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文檔簡(jiǎn)介
1、考 綱一、檢測(cè)原理(一)電阻抗法(原理)1.原理將等滲電解質(zhì)溶液稀釋的細(xì)胞懸液置入不導(dǎo)電的容器中,將小孔管插進(jìn)細(xì)胞懸液中。小孔管內(nèi)充滿電解質(zhì)溶液,并有一個(gè)內(nèi)電極,小孔管的外側(cè)細(xì)胞懸液中有一個(gè)外電極。當(dāng)接通電源后,位于小孔管兩側(cè)的電極產(chǎn)生穩(wěn)定電流,稀釋細(xì)胞懸液從小孔管外側(cè)通過小孔管壁上寶石小孔(直徑100m,厚度約75m)向小孔管,使小孔感應(yīng)區(qū)內(nèi)電阻增高,引起瞬間電壓變化形成脈沖信號(hào),脈沖振幅越高,細(xì)胞體積越大,脈沖數(shù)量越多,細(xì)胞數(shù)量越多,由此得2.白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)原理液中血細(xì)胞數(shù)量和體積值。根據(jù)電阻抗法原理,經(jīng)溶血?jiǎng)┨幚淼?、脫水的、不同體積的白細(xì)胞通過小孔時(shí),脈沖大小不同,將血液分析儀及其臨床應(yīng)
2、用一、檢測(cè)原理二、檢測(cè)參數(shù)三、血細(xì)胞直方圖四、方法學(xué)評(píng)價(jià)五、臨床應(yīng)用體積為 35450fl 白細(xì)胞分為 256 個(gè)通道。3.血紅蛋白測(cè)定原理當(dāng)稀釋血液中加入溶血?jiǎng)┖?,紅細(xì)胞溶解并紅蛋白,血紅蛋白與溶血?jiǎng)┲械哪承┏煞纸Y(jié)合形成一種血紅蛋白衍生物,在特定波長(zhǎng)(530550nm)下比色,吸光度變化與稀釋液中 Hb 含量成正比,最終顯示 Hb 濃度。如含 化鉀的溶血?jiǎng)?,與血紅蛋白作用后形成540nm。(二)光散射法血液分析儀檢測(cè)原理1.白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類計(jì)數(shù)原理激光與細(xì)胞化學(xué)法容量、電導(dǎo)、光散射法電阻抗與射頻法多角度偏振光散射(MAPSS)法(1)激光與細(xì)胞化學(xué)法過氧化物酶檢測(cè)通道:白細(xì)胞過氧化物酶染色嗜
3、酸,中性,單核白細(xì)胞總數(shù)和分類計(jì)數(shù),白細(xì)胞散點(diǎn)圖吸光率(酶反應(yīng)強(qiáng)度)為X 軸,光散射(細(xì)胞大?。?Y 軸。嗜堿性粒細(xì)胞/分葉核檢測(cè)通道化血紅蛋白,其最大吸收峰接近血液與酸性表面活性劑反應(yīng),不僅紅細(xì)胞溶解,而且除嗜堿性粒細(xì)胞外,其他所有白細(xì)胞膜均被破壞,胞質(zhì)溢出,僅剩 核。當(dāng)激光束照射到細(xì)胞時(shí),產(chǎn)生不同強(qiáng)度的散射光,形成二維細(xì)胞圖,其中,嗜堿性粒細(xì)胞呈高狹角散射,定位于細(xì)胞圖上部,核細(xì)胞則位于細(xì)胞圖下部。(2)容量、電導(dǎo)、光散射(VCS)法利用電阻抗法原理測(cè)量細(xì)胞體積(V)利用電導(dǎo)(C)技術(shù)測(cè)量細(xì)胞結(jié)構(gòu)利用光散射(S)技術(shù)測(cè)量細(xì)胞形態(tài)和核結(jié)構(gòu)(3)電阻抗與射頻法嗜酸性粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng):采用電阻抗
