結(jié)直腸癌Tiam1高表達(dá)與其啟動(dòng)子低甲基化相關(guān)課件

1、 結(jié)直腸癌Tiam1高表達(dá)(biod)與其啟動(dòng)子低甲基化相關(guān) 林潔南方(nnfng)醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)系南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院病理科第一頁，共二十四頁。背景Tiam1: T淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)(yudo)因子1Tiam1與腫瘤的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移Tiam1的表達(dá)調(diào)控機(jī)制尚未完全闡明表觀遺傳學(xué)：DNA異常甲基化第二頁，共二十四頁。 藍(lán)色區(qū)域?yàn)镃pG島，該CpG島長(zhǎng)2183bp，跨越啟動(dòng)子和第一(dy)外顯子，存在256個(gè)CpG位點(diǎn)Tiam1基因(jyn)5端CpG島預(yù)測(cè) 第三頁，共二十四頁。去甲基化藥物處理(chl)HT29細(xì)胞前后Tiam1 mRNA表達(dá)1.SW620 2.HT29(5-aza

2、-dC ) 3.HT29(對(duì)照(duzho) ) C.空白對(duì)照(duzho)GAPDH(580bp)Tiam1(252bp) marker 1 2 3 c第四頁，共二十四頁。. 116例配對(duì)(pi du)結(jié)直腸癌組織中Tiam1蛋白的表達(dá)第五頁，共二十四頁。第六頁，共二十四頁。Tiam1蛋白在結(jié)直腸癌配對(duì)組織(zzh)中的表達(dá)分布 * Z= -4.608，P0.000 # Z-3.115，P0.002 第七頁，共二十四頁。Z-2.584，P0.01 Tiam1蛋白表達(dá)(biod)與結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系 第八頁，共二十四頁。Tiam1蛋白在癌組織中的表達(dá)與臨床(ln chun)病理資料之間的關(guān)系第

3、九頁，共二十四頁。. 結(jié)直腸癌組織中Tiam1基因異常(ychng)甲基化的研究 第十頁，共二十四頁。MSP原理(yunl)第十一頁，共二十四頁。 C M U 2n 2t 12n 12t 31n 31t 48n 48t 83n83t116n116tmu 2 12 31 48 83 116nt部分配對(duì)組織中Tiam1 DNA甲基化及其蛋白(dnbi)表達(dá)情況第十二頁，共二十四頁。MSP擴(kuò)增產(chǎn)物(chnw)測(cè)序部分結(jié)果 umoo.未轉(zhuǎn)化(zhunhu)的原始序列 m.甲基化引物擴(kuò)增產(chǎn)物 u.未甲基化引物擴(kuò)增產(chǎn)物第十三頁，共二十四頁。Z= -2.244, P=0.025 r=-0.494, P0.0

4、01116例配對(duì)(pi du)組織中Tiam1基因的甲基化狀況 232例組織(zzh)中Tiam1蛋白表達(dá)與甲基化之間的相關(guān)性 第十四頁，共二十四頁。腫瘤組織Tiam1甲基化狀態(tài)(zhungti)與臨床病理資料之間的關(guān)系 第十五頁，共二十四頁。. 結(jié)直腸癌細(xì)胞株中Tiam1基因異常(ychng)甲基化的研究第十六頁，共二十四頁。Tiam1高表達(dá)(biod)結(jié)直腸癌細(xì)胞株：LoVo細(xì)胞、 SW620細(xì)胞Tiam1低表達(dá)結(jié)直腸癌細(xì)胞株：LS174T細(xì)胞Tiam1不表達(dá)結(jié)直腸癌細(xì)胞株： HT29 細(xì)胞第十七頁，共二十四頁。5-aza-dC處理對(duì)Tiam1 mRNA在HT29及LS174T中表達(dá)(bi

5、od)的影響GAPDH(580bp)Tiam1(252bp) 1 2 3 4 c markerLS174T(+)LS174T(-)HT29(+)HT29(-)5-aza-dC第十八頁，共二十四頁。5-aza-dC（+） X2005-aza-dC（-） X200免疫細(xì)胞(xbo)化學(xué)檢測(cè)5-aza-dC處理對(duì)HT29細(xì)胞(xbo)中Tiam1蛋白表達(dá)的影響第十九頁，共二十四頁。免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)(jin c)5-aza-dC處理對(duì)LS174T細(xì)胞中Tiam1蛋白表達(dá)的影響5-aza-dC（-） X2005-aza-dC（+） X200第二十頁，共二十四頁。1.SW620 2.HT29 3. HT2

6、9(5-aza-dC) 4.SW620 5.LS174T 6.LS174T (5-aza-dC) 1 2 34 5 6GAPDHTiam1Western blot法檢測(cè)5-aza-dC處理對(duì)HT29、LS174T細(xì)胞(xbo)中Tiam1蛋白表達(dá)的影響第二十一頁，共二十四頁。結(jié)論(jiln)Tiam1是一種促進(jìn)結(jié)直腸癌增殖及轉(zhuǎn)移的重要基因DNA異常甲基化可能是結(jié)直腸癌Tiam1基因表達(dá)改變的重要調(diào)控(dio kn)機(jī)制之一 第二十二頁，共二十四頁。謝謝(xi xie)！致謝：丁彥青教授李建明教授金賀博士(bsh)張香梅博士李婷婷碩士第二十三頁，共二十四頁。內(nèi)容(nirng)總結(jié)結(jié)直腸癌Tiam1高表達(dá)與其啟動(dòng)子低甲基化相關(guān)。南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院病理科。藍(lán)色區(qū)域?yàn)镃pG島，該CpG島長(zhǎng)2183bp，跨越啟動(dòng)子和第一外顯子，存在256個(gè)CpG位點(diǎn)。Z-2.584，P0.01。5-aza-dC處理對(duì)Tiam1 mRNA在HT29及LS174T中表達(dá)的影響。5-