血流感染病原菌的分布及耐藥性分析

1、血流感染病原菌的分布及耐藥性分析?？〗?翟鵬勇作者單位：048006 晉城，山西省晉城煤業(yè)集團(tuán)總醫(yī)院檢驗科摘要 目的 分析血流感染病原菌的分布及耐藥性，為臨床醫(yī)師選擇抗菌藥物提供參考。方法 收集2011年1月1日-2016年12月31日血培養(yǎng)標(biāo)本，采用BacT/Alert 3D 120型全自動血培養(yǎng)分析儀進(jìn)行培養(yǎng)，所有分離菌株采用Vitek2-compact系統(tǒng)進(jìn)行鑒定及藥敏試驗。數(shù)據(jù)分析采用Whonet5.6軟件。結(jié)果 5,122份血培養(yǎng)標(biāo)本共檢出病原菌874株，陽性率為17.1%。其中革蘭陽性球菌596株，占68.2%，革蘭陰性桿菌265株，占30.3%，真菌屬13株，占 1.5%。革蘭陽

2、性菌不同菌種的耐藥譜明顯不同，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（meticillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA）和耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（meticillin-resistant coagulase-negative staphylococci, MRCNS）的檢出率分別為14.3%和80.6%，未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素耐藥的菌株；腸球菌屬中亦未檢出對萬古霉素和替考拉寧耐藥的菌株，其中屎腸球菌對所測試的抗菌藥物的耐藥性大多數(shù)高于糞腸球菌。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中產(chǎn)超廣譜-內(nèi)酰胺酶（extended-spectrum -Lactamase, ESBLs）

3、菌株分別占35.7%和 25.5%；發(fā)現(xiàn)一株對亞胺培南耐藥的肺炎克雷伯菌。銅綠假單胞菌對所測試抗菌藥物的耐藥率均低于42.9%；鮑曼不動桿菌對頭孢哌酮/舒巴坦和阿米卡星的耐藥率分別為26.1%和30.8%，對其他抗菌藥物的耐藥率均大于53.8%。凝固酶陰性葡萄球菌（coagulase-negative staphylococci, CNS）既是血流感染病原菌，也是最常見的污染菌。結(jié)論臨床醫(yī)師應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，降低血培養(yǎng)污染率。治療血流感染前，應(yīng)積極尋找原發(fā)病灶和病原菌，做到合理使用抗菌藥物，降低患者的死亡率。關(guān)鍵詞 血流感染；病原菌；耐藥性；產(chǎn)ESBLs菌株； Distribution an

4、d drug resistance of pathogens isolated from bloodstream infectionJunjie NIU, Pengyong ZHAIDepartment of Clinical Laboratory, General Hospital of Jincheng Anthracite Mining Group Co,. Ltd, Jincheng 048006, ChinaAbstract Objective To analyze the distribution and drug resistance of pathogens isolated

5、from bloodstream infection so as to provide a reference for clinicians to choose antimicrobial agents. Methods The blood culture of patients from January 1st 2011 to December 31st 2016 were collected. Blood cultured by BacT/Alert 3D 120, all isolates identified using Vitek2-compact automated microor

6、ganism. Drug susceptibility test was performde by Vitek2-compact. The data were analyzed by WHONET 5.6 software. Results In the total 5,122 blood culture specimens, there are 874 strains (17.1%) of pathogens, including 596 strains (68.2%) of gram-positive bacteria, 265 strains (30.3%) of gram-negait

7、ive bacteria, and 13 strains (1.5%) of fungi. The drug resistant spectrums of gram-positive bacteria were different. The detected rates of the meticillin-resistant Staphylococcus aureus and coagulase-negative staphylococci were 14.3% and 80.6%, respectively. No strains resistant to vancomycin were f

8、ound, and no strains of Enterococcus to vancomycin and teicoplanin were found too. In the test, E. Faecium antimicrobial resistance to most drugs used in clinical is higher than E. faecalis. The detection rates of extended spectrum beta-lactamase (ESBLs) producing E.coli and K.pneumoniae producing w

9、ere 35.7% and 25.5%, respectively. One stain of Imipenem resistance of K.pneumoniae was found. The drug resistance rates of P.aeruginosa to most surveillance drugs were under 42.9%. The drug resistance rates of A.baumannii to Cefperazone-Sulbactam and amikacin were 26.1% and 30.8%, respectively, and