4、法計(jì)數(shù)嗜酸性粒細(xì)胞。嗜堿性粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng):采用電阻抗法計(jì)數(shù)嗜堿性粒細(xì)胞。白細(xì)胞分類檢測(cè)系統(tǒng):采用電阻抗和射頻(能透入細(xì)胞內(nèi),測(cè)量核大小、顆粒多少)法。幼稚細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)根據(jù)幼稚細(xì)胞膜上脂質(zhì)較成熟細(xì)胞少的特性進(jìn)行檢測(cè)。在細(xì)胞懸液中加入硫化氨基酸,幼稚細(xì)胞的結(jié)合量多于較成細(xì)胞,幼稚細(xì)胞對(duì)溶血?jiǎng)┯械挚棺饔?,?dāng)加入溶血?jiǎng)┖?,成熟?xì)胞被溶解,幼稚細(xì)胞不被破壞,從而提供幼稚細(xì)胞信息(IMI)。(4)多角度偏振光散射(MAPSS)法當(dāng)激光束照射到單個(gè)細(xì)胞時(shí),從 4 個(gè)角度測(cè)定散射光密度:0:前角光散射(13),可測(cè)定細(xì)胞大??;10:狹角光散射(711),可測(cè)定細(xì)胞結(jié)構(gòu)特征;90:垂直光散射(70110),可測(cè)
5、定細(xì)胞核分葉情況;-90:消偏振光散射(70110),可將嗜酸性粒細(xì)胞和其他細(xì)胞區(qū)分出來。二、檢測(cè)參數(shù)紅細(xì)胞參數(shù)血小板參數(shù)白細(xì)胞參數(shù)中文名稱英文縮寫中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)NEUT中性粒細(xì)胞百分率NEUT%淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)LYMPH淋巴細(xì)胞百分率LYMPH%單核細(xì)胞計(jì)數(shù)MONO血小板計(jì)數(shù)PLT血小板平均體積MPV血小板比容PCT血小板體積分布寬度PDW血小板平均濃度MPC血小板平均質(zhì)量MPM中文名稱英文縮寫血紅蛋白Hb血細(xì)胞比容HCT/PCV紅細(xì)胞計(jì)數(shù)RBC紅細(xì)胞平均體積MCV紅細(xì)胞平均血紅蛋白量MCH紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度MCHC單個(gè)紅細(xì)胞血紅蛋白濃度CHCM紅細(xì)胞體積分布寬度RDW紅細(xì)胞血紅蛋白分布寬度
6、HDW不屬于血細(xì)胞分析儀紅細(xì)胞參數(shù)的是A.RDW B.Hb C.MPV D.RBCE.HCT正確CMPV 指的是血小板的平均體積。在電阻抗型血液分析儀中,哪項(xiàng)與脈沖振幅成正比A.細(xì)胞的數(shù)量 B.細(xì)胞的體積 C.細(xì)胞的D.細(xì)胞的移動(dòng)速度E.以上都不是正確B脈沖振幅越高,細(xì)胞體積越大,脈沖數(shù)量越多,細(xì)胞數(shù)量越多。三分群白細(xì)胞直方圖上,中間細(xì)胞區(qū)不包括哪類細(xì)胞A.嗜堿性粒細(xì)胞 B.嗜酸性粒細(xì)胞 C.單核細(xì)胞D.幼稚細(xì)胞E.中性粒細(xì)胞正確E淋巴細(xì)胞為單個(gè)核細(xì)胞,顆粒少,細(xì)胞小,位于 3590fl 的 fl 小細(xì)胞區(qū),粒細(xì)胞(中性粒細(xì)胞)的核分多葉,顆粒多,胞體大,位于 160fl 以上的大細(xì)胞區(qū),單核
7、細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、原始細(xì)胞、幼稚細(xì)胞等,位于 90160fl 的單個(gè)核細(xì)胞區(qū),又稱為中間型細(xì)胞。血液分析儀的檢測(cè)原理不包括A.電阻抗法 B.光散射法C.容量、電導(dǎo)、光散射法 D.電阻抗與射頻法E.單一角度偏振光散射法正確E白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類計(jì)數(shù)原理激光與細(xì)胞化學(xué)法;容量、電導(dǎo)、光散射法;電阻抗與射頻法;多角度偏振光散射(MAPSS)。