦予的唯一法人標(biāo)識代碼。六、編寫應(yīng)客觀、填報(bào)材料，尊重他人知識，遵守國家有關(guān)知識。在項(xiàng)目可行性中他人研究成果時(shí)，必須以腳注或其他方式注明出處，目的應(yīng)是介紹、評論與自己的研究相關(guān)的成果或說明與自己的研究相關(guān)的技術(shù)問題。對于、篡改科學(xué)數(shù)據(jù)，他人著作、或者剽竊他人科研成果等科研不端行為，一經(jīng)查實(shí)，將記入信用。七、此表為項(xiàng)目可行性的基本信息，請務(wù)必填寫正確。一、項(xiàng)目基本信息項(xiàng)目名稱等十味中藥的抗譜研究預(yù)計(jì)完成時(shí)間2016 年 12 月預(yù)期成果類型得到抗活性成分、專利責(zé)任信息名稱性質(zhì)通訊地址所

3、在地區(qū)主管部門組織機(jī)構(gòu)代碼傳真號碼成立時(shí)間電子信箱項(xiàng)目組長信息周長征男出生日期1966-06教授最高學(xué)位從事專業(yè)中藥學(xué)固定89628968移動(dòng)傳真號碼電子信箱證件類型證件號碼聯(lián)合信息序號1山東省醫(yī)學(xué)23項(xiàng)目經(jīng)費(fèi)來源（萬元）總經(jīng)費(fèi)40項(xiàng)目經(jīng)費(fèi)40企業(yè)投資其他二、項(xiàng)目簡介簡述項(xiàng)目目標(biāo)和內(nèi)容，限 500 字以內(nèi)研究目標(biāo)：對、水蛭、蠐螬、地衣、神曲、蚯蚓、蜈蚣、連翹、藿香、進(jìn)行提取分離，配伍研究，建立抗譜，完善相應(yīng)庫，得到抗活性成分。確定 12 個(gè)療效確切的抗中藥組分配方，并確定其最佳配伍關(guān)系。研究內(nèi)容：將等十味中藥進(jìn)行提取，進(jìn)行抗篩選，確定抗譜。分別用水、乙醇、乙酸乙酯，進(jìn)行提取，并進(jìn)行初步的抗活性

4、實(shí)驗(yàn)，完善相應(yīng)抗庫，確定有抗活性的藥物，確定活性部位。并選擇最佳的追蹤，進(jìn)行活性追蹤。提取物的進(jìn)一步分離、純化，活性追蹤，得到抗的活性物質(zhì)將上述粗體的有活性的提取物進(jìn)行大孔樹脂、聚酰胺、凝膠等吸附劑和不同的洗脫方法進(jìn)行分離，并活性追蹤，確定其最佳的抗部位，測定其抑毒指數(shù)。將有效部位進(jìn)行高效液相色譜分離，根據(jù)分離情況，繼續(xù)純化。將活性部位分別用不同的色譜柱分離和型液相色譜分離，同時(shí)采用細(xì)胞病變法，檢測其抗病毒活性，確定抗指數(shù)?？沟幕钚晕镔|(zhì)的分子量和結(jié)構(gòu)測定對獲得的活性物質(zhì)分別采用物理、化學(xué)、紫外色譜、質(zhì)譜、核磁、紅外光譜等方法確定其分子量和化學(xué)結(jié)構(gòu)，從而確定抗的活性物質(zhì)。確定療效確切的抗中藥組分

5、配方將篩選的抗有效成分（部位）進(jìn)行配伍組合，采用細(xì)胞病變法，檢測配伍藥物對的體外的滅活作用，根據(jù)體外抗實(shí)驗(yàn)，確定抑毒指數(shù)，優(yōu)化抗中藥組分配方。二、項(xiàng)目立項(xiàng)的必要性分析2.1 立項(xiàng)的意義上呼吸道 是危害人類健康的 疾病，在呼吸道 中，絕大部分是由所引起，據(jù)統(tǒng)計(jì)，90%以上急性呼吸道 由 引起。引起上呼吸道 的有 100 多種，常見的有正粘科 （如流感 A、B）、副粘科 （如呼吸道合胞 ）、小 RNA （如鼻 ）、腺 、皰疹科 等。呼吸道合胞 （respiratorysyscytial ，RSV）是在嬰幼兒中引起嚴(yán)重呼吸道 的最重要的病原因子，典型的是細(xì)支氣管炎和細(xì)支氣管 ，但在較大兒童和成人主要

6、引起上呼吸道 。在嬰幼兒住院病例中，有 4050的毛細(xì)支氣管炎和 25的 是 RSV 所致。每年冬季均有流行，至 4 歲時(shí)，幾乎每個(gè)人都受過 。流行 冒 （influenza ），是正粘 科（Orthomyxoviridae）的代表種，簡稱流感 ，包括人流感 和動(dòng)物流感 ，人流感 分為甲（A）、乙（B）、丙（C）三型，是流行 冒（流感）的病原體。其中甲型流感 抗原性易發(fā)生變異，多次引起世界性大流行。單純皰疹屬于皰疹科 a亞科，質(zhì)粒大小約 180 納米。根據(jù)抗原性的差別目前把該分為 1 型和 2 型。1 型主要由口唇病灶獲得，2 型可從生殖器病灶分離到。是由于人與人的接觸。從發(fā)生后四個(gè)月到數(shù)年被

7、的人數(shù)可達(dá)總數(shù)的 5090%，是最易人的一種，但在臨床僅有一部份發(fā)病。此病可分為：口唇性皰疹、皰疹性角膜炎、皰疹性皮膚炎、皰疹、卡波西病等，有時(shí)也是腦膜炎、腦炎的病因?？诖讲堪捳钜话爿^易，同時(shí)因日曬、發(fā)熱等種種的刺激而引起復(fù)發(fā)。該可在雞胚絨毛上及人、猴、雞等的動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞中大量地增殖。另外，2 型對田鼠細(xì)胞等有轉(zhuǎn)化作用。還懷疑皰疹與人類的宮頸癌有關(guān)。（Coxsackie ）是一種腸 （entero ）分為 A 和 B 兩類，是一類常見的經(jīng)呼吸道和消化道 的 ， 后人會(huì)出現(xiàn)發(fā)熱、打噴嚏、咳嗽等感冒癥狀。妊娠期 可引起非麻痹性脊髓灰質(zhì)炎 變，并致和致畸?？够瘜W(xué)藥物治療染療效不夠理想，存在潛在的毒副

