其他病毒、朊粒精品課件

1、第30章 其他病毒、朊粒 彈狀病毒科（Rhabdoviridae），狂犬病病毒屬。（Lyssavirus）的一種嗜神經(jīng)性病毒，通過(guò)動(dòng)物咬傷、抓傷感染而引起狂犬病。屬?gòu)棤畈《究瓶袢《緦?，是人及?dòng)物狂犬病的病原體。 第一節(jié) 狂犬病病毒 （Rabies virus）臨床意義 人類狂犬病大多是由病犬咬傷所致，有時(shí)也可因貓、狼、帶毒動(dòng)物咬傷而致感染。動(dòng)物在發(fā)病前5天唾液中就帶有病毒。人被咬傷后，病毒經(jīng)傷口進(jìn)入機(jī)體內(nèi)。潛伏期一般為13個(gè)月，但亦有短至一周或長(zhǎng)達(dá)數(shù)年的。潛伏期的長(zhǎng)短取決于被咬傷部位距頭部的距離、傷口深淺及感染的病毒數(shù)量，傷口距頭部越近、傷口越深、傷口內(nèi)感染的病毒量越大，潛伏期越短。 進(jìn)入體

2、內(nèi)的病毒在肌纖維細(xì)胞中增殖，約46小時(shí)內(nèi)侵入周圍神經(jīng)，沿傳入神經(jīng)軸索及其外間隙上行,經(jīng)背根節(jié)和脊髓段上至中樞神經(jīng)系統(tǒng)。病毒在神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)大量增殖并引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷，以腦干、小腦為主。然后又沿傳出神經(jīng)向全身擴(kuò)散，以唾液腺、舌部味蕾、嗅神經(jīng)上皮等處為多，還有淚腺、視網(wǎng)膜、角膜及肺、腎等器官。致病機(jī)制首先在傷口局部肌肉細(xì)胞內(nèi)增殖沿感覺(jué)神經(jīng)神經(jīng)軸索上行中樞神經(jīng)系統(tǒng)增殖并引起損傷沿傳出神經(jīng)擴(kuò)散至唾液腺及其他組織生物學(xué)特性外形呈子彈狀，一端圓尖，另一端平直而凹進(jìn)，長(zhǎng)約100300nm，直徑為75nm。螺旋對(duì)稱，有包膜及刺突。核心為一條由12000個(gè)核苷酸組成的單負(fù)鏈RNA，編碼五種蛋白，即： 核蛋白質(zhì)（

3、nucleoprotein，N蛋白） 包膜表面糖蛋白（glycoprotein，G蛋白） 病毒衣殼基質(zhì)蛋白(matrix protein 1，M1) 包膜基質(zhì)蛋白(matrix protein 2，M2) 轉(zhuǎn)錄酶蛋白（large protein，L蛋白） 病毒在易感動(dòng)物或人中樞神經(jīng)細(xì)胞(主要是大腦海馬回的錐體細(xì)胞)中增殖，形成胞質(zhì)內(nèi)嗜酸性包涵體，又稱內(nèi)基小體(Negri body)，具有診斷價(jià)值。 病毒能在敏感細(xì)胞中培養(yǎng)，如鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤(murine neuroblastoma)細(xì)胞。 本病毒存在于病獸或患者的神經(jīng)組織和唾液中，對(duì)外界抵抗力不強(qiáng)，病毒對(duì)熱敏感，加熱40約4h或60 30min

4、可滅活，在冰凍干燥或-70能存活數(shù)年。微生物檢驗(yàn)人狂犬病根據(jù)咬傷史及典型癥狀即可診斷（一）標(biāo)本直接檢查 1.抗原檢查（1）免疫熒光技術(shù)：此法快速、敏感、特異性高。（2）ELISA法 2.核酸檢查 運(yùn)用RT-PCR法檢測(cè)標(biāo)本中狂犬病病毒RNA。（二）抗體檢測(cè)（三）分離培養(yǎng)（四）捕捉動(dòng)物觀察 神經(jīng)細(xì)胞中的狂犬病毒（綠色熒光）（四）捕捉動(dòng)物觀察 人被咬傷后，檢查動(dòng)物是否患病十分重要 1.判斷動(dòng)物是否患狂犬?。河^察710d 發(fā)病否，不發(fā)病為非病犬或咬人時(shí)唾液中無(wú)病毒。 2.發(fā)病殺死后，檢查腦內(nèi)有無(wú)內(nèi)基小體 （Negri body ），海馬回 胞質(zhì)嗜酸性包涵體 （7090）。Negri body第二節(jié)