單核細(xì)胞百分率MONO%嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)EOS嗜酸性粒細(xì)胞百分率EOS%嗜堿性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)BASO嗜堿性粒細(xì)胞百分率BASO%三、細(xì)胞直方圖(一)白細(xì)胞直方圖血液分析儀在計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量的同時(shí),還提供細(xì)胞體積分布圖形,橫坐標(biāo)為細(xì)胞體積大小,縱坐標(biāo) 為不同體
8、積細(xì)胞的相對(duì)頻率,稱為細(xì)胞直方圖。正常白細(xì)胞直方圖,在 35450fl 范圍內(nèi)將白細(xì)胞分為 3 群:左側(cè)峰又高又陡為淋巴細(xì)胞峰;最右側(cè)峰又低又寬為中性粒細(xì)胞峰;左右兩峰間的谷區(qū)較平坦為單個(gè)核細(xì)胞峰。白細(xì)胞直方圖變化的部分原因(二)紅細(xì)胞直方圖正常紅細(xì)胞直方圖,在 36360fl 范圍內(nèi)分布兩個(gè)細(xì)胞群體,從 50125fl 區(qū)域有一個(gè)兩側(cè)對(duì)稱、 較狹窄的曲線,為正常大小的紅細(xì)胞,從 125200fl 區(qū)域有另一個(gè)低而寬的曲線,為大紅細(xì)胞、網(wǎng)織白細(xì)胞直方圖變化主要原因淋巴細(xì)胞峰左側(cè)異常有核紅細(xì)胞、血小板、巨大血小板、未溶解紅細(xì)胞、瘧原蟲、冷凝集蛋白、脂類顆粒、異型淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞峰右移,與單個(gè)核細(xì)
9、胞峰左側(cè)相連并抬高急性淋巴細(xì)胞白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病、異型淋巴細(xì)胞單個(gè)核細(xì)胞峰抬高增寬原始或幼稚細(xì)胞、漿細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞增多、嗜堿性粒細(xì)胞增多、單核細(xì)胞增多單個(gè)核細(xì)胞峰與中性粒細(xì)胞峰之間異常未成中性粒細(xì)胞、異常細(xì)胞亞群、嗜酸性粒細(xì)胞增多中性粒細(xì)胞峰右移、抬高、增寬中性粒細(xì)胞絕對(duì)值增多直方圖多區(qū)出現(xiàn)異常以上多種原因引起紅細(xì)胞。當(dāng)紅細(xì)胞體積大小發(fā)生變化時(shí),峰可或右移,或出現(xiàn)雙峰。(三)血小板直方圖在 230fl 范圍內(nèi)分布,呈態(tài)分布,集中分布于 215fl 內(nèi)。當(dāng)有大血小板或細(xì)胞、聚集血小板時(shí),直方圖顯示異常。四、方法學(xué)評(píng)價(jià)(一)儀器性能的評(píng)價(jià)新儀器安裝、每次儀器維修后須對(duì)儀器性能進(jìn)包括下列
10、內(nèi)容:相關(guān)性準(zhǔn)確度稀釋效應(yīng)精密度樣本老化攜帶污染干擾(二)干擾血液分析儀檢測(cè)的 血液分析儀產(chǎn)生假性結(jié)果的情況試、評(píng)價(jià)。ICSH的血液分析儀評(píng)價(jià)方案,參數(shù)假性增高假性降低WBC溶血紅細(xì)胞抵抗(尿毒癥、和新生兒樣本)、出現(xiàn)有核紅細(xì)胞、冷球蛋白血癥和冷蛋白血癥、血小板、副蛋白血癥、多量巨大血小板、異常血紅蛋白(如 AS、SS、AC AE、A-Arab)、肝病、冷凝集素、骨髓異常增生綜合征細(xì)胞性貧血、脾切除后、蛋白絲、高脂血癥、脂肪污染樣本、瘧原蟲、不穩(wěn)定血紅蛋白因抗體或細(xì)胞膜改變出現(xiàn)腫瘤細(xì)胞引起白細(xì)胞之間或白細(xì)胞和血小板(如抗體介導(dǎo)中性粒細(xì)胞,淋巴瘤細(xì)胞或腫瘤性漿細(xì)胞)、血液放置時(shí)間超過3d 引起白
