FasFasL與肝癌相關(guān)性的研究進(jìn)展

1、Fas/FasL與肝癌相關(guān)性的研究進(jìn)展【關(guān)鍵詞】Fas/Fasl蛋白;肝癌Fas是細(xì)胞外表重要的死亡受體,是細(xì)胞凋亡的信號(hào)分子。Fas與其配體FasL結(jié)合,活化并傳導(dǎo)凋亡信號(hào),從而誘導(dǎo)細(xì)胞的凋亡。腫瘤細(xì)胞通過(guò)抵抗Fas介導(dǎo)的凋亡以及還擊免疫細(xì)胞使T細(xì)胞凋亡,使腫瘤細(xì)胞逃防止疫監(jiān)控而存活。近年來(lái),國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)Fas/FasL系統(tǒng)與肝癌免疫逃逸機(jī)制的關(guān)系及其相應(yīng)的對(duì)策進(jìn)展了深化的研究和討論,現(xiàn)將該領(lǐng)域的研究進(jìn)展作一綜述。1Fas/FasL系統(tǒng)Fas又稱(chēng)Ap-1或D95分子，它是廣泛分布于多種細(xì)胞外表的一種跨膜糖蛋白，如活化的T、B淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、肝膽細(xì)胞、腎小球系膜細(xì)胞及

2、子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。Fas分子與腫瘤壞死因子(TNF)受體和神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)受體具有同源性，屬于TNF和NGF受體超家族353。sFas稱(chēng)為可溶性Fas,游離存在于血液、細(xì)胞間液等細(xì)胞外液中，它是Fas基因在轉(zhuǎn)錄、翻譯過(guò)程中喪失了一部分堿基造成的。sFas因缺乏跨膜蛋白，因此不能與FasL結(jié)合誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。但它可與Fas競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合FasL，導(dǎo)致免疫抑制，這也是腫瘤細(xì)胞逃防止疫系統(tǒng)的一個(gè)機(jī)制。FasL是Fas在人體內(nèi)的天然配體,是屬于TNF家族的型跨膜蛋白。FasL主要表達(dá)于激活的T細(xì)胞、NK細(xì)胞、部分腫瘤細(xì)胞以及一些免疫豁免區(qū)如眼前房、睪丸滋養(yǎng)細(xì)胞外表等。膜結(jié)合型FasL在金屬酶裂解作用下成為

3、可溶性FasL(sFasL),其介導(dǎo)凋亡的才能比膜結(jié)合型減弱。2Fas/FasL介導(dǎo)凋亡的流程Fas與FasL系統(tǒng)是細(xì)胞凋亡中最主要的途徑之一。Fas單抗誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡已被大量實(shí)驗(yàn)證實(shí)1，2。在Fas介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡中,一組稱(chēng)為aspase的半胱氨酸蛋白酶家族起著關(guān)鍵性作用。研究發(fā)現(xiàn)FasL和Fas結(jié)合后,首先使Fas形成能傳遞信號(hào)的活性形式三聚體,并發(fā)現(xiàn)Fas在胞內(nèi)含有一段長(zhǎng)約6070個(gè)氨基酸序列的片段,稱(chēng)死亡構(gòu)造(deathdain,DD)。與Fas發(fā)生反響的蛋白是Fas死亡構(gòu)造域相關(guān)蛋白(FADD),此蛋白的末端也有一個(gè)DD,與Fas的DD同源。Fas與FADD能通過(guò)DD形成二聚體而互相

4、作用。FADD的N末端稱(chēng)為死亡效應(yīng)構(gòu)造域,該構(gòu)造域負(fù)責(zé)將凋亡信號(hào)傳遞到一種凋亡蛋白酶aspase-8。該酶的激活將引起aspase家族的一系列酶聯(lián)反響,其中aspase-3的激活最為關(guān)鍵。aspase-3的激活可以引起aspase-6,7等的活化,導(dǎo)致各自的多種死亡底物的降解。引起DAN降解和鏡下可見(jiàn)的細(xì)胞及細(xì)胞核的凋亡形態(tài)學(xué)改變3:如導(dǎo)致DNA斷裂,染色體凝聚,核小體的形成,線(xiàn)粒體通透性改變及胞漿的濃縮,從而完成了Fas介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡過(guò)程。3Fas/FasL與肝癌3.1Fas與肝癌目前多數(shù)學(xué)者傾向于認(rèn)為肝癌Fas表達(dá)降低或缺失。研究結(jié)果顯示,肝癌及癌旁肝硬化均有Fas表達(dá),肝癌Fas表達(dá)較癌