8、作用，并且已經(jīng)產(chǎn)生了大量的耐藥株，激素、支氣管擴(kuò)張劑療效又不肯定。中藥不僅具有耐藥性低、副作用和不良反應(yīng)少等優(yōu)點(diǎn)，而且還有抑制、調(diào)節(jié)免疫功能、改善血液循環(huán)、解熱鎮(zhèn)痛、及抗菌消炎等綜合功效，其在防治 RSV方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢和廣闊的發(fā)展前景。因此，近年來國內(nèi)外均開展了抗 RSV中草藥的研究。中藥具有成分復(fù)雜，但副作用少，藥源豐富，價(jià)格低廉，且作用靶點(diǎn)多的特點(diǎn)，并且重視-機(jī)體-中藥三者的辨證關(guān)系，以清除體內(nèi)病原體為目的，同時(shí)改善機(jī)體整體狀態(tài)，特別是能通過調(diào)體特異性和非特異性免疫功能來增強(qiáng)抗感染的能力，而具有更廣泛的適應(yīng)性和優(yōu)越性，以及展現(xiàn)了廣闊的研究前景。2.2 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢上述所致上

9、呼吸道屬中醫(yī)學(xué)外感熱病范疇，是由外感之邪侵襲機(jī)體所致，治療原則為扶正祛邪，通過抗、清熱抗及增強(qiáng)機(jī)體免疫力，其作用機(jī)制是通過阻斷繁殖過程中的吸附、穿入、成熟中的某一環(huán)節(jié)而直接抑制并通過提高機(jī)體的免疫功能間接抑制。目前對抗流感中草藥的機(jī)制研究比較清楚的成分有 2 類：多酚類物質(zhì)，證明其可抑制流感蛋白質(zhì)和RNA，同時(shí)也可抑制流感的吸附作用；黃酮類物質(zhì)，其機(jī)制是抑制流感唾液酸酶的活性和抑制膜融合作用。主要含蛋白質(zhì)，脂肪,尚含多種氨基酸以及鐵、鋅、銅、錳、鉻等微量元素,體表的白粉中含草酸銨。僵蠶醇水浸出液對小鼠、家兔均有用；其提取液在體內(nèi)、外均有較強(qiáng)的抗凝作用；僵蠶粉有較好的、抗驚厥作作用；體外試驗(yàn)，對

10、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌有輕度的抑菌作用，其醇提取物體外可抑制肝癌細(xì)胞的呼吸，可用于直腸瘤型息肉的治療。水蛭主要含蛋白質(zhì),還含有鐵、錳、鋅等多種微量元素，新鮮水蛭唾液中含有水蛭素，水蛭唾液中還有組胺樣物質(zhì)、肝素及抗血栓素等，與水蛭素有協(xié)同作用。具有抗凝血、改善微循環(huán)和抗早孕作用。蠐螬主要含蛋白質(zhì)、脂肪和多種微量元素。蠐螬水浸液 1:1000 以上能興奮離體兔；1:100 能抑制離體兔腸管。1:10000 濃度對兔冠狀、離體兔耳、肺皆有收縮作用；更高濃度(1:1000 以上)還能收縮內(nèi)服。大劑量有利尿作用，但對血壓無影響(急性兔試驗(yàn))。1:1000 濃度能興奮離體心臟，濃度更導(dǎo)致舒張期停止。地衣

11、含地衣多糖和地衣酚酸等主要成分，還含有一些其他類化合物，如醌類，目前從地衣中已發(fā)現(xiàn)的醌類化合物約 66 個(gè)，包括苯醌、萘醌、蒽醌、菲醌、聯(lián)苯醌、苯醌等。近年藥理研究發(fā)現(xiàn)，地衣具有抗腫瘤、抗、抗輻射、抗菌、抗氧化等多方面的生物活性。神曲含酵母菌、酶類、維生素 B 復(fù)合體、麥角固醇、揮發(fā)油、苷類等，酵母菌為中藥神曲中的主要有益菌。神曲具有對脾虛小鼠腸道菌群調(diào)整作用并可促進(jìn)損傷腸組織的恢復(fù)，有促進(jìn)消化、增進(jìn)食欲的作用。蚯蚓體內(nèi)含有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸及酶類, 還含有解熱堿、嘌呤、膽堿、亞油酸和多種維生素及微量元素, 具有活血化瘀、溶栓降壓、清熱平肝、消炎止痛、平喘止咳、抗腫瘤等作用。蜈蚣含有兩種似蜂

12、毒的毒性成分,即組織胺和溶血蛋白質(zhì),還含多種脂肪酸、脂性皂化物成分、微量元素、氨基酸、糖類和以及 a1、a2 和 r 球蛋白等成分。蜈蚣所含組胺樣物質(zhì)及溶血性蛋白適當(dāng)劑量可擴(kuò)張 ,降低血液粘滯度,改善局部組織因長期血循不暢缺氧所致的高凝血狀態(tài), 利于病變組織細(xì)胞的復(fù)原，還具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、解痙、抗腫瘤、抗炎和增強(qiáng)胃腸功能等作用。連翹主要含有揮發(fā)油類、苯乙醇苷類、木脂素類、黃酮類、酚酸類和三萜類成分。具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗 、抗腫瘤、抗過敏以及解熱鎮(zhèn)痛等作用。廣藿香含揮發(fā)油約 1.5，油中主要含有較多的單萜烯、倍半萜烯、醇類、酮類、醛類和烷酸類化合物，生物堿類包括廣藿香吡啶、表愈創(chuàng)吡啶等，還含