11、細(xì)胞溶解室溫達(dá) 24h、冷凝集素微小凝塊五、臨床應(yīng)用(一)部分檢測(cè)參數(shù)的臨床意義紅細(xì)胞血紅蛋白分布寬度(HDW)反映紅細(xì)胞內(nèi) Hb 含量異質(zhì)性的參數(shù),用單個(gè)紅細(xì)胞 Hb 含量的標(biāo)準(zhǔn)差表示,正常參考范圍為 24 34g/L。遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥時(shí) RDW、HDW 明顯增高,為小細(xì)胞不均一性高色素性貧血。血小板平均體積(MPV)鑒別血小板減低的病因:MPV 增高,見于外周血血小板破壞過多所致血小板減低。MPV 減低,見于骨髓病變所致血小板減低。評(píng)估骨髓造血功能恢復(fù)情況:MPV 正常:局部炎癥時(shí),骨髓造血未抑制 MPV 減低:敗血癥時(shí),骨髓造血受抑制 MPV 增高:白血病緩解時(shí)MPV 和血小板計(jì)數(shù)
12、持續(xù)減低:骨髓造血衰竭M(jìn)PV 先上升,血小板計(jì)數(shù)隨后上升:骨髓功能恢復(fù)時(shí)3.血小板分布寬度(PDW)儀器測(cè)量一定數(shù)量血小板體積后,計(jì)算所得外周血血小板體積大小異質(zhì)性參數(shù)。用血小板體積變異系數(shù)(CV)來表示。PDW 增大見于急性白血病化療后、細(xì)胞性貧血、慢性粒細(xì)胞白血病、脾切除后、巨大血小板綜RBC冷球蛋白血癥、冷蛋白血癥、多量大血小板、高白細(xì)胞高脂血癥冷凝集素、EDTA 依賴性凝集、極細(xì)胞或碎片使紅細(xì)胞落在閾值下限以外、因樣本不當(dāng)或異常紅細(xì)胞的體外紅細(xì)胞溶解、微小凝塊Hb高脂血癥、內(nèi)源性或胃腸外營(yíng)養(yǎng)、高白細(xì)胞、副蛋白或球蛋白血癥、冷球蛋白血癥MCV高滲狀態(tài)、冷凝集素和 EDTA 依賴紅細(xì)胞、樣
13、本在室溫、高白細(xì)胞、EDTA 過量低色素紅細(xì)胞、低滲狀態(tài)HctMCV 增高(除冷凝集素外)、RBC 減低MCV 減低、因極小細(xì)胞或體外溶血引起 RBC 增高、冷凝集素、微小凝塊、高血糖MCHHb 增高、RBC 減低、內(nèi)溶血引起血漿游離血紅蛋白增加MCHCHb 增高內(nèi)溶血引起血漿游離血紅蛋白增加、Hct 或 MCV和 RBC 減低、低滲狀態(tài)MCV 減低(除冷凝集素外)因多量巨大血小板引起 RBC增高、高滲狀態(tài)PLT冷球蛋白、高甘油三酯血癥或高脂血癥、白細(xì)胞碎片、細(xì)胞或紅細(xì)胞碎片、血紅蛋白H 病、微生物、經(jīng)加熱的血液樣本部分凝集樣本、采血時(shí)血小板活化、EDTA 誘導(dǎo)血小板聚集、肝素誘導(dǎo)血小板 、血
14、小板 、巨大血小板落在血小板閾值上限以外Ret紅細(xì)胞包涵體、紅細(xì)胞內(nèi)、白細(xì)胞碎片、血小板巨大血小板樣本室溫合征、血栓性疾病、性血小板增多癥、再生性貧血。PDW 減低見于反應(yīng)性血小板增多癥。4.LFR 和 HFR骨髓移植:網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)是監(jiān)測(cè)骨髓造血恢復(fù)的重要參數(shù),通常移植成功后網(wǎng)織紅細(xì)胞比白細(xì)胞提前 34d 增高。HFR 增高提示有較多未成熟細(xì)胞從骨髓進(jìn)入外周血,故 HFR 變化比網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)變化具有更重要意義。貧血:溶血性貧血時(shí) Ret、LFR、HFR 明顯增高;腎性貧血時(shí) HFR 上升、LFR 下降、Ret 正常。(3)放療和化療:長(zhǎng)期化療導(dǎo)致網(wǎng)織紅細(xì)胞亞HFR、MFR 又迅速上升。5.