5、旁肝硬變組織顯著降低。研究發(fā)現(xiàn),肝癌細(xì)胞能下調(diào)Fas受體和上調(diào)FasL的表達(dá)4;與Fas陰性病例比擬,Fas陽(yáng)性的肝癌患者肝內(nèi)轉(zhuǎn)移灶少,腫瘤細(xì)胞凋亡率高,患者存活時(shí)間長(zhǎng);肝癌患者血清中sFas明顯增高。因此認(rèn)為肝癌細(xì)胞可能通過(guò)Fas表達(dá)下調(diào)或缺失而對(duì)Fas/FasL介導(dǎo)的凋亡產(chǎn)生耐受性,癌細(xì)胞凋亡數(shù)目變少,使增殖細(xì)胞群占優(yōu)勢(shì)而獲得生存,發(fā)生轉(zhuǎn)移。Yan等5發(fā)現(xiàn),多數(shù)肝癌細(xì)胞株僅表達(dá)胞漿Fas,對(duì)激活性Fas抗體介導(dǎo)的凋亡不敏感;而少數(shù)既表達(dá)胞漿Fas也表達(dá)胞膜Fas的肝癌細(xì)胞株對(duì)Fas抗體介導(dǎo)的凋亡敏感。提示胞膜Fas在細(xì)胞凋亡過(guò)程中起重要作用。某些腫瘤細(xì)胞對(duì)Fas介導(dǎo)凋亡的敏感性與細(xì)胞外表F

6、as的程度并不呈正相關(guān)。腫瘤細(xì)胞抵抗Fas介導(dǎo)凋亡的機(jī)制是多方面的,除了Fas表達(dá)下調(diào)或缺失外,還包括腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生對(duì)自身胞漿內(nèi)Fas蛋白表達(dá)決定域的截?cái)?凋亡抑制基因的高表達(dá),如bl-2家族、Fas相關(guān)的磷酸酶l(FAP1)、FADD樣白細(xì)胞介素轉(zhuǎn)化酶(FLIE)抑制蛋白(FLIP)以及許多凋亡抑制因子(IAP)家族成員的上調(diào)等等6,7。3.2FasL與肝癌研究說(shuō)明,某些腫瘤細(xì)胞如人結(jié)腸癌、胃癌、胰腺癌等惡性腫瘤細(xì)胞外表均有FasL表達(dá)810。腫瘤特異抗原誘導(dǎo)TIL(tur-infiltrating-lyphytes，TIL)高表達(dá)Fas,使T細(xì)胞對(duì)凋亡敏感11。腫瘤細(xì)胞通過(guò)外表的FasL與激

7、活的T細(xì)胞外表的Fas結(jié)合,誘導(dǎo)T細(xì)胞發(fā)生凋亡,逃防止疫系統(tǒng)的監(jiān)視。Hahne等12發(fā)現(xiàn),把FasL陽(yáng)性的小鼠黑色素瘤細(xì)胞注射到不表達(dá)Fas的1pr突變小鼠身上,1pr小鼠的腫瘤生長(zhǎng)明顯比表達(dá)Fas的小鼠慢。這說(shuō)明1pr小鼠的T細(xì)胞因Fas缺失對(duì)瘤細(xì)胞表達(dá)的FasL不敏感,免于凋亡,從而能抑制腫瘤生長(zhǎng)。Shin等13發(fā)現(xiàn)HBx抗原能誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞表達(dá)FasL,高表達(dá)FasL的肝癌細(xì)胞與激活的T細(xì)胞共培養(yǎng),可誘導(dǎo)T細(xì)胞凋亡,Fas中和抗體可抑制該過(guò)程,提示肝癌細(xì)胞可通過(guò)FasL介導(dǎo)T細(xì)胞凋亡,還擊機(jī)體免疫系統(tǒng),引起免疫抑制,逃防止疫監(jiān)視。能抵抗Fas介導(dǎo)的凋亡是肝癌細(xì)胞通過(guò)FasL攻擊機(jī)體免疫細(xì)胞

8、的前提。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.肝癌細(xì)胞Fas表達(dá)下調(diào)或缺失,可免于FasL的攻擊,肝癌細(xì)胞和激活的T細(xì)胞表達(dá)的FasL不能作用于癌細(xì)胞,轉(zhuǎn)而作用于高表達(dá)Fas的T細(xì)胞,誘導(dǎo)其凋亡。腫瘤細(xì)胞表達(dá)的FasL因?yàn)槟芤种泼庖呒?xì)胞功能,對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移也有重要作用。Hu等14發(fā)現(xiàn),接種高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞株Ha-F的小鼠淋巴細(xì)胞增殖在第14天達(dá)峰值,隨后逐漸下降;接種低轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞株Ha-P的小鼠淋巴細(xì)胞增殖在第7天達(dá)峰值,并維持高程度。檢測(cè)肝癌細(xì)胞FasL表達(dá),發(fā)現(xiàn)Ha2F組明顯高開(kāi)Ha-P組。提示肝癌細(xì)胞表達(dá)的FasL能抑制免疫細(xì)胞功能,幫助細(xì)胞逃避淋巴細(xì)胞的殺傷,使細(xì)胞伴有高轉(zhuǎn)移潛能。Lee等15經(jīng)過(guò)研究后提