13、有黃酮類成分、丁香油酚、桂皮醛、苯 、木栓酮、表木栓醇、 果酸、-谷甾醇和胡蘿卜苷等。具有調(diào)節(jié)胃腸道功能和抗菌作用。根含 皂苷、 皂苷、白樺脂酸、胡蘿卜苷、原 素等成分。具有抗 原蟲、抗 、抗菌、抗 、 、鎮(zhèn)痛及抗痙攣等作用。三、項(xiàng)目內(nèi)容和研究方案研究目標(biāo)和考核指標(biāo)研究目標(biāo)：對 、水蛭、蠐螬、地衣、神曲、蚯蚓、蜈蚣、連翹、藿香、 進(jìn)行提取分離，配伍研究，建立抗 譜，完善相應(yīng) 庫，得到抗 活性成分。確定 12 個(gè)療效確切的抗 中藥組分配方，并確定其最佳配伍關(guān)系?？己酥笜?biāo)：提取與分離每味中藥的藥效部位和組分，分別進(jìn)行抗 譜篩選，并得到 23 個(gè)活性成分。發(fā)現(xiàn) 12 個(gè)療效確切的抗 中藥組分配方，并

14、確定其最佳配伍關(guān)系。 相關(guān) SCI 累計(jì) IF3，或取得發(fā)明專利 2 項(xiàng)，根據(jù)課題研發(fā)任務(wù)分別建設(shè)抗 藥效物質(zhì)提取純化與發(fā)現(xiàn)技術(shù)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)、抗中藥活性篩選技術(shù)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)，重點(diǎn)培養(yǎng) 12 名青年技術(shù)骨干 ，培養(yǎng) 35 名、23 名本科生。研究內(nèi)容、研究方案分離純化將 等十味中藥進(jìn)行提取，進(jìn)行抗 篩選，確定抗 譜。 分別用水、乙醇、乙酸乙酯，進(jìn)行提取，采用細(xì)胞病變法，確定有抗 或性的藥物，完善其抗 庫的同時(shí)，確定活性部位，并選擇一種最佳的 ，進(jìn)行活性追蹤。提取物的進(jìn)一步分離、純化，活性追蹤將上述粗體的有活性的提取物進(jìn)行大孔樹脂、聚酰胺、凝膠等吸附劑和不同的洗脫方法進(jìn)行分離，采用細(xì)胞病變法，追蹤其有效部

15、位，測定其抗 指數(shù)，根據(jù)抗 指數(shù)，確定下一步的分離工藝。有效部位的進(jìn)一步分離、純化，得到抗 活性物質(zhì)將有效部位進(jìn)行高效液相色譜分離，根據(jù)分離情況，若出現(xiàn)了單一的峰，可以選擇 型液相色譜進(jìn)行分離， 還是比較雜，將活性部位分別用不同的色譜柱分離和 型液相色譜分離，同時(shí)采用細(xì)胞病變法，檢測其抗 活性，確定抗 指數(shù)。藥物提取物抗 示蹤采用細(xì)胞病變法，檢測各藥物提取物體外抗 活性。株EV71（腸道 ）：分離自濟(jì)南市傳染病醫(yī)院手足口病患者，經(jīng)全序列測定證實(shí)為 EV71；RSV（呼吸道合胞 ）：long 株，2000 年 10 月引自中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院 所毒種室；HSV-1（皰疹 ）：F 株，1996 年引

16、自山東醫(yī) 學(xué)微生物學(xué)教研室； （流感 ）：地方分離株，2010 年引自山東省防疫站流感室；Cox-B3（）：Nancy 株，2010 年引自山東省防疫站流感 室。細(xì)胞株MA104：恒河猴胚胎腎細(xì)胞，為 EV71 敏感細(xì)胞；Hep2：人喉癌上皮細(xì)胞，為 RSV、HSV-1、Cox-B3 敏感細(xì)胞；MDCK：犬腎細(xì)胞，為 敏感細(xì)胞3.2.2.2 活化EV71將保存的EV71 毒種0.1mL 接種于已經(jīng)長成單層的MA104 細(xì)胞上，35 、5% CO2培養(yǎng)，鏡下觀察細(xì)胞病變(cytopathic effect, CPE)，當(dāng) CPE 達(dá)到 90%，收集。收獲的凍融 3 次，吹打離心（10000 r/

17、min，20 min），定量分裝，80 冰箱凍存?zhèn)溆谩A104 正常細(xì)胞EV71 病變形態(tài)RSV、HSV-I、Cox-B3將保存的 RSV、HSV-1、Cox-B3 毒種 0.1 mL 接種于已經(jīng)長成單層的 Hep2 細(xì)胞上，35 、5% CO2 培養(yǎng)，鏡下觀察 CPE，當(dāng) CPE 達(dá)到 90%，收集。收獲的 凍融 3 次，吹打離心（10000 r/min，20 min），定量分裝，-80 冰箱凍存?zhèn)溆?。Hep2 正常細(xì)胞HSV-1 病變形態(tài)RSV 病變形態(tài)Cox-B3 病變形態(tài)取-80 保存的毒種 1mL 加入 50 L胰酶，置 35、5% CO2 作用 1h，將消化過的液 1 mL 接種

18、于已經(jīng)長成單層的 MDCK 細(xì)胞上，35、5% CO2 孵育1h，加入 MDCK 細(xì)胞維持液，35 、5% CO2 培養(yǎng)，鏡下觀察 CPE，當(dāng)CPE 達(dá)到 90%，收集。收獲的凍融 3 次，吹打離心（10000 r/min，20 min），取上清液定量分裝，-80冰箱凍存?zhèn)溆谩?.2.2.3毒力測定用維持液將上述所得液做 10 倍比系列稀釋，縱向重復(fù) 3 孔，橫向依次接種在 96內(nèi)單層細(xì)胞上，35 、5% CO2 培養(yǎng)，細(xì)胞出現(xiàn)病變者判為藥物毒性，終止培養(yǎng)，中性紅染色，A540 值。首先以如下公式（1）、公式（2）計(jì)算獲得細(xì)胞病變率：如果 1 組 TI 最提示藥物是在粘附穿入階段發(fā)揮抑制作用；