15、網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟指數(shù)(RMI) RMI(MFRHFR)/LFR100。生變化,HFR、MFR 減低早于 LFR。骨髓恢復(fù)時(shí),RMI 增高,見于溶血性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)、慢性淋巴細(xì)胞白血?。–LL)、急性白血病、真性紅細(xì)胞增多癥、再生性貧血、多發(fā)性骨髓瘤。RMI 減低,提示骨髓衰竭和造血無效,見于6.未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞指數(shù)(IRF)細(xì)胞性貧血。指未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞與總網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比。未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞體積較大,含 RNA 的量多。監(jiān)測(cè)骨髓移植后的情況:骨髓移植后,全血細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)是監(jiān)測(cè)骨髓恢復(fù)造血的早期指標(biāo),其中IRF 是骨髓移植成功最早、最靈敏的指標(biāo)。
16、監(jiān)測(cè)腎移植后的情況:IRF 是腎移植成功較早、較靈敏的指標(biāo)。(二)紅細(xì)胞直方圖在貧血中的應(yīng)用1.小細(xì)胞性貧血(1)RDW 正常:紅細(xì)胞主峰,分布在 55100fl,波峰在 75fl 處,基底較窄,為小細(xì)胞低色一性圖形,見于輕型地中海貧血。(2)RDW 輕度增高:紅細(xì)胞主峰,分布在 55100fl,波峰在 65fl 處,為小細(xì)胞低色素和細(xì)胞不均一性圖形,見于缺鐵性貧血。(3)RDW 明顯增高:紅細(xì)胞顯示雙峰,小細(xì)胞峰明顯處,基底較寬,為小細(xì)胞低色素不均一性圖形。見于鐵粒幼細(xì)胞性貧血、缺鐵性貧血經(jīng)治療有效時(shí)。,波峰在 50fl 處,大細(xì)胞峰頂在 90fl2.大細(xì)胞性貧血(1)RDW 正常:紅細(xì)胞主
17、峰右移,分布在 75130fl,波峰在 100fl 處,為大細(xì)胞性圖形,見于溶血性貧血、白血病前期、再生性貧血、細(xì)胞性貧血。(2)RDW 輕度增高:紅細(xì)胞峰右移,基底增寬,分布在 75150fl,波峰在 105fl 處,為大細(xì)胞不均一性圖形,見于細(xì)胞性貧血。(3)RDW 明顯增高:紅細(xì)胞峰右移,出現(xiàn)雙峰,以 100fl 處峰為主,為大細(xì)胞不均一性圖形,見于細(xì)胞性貧血治療初期。3.正細(xì)胞性貧血(1)RDW 正常:紅細(xì)胞分布在 55110fl,波峰在 88fl 處,為正常紅細(xì)胞圖形,見于慢貧血、急性失血、骨髓化、骨髓發(fā)育不良。(2)RDW 輕度增高:紅細(xì)胞分布在 44120fl,波峰在 80fl
18、處,為紅細(xì)胞不均一性圖形,見于血紅蛋白異常、骨髓化。(3)RDW 明顯增高:紅細(xì)胞分布在 40150fl,波峰在 90fl 處,為紅細(xì)胞不均一性圖形,見于早期或混合性營(yíng)養(yǎng)不良?!拘〗Y(jié)】1.電阻抗()脈沖高細(xì)胞大,脈沖多細(xì)胞多。2.光散射激光與細(xì)胞化學(xué)法:過氧化物酶E,N,M。VCS:V 細(xì)胞體積,C 細(xì)胞結(jié)構(gòu),S 細(xì)胞形態(tài)和核結(jié)構(gòu)。電阻抗與射頻法:E,B,WBC,IMI。MAPSS 法。 0前角大小10狹角測(cè)90垂直核分葉90偏振 E 區(qū)分3.細(xì)胞直方圖 橫為體積,縱為頻小細(xì)胞右移大細(xì)胞底寬不均一雙峰出現(xiàn)治療有效對(duì)一位貧血患者行血液分析時(shí)發(fā)現(xiàn),紅細(xì)胞直方圖出現(xiàn)雙峰且底部變寬,此現(xiàn)象多見于A.細(xì)胞性貧血B.珠蛋白生成性貧血C.缺鐵性貧血有效治療后D.再生性貧血E.難治性貧血正確C通常情況出現(xiàn)雙峰表示正在治療期。RDW 明顯增高:紅細(xì)胞顯示雙峰,小細(xì)胞峰明顯,波峰在 50fl 處,大細(xì)胞峰頂在 90fl
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