5、人乳頭瘤病毒 （human papillomavirus,HPV）屬乳多空病毒科致病者為人乳頭瘤病毒(HPV) ，球形，5055nm,20面體，無(wú)包膜，環(huán)狀dsDNA。 臨床意義 尖銳濕疣(condyloma acminatum ,CA)，又稱生殖器疣、性病疣，是由人乳頭瘤病毒（HPV-6、11型等）引起的一種性傳播性疾病，占我國(guó)性病第二位。 宮頸癌和宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN) 由高危型HPV(high-risk HPV types- HPV16、18型)感染。致病性HPV 直接接觸，對(duì)皮膚和黏膜上皮細(xì)胞高度親嗜，誘導(dǎo)上皮增殖形成乳頭狀瘤（疣） HPV-6,11 尖銳濕疣 HPV-1,2,4 尋

6、常疣 HPV- 3，4 扁平疣 HPV-16，18，31，34 宮頸癌 生物學(xué)特性1.形態(tài)結(jié)構(gòu) HPV呈球形，直徑為5255nm，20面體立 體對(duì)稱、核衣殼由72個(gè)殼微粒組成，無(wú)包膜。2. 基因組及其編碼產(chǎn)物 病毒基因組為雙鏈環(huán)狀DNA， 以共價(jià)閉合的超螺旋結(jié)構(gòu)、開放的環(huán)狀結(jié)構(gòu)及線性分 子等三種形式存在，含有3個(gè)基因區(qū)： 早期區(qū)（ER）：6個(gè)早期開放讀框 （E1、E2、E4E7 ORFs）； 晚期區(qū)（LR）：有2個(gè)ORF。 上游調(diào)控區(qū)（URR）：是一個(gè)無(wú)編碼基因區(qū)，含有 病毒DNA的復(fù)制起點(diǎn)和基因表達(dá)的調(diào)控元件。微生物檢驗(yàn) 多聚酶鏈反應(yīng)（PCR）原位濾膜雜交或點(diǎn)雜交原位雜交：適用于經(jīng)甲醛溶液固

7、定過(guò)的組織DNA印跡 免疫學(xué)檢查：采用免疫組化法檢測(cè)病變組織中 的HPV抗原。反之可用晚期蛋白L1和L2，或用 病毒樣顆粒（VLP）檢測(cè)病人血清中抗HPV的 型特異性抗體。第三節(jié) 細(xì)小病毒B19 細(xì)小病毒B19 屬細(xì)小病毒科、細(xì)小病毒亞科、紅病毒屬的病毒。 細(xì)小病毒亞科包括三個(gè)屬1.細(xì)小病毒屬(Parvovirus) 代表種為小鼠細(xì)小病毒2.依賴性病毒屬(Dependovirus) 腺病毒伴隨病毒2型3.紅病毒屬 代表種為細(xì)小病毒B19。臨床意義 1981年發(fā)現(xiàn)細(xì)小病毒B19與兒童鐮狀細(xì)胞貧血所致的造血障礙有關(guān)。還發(fā)現(xiàn)與傳染性紅斑病(erythema infectiosum)、先天感染所致自發(fā)

8、性流產(chǎn)（spontaneousabortion）及胎兒畸形等有關(guān)。還可出現(xiàn)皮疹及關(guān)節(jié)炎等。 受細(xì)小病毒B19感染的婦女大部分是正常的，但妊娠婦女可造成胎兒嚴(yán)重貧血、心衰、流產(chǎn)、畸形、死亡。慢性癥狀有慢性貧血、神經(jīng)病變及脈管炎等。 生物學(xué)特性 呈小球形、無(wú)包膜、直徑約為1826nm，有VPl及VP2兩種衣殼蛋白。基因組為單鏈DNA分子，為正或負(fù)鏈，5.6kb長(zhǎng)，呈線狀，有兩個(gè)大ORF及許多小ORF。 病毒主要在細(xì)胞核內(nèi)復(fù)制。 1.自主復(fù)制型病毒 在分裂旺盛細(xì)胞中復(fù)制 2.復(fù)制缺陷型病毒 需輔助病毒存在才復(fù)制 如腺病毒伴隨病毒(AAV) 微生物檢驗(yàn) 檢測(cè)細(xì)小病毒B19是診斷再障有效指標(biāo)1. 檢測(cè)細(xì)

9、小病毒B19抗體(IgM早期抗體）2. 檢測(cè)病毒顆粒 如電子顯微鏡3. 檢測(cè)抗原 對(duì)流免疫電泳、RIA或EIA4. 檢測(cè)核酸 核酸雜交、原位雜交、PCR5. 檢測(cè)細(xì)小病毒B19抗體(IgG)第四節(jié) 朊粒朊粒（prion）來(lái)源于蛋白性感染顆粒（proteinaceus infection particle）的英文 縮寫，是引起傳染性海綿狀腦?。═SE）的病原體。TSE是一特征性致死性的中樞神經(jīng)系統(tǒng)慢性退化性疾患，臨床上相應(yīng)出現(xiàn)癡呆、共濟(jì)失調(diào)、震顫等癥狀，隨即昏迷死亡。 分類與命名Prion感染人和動(dòng)物引起TSE 1.常見動(dòng)物TSE 羊瘙癢病（Scrapie） 牛海綿狀腦?。˙SE） 2.人類TS