19、如果 4 種情作用，阻斷了其表達(dá)；如果 3況沒有明顯差別，則提示藥物對具有直接組 TI 值最的抑制作用。提示，藥物與結(jié)合后，中和了毒力，可能是對其有一定3.2.4 有效活性物接種體內(nèi)的內(nèi)抗實(shí)驗(yàn)需用雞胚進(jìn)行活化，加強(qiáng)毒力采用種鼠-流感模型，研究藥物抗流感的有效物質(zhì)的體內(nèi)抗效果。干預(yù)模型：種鼠，體重 1314g。將動(dòng)物按體重隨機(jī)分正常對照組、模型對照組、藥物大、中、小劑量治療組，每組 10 只。正常組動(dòng)物鼻腔接種細(xì)胞培養(yǎng)液 20l，其余動(dòng)物均鼻腔接種液 20l，并根據(jù)一定劑量給與干預(yù)。觀察動(dòng)物鼻腔是否有物、動(dòng)物是否有搔抓鼻腔現(xiàn)象、存活情況，在第 5 d 末次給藥 2 h 后，將動(dòng)物稱重后眼動(dòng)脈叢取

20、血、牽頸臼處死，無菌條件下取肺組織，用 4%3.2.5 確定療效確切的抗將 3.2.1.1 中確定的有抗固定，備做病理學(xué)檢測。中藥組分配方活性的藥物，進(jìn)行配伍組合，采用細(xì)胞病變法，檢測配伍藥物對的體外的滅活作用，根據(jù)體外抗實(shí)驗(yàn)，確定抑毒指數(shù)，優(yōu)化抗中藥組分配方。項(xiàng)目預(yù)期解決的關(guān)鍵問題活性物質(zhì)的分離與追蹤目前中藥提取分離主要是有機(jī)相的分離，對于水相極性較大的物質(zhì)分離提取的效果并不好，通過活性追蹤段，對大極性的物質(zhì)進(jìn)行分離提取。3.3.2 抗體內(nèi)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷慕⒓皩?shí)施目前比較成抗體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的模型建立還比較少，通過 LD50 實(shí)驗(yàn)，將幾種病毒的接種量明確，并進(jìn)行抗體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。3.3.3 揭示抗活性物質(zhì)抗的

21、初步化機(jī)制。3.4 年度計(jì)劃與任務(wù)分解2015-01 至 2015-06 分別用水、乙醇、乙酸乙酯，進(jìn)行提取，并進(jìn)行初步的抗病毒活性實(shí)驗(yàn)，完善相應(yīng)抗庫，確定有抗活性的藥物，確定活性部位。根據(jù)活性追蹤的結(jié)果，進(jìn)行進(jìn)一步的分離純化。2015-06 至 2015-12 將上述分離得到的有效部位，繼續(xù)進(jìn)行正、反相的色譜柱分離， 液相 ，并進(jìn)行活性追蹤，測定其抑毒指數(shù)?？?的活性物質(zhì)的分子量和結(jié)構(gòu)測定。對獲得的活性物質(zhì)分別采用物理、化學(xué)、紫外色譜、質(zhì)譜、核磁 、紅外光譜等方法確定其分子量和化學(xué)結(jié)構(gòu)，從而確定抗 的活性物質(zhì)。2016-01 至 2016-07 抗 活性物質(zhì)抗 的初步的化機(jī)制研究。活性物質(zhì)的

22、抗體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，通過模型的建立，將抗活性物質(zhì)進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，通過病理組織切片、熒光定量分析，確定其體內(nèi)抗療效。將抗活性物質(zhì)進(jìn)行配伍實(shí)驗(yàn)，確定其抗指數(shù)，進(jìn)一步優(yōu)化抗配伍，確定抗配伍的最佳處方。2016-07 至 2016-12 結(jié)合體內(nèi)抗實(shí)驗(yàn)，優(yōu)化配伍方案。完成工作，SCI，進(jìn)行專利申請。順利結(jié)題。3.5 項(xiàng)目年度任務(wù)和考核指標(biāo)年度年度任務(wù)年度考核指標(biāo)重要任務(wù)的時(shí)間節(jié)點(diǎn)2015分別用水、乙醇、乙酸乙酯，進(jìn)行提取，并進(jìn)行初步的抗 活性實(shí)驗(yàn)，完善相應(yīng)抗 庫，確定有抗病毒活性的藥物，確定活性部位。根據(jù)活性追蹤的結(jié)果，進(jìn)行進(jìn)一步的分離純化。將上述分離得到的有效部位，繼續(xù)進(jìn)行正、反相的色譜柱分離，液相，并進(jìn)行活

23、性追蹤，測定其抑毒指數(shù)?？?的活性物質(zhì)的分子量和結(jié)構(gòu)測定。對獲得的活性物質(zhì)分別采用物理、化學(xué)、紫外色譜、質(zhì)譜、核磁、紅外光譜等方法確定其分子量和化學(xué)結(jié)構(gòu)，從而確定抗 的活性物質(zhì)。完善相應(yīng)抗庫，確定有抗活性的藥物，確定活性部位，確定抗庫和活性物質(zhì)。2015-01 至 2015-06 完善相應(yīng)抗庫，確定有抗活性的藥物，確定活性部位。根據(jù)活性追蹤的結(jié)果，進(jìn)行進(jìn)一步的分離純化。 2015-06 至 2015-12 進(jìn)行活性追蹤，測定其抑毒指數(shù)，從而確定抗 的活性物質(zhì)。2016抗活性物質(zhì)抗的初步的化機(jī)制研究?；钚晕镔|(zhì)的抗體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，通過模型的建立，將抗活性物質(zhì)進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，通過病理組織切片、熒光定量分析，