9、出,肝癌細(xì)胞FasL表達(dá)是影響肝癌術(shù)后患者預(yù)后的一個(gè)獨(dú)立因素,FasL陽(yáng)性者存活時(shí)間明顯短于陰性者。4利用Fas/FasL系統(tǒng)治療肝癌的策略由于Fas/FasL系統(tǒng)在肝細(xì)胞上參與肝細(xì)胞凋亡的調(diào)控，在肝細(xì)胞功能穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)中具有重要意義。因此，調(diào)節(jié)肝細(xì)胞Fas分子的表達(dá)及其信號(hào)傳遞就具有極其重要的意義，同時(shí)在肝癌發(fā)生開(kāi)展的過(guò)程中，肝癌細(xì)胞能通過(guò)Fas/FasL系統(tǒng)使腫瘤細(xì)胞抵抗Fas介導(dǎo)的凋亡并還擊免疫細(xì)胞使T細(xì)胞凋亡,這一重要的免疫逃逸機(jī)制的說(shuō)明，為針對(duì)Fas/FasL為靶點(diǎn)制定腫瘤的免疫治療策略提供了新的思路和理論根據(jù)，詳細(xì)策略如下：增強(qiáng)肝癌細(xì)胞表達(dá)Fas抗原,恢復(fù)腫瘤細(xì)胞對(duì)Fas介導(dǎo)凋亡的敏

10、感性。封閉肝癌細(xì)胞外表FasL表達(dá)或阻斷FasL的功能,恢復(fù)T細(xì)胞的免疫功能。保護(hù)T細(xì)胞,阻斷Fas介導(dǎo)的殺傷作用?？傊?針對(duì)Fas/FasL途徑的免疫治療策略關(guān)鍵是要改變腫瘤部分的免疫抑制,改變腫瘤微環(huán)境中通常的細(xì)胞死亡途徑,使更多的腫瘤細(xì)胞凋亡,而盡量減少淋巴細(xì)胞的凋亡。隨著研究的不斷深化,對(duì)Fas/FasL系統(tǒng)在肝癌發(fā)病機(jī)制中作用的理解將會(huì)日趨透徹,針對(duì)Fas/FasL途徑的治療對(duì)策必將進(jìn)一步深化和完善?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1RskasT,LibbrehetlVanDanDaerB,etalFasandFaslligandstrng-expressininhuanHepatylessurrund

11、ingHepatellulararinaanerinduesuiideinpertiluuralellsJ.Pathl2000,191(2):150.2ShiaY,NakaK,NakashiaT,etal,Ativatinfaspase-8intransfringgrthfatr-beta-induedapptsisfhuanhepataellsJ.Hepatlgy,1999,30(5):1215.3lfBB,Shuler,EhererriF,etal.aspase-3isthepriaryativatrfeppttieDNAfragentatinviaDNAfragentatinfratr-

12、45/inhibitrfaspase-ativatedDNaseinativatinJBilhe,1999,274(29):20229.4李玉中,王朝暉,王乃玉.Fas/FasL系統(tǒng)在肝癌組織中表達(dá)的意義J.中國(guó)醫(yī)藥,2022,1(10):606.5YanH,FukudaK,Haraaki,etal.ExpressinfFasandan-ti-Fas-ediatedapptsisinhuanhepatellulararinaelllinesJ.JHepatl,1996,25(4):454.6YaH,SngE,henJ,etal.ExpressinfFAP21byhuanlnadenarina:

13、ipliatinfrresistaneagainstFas2edia2tedapptsisinanerJ.BrJaner,2022,91(9):1718.7KrklpuluP,GudpuluA,VutsinasG,etal.-FLIPexpressininbladderurthelialarinas:itsrleinresistanetFas-ediatedapptsisandlinipathlgirrelatinsJ.Urlgy,2022,63(6):1198.8李昭輝,王占民,趙志倫,等.Fas和FasL在胃癌組織中的表達(dá)J.中國(guó)現(xiàn)代普通外科進(jìn)展,2022,7(5):292.9LeeTB,

14、inYD,LiS,etal.Fas(Ap21/D95)andFasligandinteratinbeteengastrianerellsandiuneellsJ.JGastrenterlHepatl,2002,17(1):32.10ElnerA,htaT,YahieA,etal.Huanpanreatianerellsexpressnn-funtinalFasreeptrsandunterattaklyphytesbyexpressingFasligand:aptentialehanisfriuneesapeJ.IntJnl,2001,18(1):33.11uppidiJR,SiegelR.L

15、igand-independentredistributinfFas(D95)intlipidraftsediateslntypiTelldeathJ.NatIunl,2022,5(2):182.12Hahne,RildiD,Shrter,etal.elanaellexpressinfFas(Ap21/D95)ligand:ipliatinsfrturiuneesapeJ.Siene,1996,274(5291):1363.13ShinE,ShinJS,ParkJH,etal.Expressinffasligandinhuanhepataelllines:rlefhepatitis-BvirusX(HBX)inindutinfFaslig