10、E 庫(kù)魯病（Kuru disease） 克雅?。–reulzfeldt Jakob disease,CJD）等。 關(guān)于Prion在生物學(xué)領(lǐng)域中的定位至今尚未定論。 臨床意義（一）動(dòng)物TSE 1.瘙癢?。⊿crapie） 皮膚瘙癢摩擦，脫毛，慢性消耗性，致死性疾病。 2.瘋牛病（mad cow disease） 牛海綿狀腦?。˙SE） 朊粒存在的部位（二）人TSE-克雅病及克雅病的新變種 1. 克雅病的分型 傳染型：約占10%，主要由醫(yī)源性傳播，如：角膜移 植和硬腦膜移植等，或使用污染的手術(shù)器 械，或使用人垂體制備的生長(zhǎng)激素等； 家族遺傳型：占10%15% GSS綜合征 致死性家族性失眠癥 散發(fā)

11、型：克雅病在三型中最常見，約占75%80%。 2.克雅病（CJD） 是一種致命性人海綿狀腦病，又稱傳染性癡呆（transmissible dementia）。潛伏幾十年發(fā)病，精神與感覺(jué)方面癥狀，隨后運(yùn)動(dòng)失調(diào)，晚期肌肉痙攣伴癡呆，多在512個(gè)月內(nèi)死亡。發(fā)病率1/106，年齡均50歲以上。腦海綿體病變類似羊瘙癢病的羊腦。PrPCJ類似PrPSC推測(cè)CJD因子來(lái)源于瘙癢病。1968年 CJD轉(zhuǎn)移給動(dòng)物成功，現(xiàn)已證實(shí)，PrPres大量沉積腦組織淀粉樣斑塊CNS退行性變 . 克雅病新變 種(A variant of CJD, vCJD) 多發(fā)生青年人(平均年齡26歲)，病程14個(gè)月。 臨床特點(diǎn)： 開始精

12、神與感覺(jué)異常，隨后運(yùn)動(dòng)失調(diào)， 后肌肉痙攣與癡呆，神經(jīng)病理特點(diǎn)呈現(xiàn)大量PrPcj沉積。 牛海綿狀腦病（BSE）通過(guò)污染飼料在牛群中流行，跡象表明，此損害可以通過(guò)食物鏈傳給人。提出nvCJD和BSE由同一致病因子引起假說(shuō)。 （三）庫(kù)魯（Kuru）病 Kuru(顫抖)病是第一個(gè)被認(rèn)為由prion引起的人的傳染性海綿狀腦病（TSE）,發(fā)生于巴布亞新幾內(nèi)亞宗教性食尸惡習(xí)，患者多為婦女，兒童。潛伏期430年，患者小腦受損，產(chǎn)生共濟(jì)失調(diào)和震顫。 進(jìn)行性小腦綜合癥伴癡呆，一旦發(fā)病，一年內(nèi)（69個(gè)月）內(nèi)死亡。 （四）GSS綜合征與致死性家族性失眠癥GSS綜合征是一種罕見的人類傳染性海綿狀腦病，為常染色體顯性遺傳

13、性疾病，主要與PrP基因102位密碼子(Pro-Leu)突變有關(guān)。 致死性家族性失眠癥是另一種罕見的人類傳染性海綿狀腦病，為常染色體顯性遺傳性疾病，主要為PrP基因178位密碼子(Asp-Asn)突變。 生物學(xué)特性(一) PrP的蛋白結(jié)構(gòu) PrPc(Cellular isoform of PrP) 分子量（3335）103，PrP3335 4個(gè)-螺旋區(qū)(42)、幾乎無(wú)-折疊(3) PrPsc(Scrapie isoform of PrP, PrPsc) 分子量（2730）103，PrP2730 2個(gè)-螺旋(30)、4個(gè)-折疊(43)左為正常protein, 右為prion（二）PrP的基因結(jié)構(gòu) 人PrP基因位于第20號(hào)染色體的短臂 基因全長(zhǎng)為759bp ,編碼253個(gè)aa (三) PrP抵抗力 PrP抵抗力強(qiáng)，對(duì)甲醛、-羥丙酸、 -內(nèi)酶，乙醇，蛋白酶k等具有抗性 高壓滅菌202Kpa,134,1h滅活