24、確定其體內(nèi)抗療效。將抗活性物質(zhì)進(jìn)行配伍實(shí) 驗(yàn)，確定其抗指數(shù)，進(jìn)一步優(yōu)化抗配伍，確定抗配伍的最佳處方。結(jié)合體內(nèi)抗 實(shí)驗(yàn)，優(yōu)化配伍方案。完成工作， SCI ，進(jìn)行專利申請。順利結(jié)題。確定活性物質(zhì)內(nèi)抗療效，揭示抗活性物質(zhì)抗的初步化機(jī)制，確定抗 配伍最佳處方2016-01 至 2016-07 抗活性物質(zhì)抗 的初步化機(jī)制研究。確定其體內(nèi)抗 療效，確定抗 配伍的最佳處方。 2016-07 至 2016-12 結(jié)合體內(nèi)抗 實(shí)驗(yàn)，優(yōu)化配伍方案。 SCI ，進(jìn)行專利申請。3.6 聯(lián)合任務(wù)分工情況注：可根據(jù)內(nèi)容自行調(diào)整任務(wù)名稱聯(lián)合任務(wù)負(fù)責(zé)人目標(biāo)研究內(nèi)容考核指標(biāo)重要任務(wù)的時(shí)間節(jié)點(diǎn)建議經(jīng)費(fèi)（萬元）學(xué)山東省醫(yī)學(xué)確定有效

25、成分的抗指數(shù)活性物質(zhì)的追蹤確定活性物質(zhì)的抗指數(shù)2015 年 06 月2016 年 12 月2016 年 07 月10四、項(xiàng)目技術(shù)路線、知識對策及市場分析4.1 項(xiàng)目技術(shù)路線及其先進(jìn)性和可行性分析（說明其主要技術(shù)創(chuàng)新點(diǎn)）技術(shù)路線抗篩選具有抗活性的藥物，確定其追蹤優(yōu)化配伍方案正交設(shè)計(jì)、體內(nèi)外抗試驗(yàn)配伍組分體內(nèi)抗實(shí)驗(yàn)體內(nèi)病理切片分析熒光定量分析抗化機(jī)制研究體外抗實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行抗庫的補(bǔ)充確定活性物質(zhì)分子量、結(jié)構(gòu)紫外色譜、質(zhì)譜、核磁、紅外光譜等抗活性物質(zhì)具體抗活性的部位液、相正、反相柱分離大孔樹脂、凝分離十種中藥多極性提取先進(jìn)性該項(xiàng)目在原有物質(zhì)分離的基礎(chǔ)上，加入了活性追蹤法，更加有利于發(fā)現(xiàn)之前未分離純化到的

26、物質(zhì)，選用了熒光定量分析，進(jìn)行了體內(nèi)含量的測定，在原有滴度，空斑實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上更加具體化?？尚行苑治鲈擁?xiàng)目依托、山東省中藥新藥技術(shù)、山東省中藥藥效物質(zhì)發(fā)現(xiàn)與純化工程、國家生物技術(shù)藥物、山東省罕少見病重點(diǎn)，山東省中抗協(xié)同創(chuàng)新中心。儀器設(shè)備資源可以相互共享，大型儀器設(shè)備基本能滿足研究需要。已有主要儀器設(shè)備：分離分析儀器設(shè)備： HPLC（）、HPLC-MC（）、HPCE（）、HPCEMC（）、GC（）、UV-VIS、X衍射分光光度計(jì)（）、連續(xù)洗脫電泳儀（）、大孔吸附柱、TLC、冷凍干燥機(jī)、超濾機(jī)組等；生化、藥理藥效儀器設(shè)備：超低溫冰箱、低溫離心機(jī)（German）、高效液相色譜儀、酶標(biāo)測定儀（日本 NJ

27、-2000）、恒冷切片機(jī)、萬用顯微鏡（Olympus）、細(xì)胞分光光度計(jì)（德國 Leica）、熒光顯微鏡（Olympus）、顯微分光光度計(jì)、圖象分析系統(tǒng)（TN-8502）、電子顯微鏡（H1200）等。紫外透射儀、PCR 儀、電泳及其分析系統(tǒng)、紫外可見光分光光度計(jì)；超凈工作臺(tái)（國產(chǎn)）、孵箱（napco5400）、倒置顯微鏡（日本 Olympus）、高速離心機(jī)、低溫冰箱、離心涂片機(jī)等。具有完善的、細(xì)菌、細(xì)胞培養(yǎng)和保存系統(tǒng)，學(xué)、病理學(xué)及分子生物學(xué)試驗(yàn)設(shè)備齊全。本項(xiàng)目需的熒光定量 PCR 儀、冷凍高速離心機(jī)、熒光倒置顯微鏡、CO2 恒溫培養(yǎng)箱等均運(yùn)轉(zhuǎn)正常，能夠保證課題順利進(jìn)行。本課題組擁有生物安全 2

28、級（BSL-2）、2 級生物安全柜及凈化動(dòng)物飼養(yǎng)柜，操作也均接受了實(shí)驗(yàn)室生物安全的理論和實(shí)踐培訓(xùn)，達(dá)到了相關(guān)要求。整個(gè)課題組有中藥學(xué)、藥物化學(xué)、藥理學(xué)、免疫學(xué)等多學(xué)科的研究組成，實(shí)現(xiàn)多學(xué)科協(xié)作，聯(lián)合攻關(guān)，知識結(jié)構(gòu)合理。4.2 知識和技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)分析及對策（含國內(nèi)、國際競爭力分析）中藥現(xiàn)代化水平的，影響著中藥的，中藥行業(yè)技術(shù)水平的，使中藥產(chǎn)品的質(zhì)量和穩(wěn)定性無法保障。另外，在中的基礎(chǔ)研究上也存在許多含混不清、懸而未決，在藥理、毒理、標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化上均未能充分利用科學(xué)技術(shù)的新成果，與國際先進(jìn)技術(shù)水平存在較大差距，嚴(yán)重影響中藥的。中藥研究的滯后是中藥的主要，這些都是橫亙在中藥面前的難題。本課題的研究思路與