10、 to other drugs used in clinical were above 53.8%. Coagulase-negative staphylococci (CNS) were the major pathogens of bloodstream infection, and the contaminated bacteria too. Conclusions Clinicians should keep asepticoperation strictly, reduce the rate of blood culture. Before treatment of bloodstr

11、eam infections, clinicians should find lesion positions and pathogens actively, in order to use antibiotics reasonably and reducemortalityin patients. Key words Bloodstream infection; Pathogens; Drug resistance; ESBLs-producing strains當(dāng)病原微生物通過各種途徑進(jìn)入血流，并通過血流造成全身播散，引起各種臨床癥狀，稱為血流感染。近些年，隨著創(chuàng)傷性診療技術(shù)的大量開展、各

12、類人工裝置的使用以及臨床對激素和抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，使得血流感染的發(fā)病率呈上升趨勢。引起血流感染的病原菌種類繁多，耐藥性也各不相同。血流感染病死率高，嚴(yán)重危害生命健康，因此及時有效地控制血流感染越來越受到臨床重視。為協(xié)助臨床合理選用抗菌藥物，筆者對874例血培養(yǎng)分離病原菌及其耐藥性進(jìn)行整理，用Whonet5.6軟件進(jìn)行分析，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。1 資料與方法1.1 標(biāo)本來源 2011年1月1日-2016年12月31日住院患者血培養(yǎng)標(biāo)本。1.2 試劑 培養(yǎng)基及細(xì)菌生化反應(yīng)試劑全部購自威泰科生物有限公司，藥敏紙片購自O(shè)xoid公司。1.3 細(xì)菌分離鑒定及藥敏試驗 按常規(guī)方法分離細(xì)菌，采用Vitek2

13、-compact系統(tǒng)進(jìn)行鑒定及藥敏試驗，并根據(jù)CLSI對藥物敏感性試驗指導(dǎo)原則，選擇相應(yīng)抗菌藥物組合，用紙片擴(kuò)散法加以補充。Vitek2-compact系統(tǒng)每周做室內(nèi)質(zhì)控，紙片擴(kuò)散法每天做室內(nèi)質(zhì)控。1.4 葡萄球菌mecA介導(dǎo)的耐藥性檢測 采用頭孢西丁（30 g）作為指示藥物敏感紙片。在33 oC-35 oC條件下培養(yǎng)16 h-18 h后判讀。MRSA陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)為頭孢西丁抑菌圈直徑21 mm，MRSCN陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)為頭孢西丁抑菌圈直徑24 mm1。質(zhì)控菌株：金黃色葡萄球菌ATCC25923。1.5 大腸埃希菌超廣譜-內(nèi)酰胺酶（extended-spectrum -Lactamase, ESB

14、Ls）表型確證 同時使用頭孢噻肟和頭孢他啶，單獨和聯(lián)合克拉維酸的復(fù)合物。在（352）oC條件下培養(yǎng)16 h-18 h后判讀。兩種藥物中有任何一種在加克拉維酸后的抑菌環(huán)直徑和不加克拉維酸的抑菌圈直徑相差值5 mm，即判定為產(chǎn)ESBLs菌株1。質(zhì)控菌株：肺炎克雷伯菌ATCC700603 和大腸埃希菌ATCC25922。2 結(jié)果2.1 分離菌株的構(gòu)成 5,122份血培養(yǎng)標(biāo)本中，總共檢出病原菌874株，包括革蘭陽性菌596株，占68.2%；革蘭陰性桿菌265株，占30.3%，真菌屬13株，占 1.5%。分離菌株情況見表1。表 1 血流感染病原菌的分布情況病原菌株數(shù)百分率（%）凝固酶陰性葡萄球菌5015

15、7.3金黃色葡萄球菌424.8屎腸球菌293.3糞腸球菌192.2其他革蘭陽性菌50.6大腸埃希菌11212.8肺炎克雷伯菌475.3銅綠假單胞菌283.2陰溝腸桿菌252.9鮑曼不動桿菌131.5布氏桿菌111.3其他革蘭陰性菌293.3真菌屬131.5合計874100.02.2 葡萄球菌屬對常用抗菌藥物的耐藥率 葡萄球菌屬中，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌 （meticillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA）和耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）的檢出率分別為14.3%和 80.6%，金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌對青霉素G和氨芐西林的耐