29、方法可以推廣應(yīng)用為其他單味或復(fù)方中藥的研究和開發(fā)，下一步還可以進(jìn)行復(fù)雜中藥復(fù)方的研究，對中藥學(xué)、學(xué)、藥動(dòng)學(xué)的發(fā)展均有一定的學(xué)科發(fā)展意義。課題完成后，可以推動(dòng)傳統(tǒng)中藥產(chǎn)業(yè)整體質(zhì)量水平的提高，加速傳統(tǒng)中藥的現(xiàn)代化進(jìn)程，提高中藥的國際競爭力，為中進(jìn)入國際市場提供技術(shù)基礎(chǔ)。課題實(shí)施后，要建立全方位專利保護(hù)體系，對課題路線申請防御性專利保護(hù)，同時(shí)申請?jiān)摴に嚰百|(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的專利性保護(hù)，設(shè)置科學(xué)合理技術(shù)門檻，保護(hù)技術(shù)獨(dú)占性，從而有效防御仿制。并申請國際專利保護(hù)，為進(jìn)入國際主流市場的專利保護(hù)提供可能。4.3 預(yù)期產(chǎn)品的市場分析或技術(shù)成果應(yīng)用分析隨著醫(yī)學(xué)的快速發(fā)展，人們提高了對的認(rèn)識，在抗原的易變性和急性呼吸道

30、的多重影響下，行之有效的預(yù)防難度較大，而抗治療仍是主要治療方案之一。迄今為止，全球抵御流感的主要措施仍以接種和抗化學(xué)藥物為主。在抗流感藥物、皰疹藥物和廣譜抗藥物領(lǐng)域尚未有實(shí)質(zhì)性的突破。我國的傳統(tǒng)中藥在抗方面療效獨(dú)特，并且副作用較小，有許多患者希望用中成藥來治療性疾病。本項(xiàng)目對等十種中藥進(jìn)行多極性提取并純化物進(jìn)行研究，通過多種示蹤和進(jìn)一步純化分離、篩選，完善相應(yīng)抗庫，確定抗庫和活性物質(zhì)。通過活性物質(zhì)的抗體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，模型的建立，將抗活性物質(zhì)進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，通過病理組織切片、熒光定量分析，確定其體內(nèi)抗療效。將抗活性物質(zhì)進(jìn)行配伍實(shí)驗(yàn)，確定其抗指數(shù)，進(jìn)一步優(yōu)化抗配伍，確定抗配伍的最佳處方。確定其抗的藥效物質(zhì)

31、和結(jié)構(gòu)，揭示作為抗的十種中藥中有效物質(zhì)的抗作用機(jī)制，為研發(fā)高效的抗現(xiàn)代中藥奠定基礎(chǔ)。課題完成后，將為用現(xiàn)代技術(shù)和方法研究傳統(tǒng)方劑并開發(fā)出高效的現(xiàn)代中成藥提供可靠的理論和實(shí)踐依據(jù)。推動(dòng)傳統(tǒng)中藥產(chǎn)業(yè)整體質(zhì)量水平的提高，加速傳統(tǒng)中藥的現(xiàn)代化進(jìn)程，提高中藥的國際競爭力，為中進(jìn)入國際市場提供技術(shù)基礎(chǔ)。研究工作的成果形式為會(huì)議鑒定。本課題結(jié)題后預(yù)計(jì)得到 23 個(gè)活性成分，發(fā)現(xiàn) 12 個(gè)療效確切的抗中藥組分配方，并確定其最佳配伍關(guān)系，相關(guān) SCI累計(jì) IF3，或取得發(fā)明專利 2 項(xiàng)，根據(jù)課題研發(fā)任務(wù)分別建設(shè)抗藥效物質(zhì)提取純化與發(fā)現(xiàn)技術(shù)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)、抗 中藥活性篩選技術(shù)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)，重點(diǎn)培養(yǎng) 12名青年技術(shù)骨干 ，培

32、養(yǎng) 35 名 、23 名本科生。本課題將達(dá)到國內(nèi)先進(jìn)水平，市場前景將填補(bǔ)國內(nèi)空白，為抗 藥物 和申報(bào)大課題奠定良好的基礎(chǔ)。篩選出的抗 有效成分經(jīng)配伍可制成一種新型高效抗 的現(xiàn)代中藥，預(yù)計(jì)隨著課題完成后，即可申報(bào)一類或四類中藥新藥，并對關(guān)鍵工藝實(shí)施專利保護(hù)及申請國際專利。本產(chǎn)品投放市場后，可占有抗 市場的 25%，即 25 億的國內(nèi)銷售額，利稅總額 10 億 ，將具有廣闊的市場前景和顯著的經(jīng)濟(jì)效益。課題進(jìn)行強(qiáng)強(qiáng)合作，共同攻關(guān)，儀器設(shè)備資源可以相互共享，大型儀器設(shè)備基本能滿足研究需要。五、基礎(chǔ)條件和優(yōu)勢5.1 項(xiàng)目責(zé)任和聯(lián)合、團(tuán)隊(duì)的基本情況（包括與項(xiàng)目實(shí)施相關(guān)的實(shí)力和基礎(chǔ)，以往的業(yè)績和成就，承擔(dān)相

33、關(guān)項(xiàng)目情況）山東省醫(yī)學(xué) 創(chuàng)建于 1958 年。1962 年 3 月，山東省醫(yī)學(xué) 縮編為山東省醫(yī)學(xué)科學(xué) 。1981 年，省 決定在原山東省醫(yī)學(xué)科學(xué) 的基礎(chǔ)上重新組建山東省醫(yī)學(xué) ，為省 直屬的廳局級事業(yè) 。下屬 13 個(gè)專業(yè)（院），8 所醫(yī)院?，F(xiàn)有在職職工 2257 人，專業(yè)技術(shù) 1999 人，其中高級專業(yè)技術(shù) 657 人。有中國工程院 1 人，山東省“ ”特聘教授（ ）2人，獲 以上榮譽(yù)稱號或 的優(yōu)秀科技 77 人，博士生導(dǎo)師 11 人，生導(dǎo)師 人。 位兩院 和 位外國 擔(dān)任顧問、客座教授。有 個(gè)省部共建國家培育 個(gè)國家個(gè)山東省高水平重點(diǎn)個(gè)“”崗位、5 個(gè)、3 個(gè)省衛(wèi)生、 7 個(gè)省衛(wèi)生重點(diǎn)學(xué)科、