16、藥率分別為88.1%和90.2%，尚未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素、利奈唑胺和替考拉寧耐藥的菌株。詳見表2。表2 葡萄球菌屬對常用抗菌藥物的耐藥率抗菌藥物金黃色葡萄球菌（n=42）凝固酶陰性葡萄球菌（n=501）株數(shù)耐藥率（%）株數(shù)耐藥率（%）頭孢西丁614.340480.6青霉素G3788.145290.2頭孢唑啉1228.619939.7氨芐西林/舒巴坦1945.221342.5環(huán)丙沙星1535.728156.1左氧氟沙星1331.027554.9莫西沙星511.97815.6紅霉素3481.043286.2克林霉素2559.535370.5利福平511.9499.8慶大霉素1433.329759.3四

17、環(huán)素921.417835.5復(fù)方新諾明1740.527755.3萬古霉素00.000.0利奈唑胺00.000.0替考拉寧00.000.02.3 腸球菌屬對常用抗菌藥物的耐藥率 共分離出腸球菌屬48株，未檢出對萬古霉素和替考拉寧耐藥的菌株。屎腸球菌和糞腸球菌對高濃度慶大霉素的耐藥率分別為82.8%和26.3%，見表3。表3 腸球菌屬對常用抗菌藥物的耐藥率抗菌藥物屎腸球菌（n=29）糞腸球菌（n=19）菌株數(shù)耐藥率（%）菌株數(shù)耐藥率（%）青霉素G2896.6842.1氨芐西林2793.1631.6環(huán)丙沙星2689.7210.5左氧氟沙星2586.2210.5紅霉素2689.7526.3利福平217

18、2.41157.9高濃度慶大霉素2482.8526.3高濃度鏈霉素2379.3315.8四環(huán)素620.71473.7米諾環(huán)素413.81263.2萬古霉素00.000.0替考拉寧00.000.02.4 腸桿菌科細(xì)菌對常用抗菌藥物的耐藥率 腸桿菌科細(xì)菌對碳青霉烯類抗菌藥物、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦和頭孢哌酮/舒巴坦的耐藥率較低（28.0%）。肺炎克雷伯菌和陰溝腸桿菌對喹諾酮類藥物的耐藥率較低（73.2%）。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中產(chǎn)ESBLs菌株分別占35.7%和25.5%。見表 4。表 4 腸桿菌科細(xì)菌對常用抗菌藥物的耐藥率抗菌藥物大腸埃希菌（n=112）肺炎克雷伯菌（n=47）陰溝腸桿

19、菌（n=25）菌株數(shù)耐藥率（%）菌株數(shù)耐藥率（%）菌株數(shù)耐藥率（%）產(chǎn)ESBLs菌株4035.71225.5-氨芐西林10190.247100.02496.0頭孢唑啉7970.52451.12496.0頭孢呋辛7466.12246.82080.0頭孢曲松7062.52042.6832.0頭孢他啶6558.01940.41144.0頭孢吡肟6356.31940.4832.0氨芐西林/舒巴坦6759.82144.72187.5哌拉西林/他唑巴坦119.81123.4728.0頭孢哌酮/舒巴坦65.448.5312.0氨曲南6961.62144.71352.0環(huán)丙沙星8575.91531.91040

20、.0左旋氧氟沙星8273.21327.71040.0復(fù)方新諾明9080.41429.81248.0慶大霉素119.81531.91352.0阿米卡星98.0510.6624.0亞胺培南00.012.100.02.5 銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌的耐藥率 銅綠假單胞菌對頭孢他啶、頭孢吡肟、頭孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星和米諾環(huán)素的耐藥率均低于17.9%；鮑曼不動桿菌對頭孢哌酮/舒巴坦和阿米卡星的耐藥率分別為26.1%和30.8%，對其他抗菌藥物的耐藥率均大于53.8%，見表5。表 5 銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌的耐藥率抗菌藥物銅綠假單胞菌（n=28）鮑曼不動桿菌（n=13）菌株數(shù)耐藥率（%）菌株數(shù)耐藥