34、7 個(gè)聯(lián)合博士學(xué)位授予學(xué)科、20 個(gè)二級學(xué)位授予學(xué)科、2 個(gè)本科專業(yè)、10 個(gè)院重點(diǎn)學(xué)科、6 個(gè)院特色?？?。擁有學(xué)醫(yī)療救治 ”和國家“核輻射醫(yī)療救治”，是國家人事部批準(zhǔn)的“博士后科研工作站”，承擔(dān) 5 種國家級學(xué)術(shù)期刊的編輯工作。1981 年以來，先后承擔(dān)科研項(xiàng)目 1577 項(xiàng)，其中國家級項(xiàng)目 90 項(xiàng)，項(xiàng)目 554 項(xiàng)；獲得各類科技成果796項(xiàng)，其中國家科技進(jìn)步獎(jiǎng) 6 項(xiàng)，科技獎(jiǎng)項(xiàng) 270 項(xiàng)。與世界 6 大洲 30 多個(gè)國家建立了有效的科技合作關(guān)系。山東省醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)是一所集醫(yī)學(xué)科研、醫(yī)療、教育、科技開發(fā)為一體的省級專業(yè)研究機(jī)構(gòu)，山東省一類科研院所。擁有山東省醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)與工程、山東省 衛(wèi)生

35、腫瘤免疫與中藥免疫；免疫學(xué)為山東省衛(wèi)生重點(diǎn)學(xué)科；有流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)學(xué)、免疫學(xué)個(gè)聯(lián)合培養(yǎng)博士學(xué)科；有免疫學(xué)、病原生物學(xué)、內(nèi)科學(xué)、中西醫(yī)結(jié)合、流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)學(xué)等個(gè)學(xué)位 學(xué)科；為山東免疫學(xué)會(huì)、山東省生物、山東功能研究會(huì)掛靠。微生物學(xué)研究室創(chuàng)建于 60 年代，現(xiàn)有研究員人，其中研究員人，副研究員人，助理研究員人，研究實(shí)習(xí)員人。主要從事 HCMV 宿主特性變異分析、病佐劑和試劑的研制。本科室發(fā)現(xiàn)了 HCMV宿主特性的變化；調(diào)取 preS2/S，成功克隆腺載體，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明該黏膜免疫可獲得較強(qiáng)的體液免疫和細(xì)胞免疫效果；發(fā)現(xiàn)了高效抗人巨細(xì)胞活性物質(zhì)，有望獲得知識；目前已成功表達(dá) HSV2-gG 抗原和 H

36、CMV 檢測原。90 年代以來，承擔(dān)省級課題 12 項(xiàng)，山東省科技進(jìn)步二等獎(jiǎng) 1 項(xiàng)，三等獎(jiǎng) 3 項(xiàng)，院級6 項(xiàng)。發(fā)表30 余篇。多篇被 CHEMICAL ABSTRACTS 摘錄。5.2 項(xiàng)目責(zé)任及聯(lián)合與國內(nèi)外同類機(jī)構(gòu)的優(yōu)勢比較分析（完成項(xiàng)目預(yù)期目標(biāo)的技術(shù)、機(jī)制、設(shè)施設(shè)備優(yōu)勢等）本課題組擁有生物安全 2 級（BSL-2）、2 級生物安全柜及凈化動(dòng)物飼養(yǎng)柜，操作也均接受了生物安全的理論和實(shí)踐培訓(xùn)，達(dá)到了相關(guān)要求。整個(gè)課題組有中藥學(xué)、藥物化學(xué)、藥理學(xué)、免疫學(xué)等多學(xué)科的研究組成，實(shí)現(xiàn)多學(xué)科協(xié)作，聯(lián)合攻關(guān)，知識結(jié)構(gòu)合理。5.3 項(xiàng)目的主要情況序號職務(wù)專業(yè)項(xiàng)目中職務(wù)及分擔(dān)的任務(wù)累計(jì)為本項(xiàng)目工作時(shí)間（人

37、月）證件類型證件號碼所在1周長征男48教授中藥學(xué)組織、協(xié)調(diào)12370102196606202966山東中大學(xué)2女34助理研究員病原生物學(xué)、感染免疫學(xué)活性追蹤10370102198002270820山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院3男36中藥學(xué)提取純化8370102197803山東中大學(xué)馬山男講師中藥學(xué)純化、結(jié)構(gòu)測東中大學(xué)5女41藥學(xué)成分配伍、結(jié)構(gòu)測定8650103197308021842山東中大學(xué)6女25藥理學(xué)活性追蹤、藥理16370112198901017725山東中大學(xué)7男26藥化提取純化、結(jié)構(gòu)測定16山東中大學(xué)8女26藥劑學(xué)成分配伍、制劑山東中大學(xué)女藥理學(xué)活性追蹤

38、、藥理山東中大學(xué)女藥理學(xué)活性追蹤、藥理16山東中大學(xué)項(xiàng)目 及主要骨干 的情況(從事過的主要相關(guān)研究及所負(fù)責(zé)任和作用，相關(guān)研究和 成果、發(fā)明專利和獲獎(jiǎng)情況，在國內(nèi)外主要 上情況，特別是與本項(xiàng)目相關(guān)的研究成果情況等)周長征，課題組組長，主要負(fù)責(zé)整個(gè)課題從立項(xiàng)到結(jié)束的技術(shù)和協(xié)調(diào)工作，技術(shù)方案制定，試驗(yàn)研究計(jì)劃，技術(shù)攻關(guān)。1966 年 6 月出生，學(xué)位，教授，導(dǎo)師，從事中藥藥劑學(xué)和制藥工程的教學(xué)和科研工作，山東省藥劑專業(yè)委員。自 1990 年始一直從事新藥科研工作，先后主持或參與研究新藥 20 余種，主持或參與國家級 課題 10 余項(xiàng)，在國家級 上 學(xué)術(shù) 10 余篇，主編或參編與專業(yè)有關(guān)的專著和 10

39、 余部，參與中華海洋本草、中藥藥劑學(xué)、制藥工程與設(shè)備、制藥工程實(shí)訓(xùn)等的編寫工作。曾承擔(dān)山東省教育廳科技計(jì)劃課題- 、連翹、牛蒡子配伍的抗流感藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及其制劑研究，山東省中科技計(jì)劃課題-動(dòng)物類中藥提取純化工藝的研究，濟(jì)南市科技計(jì)劃課題-水蛭溶栓肽注射液的研制等課題。活血消癥和化瘀止痛膠囊對 腺肌病臨床與 VEGF 及 Bc1-2蛋白表達(dá)的調(diào)控研究獲 2008 山東省科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)，連翹防治腫瘤化療性作用及其止吐機(jī)制的系列研究，獲山東高等學(xué)校優(yōu)秀科研成果自然科學(xué)類三等獎(jiǎng)。在中藥抗方面做了大量工作，指導(dǎo) 6 名和 3 項(xiàng)本科生 SRT 進(jìn)行抗研究，取得了較大成績，其中有 4 個(gè)單體進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定

40、。與課題有關(guān)的（*為通訊作者）：杰；戰(zhàn)旗；周長征*，正交法優(yōu)化、連翹、牛蒡子中抗成分的提取工藝，食品與藥品，第 14 卷，第 11 期， 2012付信寶；周長征*，木芙蓉葉總黃酮提取純化工藝的研究，食品與藥品，第 14 卷，第 7 期， 2012周長征，生物堿類成分抗的研究進(jìn)展，健康必讀（中旬刊），第 11 卷，第 5 期， 2012；周長征*，治療性噬菌體制劑的研究進(jìn)展，食品與藥品，2011 年 5 期（5）；杰；周長征*，銀翹抗感顆粒的成型工藝研究，食品與藥品，2014 年 1 期（6）；周長征*，蛇莓提取物體外抗單純皰疹作用初報(bào)，山東中醫(yī)雜志，2014/06；周長征*，夏至草體外抗單純皰

41、疹作用研究，山東中醫(yī)雜志，2014/11；周長征*，木芙蓉葉的研究進(jìn)展，中國指南，2013/01；周長征*；，感冒清熱顆粒體外抗有效成分研究，藥學(xué)研究，2013/01；周長征*，木芙蓉葉提取物抗作用實(shí)驗(yàn)研究，長春中大學(xué)學(xué)報(bào)，2013/01，女，山東省醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)所病原微生物室，病原生物學(xué)、免疫學(xué)專業(yè)，從事醫(yī)學(xué)學(xué)研究，主要領(lǐng)域 HCMV 宿主特性變異分析、疫苗、佐劑和試劑的研制。20 余篇。與課題有關(guān)的：，岳盈盈，金黃色葡萄球菌蛋白 A 的原核表達(dá)及生物親和特性研究，山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2009/10岳盈盈，腸道71 型結(jié)構(gòu)蛋白 VP1 的原核表達(dá)及初步鑒定，山東，2011/07岳盈盈，呼吸道合

42、胞兔呼吸系統(tǒng)組織病理學(xué)的改變和相關(guān)指數(shù)評分標(biāo)準(zhǔn)的建立，中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2010/06，岳盈盈，蓋中濤，兩株不同毒力 EV71全組序列測定及分析，獸共患病學(xué)報(bào)，2012/05，岳盈盈，蓋中濤，腸道71 型山東分離株全組序列分析，山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版) ，2011/10岳盈盈，風(fēng)疹包膜糖蛋白 E1 的原核表達(dá)及條件優(yōu)化，山東 ，2010/03，岳盈盈，蓋中濤，不同毒力EV71 濟(jì)南分離株全 組序列比較分析，中國病原生物學(xué)雜志，2013/10，岳盈盈，蓋中濤，EV71 臨床分離株BALB/c 小鼠致病特點(diǎn)分析，山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2012/08，岳盈盈， ， ， ， 腸道 71 型黏膜 的初步

43、探索，山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2012/02（10）岳盈盈， ， ， ， ， ，蓋中濤， ，重癥手足口病患者氣管插管吸出液中腸道 71 型的分離與鑒定，山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版) ，2012/02，岳盈盈， ， ， ，EV71 VP1 黏膜 及其誘導(dǎo)黏膜免疫的實(shí)驗(yàn)研究，山東 ，2011/43， ， ，岳盈盈， ， ， ，致敏綿羊紅細(xì)胞在 EV71 細(xì)胞嗜性研究中的應(yīng)用，山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版) 2010/11（13） ， 舜， ，岳盈盈， ， ， ， 菇產(chǎn)抗菌活性物質(zhì)的提取與純化，食用菌，2011/01， ，岳盈盈， ， ，曹銀光， ，通用黏膜免疫佐劑的 ，山東 ，2012/39，岳盈盈， ， ，

44、， ，低滲條件下竹葉狀灰?guī)r中微生物的初步培養(yǎng)，中國微生態(tài)學(xué)雜志，2013/06（16） ， ， ，岳盈盈， ， ， 清， ，腸道71 型 2C 蛋白的異源表達(dá)及純化，中國病原生物學(xué)雜志，2014/09（17，岳盈盈，腸道71 型對 BALB/c乳鼠 T 淋巴細(xì)胞亞群的影響，山東，2013/27（18）岳盈盈，人巨細(xì)胞截短被膜磷蛋白 pp65 的原核表達(dá)及抗原性分析，山東，2012/43，岳盈盈，曹銀光，枯草芽孢桿菌芽孢佐劑免疫途徑及效果的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察，山東，2013/27，岳盈盈，真菌提取物 JN219 抗輪狀機(jī)制的研究，山東，2009/235.5 項(xiàng)目主要骨干目前承擔(dān)其它相關(guān)國家及省市各類科技計(jì)劃項(xiàng)目情況（請?zhí)顚懴卤恚幢M事宜應(yīng)進(jìn)行說明）序