21、率（%）哌拉西林1242.91184.6頭孢他啶517.9861.5頭孢吡肟414.31076.9哌拉西林/他唑巴坦1035.7969.2頭孢哌酮/舒巴坦310.7626.1環(huán)丙沙星621.4969.2左氧氟沙星621.4969.2復(fù)方新諾明-1292.3慶大霉素932.11076.9妥布霉素828.6969.2阿米卡星517.9430.8米諾環(huán)素414.3753.8亞胺培南621.4861.52.6 回顧分析總結(jié) 查閱2011年1月1日-2016年12月31日血培養(yǎng)陽性住院患者的病歷資料，結(jié)合患者的臨床表現(xiàn)、基礎(chǔ)疾病、陽性報警時間、病原菌種類及預(yù)后等資料進(jìn)行回顧性判斷是否為血流感染。最終采納

22、資料完整的102例患者進(jìn)行分析，其中確診為血流感染者71例。分離出凝固酶陰性葡萄球菌的患者有54例，明確血流感染的17例（占凝固酶陰性葡萄球菌的31.5%）；其他檢出的病原菌均可確認(rèn)為血流感染病例。可見凝固酶陰性葡萄球菌既是最常見的污染菌，也是血流感染病原菌之一。因此，臨床對血培養(yǎng)陽性結(jié)果的診斷意義應(yīng)綜合分析，避免不必要地使用抗菌藥物。3 討論近年來隨著醫(yī)療技術(shù)的飛速發(fā)展，血流感染的發(fā)生率也不斷增加，尤其繼發(fā)于化療、介入治療和應(yīng)用免疫抑制藥物的患者，或進(jìn)行氣管切開、各類導(dǎo)管插管、透析療法、器官移植等診療措施的重癥患者。此類患者常并發(fā)嚴(yán)重感染，而且多為耐藥菌株感染，治療效果差，應(yīng)引起高度重視2-

23、3。凝固酶陰性葡萄球菌占所有分離病原菌的57.3%，是檢出率最高的細(xì)菌。查閱病例資料表明，凝固酶陰性葡萄球菌（coagulase-negative staphylococci, CNS）既是血流感染病原菌，也是最常見的污染菌。MRSA和MRCNS的檢出率分別為14.3%和 80.6%，尚未檢出對萬古霉素、利奈唑胺和替考拉寧耐藥的金黃色葡萄球菌。本組結(jié)果還顯示，除四環(huán)素和米諾環(huán)素外，屎腸球菌對所測試抗菌藥物的耐藥率均高于糞腸球菌。腸桿菌科細(xì)菌是醫(yī)院獲得性感染和社區(qū)獲得性感染的重要致病菌，碳青霉烯類抗菌藥物依舊是目前治療其感染最有效的藥物。由于抗菌藥物的廣泛應(yīng)用導(dǎo)致臨床耐藥菌株不斷增加，金屬-內(nèi)酰

24、胺酶是導(dǎo)致該類菌群耐藥的主要原因3-5 。非發(fā)酵革蘭陰性桿菌是指不發(fā)酵葡萄糖的而獲得生長、繁殖能力的一類菌群。主要包括銅綠假單胞菌和不動桿菌屬等。銅綠假單胞菌血流感染常見于機(jī)體免疫力較弱的人群，如繼發(fā)于惡性腫瘤晚期、代謝性疾病和嬰幼兒等。銅綠假單胞菌對所測試抗菌藥物的耐藥率均低于42.9%，對碳青霉烯類、喹諾酮類和氨基糖苷類抗菌藥物的耐藥率低于21.4%；鮑曼不動桿菌對頭孢哌酮/舒巴坦和阿米卡星的耐藥率分別為26.1%和30.8%，對其他抗菌藥物的耐藥率均大于53.8%。這組結(jié)果與相關(guān)報道3-7基本一致。綜上所述，血流感染是由不同病原菌入侵患者血液系統(tǒng)而引起的復(fù)雜的臨床癥狀和體征，因此早期診斷血流感染的致病菌尤為重要。目前，血培養(yǎng)仍是臨床診斷